一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基的製作方法

2023-05-11 09:21:16 1

專利名稱：一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種真菌殺蟲劑培養基，特別是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基。
背景技術：
蟲生真菌的重要成員扁座殼孢菌,其有性型為莫勒菌0foe77erie77a)，目前認為該菌隸屬於子囊菌門、糞菌綱、肉座菌目、麥角菌科。扁座殼孢菌及其有性型莫勒菌能引起粉蝨和介殼類昆蟲群體性流行病的發生，這使得它成為有用的生物防治劑。座殼孢菌及其有性型的代謝產物呈現較好的抗菌、殺瘧原蟲活性，並對昆蟲和腫 瘤細胞有較強的毒性，這預示該菌在生物農藥或醫藥上存在很大應用價值。若要對其進行大規模生產應用，首先要考慮明確其對培養基各營養成分的需求從而對其進行控制。

發明內容
本發明的目的在於提供一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，該培養基組成成分明確、穩定，使得發酵過程和產品質量易於控制，菌絲產量高。為實現上述目的，本發明的技術方案是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，由葡萄糖、乾酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. 0g，乾酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀0. 95g I. 05g,硫酸鎂0. 6g 0. 7g,維生素B6為0. Ollg
0.012g，用水定容至1L。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養基為液體發酵培養基。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養基可按常規方法配製，滅菌條件為溫度121°C，壓力範圍0. IMPa 0. 15MPa,時間為30min。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養基在接種前需將其冷卻至35°C以下。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養基在接種時接種量要控制在培養基重量比的10%以內。上述扁座殼孢菌菌絲生長培養基中，碳源為葡糖糖，氮源為乾酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優配比為葡萄糖31. 4g，乾酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6S0.0115g，用水定容至IL0本發明的有益效果是該培養基配方成分明確，解決了天然培養基成分複雜以及成分含量不穩定而導致發酵過程和產品質量不易控制的問題，而且菌絲體產量高，菌絲乾重可達26. I g/L以上，為等量PDB培養基產量的3. 8倍。該培養基可以進行連續化、批量化大規模發酵生產，對於該菌的大規模應用提供了必要的前提條件。


圖I是本發明扁座殼孢菌菌絲生長培養基的構成示意圖。圖2是通過響應面法優化本發明培養基所得glucose (X1)和vitamin B6 (X2)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖3是通過響應面法優化本發明培養基所得glucose (X1)和vitamin B6 (X2)兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。圖4是通過響應面法優化本發明培養基所得glucose (X1)和MgSO4 WH2O(X3)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖5是通過響應面法優化本發明培養基所得glucose (X1)和MgSO4 WH2O(X3)兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。圖6是通過響應面法優化本發明培養基所得vitamin B6(X2)和MgSO4 7H20(X3)兩因素對菌絲生長的影響的響應曲面圖。圖7是通過響應面法優化本發明培養基所得vitamin B6(X2)和MgSO4 7H20(X3) 兩因素對菌絲生長的影響的等高線圖。
具體實施例方式本發明的扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，由葡萄糖、乾酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. Og,乾酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀
0.95g I. 05g，硫酸鎂0. 6g 0. 7g，維生素B6為0. Ollg 0. 012g，用水定容至IL0上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基為液體發酵培養基。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基可按常規方法配製，滅菌條件為溫度121°C，壓力範圍 0. IMPa 0. 15MPa，時間為 30min。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基在接種前需將其冷卻至35°C以下。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基在接種時接種量要控制在培養基重量比的10%以內。上述扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基中，碳源為葡糖糖，氮源為乾酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優配比為葡萄糖31. 4g，乾酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6S 0.0115g，用水定容至IL0下面結合具體實施例對利用本發明的扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基生產該菌菌絲的過程及效果作進一步的說明。實施例I :從自然侵染扁座殼孢菌的粉蝨蟲屍上分離純化獲得該菌，並藉助形態特徵及分子生物學證據對其進行鑑定。將其接種至上述培養基和對照PDB培養基中，分別按照常規方法進行菌絲髮酵生產。結果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基的菌絲乾重達26. I g/L,為對照培養基菌絲乾重6. 86g/L的3. 8倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基按最優配比進行配製。實施例2 :從自然侵染扁座殼孢菌的粉蝨蟲屍上分離純化獲得該菌，並藉助形態特徵及分子生物學證據對其進行鑑定。將其接種至上述培養基和對照PDB培養基中，分別按照常規方法進行菌絲髮酵生產。結果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基的菌絲乾重達24.12 §/1，為對照培養基菌絲乾重6.6^/1的3.65倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基配方為葡萄糖32. Og,乾酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 7g，維生素B6 0. 012g,用水定容至1L。實施例3 :從自然侵染扁座殼孢菌的粉蝨蟲屍上分離純化獲得該菌，並藉助形態特徵及分子生物學證據對其進行鑑定。將其接種至上述培養基和對照PDB培養基中，分別按照常規方法進行菌絲髮酵生產。結果表明扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基的菌絲乾重達23.7 8/1，為對照培養基菌絲乾重6.59§/1的3.6倍。其中，扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基配方為葡萄糖31. Og,乾酪素2. 95g,磷酸氫二鉀0. 95g,硫酸鎂0. 6g,維生素B6 0. Ollg,用水定容至1L。以上是本發明的較 佳實施例，凡依本發明技術方案所作的改變，所產生的功能作用未超出本發明技術方案的範圍時，均屬於本發明的保護範圍。
權利要求
1.一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於由葡萄糖、乾酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31. Og 32. Og,乾酪素2. 95g 3. 05g,磷酸氫二鉀0. 95g I. 05g，硫酸鎂0. 6g 0. 7g，維生素B6為0. Ollg 0. 012g，用水定容至IL0
2.根據權利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於所述扁座殼孢菌菌絲生長培養基為液體發酵培養基。
3.根據權利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於所述扁座殼孢菌菌絲生長培養基的滅菌條件為溫度121°C，壓力範圍0. IMPa 0. 15MPa，時間為30mino
4.根據權利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於所述扁座殼孢菌菌絲生長培養基在接種前需將其冷卻至35°C以下。
5.根據權利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於所述扁座殼孢菌菌絲生長培養基在接種時接種量要控制在培養基重量比的10%以內。
6.根據權利要求I所述的一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，其特徵在於所述扁座殼孢菌菌絲生長培養基中，碳源為葡糖糖，氮源為乾酪素，添加微量元素為維生素B6,其最優配比為葡萄糖31. 4g，乾酪素3g，磷酸氫二鉀lg，硫酸鎂0. 64g，維生素B6為0. 0115g，用水定容至1L。
全文摘要
本發明涉及一種真菌殺蟲劑培養基，特別是一種扁座殼孢菌菌絲快速生長培養基，由葡萄糖、乾酪素、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、維生素B6和水組成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，乾酪素2.95g～3.05g，磷酸氫二鉀0.95g～1.05g，硫酸鎂0.6g～0.7g，維生素B6為0.011g～0.012g，用水定容至1L。該培養基組成成分明確、穩定，解決了天然培養基成分複雜以及成分含量不穩定而導致發酵過程和產品質量不易控制的問題，而且菌絲體產量較高，菌絲乾重可達26.1g/L以上，為等量PDB培養基產量的3.8倍。該培養基可以進行連續化、批量化大規模發酵生產，對於該菌的大規模應用提供了必要的前提條件。
文檔編號C12R1/645GK102746997SQ201210268659
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月31日 優先權日2012年7月31日
發明者關雄, 宋飛飛, 李小霞, 謝小聰, 邱雲鋒, 邱君志 申請人:福建農林大學