一種利用特徵圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊裡蛇膽汁質量的方法
2023-04-28 04:20:36 2
專利名稱：一種利用特徵圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊裡蛇膽汁質量的方法
技術領域：
本發明涉及一種中成藥的質量控制方法，特別是涉及一種利用特徵圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊裡蛇膽汁的方法。
背景技術：
牛黃蛇膽川貝膠囊是由人工牛黃、蛇膽汁、川貝母等三味中藥材，經一定工藝加工而成。具有清熱、化痰、止咳功效，主要用於外感咳嗽中的熱痰咳嗽，燥痰咳嗽。為了提高生物利用度，本品是制粒後粉碎成細粉，然後灌裝膠囊。眾所周知，中成藥的藥效不是來自任何單一的活性成分，而是多種有效部位群共同作用的結果，目前，牛黃蛇膽川貝膠囊質量標準中對人工牛黃、川貝母採用多成分鑑別方式進行質量控制，而蛇膽汁是採用牛磺膽酸鈉進行含量測定。看似蛇膽汁的控制更嚴，但由於牛磺膽酸鈉能額外獲得，所以單獨採用牛磺膽酸鈉含量來判斷蛇膽汁的質量不準確，反而存在很大風險。因此，需要一種快速、相對準確的質量控制方法，對牛黃蛇膽川貝膠囊中的蛇膽汁進行控制。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術中的不足，提供一種牛黃蛇膽川膠囊中蛇膽汁的質量控制方法。本發明方法快速、準確率高。本發明的技術方案概述如下:第一步，先建立蛇膽汁中成分標準特徵圖譜，方法如下:(I)供試品溶液的製備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內容物適量，混勻，取lg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過，取續濾液，為供試品溶液；(2)參照物溶液的製備:取牛磺膽酸鈉對照品適量，精密稱定，加70%甲醇製成每Iml含0.2mg的溶液，作為參照物溶液；(3)色譜條件:用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液(7:3)為流動相；檢驗波長為205nm ；(4)測定:分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，用液相色譜法測定，制定牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜；所述牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜中，有三個特徵峰，以參照物牛磺膽酸鈉的色譜峰的相對保留時間和相對峰面積為1，計算其它色譜峰的相對保留時間和相對峰面積，上述三個特徵峰分別是I號峰:平均相對保留時間RRT為0.68，相對峰面積為50%-70%，2號峰的平均相對保留時間RRT為0.81，相對峰面積為80%_100%，3號峰平均相對保留時間RRT為1.0，相對峰面積為100% ;所述I號峰、2號峰的相對保留時間的差值均小於 10% ；
第二步，以上述相同的方法建立待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜；第三步，將待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜與標準的蛇膽汁成分特徵圖譜比對，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質量。本發明是結合大量生產批次統計情況和試驗研究工作，建立了合格的牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分標準特徵圖譜，能較好地保證牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁投料的準確性與正確性。到目前為止，上述的控制方法尚無公開報導。本發明具有下述特點:1、整體性、宏觀性和模糊性，本發明克服了單一成分含量測定難以反映蛇膽汁真實投料情況，本發明為完整、準確評價牛黃蛇膽川貝膠囊的質量提供了新的方法和手段；2、用視覺直觀辨識圖譜的異同；用半定量指標量化樣品的真偽，優劣。
圖1為牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分標準特徵圖譜。
具體實施例方式下面通過實施例的方式進一步說明本發明。實施例1:牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁特徵圖譜的建立1、儀器與試藥1.1 儀器EX1600高效液相色譜儀及原裝工作站1.2 試藥牛磺膽酸鈉對照品由中國藥品生物製品檢定所提供；磷酸二氫鉀為分析純；甲醇為色譜純；牛黃蛇膽川貝膠囊由合肥今越製藥有限公司提供，批號為110801,110901，111101，120101，120201，120301，120302，120401，120501，120601。2、方法與結果2.1色譜條件與系統適用性C18色譜柱(4.6X250mm，5 μ m)，甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液(7:3)為流動相；檢測波長為205nm。理論板數按牛磺膽酸鈉峰計算應不低於5000。3、特徵圖譜特徵峰的測定3.1牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜特徵峰的建立(I)供試品溶液的製備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內容物適量，混勻，取Ig精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μ m)濾過，取續濾液，為供試品溶液。(2)參照物溶液的製備:取牛磺膽酸鈉對照品約50mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加入70%甲醇適量使溶解完全，然後稀釋至刻度，搖勻，作為參照物溶液。分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，照液相色譜法測定，記錄30分鐘的圖譜，即得。以參照物的色譜峰保留時間和峰面積為1，計算相對保留時間和峰面積比值，即得牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁標準特徵圖譜。
3.2特徵峰確定通過10批牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜的測定，比較其圖譜，確定特徵峰為3個，以參照物牛磺膽酸鈉的色譜峰的相對保留時間和相對峰面積為1，計算10批樣品共有峰相對保留時間以及相對峰面積。結果見下表1、表2。表1:10批樣品保留時間統計結果
權利要求
1.一種利用特徵圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊裡蛇膽汁質量的方法，其特徵在於，包括如下步驟: 第一步，先建立蛇膽汁中成分標準特徵圖譜，方法如下: (1)供試品溶液的製備:取牛黃蛇膽川貝膠囊內容物適量，混勻，取lg，精密稱定，置25ml量瓶中，加70%甲醇約20ml，超聲處理30分鐘，放冷，加70%甲醇至刻度，搖勻，用.0.45 μ m微孔濾膜濾過，取續濾液，為供試品溶液； (2)參照物溶液的製備:取牛磺膽酸鈉對照品適量，精密稱定，加70%甲醇製成每Iml含.0.2mg的溶液，作為參照物溶液； (3)色譜條件:用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸二氫鉀溶液為流動相，檢驗波長為205nm，其中，甲醇與0.4%磷酸二氫鉀溶液的質量比為7:3 ； (4)測定:分別精確吸取參照物溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，用液相色譜法測定，制定牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜； 所述牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分特徵圖譜中，有三個特徵峰，以參照物牛磺膽酸鈉的色譜峰的相對保留時間和相對峰面積為1，計算其它色譜峰的相對保留時間和相對峰面積，上述三個特徵峰分別是I號峰:平均相對保留時間RRT為0.68，相對峰面積為50%-70%，2號峰的平均相對保留時間RRT為0.81，相對峰面積為80%_100%，3號峰平均相對保留時間RRT為1.0，相對峰面積為100% ;所述I號峰、2號峰的相對保留時間的差值均小於 10%, 第二步，以上述相同的方法建立待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜； 第三步，將待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜與標準的蛇膽汁成分特徵圖譜比對，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質量及真偽。
全文摘要
本發明提供了一種利用特徵圖譜控制牛黃蛇膽川貝膠囊裡蛇膽汁的方法，首先先建立標準蛇膽汁中成分標準特徵圖譜，然後，以相同的方法建立待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜；最後將待測牛黃蛇膽川貝膠囊中蛇膽汁成分樣品特徵圖譜與標準的蛇膽汁成分特徵圖譜比對，判斷牛黃蛇膽川貝膠囊的質量及真偽。本發明方法能真實的控制蛇膽汁實際投料情況，為完整、準確評價牛黃蛇膽川貝膠囊的質量提供了新的方法和手段。
文檔編號G01N30/02GK103149288SQ201310043898
公開日2013年6月12日 申請日期2013年2月4日 優先權日2013年2月4日
發明者趙棟磊, 劉延武, 孫夢希, 王旦, 呂春懷 申請人:合肥今越製藥有限公司