幹擾素α的乾粉吸入劑的製作方法
2023-04-26 22:35:36
專利名稱：幹擾素α的乾粉吸入劑的製作方法
技術領域：
本發明一般的涉及幹擾素a的藥物組合物在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，特別的涉及幹擾素a的吸入給藥劑型在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用。
背景技術：
幹擾素(interferon, IFN)是一種最初由動物機體產生的具有廣譜抗病毒作用的細胞因子類藥物，根據其產生部位與作用機理不同可以分為a、P、Y、X等大的類型，而每種大的類型又可分為若干小的亞型，同一大的類型中不同的亞型間在一級結構上差異很小，在二級以上高級結構上非常接近。在幾種大的類型中，a型是應用最廣的一種，目前臨床應用的此型幹擾素主要包括幹擾素a 2a、幹擾素a 2b、幹擾素a lb、複合幹擾素等。病毒性肺炎是一種嬰幼兒時期的常見病，嚴重危害嬰幼兒的生命健康。據不完全統計，超過90%的嬰幼兒在2歲以前感染過病毒性肺炎，其中80%以上病例在I歲以內，發病高峰年齡為2-6個月，1-6個月可見較重病例。嬰幼兒因感染病毒性肺炎造成的死亡在發達國家為0. 5%-2. 0%，在發展中國家可達7%，在我國更是嬰幼兒死亡的首要原因。此外，病毒性肺炎的傳染性和再感染性很強，有報導表明家庭成員間可發生相繼感染，已感染嬰幼兒在10年內再感染發生率高達65%。引起病毒性肺炎的病毒主要是腺病毒(adenovirus, ADV)和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV),其次是流感病毒(influenza virus, IFV)和副流感病毒(parainfluenza virus, PIV),再次是巨細胞病毒(cytomegalovirus, CMV)、單純皰疫病毒(herpes simplex virus, HSV)、腸道病毒(enterovirus, EV)、人類偏肺病毒(hMPV)等。由於這些病毒極易發生變異，加之在病毒感染後容易誘發進一步的細菌感染，從而給患兒造成混合感染和併發症，因此嬰幼兒病毒性肺炎很難實現全面的特異防治，臨床上缺乏有效的藥物治療。現有技術中有很多關於幹擾素a用於病毒性肺炎治療的報導。在病毒性肺炎的治療中，幹擾素a —般以注射、霧化吸入或噴霧的方式給藥，分別製備成注射液、霧化吸入劑和噴霧劑。例如發表在《中華現代內科學》雜誌2006年第3卷第6期645-647頁上的文章「幹擾素治療病毒性肺炎療效觀察」報導了注射重組人幹擾素a Ib治療小兒病毒性肺炎的療效，經統計學分析表明加用重組人幹擾素a Ib治療的治療組與採用常規治療的對照組之間相比在療效上有顯著性差異。又如發表在《中國實用醫藥》2009年第4卷第9期151-152頁上的文章「幹擾素霧化吸入治療病毒性肺炎療效分析」報導了霧化吸入重組人幹擾素a治療小兒病毒性肺炎的療效，經統計學分析表明加用重組人幹擾素a霧化吸入治療的治療組與採用一般治療的對照組相比在療效上有顯著性差異。再如中國專利CN03147580. 9公開了一種治療病毒性肺炎的重組人幹擾素a噴霧劑，其由重組人幹擾素a原液配以適當的保護劑、黏膜吸收促進劑、抑菌劑等製成，PH值在5. 0-8. 0，體外抗病毒試驗表明上述配方的重組人幹擾素a噴霧劑對呼吸道或肺部易感染的HSVjP HSV2病毒均有較強的抑制作用，但對HSV2病毒的抑制作用更敏感。、
雖然幹擾素a製備成注射液、霧化吸入劑或噴霧劑用於病毒性肺炎的治療有明確的療效，但全身代謝的特點使注射液劑型實際發揮藥效的劑量大打折扣；霧化吸入劑和噴霧劑劑型則存在有效吸入劑量低，給藥劑量無法精確控制的缺點。幹擾素a製備成乾粉吸入劑，也即粉霧劑經肺部吸入給藥則從劑型特點上可以完全克服以上注射液、霧化吸入劑和噴霧劑劑型存在的這些缺點。例如中國專利95193669. 7公開了一種幹擾素的乾粉吸入劑，其由幹擾素水溶液製備並含有與藥物可接受的輔料結合的治療有效量的幹擾素，該乾粉吸入劑優選不含有滲透促進劑但優選含有輔料人血清白蛋白。又如中國專利申請200410018796. X公開了一種幹擾素粉霧劑，其由下列重量百分比的物質組成幹擾素0.0002% - 0.8%，稀釋劑70% - 97. 9%，活性保護劑0.01% -5%，分散性助劑0% - 25%及保持pH 4 - 9範圍的緩衝鹽體系，該粉霧劑優選不含有人血白蛋白和吸收促進劑。
發明內容
本發明的目的是提供幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應 用，所述的幹擾素a的乾粉吸入劑較臨床治療病毒性肺炎的常規幹擾素a劑型注射液、霧化吸入劑、噴霧劑在動物藥效試驗中具有更好的藥效。為實現此目的，在基礎的實施方案中，本發明提供幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，所述的幹擾素a的乾粉吸入劑含有治療有效量的幹擾素a與適宜量的乾粉吸入劑可藥用輔料，所述的乾粉吸入劑可藥用輔料按功能劃分包括活性保護劑、分散性助劑、PH穩定調節劑、稀釋劑和/或大粒度載體中的一種或幾種。
活性保護劑起到保護幹擾素a在乾粉吸入劑製備、貯存與運輸中活性不喪失或較少喪失的作用，可以是白蛋白、胺基酸、多元醇、環糊精、卵磷脂類物質中的一種或多種的組合，優選白蛋白、賴氨酸、2-羥丙基-￠-環糊精、大豆卵磷脂中的一種或多種的組合，並更優選不包括白蛋白的優選物質中的一種或多種的組合。分散性助劑起到分散製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑的顆粒到適宜的分散度，防止顆粒之間彼此團聚和粘連的作用，可以是酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸中的一種或多種的組合，優選亮氨酸、苯丙氨酸。pH穩定調節劑起到將乾粉吸入劑溶解後的pH穩定在生理適宜pH的作用，包括但不局限於磷酸鹽緩衝溶液體系、枸櫞酸鹽緩衝溶液體系、抗壞血酸鹽緩衝溶液體系，要求生理安全且能將pH調節並穩定在5. 0-8. 0之間。稀釋劑起到在主藥含量與其他可藥用輔料含量的基礎上填充增加乾粉吸入劑顆粒重量到所需裝填量或吸入量的作用，可以是多元醇、胺基酸類物質中的一種或多種的組合，優選甘露醇、木糖醇、乳糖、海藻糖、棉籽糖、亮氨酸、蘇氨酸、甘氨酸中的一種或多種的組合，並更優選甘露醇、乳糖、亮氨酸、蘇氨酸中的一種或多種的組合。大粒度載體起到幫助將乾粉吸入劑顆粒從給藥部位輸送到咽喉部位的作用。當製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒粒度較小且分散度較高時，其適於從咽喉部位通過呼吸道輸送到肺部，但並不適於從給藥部位輸送到咽喉部位，此時需要在製備得到的乾粉吸入劑顆粒中加入大粒度載體；而當製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒雖然單個較小但彼此間有較鬆散的粘連從而可形成粒度達50-100 u m的鬆散聚集體時(少許施加外力，如增加外界空氣流，粘連的乾粉吸入劑顆粒就會分散成彼此之間獨立的乾粉吸入劑顆粒)，則無需在製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑的顆粒中添加大粒度載體。這樣的大粒度載體可以選擇乳糖、甘露醇、磷脂、胺基酸等物質中的一種或多種的組合，優選乳糖和甘露醇中的一種或兩種的組合，並更優選乳糖。大粒度載體的平均粒度應在25-300 y m之間，優選50-200 u m之間，並更優選50-100 u m之間。乾粉吸入劑顆粒與大粒度載體混合的比例按重量計應在100:1-1:100之間，優選在50:1-1:50之間，並更優選在20:1-1:20之間。應當指出的是，不排除選用一種或一類物質同時起到上述多種乾粉吸入劑可藥用輔料功能作用的情況。 上述幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒可採用本領域技術人員公知的凍幹-機械粉碎法、噴霧乾燥法、超臨界流體法、結晶法等方法製備，優選採用噴霧乾燥法製備。在採用噴霧乾燥法製備幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒時應首先製備噴霧乾燥用的溶液，也即將除大粒度載體外構成乾粉吸入劑的各種成分分別溶解後合併或統一溶解成溶液狀態，然後將該溶液用於後續的噴霧乾燥。噴霧乾燥用溶液中的固含量會影響噴霧乾燥的效率及噴霧乾燥得到的乾粉吸入劑顆粒的性能，其一般應在0.5-10% (m/v)之間，優選在1-5% (m/v)之間，並更優選在1-3% (m/v)之間。在噴霧乾燥中，影響製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的性能的主要製備工藝參數包括噴霧乾燥氣體進口溫度、噴霧氣體流量、噴液流量等。噴霧乾燥氣體進口溫度越高，乾燥速度越快，物料處理能力越大，但幹擾素a及乾粉吸入劑可藥用輔料在噴霧乾燥過程中越容易發生生物失活和/或化學降解/反應，因此適宜的進口溫度為80-140°C，優選90-130°C，並更優選100-120°C。噴霧氣體流量越高，乾燥速度越快，物料處理能力越大，但同時動力消耗越大，幹擾素a及乾粉吸入劑可藥用輔料在噴霧乾燥過程中越容易發生生物失活和/或化學降解/反應，因此對於像Buchi B-290這樣的小型噴霧乾燥儀，適宜的氣體流量是200 - 1000L/h，優選300-800 L/h，並更優選500 - 700 L/h，其他類型的噴霧乾燥儀的噴霧氣體流量可利用本領域技術人員公知的反應器放大縮小時操作參數轉換的一般原理進行換算。噴液流量越低，氣液流量比越大，乾燥速度越快，得到的乾粉吸入劑顆粒的粒度越小，但同時處理量會明顯降低，處理時間會明顯延長，而處理時間過長又更易弓I起幹擾素a及可藥用輔料在噴霧乾燥過程中發生生物失活和/或化學降解/反應，因此對於像BuchiB-290這樣的小型噴霧乾燥儀,適宜的噴液流量是I - 10ml/min,優選2 - 8ml/min,並更優選3 - 5ml/min，其他類型的噴霧乾燥儀的氣體流量可利用本領域技術人員公知的反應器放大縮小時操作參數轉換的一般原理進行換算。其他噴霧乾燥條件方面，對噴霧乾燥氣體的種類一般沒有特殊要求，用空氣即可，但為了防止噴霧乾燥氣體與幹擾素a及可藥用輔料發生化學反應，也可以選擇氮氣或惰性氣體作為噴霧乾燥氣體。噴液的溫度一般選擇冰點溫度(0°C)至室溫(25°C)間的溫度。通過對上述噴霧乾燥過程中操作參數的控制，應該使製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒中50%以上顆粒的粒度0. 1-10 u m之間，優選70%以上顆粒的粒度在1_5 u m之間，並更優選80%以上顆粒的粒度在2-4 ii m之間。由於水分含量過高會導致製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑流動性降低，在貯存過程中顆粒粒度增大，主藥生物學活性降低，因此通過上述噴霧乾燥過程中操作參數的控制，應該使製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒中水分含量控制在5%以下，優選3%以下，並最優選2. 5%以下。通過上述方法製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒應視情況決定是否與大粒度的載體混合。在一種優選的實施方案中，本發明提供幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，所述的幹擾素a的乾粉吸入劑每20mg中含有2. 5 - 50 u g的幹擾素a，0. 3 - Img的活性保護劑，0.6 - 5mg的分散性助劑，I - 4. 8mg的pH穩定調節劑，3-9mg的稀釋劑,0 - 15mg的大粒度載體。在一種優選的實施方案中，本發明提供幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的活性保護劑選自白蛋白、賴氨酸、2-羥丙基-P -環糊精、大豆卵磷脂中的一種或多種的組合。
在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的分散性助劑選自酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸中的一種或多種的組合。在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的pH穩定調節劑選自磷酸鹽緩衝溶液、枸櫞酸鹽緩衝溶液、抗壞血酸鹽緩衝溶液中的一種或多種的組合。在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的稀釋劑選自甘露醇、乳糖、亮氨酸、蘇氨酸中的一種或多種的組合。在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的大粒度載體選自乳糖和甘露醇中的一種或兩種的組
口 o在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的幹擾素a選自幹擾素a 2a、幹擾素a 2b、幹擾素a Ib和/或複合幹擾素中的一種或幾種的組合。在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的幹擾素a是幹擾素alb。在一種優選的實施方案中，本發明提供一種幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其中所述的病毒性肺炎是RSV導致的病毒性肺炎。本發明中使用的術語「乾粉吸入劑」(Dry Power Inhalation, DPI),也稱為「粉霧劑」，是指將微粉化的藥物和/或載體以單劑量或多劑量儲庫形式，採用特殊的乾粉吸入裝置，由患者主動或被動吸入霧化藥物至呼吸道乃至肺部的製劑。本發明中使用的術語「治療有效量」表示當施用藥物活性成分用於治療或預防疾病時，藥物活性成分的量足以實現對疾病的治療或預防。治療有效量將依藥物活性成分、疾病和它的嚴重性和所治療病人的年齡、體重等而異。本發明中使用的術語「乾粉吸入劑可藥用輔料」是指在乾粉吸入劑處方設計時，為解決乾粉吸入劑的成型性、有效性、穩定性、安全性等問題，加入到乾粉吸入劑處方中的除藥物活性成分以外自身對人體或動物體安全的其他輔助成分。
本發明中使用的術語「複合幹擾素」(consensus interferon或integratedinterferon)是指在中國專利申請CN02159950. 5中於序列表3公開序列並在說明書實施例中公開製備方法的複合幹擾素。
具體實施例方式通過如下的實施例對本發明的實施作進一步說明，但本發明的實施方式並不局限於如下的實施例。實施例I :幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的製備按如下表I中的配方配製各噴霧乾燥用溶液，並按表2對應的噴霧乾燥條件用Buchi B-290噴霧乾燥儀噴霧乾燥該溶液(全部液體噴霧完成後繼續保持噴霧乾燥氣體進口溫度與流量15分鐘)從而製備得到幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒。 表I製備幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的噴霧乾燥用溶液配方
pH調節穩
配方活性保護分散性助稀釋劑及含 主藥及含量定劑及含 編號劑及含量劑及含量量 _____*__
1幹擾素alb 2.5}j,g/ml枸櫞酸
2幹擾素 a2a 2.5^g/ml0.30mg/ml
賴氨酸亮氨酸，枸櫞酸甘露醇 1.00mg/ml 5.00mg/ml 鈉9.00mg/ml
3複合幹擾素2.5pg/ml4.50mg/ml
4I 擾盈 a I b 50(ig/ml磷酸氫二
5幹擾素a2b 50昭/ml鈉
白蛋白苯丙氨酸0.25mg/ml 乳糖 0.3rag/ml 0.60mg/ml ，磷酸二 3.00mg/ml
6複合幹擾素50|ig/ml
氫鈉
0.75mg/ml表2幹擾素a的乾粉吸入劑的噴霧乾燥條件
空氣入口溫空氣出口溫 配方編號噴液溫度噴液流量空氣流量
度度------
1-3__rc__5ml/min 120。。__65T__500 L/h
4-6__8T__3ml/min 100。。__T^C__700 L/h實施例2 :幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的質量評價
按《中國藥典2010版(三部)》附錄「幹擾素生物學活性測定法」的規定測定製備得到的各配方的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒溶解後溶液中幹擾素a的活性(IU/ml);按《中國藥典2010版(三部)》附錄「蛋白質含量測定法」第二法Lowry法的規定測定製備得到的各配方的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒溶解後溶液中幹擾素a的濃度(mg/ml )，兩者相除得到製備得到的各配方的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒中幹擾素a的比活性(IU/mg)。對照測定各噴霧乾燥用溶液中幹擾素a的比活性，並由此計算經噴霧乾燥後幹擾素a比活性的保留。按《中國藥典2010版(三部)》附錄「水分測定法」第一法的規定測定製備得到的各配方的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒中的水分含量。按《中國藥典2010版(二部)》附錄「粒度和粒度分布測定法」第一法的規定測定製備得到的各配方的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的平均粒度。所有測定結果如下表3所示。 表3噴霧乾燥製備得到的幹擾素a的乾粉吸入劑顆粒的質量評價
權利要求
1.幹擾素a的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用，其特徵是所述的幹擾素a的乾粉吸入劑含有治療有效量的幹擾素a與適宜量的乾粉吸入劑可藥用輔料，所述的可藥用輔料按功能劃分包括活性保護劑、分散性助劑、PH穩定調節劑、稀釋劑和/或大粒度載體中的一種或幾種。
2.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的幹擾素a的乾粉吸入劑每20mg中含有2. 5 - 50 Ug的幹擾素a，0. 3 - Img的活性保護劑，0. 6 - 5mg的分散性助劑，I -.4. 8mg的pH穩定調節劑,3 - 9mg的稀釋劑,0 - 15mg的大粒度載體。
3.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的活性保護劑選自白蛋白、賴氨酸、2-羥丙基-0 -環糊精、大豆卵磷脂中的一種或多種的組合。
4.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的分散性助劑選自酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸中的一種或多種的組合。
5.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的PH穩定調節劑選自磷酸鹽緩衝溶液、枸櫞酸鹽緩衝溶液、抗壞血酸鹽緩衝溶液中的一種或多種的組合。
6.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的稀釋劑選自甘露醇、乳糖、亮氨酸、蘇氨酸中的一種或多種的組合。
7.根據權利要求I所述的應用，其特徵是所述的大粒度載體選自乳糖和甘露醇中的一種或兩種的組合。
8.根據權利要求1-7之一所述的應用，其特徵是所述的幹擾素a選自幹擾素a2a、幹擾素a 2b、幹擾素a Ib和/或複合幹擾素中的一種或幾種的組合。
9.根據權利要求8所述的應用，其特徵是所述的幹擾素a是幹擾素alb。
10.根據權利要求1-9之一所述的應用，其特徵是所述的病毒性肺炎是RSV導致的病毒性肺炎。
全文摘要
本發明屬於蛋白質類藥物的製劑領域，涉及幹擾素α的乾粉吸入劑在製備治療病毒性肺炎藥物中的應用。所述的幹擾素α的乾粉吸入劑含有治療有效量的幹擾素α與適宜量的乾粉吸入劑可藥用輔料，所述的乾粉吸入劑可藥用輔料按功能劃分包括活性保護劑、分散性助劑、pH穩定調節劑、稀釋劑和/或大粒度載體中的一種或幾種。本發明的幹擾素α的乾粉吸入劑較臨床治療病毒性肺炎的常規幹擾素α劑型注射液、霧化吸入劑、噴霧劑在動物藥效試驗中具有更好的藥效。
文檔編號A61K47/18GK102716105SQ20121023660
公開日2012年10月10日 申請日期2012年7月7日 優先權日2012年7月7日
發明者劉金毅, 周敏毅, 程永慶 申請人:北京三元基因工程有限公司