一種茯苓多糖的提取方法

2023-04-26 17:07:51

專利名稱：一種茯苓多糖的提取方法
技術領域：
本發明涉及中藥材有效成分提取，具體涉及茯苓多糖的提取方法。
背景技術：
Jndian Buead, Tuckahoe, & T ^ :ffolfiporia cocos(Schw.) Ryv.&Gibn，別名茯菟、茯靈、茯奪、伏苓、伏菟、松腴、雲苓、茯兔、松薯、松木薯、松苓。隸屬於非裙菌目 Aphyllophorales,多孑L菌禾鬥 Polyporaceae,獲等屬 Wolfiporia0茯苓的乾燥菌核，其主要活性成分為多聚糖類，主要為茯苓聚糖(pachyman)，含量最高可達75%，為一種具有β (1 — 6)吡喃葡萄糖聚糖支鏈的β (1-3)吡喃葡萄糖聚糖， 切斷支鏈成β (1 —幻葡萄糖聚糖，稱茯苓次聚糖(pachymaran)，常稱為茯苓多糖(PPS)， 具抗腫瘤活性、抑制腫瘤生長、抗炎、抗衰老、調節機體免疫、減輕放化療毒副反應等多種功能。但是，茯苓中水溶性茯苓多糖，含量比較低，大多數是茯苓聚糖，普通水煮沸提取方法， 提取率2 %左右，提取率很低，造成藥材利用率也很低。目前，茯苓多糖的製備主要是通過發酵醇沉法[1]、稀鹼浸提法[2]、水提醇沉法 [3]和微波輔助提取法[4]等，先得到茯苓多糖的粗品，再通過純化工藝得到茯苓多糖的精品。水提醇沉法耗時長，多糖提取率低；用酸鹼液浸提茯苓多糖，浸提程序較繁瑣，浸提反應較劇烈，極易破壞多糖的立體結構，使其生物活性受到限制。[1]紀芳，李鵬飛，徐勝元，等.羧甲基茯苓多糖的製備及體內抗腫瘤作用的實驗研究[J]·中國微生態學雜誌，2003，15 (3) :333-334。[2]潘琦，賈向雲，羅天誥，等.茯苓皮提取茯苓多糖實驗方法研究[J].雲南中醫學院學報，1997，20 (3)。[3]仲兆金，劉浚.衍生法分離茯苓三萜[J]·中藥材，2002,25 ) :247-250.[4]聶金嬡，吳成巖，吳世容，等.微波輔助提取茯苓中茯苓多糖的研究[J].中草藥，2004，35 (12)。

發明內容
本發明的目的是克服現有技術中的缺陷，提供一種茯苓多糖的提取方法。本發明的提取方法相比已有的技術，可有效提高收率。本發明採用了下列技術方案來解決上述技術問題一種茯苓多糖的提取方法，包括下列步驟1)將茯苓原料超細粉碎得茯苓粉；將合格乾燥的茯苓飲片初步粉碎後，再超細粉碎，使茯苓粉顆粒直徑達到3微米以下。2)酶解提取；先將茯苓粉加去離子水後攪拌，採用複合酶在合適的條件下酶解獲得酶解液；而後酶解液滅酶活，採用回流法提取有效成分後固液分離獲得濾液。
所述複合酶含有纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶。進一步的，複合酶中，所述纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶的重量比為4. 8 5. 2 2. 8 3. 2 1. 8 2. 2 0. 8 1. 2，最優比例為 5 3 2 1。較佳的，茯苓粉末與去離子水的重量比為1 11. 5 12. 5。較佳的，攪拌速度為25 35轉/分鐘。較佳的，複合酶使用量為藥材重量的3. 8 4. 2%。較佳的，酶解時間0. 9 1. lh、酶解溫度55 65°C、溶媒pH值5. 0 6. 0。酶解液滅酶活的方法為將酶解液升溫至沸騰滅酶活。酶解液滅酶活後可多次提取並合併提取液，較佳為兩次提取。本發明經研究認為，茯苓多糖主要存在於茯苓細胞壁中，受細胞壁主要成分纖維素的阻礙，往往提取率較低。採用主要成分為纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶、木瓜蛋白酶組成的複合酶，可使細胞壁發生不同程度的軟化、膨脹和崩潰，從而改變細胞壁的通透性，使茯苓多糖更容易被提取，同時採酶解法可以部分降解茯苓聚糖，使之成為水溶性茯苓多糖， 增加了有效成分的提取比例。3)濾液濃縮至比重為1. 05 1. 10時過濾，濾液乾燥後獲得茯苓多糖。較佳的，所述濾液濃縮方法為減壓濃縮。減壓濃縮時，真空度優選控制在0. 08 0. 09MPa之間、溫度65 85°C之間，較佳的，所述乾燥方法為噴霧乾燥。噴霧乾燥時，較佳的，進風溫度控制在 175 士 3 °C，出風溫度控制在70 士 3 °C。減壓濃縮及噴霧乾燥應在M小時內完成。本發明的茯苓多糖提取方法，工藝條件容易控制，可以提高收率，達到25 %，而且具有反應條件溫和，反應產物無毒、無副作用等優點。


圖1 茯苓多糖生產工藝簡圖
具體實施例方式以下列舉具體實施例以進一步闡述本發明，應理解，實例並非用於限制本發明的保護範圍。實施例1茯苓多糖的提取工藝流程如圖1所示，提取方法1.將茯苓原料超細粉碎得茯苓粉根據批生產指令，領出所需乾燥茯苓飲片原料100kg。將合格乾燥的茯苓飲片，粉碎成0. 5cm左右的顆粒，在超細粉碎10分鐘，使茯苓粉末細度達到3微米以下。2.酶解提取複合酶由纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶混合而成，其比例為5:3:2:1。酶解提取第一次加茯苓原料重量12倍量去離子水，調成提取用水pH值 5. 0-6. 0，開動攪拌槳，攪拌速度30轉/分鐘，加入混合酶，使用量為茯苓粉末重量的4. 0%， 加熱到酶解溫度60°C，保持溫度酶解Ih後，加熱使酶解液升溫沸騰，滅酶回流提取1小時， 離心機過濾，得濾液1 ；藥材殘渣，第二次加茯苓重量8-10倍量去離子水，回流提取1小時， 離心過濾，得濾液2，合併兩次水提取液。3.濾液濃縮至比重為1. 05-1. 10時過濾，濾液乾燥後獲得茯苓多糖提取液濃縮按照《外循環真空濃縮回收機使用、維護、保養規程》、《藥液濃縮崗位操作規程》操作，開啟真空泵及循環水冷卻泵，待真空度升至0. (MMI5a時，向蒸發器中加入提取液至液面高度在下視鏡中部，繼續抽真空，待真空度至0. OSMPa時，打開蒸汽開關，控制真空度在0. 08-0. 09MPa之間、溫度65_85°C之間，保持液位在視鏡範圍內。當液體濃縮至比重為1. 05-1. 10時(60°C )，快速濾過(孔徑80目)，濾液置噴霧乾燥貯罐中，以備噴霧乾燥用。噴霧乾燥按照《噴霧乾燥機組使用、維護、保養規程》、《噴霧乾燥崗位操作規程》 操作，對上述濃縮液進行噴霧乾燥。進風溫度控制在175士3°C，出風溫度控制在70士3°C。 最終獲得茯苓提取物25. 5kg,收集茯苓提取物裝入PE袋中，稱重，每桶不超過25kg包裝。濃縮、噴霧乾燥應在M小時內完成。4.檢驗採用中國藥典2010版一部中記載的多糖檢測方法檢驗產物中茯苓多糖的重量百分含量為70%，計算茯苓多糖的收率為25. 5%。
權利要求
1.一種茯苓多糖的提取方法，包括下列步驟1)將茯苓原料超細粉碎得茯苓粉；2)酶解提取先將茯苓粉加去離子水後攪拌，採用複合酶在合適的條件下酶解獲得酶解液；而後酶解液滅酶活，採用回流法提取有效成分後固液分離獲得濾液；3)濾液濃縮至比重為1.05 1. 10時過濾，濾液乾燥後獲得茯苓多糖。
2.如權利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述步驟1)中，茯苓粉的顆粒直徑為3微米以下。
3.如權利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述步驟2)中，所述複合酶含有纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶。
4.如權利要求3所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述複合酶中，纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶的重量比為4. 8 5. 2 2. 8 3. 2 1.8 2. 2 0. 8 1. 2。
5.如權利要求4所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述複合酶中，纖維素酶、半纖維素酶、澱粉酶和木瓜蛋白酶的重量比為5 3 2 1。
6.如權利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述步驟2)中，複合酶使用量為藥材重量的3. 8 4. 2%，酶解時間0. 9 1. Ih、酶解溫度55 65°C、溶媒pH值為5. 0 6. 0。
7.如權利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述步驟2)中，酶解液滅酶活的方法為將酶解液升溫至沸騰滅酶活。
8.如權利要求1所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述步驟3)中，所述濾液濃縮方法為減壓濃縮；所述乾燥方法為噴霧乾燥。
9.如權利要求8所述茯苓多糖的提取方法，其特徵在於，所述減壓濃縮及噴霧乾燥在 M小時內完成。
全文摘要
本發明公開了一種茯苓多糖的提取方法，包括下列步驟將茯苓原料超細粉碎得茯苓粉；酶解提取獲得濾液；濾液濃縮至比重為1.05-1.10時過濾，濾液乾燥後獲得茯苓多糖。本發明的茯苓多糖提取方法，工藝條件容易控制，可以提高收率達到25%，而且具有反應條件溫和，反應產物無毒、無副作用等優點。
文檔編號C08B37/00GK102191300SQ201110072200
公開日2011年9月21日 申請日期2011年3月24日 優先權日2011年3月24日
發明者周明揚 申請人:周明揚