薑黃素明膠微球及其製備工藝的製作方法
2023-04-28 06:34:26 1
專利名稱：：薑黃素明膠微球及其製備工藝的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種薑黃素明膠微球及其製備工藝。技術背景薑黃素(Curcumin，簡稱C)是從姜科薑黃屬(curcumaL.)植物中提取的一種天然有效成分，具有廣泛的預防和治療腫瘤的作用，且毒副作用小。體外研究表明，薑黃素對多種腫瘤細胞的產生、增殖、轉移均具有抑制作用，特別是對於人肺癌細胞，不僅可使細胞內Ca2、cAMP濃度升高，成功誘導其凋亡，而且可以使具有抗脫落凋亡特性的肺癌細胞發生脫落凋亡，對於惡性轉移瘤的治療具有非常重要的意義。但其水中溶解度小，.穩定性差，口服吸收少，生物利用度低，這大大限制了其應用。微球，是一種以適宜高分子材料為載體包裹或吸附藥物而製成的球形或類球形微粒，粒徑一般在l500nm之間，屬於基質型骨架微粒，可以供注射、口服、滴鼻、皮下埋植或關節腔給藥使用，達到提高藥物靶向性、延緩或控制藥物釋放、增加製劑穩定性等目的。若將薑黃素製備成微球，則會大大提高其穩定性、吸收率、生物利用度等。目前並沒有關於薑黃素微球及製備工藝的專利文獻報導。
發明內容針對上述現有技術，本發明提供了一種薑黃素明膠微球，本發明還提供了其製備工藝。一種薑黃素明膠微球，微球中薑黃素的質量分數為2.2%7.6%，餘量為明膠。以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，步驟如下在溫度55。C士2。C下，將含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到溫度為55'C士2。C的含有Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%20%，薑黃素與明膠的質量比為1:1020，Span80的體積濃度為1%2%，水相與油相的比例為l:46;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20'C土2。C，加入戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58。C,攪拌固化2535min，再放入48。C冰箱中繼續固化24土0.5h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替沖洗數次，得乾燥粉末狀微球。所述電磁攪拌的轉速為8001000r/min。所述形成W/0乳劑時攪拌時間為3040min。所述戊二醛溶液體積分數為25%，加入的戊二醛溶液與7jC相的體積比為1:5。本發明的薑黃素明膠微球外觀為淡黃色粉末，用光學顯微鏡與掃描電鏡觀察，顯示微球呈球形，表面光滑，粒徑分布較窄、分散性好，不粘聯或極少粘聯，流動性好。本發明以可生物降解的價格低廉的明膠為載體材料，以乳化交聯法製備了薑黃素明膠微球(C-GMS)，具有工藝簡單、成本低、操作方便、包封率高、穩定性好等優點。-圖1為微球在光學顯微鏡下的照片(*100);圖2為微球在掃描電鏡下的照片(*4000);圖3為微球粒徑分布圖；圖4為薑黃素的DSC曲線圖；，圖5為空白明膠微球的DSC曲線圖；圖6為薑黃素明膠微球的DSC曲線圖;圖7為C-GMS體外釋放曲線示意圖。具體實施方式下面結合實施例和試驗例對本發明作進一步的說明實施例l:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在800r/rnin電磁攪拌下緩慢加入到8mL溫度為55'C的含有2%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為20%，薑黃素與明膠的質量比為1:20;攪拌30min形成W/O乳劑，然後降溫至2(TC，加入0.4mL25呢的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C，攪拌固化30min，再放入48。C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙y醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥畺為2.22%,包封率為27.50%。實施例2:製備薑黃素明膠微球，步驟如下，，以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在1000r/min電磁攪拌下緩慢加入到8mL溫度為55'C的含有1.5%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為15%，薑黃素與明膠的質量比為15:200;攪拌40min形成W/O乳劑，然後降溫至2(TC，加入0.4mL25W的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58°C，攪拌固化25min，再放入48。C冰箱中繼續固化23.5h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為4.44%,包封率為52.00%。實施例3:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到8mL溫度為55'C的含有P/。Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%，薑黃素與明膠的質量比為l:10;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20'C，加入0.4mL25y。的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C，攪拌固化35min，再放入48'C冰箱中繼續固化24.5h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為7.6%，包封率為71.50%。實施例4:製備薑黃素明膠微球，步驟如下-以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到10mL溫度為55'C的含有1.5%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%，薑黃素與明膠的質量比為1:20;.攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20'C，加入0.4mL25免的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58"，攪拌固化30min，再放入48t:冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為3.74%，包封率為66.90%。實施例5:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL2含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到10mL溫度為55'C的含有l%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為20%,薑黃素與明膠的質量比為15:200;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20。C，加入0.4mL25免的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58。C，攪拌固化30min，再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為4.8%，包封率為'55.40%。實施例6:製備薑黃素明膠微球，步驟如下-以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到10mL溫度為55'C的含有2。/。Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為15%，薑黃素與明膠的質量比為1:10;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至2(TC，加入0.4mL2596的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C，攪拌固化30min，再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為6.01%，包封率為71.90%。實施例7:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55。C下，將2mL2含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到12mL溫度為55'C的含有l%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為15%,薑黃素與明膠的質量比為l:20;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20'C，加入0.4mL25免的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58。C，攪拌固化30min,再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為3.30%，包封率為61.00%。實施例8:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到12mL溫度為55'C的含有2。/。Spaii80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%，薑黃素與明膠的質量比為15:200;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至2(TC，加入0.4mL25y。的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C，攪拌固化30min,再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為6.15%，包封率為75.50%。實施例9:製備薑黃素明膠微球，步驟如下以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55'C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到12mL溫度為55'C的含有1.5%Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為20%，薑黃素與明膠的質量比為1:10;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至2(TC，加入0.4mL259b的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C,攪拌固化30min，再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定，載藥量為6.30%，包封率為50.01%。實施例10:製備薑黃素明膠微球，步驟如下r以液體石蠟為油相，Span80為乳化劑，在溫度55。C下，將2mL含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到10mL溫度為55'C的含有in/。Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%，薑黃素與明膠的質量比為1:10;攪拌形成W/0乳齊U,然後降溫至2(TC,加入0.4mL25^的戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58'C，攪拌固化30min，再放入48'C冰箱中繼續固化24h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。經測定.，其中，載藥量為6.15%，包封率為75.5%。試驗例l:微球的形態、粒徑及其分布按實施例10的製備工藝製備薑黃素明膠微球，觀察其形態、粒徑及其分布，結果為外觀為淡黃色粉末，用光學顯微鏡與掃描電鏡觀察，顯示微球呈球形，表面光滑，粒徑分布較窄、分散性好，不粘聯或極少粘聯，流動性好，如圖l、圖2所示。以算術平均徑(dav)為微球的平均粒徑，計算公式為dav-(n,d,+n2d2+…nndn)/(m+n2+…+nn),式中n,、！12...1111為粒子數，山、d2…dn為粒徑。在光學顯微鏡下用測微尺測定500個，以每隔5[im粒徑為一單元的微球個數除以總個數得微球的頻率(％)為縱坐標，以粒徑Oun)為橫坐標繪製微球的球徑直方圖表示粒度分布，如圖3所示，測得微球的平均粒徑為18.9pm,粒徑在5~30pm範圍內者佔總數的86.6%。試驗例2:差示掃描量熱法(DSC)測定以實施例IO所得到的微球為樣品，進行DSC測定，操作條件掃描溫度31400°C,升溫速度10°C/min，DSC量程為40mw，氮氣流量為0.2ml/min，分別測得C(薑黃素)、GMS(空白明膠微球)與C-GMS(薑黃素明膠微球)的DSC曲線，如圖4、圖5、圖6所示，從曲線上看出C在185.5。C時有特徵峰，GMS在62.5。C時有特徵吸收峰，但C-GMS基本上無C或GMS的特徵吸收峰，而有其本身67.9X:，182.5。C的特徵峰，說明確實形成了C-GMS。試驗例3:C-GMS體外釋藥試驗(1)標準曲線的製備準確稱量10mg薑黃素，用40%乙醇生理鹽水溶液溶於lOOmL容量瓶中，定容後分別取O.l、0.3、0.5、0.7、0.9ml,在10mL容量瓶中用上述溶液溶定容。於432nrn處測定吸收度A，以A對藥物濃度C進行線性回歸，得標準曲線方程為A=0.1276C-0.0035,r=0.9998(2)釋藥試驗參照文獻趙瑞玲，丁紅，謝茵.阿黴素聚乳酸微球的製備及釋藥特性研究[J].中國醫院藥學雜誌，2004，24(2):74-7,採用動態透析法，精密稱取實施例10製備的C-GMS20mg，裝入透析袋(分子量截留值為20000)中，置200mL溶出杯中，加入lOOmL40%乙醇生理鹽水溶液作為釋放介質，在37。C恆溫溶出儀中旋轉，定時取樣3mL，同時補充等量的同溫度的釋放介質。樣液用0.8pm微孔濾膜過濾後，以同法操作的GMS為空白，測定藥物含量，計算累積釋藥百分率(Ft),以(Ft)對相應取樣時間(t)做圖，結果如圖7所示。結果表明，C-GMS體外累積釋放量在48h時可達77.01%，具有明顯的緩釋特徵。C-GMS的釋藥可用一級動力學方程描述ln(l-Q)=-0.0298t-0.0598，r=0.9984，T1/2=21.25h。試驗例4:C-GMS的穩定性考察取實施例IO製備的C-GMS，密封於西林瓶中，分別置冰箱內(35°C)、室溫1525。C與37。CRH75X條件下3個月，結果如表1所示，其外觀、形態、載藥量、釋藥規律均幾乎無變化或變化不顯著。表ltableseeoriginaldocumentpage7權利要求1.薑黃素明膠微球，其特徵在於微球中薑黃素的質量分數為2.2％～7.6％，餘量為明膠。2.權利要求1所述的薑黃素明膠微球的製備工藝，其特徵在於以液體石蠟為油相，Span80'為乳化劑，步驟如下在溫度55。C土2-C下，將含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下緩慢加入到溫度為55'C土2X:的含有Span80的液體石蠟中，其中，明膠的質量濃度為10%20%，薑黃素與明膠的質量比為1:1020，Span80的體積濃度為1%2%，水相與油相的比例為l:46;攪拌形成W/0乳劑，然後降溫至20'C士2'C,加入戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在58。C，攪拌固化2535min,再放入48。C冰箱中繼續固化24±0.5h;將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。3.根據權利要求2所述的薑黃素明膠微球的製備工藝，其特徵在於所述電磁攪拌的轉速為8001000r/min。4.根據權利要求2所述的薑黃素明膠微球的製備工藝，其特徵在於所述形成W/0乳劑時攪拌時間為3040min。5.根據權利要求2所述的薑黃素明膠微球的製備工藝，其特徵在於所述戊二醛溶液體積分數為25%，加入的戊二醛溶液與水相的體積比為h5。全文摘要本發明公開了一種薑黃素明膠微球，微球中薑黃素的質量分數為2.2％～7.6％，餘量為明膠。其製備方法為將含有薑黃素的明膠水溶液在電磁攪拌下加入到含有Span80的液體石蠟中，攪拌形成W/O乳劑，然後降溫至20℃，加入戊二醛溶液，冰浴，保持溫度在5～8℃，攪拌固化，再放入冰箱中繼續固化24h；將上層油相傾倒，加入異丙醇脫水，抽濾，用乙醚和異丙醇交替衝洗數次，得乾燥粉末狀微球。微球外觀為淡黃色粉末，呈球形，表面光滑，粒徑分布較窄、分散性好，不粘聯或極少粘聯，流動性好。本發明以可生物降解的價格低廉的明膠為載體材料，以乳化交聯法製備了薑黃素明膠微球，具有工藝簡單、成本低、操作方便、包封率高、穩定性好等優點。文檔編號A61P35/00GK101401801SQ200810159648公開日2009年4月8日申請日期2008年11月11日優先權日2008年11月11日發明者劍唐,曹豐亮,靜楊,翟光喜,瑋蔣申請人:山東大學