團頭魴複合中草藥抗應激製劑、製備方法及其使用方法
2023-04-28 10:58:21
專利名稱：團頭魴複合中草藥抗應激製劑、製備方法及其使用方法
技術領域：
本發明涉及一種團頭魴複合中草藥抗應激製劑、製備方法及其使用方法，屬於水產配合飼料技術領域。
背景技術：
團頭魚方{Megalobrama amblycephala ),隸屬於硬骨魚綱，鯉形目，鯉科，鯿亞科，魚方屬，現為我國主要的淡水養殖品種之一，近年來年產量已超過60萬噸，並有上升趨勢。團頭魴生理特點是身體大、內臟小，集中在南方地區養殖，易受高溫氣候影響，相對於鯉、鯽魚等魚類，團頭魴不耐低氧和運輸，因此在養殖生產過程當中經常受到外界不利因素的影響產生應激，病害頻繁發生，團頭魴養殖業帶來巨大的經濟損失。為防治病原菌，抗生素及抗菌藥物得到了大量使用，並造成藥物殘留、耐藥性增強、引起動物免疫力下降等一系列不良後果，影響人類食品安全，影響水產養殖業的可持續發展。隨著抗生素、抗菌藥物的逐漸禁用，一些綠色、安全、高效飼料添加劑的開發與應用應運而生。中草藥具有天然、高效、毒副作用少、資源豐富等優點，含有與動物的免疫功能密切相關的生物鹼、茶多酚、皂甙、低聚糖、黃酮類、揮髮油類等，能促進機體健康，減少抗生素在動物生產中的使用，是我國傳統的防病治病藥物。五倍子(Galla Chinensis)又名百蟲倉、百藥煎、掊子,化學成分主要包括單寧酸、沒食子酸、五倍子油、樹脂、蛋白質、脂肪、澱粉、蠟質、礦物質等。其中主要有效成分單寧酸含量很高，最高可達70%以上，具有抗菌、抗病毒、清除自由基和抗氧化等作用。刺五加(Radix Acanthopanacis Senticosl)是五加科五加屬，化學成分主要包括多種醣類、胺基酸、脂肪酸、維生素A、B1、B2及多量的胡蘿蔔素；另含有芝麻脂素、留醇、香豆精、黃酮、木栓酮、非芳香性不飽和有機酸、及多種微量礦物質等，具有調節機體紊亂，使之趨於正常的功能，提高耐缺氧能力，抗菌消炎等作用。黃柏(Cortex Phellodendri Chinensis)為芸香科植物黃皮樹或黃檗的乾燥樹皮。主要成分小檗鹼、黃柏鹼、木蘭花鹼等多種生物鹼及內酯、留醇、黏液質等，具有抗真菌、抗細菌、抗氧化、提高免疫機能等功效。蒲公英(Herba Taraxaci)屬菊科多年生草本植物。含有蒲公英醇、蒲公英素、膽鹼、有機酸、菊糖等多種健康營養成分，同時含有蛋白質、脂肪、碳水化合物、微量元素及維生素等，有豐富的營養價值。具有有利尿、緩瀉、退黃疸、利膽、保肝等功效，同時具有抗真菌、抗細菌、抗氧化、提高免疫機能等作用。白頭翁(Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel)是毛莨科植物，多年生草本,另lj名有奈何草、粉乳草、白頭草、老姑草、菊菊苗、老翁花、老冠花、貓爪子花等等，具有清熱解毒，涼血止痢，用於熱毒血痢，阿米巴痢疾，對腸黏膜有收斂作用，能止瀉，止血，對綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、痢疾桿菌有抑制作用。甘草(Radix Glycyrrhizae)是一種補益中草藥。含有多種化學成分,主要成分有甘草酸、甘草甙等。研究證明甘草能抗病毒、抗細菌、抗氧化、抗應激，且能調節免疫機能，如增強巨噬細胞吞噬能力，促進輔助性T淋巴細胞的增殖與激活等。最近的一些專利喻運珍等申請了專利「一種魚用複方中草藥製劑及其製備方法」(201010162861.1 );張其中等申請了專利「一種魚用複方中草藥免疫增強劑及其製備方法」(201110201424.0 );張璐等申請了專利「一種淡水養殖魚類通用複合中草藥免疫增強劑」(201110186183. 7 );徐維娜等申請了專利「一種團頭魴免疫增強劑飼料及其生產方法」(20210033844. 7 )等，都是提高魚類的免疫力複方中草藥製劑，但是有關提高魚體抗應激複合中草藥的論文與專利還少見，特別是能提高團頭魴專用的複合中草藥製劑還少見。目前已有一些關於五倍子、刺五加、黃柏、蒲公英、白頭翁、甘草的在水產養殖的使用，但是有關五倍子、刺五力卩、黃柏、蒲公英、白頭翁、甘草配伍使用，還未見報導。因此研製複合中草藥抗應激製劑，提高團頭魴抗病能力，抗應激能力，對水產養殖的健康發展和可持續發展具有重要意義。
發明內容
本發明的目的在於從中醫的理論出發，以五倍子為君，刺五加、黃柏為臣，蒲公英、
白頭翁、甘草等為使，研製中草複合物，從而提供一種團頭魴複合中草藥抗應激製劑及製備方法，其能耗低、工藝簡單、生產成本低，能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高魚體抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，且可促進魚體生長。本發明提供一種團頭魴複合中草藥抗應激製劑，其組成包括(重量份)五倍子22 28份、刺五加15 19份、黃柏5 20份、蒲公英12 19份、白頭翁10 16份和甘草10-15份。製備方法為按上述配方分別稱取各組份，分別烘乾後粉碎，混勻即得。所述烘乾至水分〈12%，烘乾溫度範圍為50-60°C。上述團頭魴複合中草藥抗應激製劑在魚飼料中的添加量為1%-5. 0%。優選地，添加量與使用的周期有關，當使用周期在30d以上，在飼料中添加量為1. 0%-2. 0% ;當使用周期在7-30d以內，在飼料中添加量為2. 0%-3. 0%。當使用周期在7d以內，在飼料中添加量為
3.0%-5. 0%。此複合中草藥抗應激製劑可直接清除機體內的自由基，消除自由基對機體組織器官正常功能的負面影響，加快修復被破壞的免疫系統，減緩機體對應激條件的反應，能提高團頭魴的免疫與抗氧化能力、抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，改善飼料適口性，促進團頭魴生長。本發明的團頭魴複合中草藥抗應激製劑，從中醫的理論出發，以五倍子為君，刺五加、黃柏為臣，蒲公英、白頭翁、甘草等為使，研製複合中草藥抗應激製劑，能克服某一種產品的不足之處，相互補充，既有抗應激的功效，又具有一定的抗病原菌的功效，促進魚體生長；本發明原料來源穩定，製備簡單，取材廣泛，成本低廉。
具體實施例方式
下面結合實施例進一步描述本發明。實施例1
配製I kg複合中草藥抗應激製劑，其各原料組成五倍子280g、刺五加150g、黃柏200g、蒲公英120g、白頭翁為100g、甘草150g份；將上述各組份進行烘乾，烘乾至水分〈12% ;烘乾後的各組分進行粗粉碎，粉碎機(WKX-160型中草藥粉碎機，青州市富爾康製藥機械有限公司)內粉碎後為粗物料，並通過40目篩網，粉碎機粉碎速度200轉/分；後經超微粉碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)進行第二次粉碎，並通過200目篩網，粉碎機粉碎速度500轉/分；再將上述各組分在混合機(V型混合機，上海華夏漁業機械有限公司)內充分混勻，製成200目乾粉的複合中草藥抗應激製劑，混合機投料轉速18轉/分。所用五倍子、刺五加、黃柏、蒲公英、白頭翁、甘草等中草藥均購自江蘇中草藥貿易有限公司，下同。生長實驗團頭魴由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、規格、重量基本一致的團頭魴，個體初均重約30g。隨機分組，設有試驗組與對照組，每組設3個平行試驗，每平行組50尾試驗魚，共6個網箱(規格為250cmX 150cmX 100cm)。團頭魴馴化30d後投餵O、1. 0%兩個劑量複合中草藥抗應激製劑56d，測定其生長的影響。應激試驗飼養試驗結束後，選取個體基本一致的魚進行應激試驗。採用高密度(100 g/L)應激，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為20尾左右，放養於同樣規格容積為40 L塑料桶中。採用流水系統，水溫25± 1°C，流速為2 L/min,並保證充足的氧氣，減少人為幹擾，保持安靜，防止額外應激。每12觀察魚體死亡情況，觀察4d，統計死亡率，採集血液、肝臟樣品等。攻毒實驗飼養試驗結束後，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為10尾魚。病原菌採用淡水魚類細菌-嗜水性氣單胞菌，將兩次活化後的嗜水性氣單胞菌用無菌生理鹽水稀釋，使終濃度約為5X106cells/ml。按每100 g魚重腹腔注射菌液1. O ml，後放養於同樣規格容積的水泥池網箱中(規格為IOOcmX IOOcmX 100cm),並保證充足的氧氣，每天觀察魚體死亡情況，觀察7d，統計死亡率。結果表明與對照組相比，1. 0%複合中草藥抗應激製劑增重率顯著(P〈0. 05)分別提高了 12. 58% ;病原菌感染魚體7d，對照組死亡率為90. 0%，1. 0%複合中草藥抗應激製劑魚死亡率為28. 0% ;高密度應激Id試驗後，與對照組相比，1. 0%免疫增強劑顯著(P〈0. 05)降低血液皮質醇濃度9. 21%，血糖水平5. 54%及丙二醛濃度8. 11%，增加了血液過氧化氫酶15. 34%、超氧化物歧化酶活性11. 238%以及應激蛋白HSP70濃度6. 33%，因此，該複合中草藥抗應激製劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高魚體抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，提高魚體抗應激能力，促進魚體生長。實施例2
配製I kg複合中草藥抗應激製劑,其各原料組成五倍子250g、刺五加170g、黃柏170g、蒲公英150g、白頭翁為160g、甘草IOOg份；將上述各組份進行烘乾，烘乾至水分〈12% ;烘乾後的各組分進行粗粉碎，粉碎機(WKX-160型中草藥粉碎機，青州市富爾康製藥機械有限公司)內粉碎後為粗物料，並通過50目篩網，粉碎機粉碎速度250轉/分；後經超微粉碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)進行第二次粉碎，並通過250目篩網，粉碎機粉碎速度550轉/分；再將上述各組分在混合機(V型混合機，上海華夏漁業機械有限公司)內充分混勻，製成250目乾粉的複合中草藥抗應激製劑，混合機投料轉速19轉/分。生長實驗團頭魴由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、規格、重量基本一致的團頭魴，個體初均重約30g。隨機分組，設有試驗組與對照組，每組設3個平行試驗，每平行組50尾試驗魚，共6個網箱(規格為250cmX 150cmX 100cm)。團頭魴馴化30d後投餵0、2. 5%兩個劑量複合中草藥抗應激製劑25d，測定其生長的影響。應激試驗飼養試驗結束後，選取個體基本一致的魚進行應激試驗。採用高密度(100 g/L)應激，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為20尾左右，放養於同樣規格容積為40 L塑料桶中。採用流水系統，水溫25± 1°C，流速為2 L/min,並保證充足的氧氣，減少人為幹擾，保持安靜，防止額外應激。每12h觀察魚體死亡情況，觀察4d，統計死亡率，採集血液、肝臟樣品等。攻毒實驗飼養試驗結束後，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為10尾魚。病原菌採用淡水魚類細菌-嗜水性氣單胞菌，將兩次活化後的嗜水性氣單胞菌用無菌生理鹽水稀釋，使終濃度約為5X106cells/ml。按每100 g魚重腹腔注射菌液1. O ml，後放養於同樣規格容積的水泥池網箱中(規格為IOOcmX IOOcmX 100cm),並保證充足的氧氣，每天觀察魚體死亡情況，觀察7d，統計死亡率。結果表明與對照組相比，2. 5%複合中草藥抗應激製劑增重率顯著(P〈0. 05)分別提高了 11. 21% ;病原菌感染魚體7d，對照組死亡率為94. 0%, 2. 5%複合中草藥抗應激製劑魚死亡率為24. 0%;高密度應激Id試驗後，與對照組相比，2. 5%複合中草藥抗應激製劑顯著(P〈0. 05)降低血液皮質醇濃度9. 54%，血糖水平6. 99%及丙二醛濃度12. 857%，增加了血液過氧化氫酶8. 99%、超氧化物歧化酶活性8. 44%以及應激蛋白HSP70濃度12. 45%，因此，該免疫增強劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高魚體抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，提高魚體抗應激能力，促進魚體生長。實施例3
配製I kg複合中草藥抗應激製劑其各原料組成五倍子220g、刺五加190g、黃柏150g、蒲公英190g、白頭翁130g、甘草120g份；將上述各組份進行烘乾，烘乾至水分〈12% ;烘乾後的各組分進行粗粉碎，粉碎機(WKX-160型中草藥粉碎機，青州市富爾康製藥機械有限公司)內粉碎後為粗物料，並通過60目篩網；粉碎機粉碎速度300轉/分；後經超微粉碎機(ZNC-300小型超微粉碎機，北京興時利和科技發展有限公司)進行第二次粉碎，並通過300目篩網；粉碎機粉碎速度600轉/分；再將上述各組分在混合機(V型混合機，上海華夏漁業機械有限公司)內充分混勻，製成300目乾粉的複合中草藥抗應激製劑，混合機投料轉速:20轉/分。生長實驗團頭魴由中國水產科學院淡水漁業研究中心漁場提供。試驗選擇健康、規格、重量基本一致的團頭魴，個體初均重約30g。隨機分組，設有試驗組與對照組，每組設3個平行試驗，每平行組50尾試驗魚，共6個網箱(規格為250cmX 150cmX 100cm)。團頭魴馴化15d後投餵0、4. 0%複合中草藥抗應激製劑7d，測定其生長的影響。應激試驗飼養試驗結束後，選取個體基本一致的魚進行應激試驗。採用高密度(100 g/L)應激，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為20尾左右，放養於同樣規格容積為40 L塑料桶中。採用流水系統，水溫25± 1°C，流速為2 L/min,並保證充足的氧氣，減少人為幹擾，保持安靜，防止額外應激。每12h觀察魚體死亡情況，觀察2d，統計死亡率，採集血液、肝臟樣品等。攻毒實驗飼養試驗結束後，每個劑量組分三個平行組，每個平行組均為10尾魚。病原菌採用淡水魚類細菌-嗜水性氣單胞菌，將兩次活化後的嗜水性氣單胞菌用無菌生理鹽水稀釋，使終濃度約為5X106cells/ml。按每100 g魚重腹腔注射菌液1. O ml，後放養於同樣規格容積的水泥池網箱中(規格為IOOcmX IOOcmX 100cm),並保證充足的氧氣，每天觀察魚體死亡情況，觀察7d，統計死亡率。結果表明與對照組相比，4. 0%複合中草藥抗應激製劑增重率顯著(P〈0. 05)分別提高了 10. 78% ;病原菌感染魚體7d，對照組死亡率為89. 0%，4. 0%複合中草藥抗應激製劑魚死亡率為36. 0%;高密度應激Id試驗後，與對照組相比，4. 0%複合中草藥抗應激製劑顯著(P〈0. 05)降低血液皮質醇濃度8. 39%，血糖水平4. 46%及丙二醛濃度9. 64%，增加了血液過氧化氫酶9. 66%、超氧化物歧化酶活性6. 76%以及應激蛋白HSP70濃度5. 76%，因此，該複合中草藥抗應激製劑能提高魚體免疫與抗氧化能力，提高魚體抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，提高魚體抗應激能力，促進魚體生長。
權利要求
1.一種團頭魴複合中草藥抗應激製劑，其特徵在於其組成包括(重量份):五倍子22 28份、刺五加15 19份、黃柏5 20份、蒲公英12 19份、白頭翁10 16份和甘草 10-15 份。
2.如權利要求1所述的團頭魴複合中草藥抗應激製劑的製備方法，其特徵在於所述製備方法為按權利要求1所述配方分別稱取各組份，分別烘乾後粉碎，混勻即得。
3.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於所述烘乾的溫度為50-60°C，烘乾至水分 <12%ο
4.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於所述粉碎的方法為粉碎，過40-60目篩網；二次粉碎，過200-300目篩網。
5.如權利要求1所述的團頭魴複合中草藥抗應激製劑的使用方法，其特徵在於將所述複合中草藥抗應激製劑添加到團頭魴飼料中，添加量為1. 0%-5. 0%。
6.如權利要求5所述的使用方法，其特徵在於當使用周期在30d以上，在飼料中添加量為1. 0%-2. 0% ;當使用周期在7-30d以內，在飼料中添加量為2. 0%-3. 0% ;當使用周期在 7d以內，在飼料中添加量為3. 0%-5. 0%。
全文摘要
本發明公布了一種團頭魴複合中草藥抗應激製劑，其組成包括(重量份)五倍子22～28份、刺五加15～19份、黃柏5～20份、蒲公英12～19份、白頭翁10～16份和甘草10-15份。製備方法為按上述配方分別稱取各組份，分別烘乾後粉碎，混勻即得。所述複合中草藥抗應激製劑在魚飼料中的添加量為1.0%-5.0%。本發明的複合中草藥抗應激製劑可直接清除機體內的自由基，消除自由基對機體組織器官正常功能的負面影響，加快修復被破壞的免疫系統，減緩機體對應激條件的反應，能提高團頭魴的免疫與抗氧化能力、抗高密度以及抵抗嗜水性氣單胞菌感染能力，改善飼料適口性，促進團頭魴生長。
文檔編號A23K1/16GK102987164SQ20121057361
公開日2013年3月27日 申請日期2012年12月26日 優先權日2012年12月26日
發明者劉波, 謝駿, 戈賢平, 周群蘭, 繆凌鴻, 任明春, 高啟平 申請人:中國水產科學研究院淡水漁業研究中心