一種青黛炮製方法

2023-05-10 21:35:06 2

專利名稱：一種青黛炮製方法
技術領域：
本發明涉及一種青黛炮製方法，屬於藥物領域。
背景技術：
青黛為爵床科植物馬藍、蓼科植物蓼藍或十字花科植物菘藍的葉或莖葉經加工製得的乾燥粉末或團塊。其炮製過程，是馬藍莖葉中的前體物質向靛藍、靛玉紅轉化的過程， 主要包括浸泡、制粗靛、水飛精製等環節。傳統的炮製方法為在秋季收割莖葉，將其置於浸泡池內，引入河水，將其完全淹沒，浸泡發酵數日，待池液呈汙綠色時，撈去殘渣，投入石灰， 充分攪拌，靜置1至2日，棄去上清液，收集底部的沉澱物移至小池中，靜置、再棄去上清液， 得到半成品一一粗靛。粗靛再經過水飛、泡沫浮選等除雜精製過程，乾燥後即得青黛。[賈思勰.齊民要術.卷五[M].繆啟愉校釋，繆桂龍參校.北京農業出版社，1982 :53.][宋應星·天工開物[M],北京商務印書館，1954 12.]專利申請號200310110926. 8，發明名稱「青黛炮製的現代化生產方法」的專利申請公開了一種以天然植物馬藍的葉或莖葉炮製粗靛的現代化生產方法浸泡環節將切制後的馬藍莖葉，按照1 10 1 30的比例加入經預處理過的浸泡用水，浸泡發酵至浸泡液變成汙綠色為止，浸泡用水的溫度為20 50°C，浸泡時間為M 7 後過濾除莖葉碎片；制粗靛環節按生石灰用量與馬藍量的比值為10 1的比例加入生石灰，調成石灰乳， 將其引入上述已除雜的浸泡發酵液中，並用攪拌器充分攪拌，同時在攪拌過程中通過對溶液酸鹼度的測試進而增減生石灰的用量，至1小時後觀察溶液有藍靛成線狀沉澱為止；或者使用鼓風機或空氣壓縮機將空氣直接通入浸泡發酵池中，直至有藍靛成線狀沉澱生成為止。其中，所述的酸鹼度的測試，是指一方面在攪拌過程中注意觀察池內溶液的顏色變化， 若由綠色變為蛋黃色說明石灰用量已適度；另一方面，為穩重起見，還須經口嘗味道加以驗證，感到先苦後帶甜是鹼性適度，即PH值為12 13。青黛中的有效成分是靛藍(Indigo)和靛玉紅(Indirubin)。近年來，青黛及其製劑的治療範圍不斷擴展，除傳統應用外，靛玉紅治療白血病的藥用價值引起了高度關注。但是目前青黛炮製方法的研究僅以靛藍為控制產品質量的指標，如何提高青黛中靛玉紅或靛藍的含量值得研究。另外，制靛過程中調節的PH為影響靛藍、靛玉紅產生的關鍵因素，而實際中石灰乳的用量完全依據經驗，使得炮製工藝難以規範，導致青黛成品質量參差不齊，影響了臨床療效的發揮。

發明內容
本發明的技術方案是提供了一種青黛炮製方法，本發明的另一技術方案是提供了此法製備的粗靛。本發明提供了一種青黛炮製方法，它包括如下步驟a、取爵床科植物馬藍、蓼科植物蓼藍或十字花科植物菘藍的葉或莖葉，置於pH值為3. 5-7，溫度為25-60°C的水中，水與鮮葉質量比值為8_15，浸泡Mh_48h，過濾除去葉渣，得濾液；b、濾液通空氣0-30min後，加鹼調節pH值至9-10. 5，通空氣30_240min，加入石灰乳，攪拌均勻後靜置，過濾取沉澱，乾燥得粗靛，粗靛精製後即得青黛。其中，所述的石灰乳的製備方法為取生石灰，緩慢加入沸水中配製而得，其中，生石灰的用量為葉或莖葉量的5-12倍；所述的鹼為氨水、氫氧化鈉或氫氧化鉀。其中，步驟a所述的PH值為3.5，溫度為25_601，水與鮮葉的質量比值為 11. 5-15，浸泡時間為Mh ；步驟b所述的加鹼調節PH值至9，通空氣30-50min。進一步優選地，步驟a所述的溫度為25 V，水與鮮葉的質量比值為11. 5-13 ；步驟b所述的加鹼調節 PH值後通空氣30min。所述的步驟a的浸泡過程採用避光浸泡操作。該炮製方法製備的粗靛中靛藍轉移率大於1. 8mg/g，其中所述的轉移率為粗靛中靛藍的質量mg/鮮葉的質量g。其中，所述的步驟a中pH值為7，溫度為42. 5-60°C，水與鮮葉的質量比值為8_15， 浸泡時間為48h ；所述的步驟b中濾液通空氣30min後，加氨水調節pH值至10. 5，通空氣 30-240min。進一步優選地，步驟b所述的通空氣135-180min。該方法製備得到的粗靛中靛玉紅轉移率大於0. 35mg/g，其中所述的轉移率為粗靛中靛玉紅的質量mg/鮮葉的質量g。本發明分別以靛藍、靛玉紅為評價指標系統的確定了粗靛炮製工藝，量化了各個工藝參數，改變了依據經驗進行炮製的傳統，通過制靛前通氧氣和制靛過程中調節PH值提高了靛玉紅的含量，擴大了青黛臨床應用範圍；本發明將粗靛製備分為兩步，採用氨水調節 PH值以提供氧化環境，再採用石灰乳作為靛沉澱的載體，減少了石灰用量，減少了粗靛的後期精製次數，節約了工序；通過在本發明炮製方法下不同參數的選擇，可分別定向製備成靛藍或靛玉紅的含量較高的粗靛，產品品質好。
具體實施例方式實施例1本發明粗靛的製備將鮮葉置於pH約為3. 5的25°C自來水中，其中水體積鮮葉質量(ml g)為13， 避光浸泡24h後，過濾除去葉渣，加氨水調節濾液pH至9，再通空氣30min後，加入10 %新制的石灰乳(取鮮葉質量10%的CaO，加入10倍量的沸水中，不斷攪拌，形成混懸液，即可)， 攪拌均勻後靜置Mh，過濾取沉澱，乾燥即得粗靛。實施例2本發明粗靛的製備將鮮葉置於pH約為7的60°C自來水中，其中水體積鮮葉質量(ml g)為15，浸泡4 後，過濾除去葉渣，濾液通空氣30min，加氨水調節濾液pH至10. 5，再通空氣180min 後，加入10%新制的石灰乳(取鮮葉質量10%的CaO，加入10倍量的沸水中，不斷攪拌，形成混懸液，即可)，攪拌均勻後靜置Mh，過濾取沉澱，乾燥即得粗靛。實施例3粗靛炮製過程中靛藍定向生成的工藝參數選擇1、儀器與試藥島津LC-10ATvp高效液相色譜儀(浙江智達N2000色譜工作站)；BP211D型電子分析天平(Max = 210g，d = 0. Olmg，德國Sartorius) ；KQ-400DB型數控超聲波清洗器(崑山市超聲儀器有限公司)；SZ-93型自動雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)；UB-FB 型轉子流量計(蘇州化工儀表有限公司)；ACO系列電磁式空氣壓縮機(浙江森森實業有限公司)；SHB-III S循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)
馬蘭莖葉(四川江油恆源藥業提供)；靛藍(中國藥品生物製品檢定所，批號 110716-200509)；靛玉紅(中國藥品生物製品檢定所，批號:110717-200204)；甲醇(色譜純，購買於Fisher公司)；水(重蒸水，自製)；微孔濾頭(0.2 μ m，購買於Millipore公司)； 其它試劑均為分析純。2、方法與結果2. 1 Plackett-Burman i式驗方^去選用Plackett-Burman設計對影響浸泡、打靛環節的8個因素的重要性進行考察。 共8個因素做12個試驗，每個因素取高、低兩種水平。用design expert7. 1軟體設計試驗並進行數據處理。比較各因素P值，P值< 0. 05的因素作為顯著影響因素。2. 1. 1試驗因素範圍及水平的規定以葉子前處理是否除蠟、浸泡液pH、浸泡是否避光、溶劑體積、浸泡時間、溫度、加鹼種類、通空氣時間等8個因素作為考察對象。每個因素測試高(+1)、低(-1)兩水平，試驗次數為12。具體試驗因素以及水平值見表1。表1 Plackett-Burman設計因子的水平範圍
ABCD (ml g)E(h)F(0C)GH(min)閃素除蠟否浸泡液pH避光否溶劑體積鮮葉質量時間、>曰 ρ τ πη/又加鹼種類通氣時間水平d 1除蠟3.5避光81230石灰乳30不除蠟7不避光153660氨水2402. 1. 2 Plackett-Burman 試驗結果及分析8個因素12個試驗，按Plackett-Burman設計表進行試驗，每個試驗號重複做三次，粗靛含量測定結果取三次的均值，再轉化為鮮葉中的產靛量(mg/g)。Plackett-Burman 試驗設計及響應值(靛藍的產量)見表2。表2 Plackett-Burman試驗設計及響應值
試驗號浸泡除賠否、 t 避光否溶劑體積液pH浸泡時間 (min)浸泡她/又 (。C)加鹼種類？·罵閩 B 3虛靛藍產量 (mg/g)111-1 111-11.182111-10.273-11111.2141-1111.5151110.326-111-]0.1271-1110.818-1110.259-1-11-10.7510-1-111.52111-1-11.3512-1 -1 -1 -1-1-1-10.00
由表2可以看出，各個因素對產靛有比較顯著的影響。運用design expert7. 1軟體對表2進行回歸分析，得到各因素的顯著性列入表3。表3各因素顯著性分析
權利要求
1.一種青黛炮製方法，它包括如下步驟a、取爵床科植物馬藍、蓼科植物蓼藍或十字花科植物菘藍的葉或莖葉，置於pH值為 3. 5-7，溫度為25-60°C的水中，水與鮮葉質量比值為8_15，浸泡Mh_48h，過濾除去葉渣， 得濾液；b、濾液通空氣0-30min後，加鹼調節pH值至9-10.5，通空氣30_240min，加入石灰乳， 攪拌均勻後靜置，過濾取沉澱，乾燥得粗靛，粗靛精製後即得青黛。
2.根據權利要求1所述的青黛炮製方法，其特徵在於所述的石灰乳的製備方法為取生石灰，緩慢加入沸水中配製而得，其中，生石灰的用量為葉或莖葉量的5-12倍；所述的鹼為氨水、氫氧化鈉或氫氧化鉀。
3.根據權利要求1或2所述的青黛炮製方法，其特徵在於步驟a所述的pH值為3.5， 溫度為25-60°C，水與鮮葉的質量比值為11. 5-15，浸泡時間為Mh ；步驟b所述的加鹼調節 pH值至9，通空氣30-50min。
4.根據權利要求3所述的青黛炮製方法，其特徵在於步驟a所述的溫度為25°C，水與鮮葉的質量比值為11. 5-13 ；步驟b所述的加鹼調節pH 值後通空氣30min。
5.根據權利要求3或4所述的青黛炮製方法，其特徵在於所述的步驟a的浸泡過程採用避光浸泡操作。
6.根據權利要求1或2所述的青黛炮製方法，其特徵在於所述的步驟a中pH值為7， 溫度為42. 5-60°C，水與鮮葉的質量比值為8-15，浸泡時間為48h ；所述的步驟b中濾液通空氣30min後，加鹼調節pH值至10. 5，通空氣30_240min。
7.根據權利要求6所述的青黛炮製方法，其特徵在於步驟a所述的溫度為60°C，水與鮮葉的質量比值為15 ；步驟b所述的通空氣 i;35-180min。
8.權利要求3或4所述的炮製方法製備的粗靛。
9.根據權利要求8所述的粗靛，其特徵在於靛藍轉移率大於1.8mg/g。
10.權利要求6或7所述的炮製方法製備的粗靛。
11.根據權利要求10所述的粗靛，其特徵在於靛玉紅轉移率大於0.35mg/g。
全文摘要
本發明提供了一種青黛炮製方法，它包括如下步驟a、取爵床科植物馬藍、蓼科植物蓼藍或十字花科植物菘藍的葉或莖葉，置於pH值為3.5-7，溫度為25-60℃的水中，水與鮮葉質量比值為8-15，浸泡24h-48h，過濾除去葉渣，得濾液；b、濾液通空氣0-30min後，加鹼調節pH值至9-10.5，通空氣30-240min，加入石灰乳，攪拌均勻後靜置，過濾取沉澱，乾燥得粗靛，粗靛精製後即得青黛。本發明炮製方法製備的粗靛中靛藍、靛玉紅的含量較高，產品品質好。
文檔編號A61K36/315GK102247415SQ20111015224
公開日2011年11月23日 申請日期2011年5月20日 優先權日2010年5月21日
發明者傅超美, 劉澤玉, 楊明, 蘇柘僮, 許潤春 申請人:成都中醫藥大學