一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法

2023-04-26 00:50:26 2

一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法
【專利摘要】本發明公開了一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉30-40份、牡丹籽殼提取物1-3份、牡丹花提取物1-3份、蜂蠟3-8份和牡丹籽油48-63份；所述的牡丹肽粉為牡丹籽仁經蛋白酶水解後乾燥得到的粉末；所述的牡丹籽殼提取物為從牡丹籽殼中提取，並乾燥的提取物；所述的牡丹花提取物為從經過水蒸氣蒸餾的牡丹花花瓣中提取，並乾燥的提取物。本發明提供的軟膠囊營養價值高，含有多種具有較好保健功能的活性成分，且牡丹肽分子量較小，分布均勻，最大限度的保留了牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸收，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明屬於保健品領域，主要涉及一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法。 一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法

【背景技術】
[0002] 牡丹是我國特有的木本名貴花卉，有數千年的自然生長和兩千多年的人工栽培歷 史，素有"國色天香"、"花中之王"的美稱。牡丹全身是寶，牡丹花可供觀賞，還可以製成牡 丹花茶、牡丹花精油；牡丹根皮是傳統中藥"丹皮";牡丹籽油含有多種不飽和脂肪酸，尤其 是罕見的奇數脂肪酸，是一種具有重要開發價值的食用油脂來源通過脫皮後牡丹籽仁不僅 含有脂肪、蛋白質等營養成分，還含有芍藥苷，白芍苷，羥基芍藥苷，羥基白芍苷等芍藥苷類 化合物。如何全發麵開發利用牡丹將會是一個非常重要且任務艱巨的研究課題。


【發明內容】

[0003] 本發明的目的是提供一種牡丹肽軟膠囊及其製備方法，該軟膠囊營養價值高，含 有多種具有較好保健功能的活性成分，且牡丹肽分子量較小，分布均勻，最大限度的保留了 牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸收，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。
[0004] 本發明實現上述目的採用的技術方案是：一種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填 充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉30-40份、牡丹籽殼提取物1-3份、牡丹花提 取物1-3份、蜂錯3-8份和牡丹籽油48-63份； 所述的牡丹肽粉為牡丹籽仁經蛋白酶水解後乾燥得到的粉末； 所述的牡丹籽殼提取物為從牡丹籽殼中提取，並乾燥的提取物； 所述的牡丹花提取物為從經過水蒸氣蒸餾的牡丹花花瓣中提取，並乾燥的提取物。
[0005] 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機研磨 2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束後升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除漁，經噴霧乾燥後即製得牡 丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15-25倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液 並濃縮至原體積的1/4-1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4-6倍的無水乙醇， 混合後靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹籽 殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量3-5%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣 蒸餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的10-15倍的水，超聲提取20-30min，然後將提 取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃縮液中加入體積4-6倍的無水乙醇，混合靜置3-6h， 過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取物 1-3份和步驟三得到的牡丹花提取物1-3份，再取蜂蠟3-8份和牡丹籽油48-63份，備用； 先向混合釜內加入牡丹籽油，然後邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂 蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼提取物和牡丹花提取物，並在溫度為65-75 °C條件下攪 拌20-30min，然後用180-220目研磨機研磨2-4次，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，在 140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌15-20秒，得到混合底料，備用；將混合底料採用常 規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成牡丹肽軟膠囊的製備。
[0006] 步驟一所述的混合蛋白酶是指重量比為1:0. 8-1.2:0. 8-1.2 :0-1.2:0-1.2的胰 蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、鹼性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合物。
[0007] 本發明的有益效果 其一、本發明提供的牡丹肽軟膠囊營養價值高，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多 種生物活性，同時含有多種具有較好保健功能的活性成分，如芍藥苷、白芍苷、羥基芍藥苷、 羥基白芍苷等芍藥苷類化合物，具有較好的抗高血脂、抗血栓形成，擴張冠狀動脈，增加冠 脈流量，對抗急性心肌缺血，降低血壓具有較好的療效，另外還能夠顯著提高人的免疫力， 抗炎抗潰瘍、解熱解痙、利尿等。而且，充分利用複合蛋白酶來水解牡丹籽餅柏蛋白，製備得 到的牡丹小肽分子量較小，分布均勻，最大限度的保留了牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸 收。
[0008] 其二、本發明是以油用牡丹，主要是鳳丹和紫斑牡丹牡丹籽仁為主要原料，同時充 分利用牡丹籽殼、牡丹花等其它的牡丹原料資源，實現了牡丹資源的充分利用，不會造成任 何牡丹資源的浪費，且本發明在製備過程對環境不產生有毒有害排放物，製備工藝簡單，適 合規模化生產。

【具體實施方式】
[0009] -種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹 肽粉30-40份、牡丹籽殼提取物1-3份、牡丹花提取物1-3份、蜂蠟3-8份和牡丹籽油48-63 份； 所述的牡丹肽粉為牡丹籽仁經蛋白酶水解後乾燥得到的粉末； 所述的牡丹籽殼提取物為從牡丹籽殼中提取，並乾燥的提取物； 所述的牡丹花提取物為從經過水蒸氣蒸餾的牡丹花花瓣中提取，並乾燥的提取物。 [0010] 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機研磨 2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束後升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除渣，經噴霧乾燥後即製得牡 丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15-25倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液 並濃縮至原體積的1/4-1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4-6倍的無水乙醇， 混合後靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹籽 殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量3-5%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣 蒸餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的10-15倍的水，超聲提取20-30min，然後將提 取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃縮液中加入體積4-6倍的無水乙醇，混合靜置3-6h， 過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取物 1-3份和步驟三得到的牡丹花提取物1-3份，再取蜂蠟3-8份和牡丹籽油48-63份，備用； 先向混合釜內加入牡丹籽油，然後邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂 蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼提取物和牡丹花提取物，並在溫度為65-75 °C條件下攪 拌20-30min，然後用180-220目研磨機研磨2-4次，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，在 140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌15-20秒，得到混合底料，備用；將混合底料採用常 規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成牡丹肽軟膠囊的製備。
[0011] 步驟一所述的混合蛋白酶是指重量比為1:0. 8-1.2:0. 8-1.2 :0-1.2:0-1.2的胰 蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、鹼性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合物。
[0012] 本發明中所述的牡丹籽為油用牡丹籽，主要有鳳丹牡丹和紫斑牡丹等。在制 備牡丹肽過程中，採用的過濾方法是板框過濾或者膜過濾，水解得到的牡丹肽分子量在 200-5000道爾頓之間，且該牡丹肽具有抗氧化、抗腫瘤及抗菌等多種活性。
[0013] 以下結合具體實施例對本發明做進一步說明： 實施例1 : 一種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉 40份、牡丹籽殼提取物3份、牡丹花提取物1份、蜂蠟8份和牡丹籽油48份； 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取鳳丹牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為9. 5的 稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌4次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制8 min，得到牡 丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量20倍的水，用160-220目的研磨機研磨4遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為9. 6， 然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為1. 2%，所述的 混合蛋白酶是指重量比為1:1. 2:1. 2 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和鹼 性2709蛋白酶的混合物，保持溫度為50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為200 r/min，在無菌空氣 下水解48 h，水解結束後升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除渣，經噴霧乾燥後即製得 牡丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量25倍的水，超聲提取50min，收集提取液並濃縮 至原體積的1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積6倍的無水乙醇，混合後靜置 6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹籽殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量5%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣蒸 餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的15倍的水，超聲提取30min，然後將提取液濃縮 至原體積的1/5,再向濃縮液中加入體積6倍的無水乙醇，混合靜置6h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉、步驟二得到的牡丹籽殼提取物和步 驟三得到的牡丹花提取物，再取蜂蠟和牡丹籽油，備用；先向混合釜內加入牡丹籽油，然後 邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼 提取物和牡丹花提取物，並在溫度為75 °C條件下攪拌30min，然後用220目研磨機研磨4 次，在壓力為20-30Mpa下均質2次，在140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌20秒，得到混 合底料，備用；將混合底料採用常規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成 牡丹肽軟膠囊的製備。
[0014] 實施例2 : 一種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉 30份、牡丹籽殼提取物1份、牡丹花提取物3份、蜂蠟3份和牡丹籽油63份； 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取紫斑牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為8. 5的 稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制5 min，得到牡 丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量10倍的水，用160-220目的研磨機研磨2遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為7. 5， 然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0. 6 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:0. 8:0. 8 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 中性Neutrase蛋白酶的混合物，保持溫度為40 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100r/min，在無 菌空氣下水解24 h，水解結束後升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，經噴霧乾燥後 即製得牡丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15倍的水，超聲提取30min，收集提取液並濃縮 至原體積的1/4,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4倍的無水乙醇，混合後靜置 3h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3,噴霧乾燥，即得到牡丹籽殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量3%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣蒸 餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的10倍的水，超聲提取20min，然後將提取液濃縮 至原體積的1/4,再向濃縮液中加入體積4倍的無水乙醇，混合靜置3h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/3,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉、步驟二得到的牡丹籽殼提取物和步 驟三得到的牡丹花提取物，再取蜂蠟和牡丹籽油，備用；先向混合釜內加入牡丹籽油，然後 邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼 提取物和牡丹花提取物，並在溫度為65°C條件下攪拌20min，然後用180目研磨機研磨2 次，在壓力為20-30Mpa下均質1次，在140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌15秒，得到混 合底料，備用；將混合底料採用常規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成 牡丹肽軟膠囊的製備。
[0015] 實施例3: 一種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉 35份、牡丹籽殼提取物2份、牡丹花提取物2份、蜂蠟5份和牡丹籽油56份； 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取鳳丹牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為9. 0的 稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制7min，得到牡 丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量15倍的水，用190目的研磨機研磨3遍，得到 牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為8. 6， 然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0. 9 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:0. 8:1. 0 :0. 6 :0. 6的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白 酶、鹼性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合物，保持溫度為45 °C，控制攪拌槳攪拌 轉數為150 r/min，在無菌空氣下水解36 h，水解結束後升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過 濾除渣，經噴霧乾燥後即製得牡丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量20倍的水，超聲提取40min，收集提取液並濃縮 至原體積的1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積5倍的無水乙醇，混合後靜置 5h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹籽殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量4%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣蒸 餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的13倍的水，超聲提取25min，然後將提取液濃縮 至原體積的1/4,再向濃縮液中加入體積5倍的無水乙醇，混合靜置5h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉、步驟二得到的牡丹籽殼提取物和步 驟三得到的牡丹花提取物，再取蜂蠟和牡丹籽油，備用；先向混合釜內加入牡丹籽油，然後 邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼 提取物和牡丹花提取物，並在溫度為70 °C條件下攪拌25min，然後用200目研磨機研磨3 次，在壓力為20-30Mpa下均質2次，在140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌18秒，得到混 合底料，備用；將混合底料採用常規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成 牡丹肽軟膠囊的製備。
[0016] 實施例4: 一種牡丹肽軟膠囊，所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料製成：牡丹肽粉 35份、牡丹籽殼提取物2份、牡丹花提取物2份、蜂蠟4份和牡丹籽油63份； 所述的牡丹肽軟膠囊的製備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為8. 5的 稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制5 min，得到牡 丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量10倍的水，用160-220目的研磨機研磨4遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為7. 5， 然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0. 8 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:1. 〇:〇. 8 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 鹼性2709蛋白酶的混合物，保持溫度為50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為200 r/min，在無菌空 氣下水解48 h，水解結束後升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除渣，經噴霧乾燥後即制 得牡丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液並 濃縮至原體積的1/4,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4倍的無水乙醇，混合後靜 置6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3,噴霧乾燥，即得到牡丹籽殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量5%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣蒸 餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的10倍的水，超聲提取20min，然後將提取液濃縮 至原體積的1/5,再向濃縮液中加入體積5倍的無水乙醇，混合靜置4h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/3,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉、步驟二得到的牡丹籽殼提取物和步 驟三得到的牡丹花提取物，再取蜂蠟和牡丹籽油，備用；先向混合釜內加入牡丹籽油，然後 邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼 提取物和牡丹花提取物，並在溫度為70°C條件下攪拌25min，然後用200目研磨機研磨3 次，在壓力為20-30Mpa下均質2次，在140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌20秒，得到混 合底料，備用；將混合底料採用常規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成 牡丹肽軟膠囊的製備。
[0017] 活性測試試驗 1.抗腫瘤活性研究 1)試驗材料 胎牛血清，96孔培養板，恆溫箱，RPM1640培養液。
[0018] 2)方法 對上述實施例中得到的牡丹肽進行細胞毒活性測試，採用的方法為MTT法。
[0019] 3)試驗步驟 ⑴取對數生長期細胞，用含10%胎牛血清的RPM1640培養液，製成單細胞懸液5X 104 個/mL，將該懸液加到96孔培養板中，每孔加入1 X 104個細胞。培養24 h後，加入受試牡 丹肽濃度分別為30 μ g/mL、10 μ g/mL。
[0020] (2)將平板在37 °C，含5%C02空氣及100%溼度的恆溫箱中孵育3天，去除培養液。
[0021] (3) MTT用無血清的RPM1640培養液配成1 mg/mL溶液，每孔加100 μ L，37°C溫育 4 h，使MTT還原為甲臢。
[0022] (4)吸出上層清液，加入150 μ L DMS0使甲臢溶解，於ELISA儀570 nm處測0D值。
[0023] 4)試驗結果 表1牡丹肽細胞毒活性實驗數據（n=3)

【權利要求】
1. 一種牡丹肽軟膠囊，其特徵在於：所述的軟膠囊的填充物按照重量份數由以下原料 製成：牡丹肽粉30-40份、牡丹籽殼提取物1-3份、牡丹花提取物1-3份、蜂蠟3-8份和牡丹 籽油48-63份； 所述的牡丹肽粉為牡丹籽仁經蛋白酶水解後乾燥得到的粉末； 所述的牡丹籽殼提取物為從牡丹籽殼中提取，並乾燥的提取物； 所述的牡丹花提取物為從經過水蒸氣蒸餾的牡丹花花瓣中提取，並乾燥的提取物。
2. 如權利要求1所述的一種牡丹肽軟膠囊的製備方法，其特徵在於：包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽的製備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼後收集牡丹籽殼，並將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀鹼水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾乾水分後在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機研磨 2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然後加入培養成熟的混合蛋白酶，並使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束後升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除漁，經噴霧乾燥後即製得牡 丹肽粉，備用； 步驟二、牡丹籽殼提取物的製備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15-25倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液 並濃縮至原體積的1/4-1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4-6倍的無水乙醇， 混合後靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹籽 殼提取物，備用； 步驟三、牡丹花提取物的製備 取水分含量為20-30%的牡丹花瓣原材料，加入其重量3-5%的食鹽，揉捻後採用水蒸氣 蒸餾，向蒸餾結束後的牡丹花中加入其重量的10-15倍的水，超聲提取20-30min，然後將提 取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃縮液中加入體積4-6倍的無水乙醇，混合靜置3-6h， 過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧乾燥，即得到牡丹花提取物，備用； 步驟四、牡丹肽軟膠囊的製備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽粉30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取物 1-3份和步驟三得到的牡丹花提取物1-3份，再取蜂蠟3-8份和牡丹籽油48-63份，備用； 先向混合釜內加入牡丹籽油，然後邊攪拌邊加入牡丹肽粉，牡丹肽粉加入完成後再加入蜂 蠟，攪拌均勻後依次加入牡丹籽殼提取物和牡丹花提取物，並在溫度為65-75 °C條件下攪 拌20-30min，然後用180-220目研磨機研磨2-4次，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，在 140-160°C溫度下採用超高溫瞬間殺菌15-20秒，得到混合底料，備用；將混合底料採用常 規方法填充在由明膠、甘油和水製備的軟膠囊中，即完成牡丹肽軟膠囊的製備。
3. 如權利要求2所述的一種牡丹肽軟膠囊的製備方法，其特徵在於：步驟一所述的混 合蛋白酶是指重量比為1:0. 8-1. 2:0. 8-1. 2 :0-1. 2:0-1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草 桿菌蛋白酶、鹼性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合物。
【文檔編號】A23P1/04GK104041831SQ201410294945
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月26日 優先權日:2014年6月26日
【發明者】劉普, 易軍鵬, 鄧瑞雪, 尹衛平, 李小方, 高嘉嶼, 田軼, 段文錄, 梁菊, 曹輝 申請人:河南科技大學