一種積雪苷凝膠的質量控制方法

2023-04-28 01:50:41

專利名稱：一種積雪苷凝膠的質量控制方法
技術領域：
本發明涉及一種具有中藥組合物的質量控制方法，特別涉及一種積雪苷凝膠的質 量控制方法。
背景技術：
積雪苷凝膠是在積雪甙霜軟膏的基礎上劑改而來的品種，具有有促進創傷癒合作 用。用於治療外傷，手術創傷，燒傷，疤痕疙瘩及硬皮病。具有製備工藝簡單；外觀光滑、透 明細膩；無油膩感，易清洗、不汙染衣物；局部無刺激性，不妨礙皮膚的正常功能，並能在皮 膚表面形成一層極薄的保護膜；稠度、黏度適宜，易於塗布使用；穩定性較好等特點。處方積雪草總苷27.5g、卡波姆9418. 0g、甘油100. 0g、山梨酸1. 5g蒸餾水適量製法取卡波姆941，在不斷攪拌下加入800ml蒸餾水中，並攪拌至卡波姆941充 分水合，加入甘油，攪拌均勻，調PH近中性，製成空白凝膠；取積雪草總苷和山梨酸溶於適 量乙醇，醇溶液加入空白凝膠中，加蒸餾水至全量，攪拌均勻，製成凝膠lOOOg，即得。為了更好的控制積雪苷凝膠的質量，保證用藥的安全有效性，更好的指導生產，為 此，本發明人結合藥物本身的性質及外科局部用藥的特點及中藥製劑現代化的要求，經過 科學論證，將原軟膏製劑改為凝膠製劑。經檢索，該製劑凝膠劑尚屬國內空白。本發明凝膠 劑採用親水性凝膠輔料製成，用時塗抹於患處，無油膩感，與皮膚耦合良好，吸收好，且塗抹 後可在患部皮膚形成一層很薄的保護膜，具有保護作用。同時凝膠劑裝在藥用軟膏鋁管中， 可以增加藥物的穩定性，而且攜帶、貯存、運輸等均較方便，為了嚴格控制積雪苷凝膠的質 量，有必要研究一套積雪苷凝膠的質量控制方法。

發明內容
本發明目的就是在於公開積雪苷凝膠的質量控制方法。本發明是通過以下技術方案實現的一種積雪苷凝膠的質量控制方法，包括如下方法1、鑑別取本品0. lg，加乙醇2ml，微熱，濾過，濾液作下列試驗(1)取濾液0.5ml，蒸乾，加醋酐1ml，搖勻，沿試管壁緩緩加入硫酸lml，在兩液接 界處呈紫紅色環。(2)取濾液1ml，作為供試品溶液。另取積雪草苷及羥基積雪草苷對照品，分別加 乙醇製成每Iml含IOmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一 部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，分別以正丁 醇-醋酸乙酯-水(4 1 5)的上層溶液、氯仿-甲醇(20 1)溶液、氯仿-甲醇(10 1) 溶液、甲苯-乙酸乙酯-甲醇(2 10 1)溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以醋酐-硫 酸-無水乙醇(1 1 10)溶液，於105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照 品色譜相應的位置上，顯兩個相同顏色的斑點。
2、含量測定對照品溶液的製備精密稱取105°C乾燥至恆重的葡萄糖20. 6mg和鼠李糖9. 4mg, 共置IOOml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。標準曲線的製備精密量取對照品溶液1. Oml,2. Oml,3. Oml,4. Oml,5. 0ml，分別置 50ml具塞試管中，各加水至5ml，精密加入銅試液5ml，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出， 冷卻，加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置冰浴中充分振搖，使氧化亞銅沉澱完全溶解，分別用 硫代硫酸鈉滴定液(0. 005mol/L)滴定，至近終點時，加澱粉指示液1 2滴，繼續滴定至藍 色消失，另取水5ml按同法操作，作為空白，以兩者滴定ml數的差數作為縱坐標，糖的mg數 作為橫坐標，繪製標準曲線。測定法取本品約2. 0g，精密稱定，加無水乙醇50ml，加熱回流1小時，冷卻，濾過， 殘渣用無水乙醇洗滌，濾液置IOOml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，為(A)溶液。 精密量取(A)液20ml，減壓濃縮至幹，加水20ml，再加入30%硫酸3ml，置雙層石棉板上文 火加熱，煮沸1小時，冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖 勻，濾過，為(B)溶液。取續濾液(B) 5ml作為供試品溶液，另取溶液(A) 2ml，蒸乾，加水5ml， 作空白，分別置50ml具塞試管中，按標準曲線項下的製備方法，自「精密加入銅試液5ml」起 同法操作，取二者滴定ml數的差數，自標準曲線上讀取相當於糖的mg數，除以0. 5468，得總 苷mg數，計算，即得。本品每克含積雪草總苷不得少於16. 5mg。3、性狀本品為淡黃色稠厚液體。4、pH值取本品1. 0g，加水40ml，攪拌使溶解後，依法測定(中國藥典2005年版一 部vn G)，pH值應為4. 5 7. 5。現行檢測方法是依據藥典會國家標準提高要求，主要從操作簡單、節約檢測、降低 試劑毒性、提高專屬性著手進行修訂、補充、完善質量標準檢測方法，原質量標準無含量測 定方法，我們參考積雪苷片劑中積雪草總苷的含量測定方法，並對此進行了詳細的研究制 定了含量測定的上述技術方案。實驗例1含量測定1儀器、試藥儀器BS110s、BT25s電子分析天平(德國)。試藥D-無水葡萄糖由中國藥品生物製品檢定所提供，供含量測定用，批號 110833-200302 ；L(+)-鼠李糖北京化學試劑公司，BR，批號=030120 ；其他試劑、溶劑均為 分析純。2實驗方法與結果對照品溶液的製備精密稱取105°C乾燥至恆重的葡萄糖20. 6mg和鼠李糖9. 4mg， 共置IOOml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。標準曲線的製備精密量取對照品溶液1. Oml,2. Oml,3. Oml,4. Oml,5. 0ml，分別置 50ml具塞試管中，各加水至5ml，精密加入銅試液5ml，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出， 冷卻，加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置冰浴中充分振搖，使氧化亞銅沉澱完全溶解，分別用 硫代硫酸鈉滴定液(0. 005mol/L)滴定，至近終點時，加澱粉指示液1 2滴，繼續滴定至藍 色消失，另取水5ml按同法操作，作為空白，以兩者滴定ml數的差數作為縱坐標，糖的mg數作為橫坐標，繪製標準曲線。測定法取本品約2. 0g，精密稱定，加提取溶媒50ml，選擇合適的提取方式和提取 時間，冷卻，濾過，殘渣用提取溶媒洗滌，濾液置IOOml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度， 搖勻，為(A)溶液。精密量取(A)液20ml，減壓濃縮至幹，加水20ml，再加入30%硫酸3ml， 置雙層石棉板上文火加熱，煮沸，冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和，置50ml量瓶中，加水稀 釋至刻度，搖勻，濾過，為(B)溶液。取續濾液(B) 5ml作為供試品溶液，另取溶液(A) 2ml，蒸 幹，加水5ml，作空白，分別置50ml具塞試管中，按標準曲線項下的製備方法，自「精密加入 銅試液5ml」起同法操作，取二者滴定ml數的差數，自標準曲線上讀取相當於糖的mg數，除 以0. 5468，得總苷mg數，計算，即得。(1)供試品溶液製備方法考察A.提取溶劑的選擇參照積雪甙片的標準中採用無水乙醇作為提取溶劑，以最終的積雪草總苷的量為 標準，對無水乙醇、70%乙醇、水三種溶劑的提取效果進行比較。取本品約2. 0g，精密稱定，分別加無水乙醇、70%乙醇、水50ml，加熱回流1小時， 濾液置IOOml量瓶中，殘渣分別用無水乙醇、70%乙醇、水洗滌，濾過，分別加無水乙醇、 70%乙醇、水稀釋至刻度，搖勻，按「上述含量測定所確定的測定法」進行含量測定，結果見 表1。表1不同提取溶劑的測定結果 根據以上結果，三種溶媒均可提取出有效成分，但以無水乙醇為提取溶媒，對積雪 草總苷提取較完全，故優選以無水乙醇為提取溶媒進行提取。B.提取方式的選擇取本品約2. Og,精密稱定，分別加無水乙醇50ml，分別超聲提取30分鐘、加熱回流 1小時、靜置24小時，濾液置IOOml量瓶中，殘渣用無水乙醇洗滌，濾過，加無水乙醇稀釋至 刻度，搖勻，按「上述含量測定法」進行含量測定，結果見表2。表2不同提取方法的測定結果 由上表可知，三種提取方法均能有效提取出有效成分，但以回流1小時，提取積雪草總苷較完全，故選用以回流的方式進行提取。C.提取時間的選擇取本品約2. 0g，精密稱定，分別加無水乙醇50ml加熱回流提取，回流時間分別為 0. 5h、lh、l. 5h，放冷後濾過，濾液置IOOml量瓶中，殘渣用無水乙醇洗滌，濾過，加無水乙醇 稀釋至刻度，搖勻，按「上述含量測定法」進行含量測定。結果見表3。表3不同提取時間的測定結果 由上表可知，0. 5-1. 5小時均能將有效成分提取出來，但以加熱回流1小時為最佳 提取條件，故選擇提取時間為加熱回流1小時。D.酸化水解時間的選擇原積雪苷片標準的「測定法」中，以無水乙醇提取後的濾液減壓濃縮至幹，加水 20ml，加入30%硫酸3ml，置雙層石棉板上文火加熱，煮沸1小時，對製劑中的積雪草苷和羥 基積雪草苷進行水解，以生成葡萄糖和鼠李糖。另取本製劑，按照正文方法，僅改變酸化水 解的煮沸時間，分別為0. 5小時、1小時和1. 5小時。再按「上述含量測定法」進行含量測 定。結果見表4。表4不同酸化水解時間的測定結果 由上表可知，選擇酸化水解的時間0. 5-1. 5h均能達到有效酸化水解效果，但以煮 沸1小時最佳。(2)標準曲線的繪製對照品溶液的製備精密稱取105°C乾燥至恆重的無水葡萄糖20. 17mg和鼠李糖 9. 52mg，共置IOOml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。標準曲線的製備精密量取對照品溶液1. Oml,2. Oml,3. Oml,4. Oml,5. 0ml，分別置 於50ml具塞試管中，各加水至5ml，精密加入銅試液5ml，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取 出，冷卻，加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置冰浴中充分振搖，使氧化亞銅沉澱完全溶解，分別 用硫代硫酸鈉滴定液(0. 005mol/L)滴定，至近終點時，加澱粉指示液1 2滴，繼續滴定至 藍色消失，另取水5ml按同法操作，作為空白，結果見表5 (見圖1)。表5標準曲線測定結果 以糖的mg數作為橫坐標，兩者滴定ml數的差數作為縱坐標，繪製標準曲線(見附 圖1)。得回歸方程為=Y = 6. 0896X-1. 148，相關係數r = 0.9997。結果表明，糖的量0. 2969 1. 4845mg範圍內與滴定液的用量間呈良好的線性關係。(3)空白試驗空白溶液的製備照上述方法製備對照品溶液和標準曲線，另按確定的積雪苷凝膠 處方比例及製備工藝，製備不含積雪草總苷的空白樣品，並按上述含量測定法測定，其溶液 (A)與溶液(B)消耗的ml數基本一致，說明陰性對照製劑對測定無幹擾。(4)精密度試驗由於本測定法採用的方法無法對同一樣品溶液進行精密度考察，故採用對照品溶 液進行精密度的考察。方法為取對照品溶液3. Oml,以「標準曲線的製備」下的方法進行測 定5次，結果以硫代硫酸鈉滴定液(0.005mol/L)的量(與空白的差數)，結果表6 表6精密度試驗結果 (5)溶液的穩定性試驗本法所採用的是經典的氧化還原法_碘量法。通常，最終溶液採用碘量法的誤差 來源有二 一是碘具有揮發性；另一是碘離子易被空氣所氧化。但在有足夠濃度的Γ存在 時，由於I2與Γ產生絡合反應生成13_可減小I2的揮發性；由於I2在高溫時更易揮發，所 以測定時室溫不可過高；因本操作中的溶液酸度較高，過量Γ可能被氧化氧化，在滴定碘前 不宜放置過久，並應密塞避光。在供試品溶液(包括空白溶液)製備完成後，未加酸之前，對溶液的穩定性進行試 驗。方法為取對照品溶液3. 0ml，以「標準曲線的製備」下的方法進行製備，在供試品溶液 (包括空白溶液)製備完成後，分別放置0、1、2、3、4小時後加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置 冰浴中充分振搖，再分別滴定，結果以硫代硫酸鈉滴定液(0.005mol/L)的量(與空白的差 數)。結果見表7表7穩定性試驗結果放置時間0小時 1小時 2小時 3小時 4小時-
試驗結果(ml) 4.32 4.30 4.27 4.24 4. 19 根據以上結果，說明在供試品溶液(包括空白溶液)製備完成後4小時內基本穩定。此外，在本滴定條件下，終點後溶液放置Ih幾乎無回藍現象。(6)重複性試驗取本品研細，取細粉5份，每份約2g，分別精密稱定，按「上述含量測定法」項下操 作，測定含量，結果見表8。表8重複性試驗結果 根據以上結果，該方法重複性較好，RSD < 2%。(7)加樣回收率試驗據有關文獻報導，在進行回收率試驗時，如其在提取前加入糖，則理論和實際操作 均不可能完成回收率試驗。且葡萄糖和鼠李糖易溶於水，在無水乙醇中微溶的性質，操作中 我們在樣品中加入葡萄糖和鼠李糖一定量，結果對測定有明顯幹擾，故我們在樣品中加入 積雪草苷對照品，再折算成葡萄糖和鼠李糖的量，進行加樣回收率的試驗。具體實驗方法如 下取本品研細，取細粉5份，稱約1. 0g，分別精密稱定，再分別加入積雪草苷對照品 25mg,照「上述含量測定法」項下操作，測定糖的含量，計算回收率。結果見表9。表9回收率試驗結果 根據以上結果，該方法重複性較好，RSD < 2%。(8)含量測定結果對本品三批積雪苷凝膠依法測定積雪草總苷含量，結果見表10。 由於製劑處方為積雪草總苷27. 5g製成凝膠1000g，而積雪草總苷的原料標準中 規定積雪草總苷中含總苷以積雪草苷計，不得少於60.0%。按100%轉移率計算，暫定本 品每克含積雪草總苷以積雪草苷計，應不得少於16. 5mg。
具體實施例方式實驗例1 積雪苷凝膠的質量控制方法
性狀本品為淡黃色稠厚液體。鑑別取本品0. Ig,加乙醇2ml，微熱，濾過，濾液作下列試驗(1)取濾液0.5ml，蒸乾，加醋酐1ml，搖勻，沿試管壁緩緩加入硫酸lml，在兩液接 界處呈紫紅色環。(2)取濾液1ml，作為供試品溶液。另取積雪草苷及羥基積雪草苷對照品，分別加 乙醇製成每Iml含IOmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一 部附錄VI B)試驗，吸取上述三種溶液各5μ1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正丁醇-醋 酸乙酯-水(4 1 5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以醋酐-硫酸-無水乙 醇(1 1 10)溶液，於105°C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應 的位置上，顯兩個相同顏色的斑點。
9
檢查pH值取本品1.0g，加水40ml，攪拌使溶解後，依法測定(中國藥典2005年 版一部vn G)，pH值應為4. 5 7. 5。含量測定對照品溶液的製備精密稱取105°C乾燥至恆重的葡萄糖20. 6mg和鼠李糖9. 4mg， 共置IOOml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。標準曲線的製備精密量取對照品溶液1. Oml,2. Oml,3. Oml,4. Oml,5. 0ml，分別置 50ml具塞試管中，各加水至5ml，精密加入銅試液5ml，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出， 冷卻，加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置冰浴中充分振搖，使氧化亞銅沉澱完全溶解，分別用 硫代硫酸鈉滴定液(0. 005mol/L)滴定，至近終點時，加澱粉指示液1 2滴，繼續滴定至藍 色消失，另取水5ml按同法操作，作為空白，以兩者滴定ml數的差數作為縱坐標，糖的mg數 作為橫坐標，繪製標準曲線。測定法取本品約2. 0g，精密稱定，加無水乙醇50ml，加熱回流1小時，冷卻，濾過， 殘渣用無水乙醇洗滌，濾液置IOOml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，為(A)溶液。 精密量取(A)液20ml，減壓濃縮至幹，加水20ml，再加入30%硫酸3ml，置雙層石棉板上文 火加熱，煮沸1小時，冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖 勻，濾過，為(B)溶液。取續濾液(B) 5ml作為供試品溶液，另取溶液(A) 2ml，蒸乾，加水5ml， 作空白，分別置50ml具塞試管中，按標準曲線項下的製備方法，自「精密加入銅試液5ml」起 同法操作，取二者滴定ml數的差數，自標準曲線上讀取相當於糖的mg數，除以0. 5468，得總 苷mg數，計算，即得。


附1為積雪苷凝膠標準曲線示意圖。
權利要求
一種積雪苷凝膠的質量控制方法，所述質量控制方法包括鑑別步驟，所述鑑別是理化鑑別和薄層鑑別，其特徵在於，鑑別方法如下鑑別取本品0.1g，加乙醇2ml，微熱，濾過，濾液作下列試驗(1)取濾液0.5ml，蒸乾，加醋酐1ml，搖勻，沿試管壁緩緩加入硫酸1ml，在兩液接界處呈紫紅色環。(2)取濾液1ml，作為供試品溶液。另取積雪草苷及羥基積雪草苷對照品，分別加乙醇製成每1ml含10mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄ⅥB)試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正丁醇 醋酸乙酯 水(4∶1∶5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以醋酐 硫酸 無水乙醇(1∶1∶10)溶液，於105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯兩個相同顏色的斑點。
2.一種積雪苷凝膠的質量控制方法，所述質量控制方法還包括含量測定步驟，所述含 量測定是採用滴定法對有效成分積雪苷總苷的含量進行測定，其特徵在於，測定方法步驟 如下含量測定對照品溶液的製備精密稱取105°C乾燥至恆重的葡萄糖20. 6mg和鼠李糖9. 4mg，共置 IOOml量瓶中，加水溶解並稀釋至刻度，搖勻，即得。標準曲線的製備精密量取對照品溶液1. Oml,2. Oml,3. Oml,4. Oml,5. 0ml，分別置50ml 具塞試管中，各加水至5ml，精密加入銅試液5ml，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出，冷 卻，加入0. 5mol/L硫酸溶液5ml，置冰浴中充分振搖，使氧化亞銅沉澱完全溶解，分別用硫 代硫酸鈉滴定液(0. 005mol/L)滴定，至近終點時，加澱粉指示液1 2滴，繼續滴定至藍色 消失，另取水5ml按同法操作，作為空白，以兩者滴定ml數的差數作為縱坐標，糖的mg數作 為橫坐標，繪製標準曲線。測定法取本品約2. 0g，精密稱定，加無水乙醇50ml，加熱回流1小時，冷卻，濾過，殘渣 用無水乙醇洗滌，濾液置IOOml容量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，為(A)溶液。精密 量取(A)液20ml，減壓濃縮至幹，加水20ml，再加入30%硫酸3ml，置雙層石棉板上文火加 熱，煮沸1小時，冷卻，用20%氫氧化鈉溶液中和，置50ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻， 濾過，為(B)溶液。取續濾液(B) 5ml作為供試品溶液，另取溶液(A) 2ml，蒸乾，加水5ml，作 空白，分別置50ml具塞試管中，按標準曲線項下的製備方法，自「精密加入銅試液5ml」起同 法操作，取二者滴定ml數的差數，自標準曲線上讀取相當於糖的mg數，除以0. 5468，得總苷 mg數，計算，即得。本品每克含積雪草總苷不得少於16. 5mg。
3.一種積雪苷凝膠的質量控制方法，所述質量控制方法還包括性狀，其特徵在於，所述 性狀的步驟如下本品為淡黃色稠厚液體。
4.一種積雪苷凝膠的質量控制方法，所述質量控制方法還包括PH值的檢查，其特徵在 於，所述PH值檢查步驟如下取本品1. Og,加水40ml，攪拌使溶1解後，按照中國藥典2005年 版一部ΥΠ G依法測定，ρΗ值應為4. 5 7. 5。
全文摘要
本發明公開了積雪苷凝膠的質量控制方法。該方法採用滴定法對積雪苷凝膠中的積雪草總苷進行含量測定，並對有效物質進行鑑別，該方法是依據國家藥典會國家標準提高要求，體現了操作簡單、節約檢測、降低試劑毒性、提高專屬性等優點。
文檔編號A61K36/23GK101897741SQ20091008622
公開日2010年12月1日 申請日期2009年5月27日 優先權日2009年5月27日
發明者李桂珠 申請人:北京因科瑞斯醫藥科技有限公司