長柄扁桃油渣提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法

2023-05-02 23:17:21 3

專利名稱：：長柄扁桃油渣提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法
技術領域：
：本發明涉及一種從長柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法。
背景技術：
：長柄扁桃又名野櫻桃(AmygdaluspedunculatePall.)，是薔薇科扁桃屬的落葉灌木，由於沙漠淹沒和人為破壞，分布零散且日趨絕跡，1992年版《內蒙古珍稀瀕危植物圖譜》已將長柄扁桃列為二級瀕危植物。長柄扁桃用作防風固沙外，其果仁含油量為45%58%，可以使其成為治理北方荒漠地區發展木本油料基地的首選樹種。長柄扁桃主要在沙漠和荒漠化地帶種植，遠離城市三廢汙染源，幾乎不受化肥和農藥等的汙染，可發展為有機食用油。此外，長柄扁桃果仁榨油後油渣富含苦杏仁甙及蛋白質。苦杏仁甙(扁桃甙、扁桃苷Amygdalins，扁桃氰-!3-龍膽二糖甙)，屬芳香族氰甙，在植物界中分布廣泛，其中以薔薇科植物(杏、桃、李)種子的含量最高，結構式為苯羥基乙氰-13-D-葡萄糖-6-13-D-葡萄糖甙，它在苦杏仁酶及櫻葉酶等葡萄糖甙酶的作用下水解生成野櫻皮甙和杏仁氰，後者不穩定，遇熱易分解生成苯甲醛和氫氰酸(HCN)。近些年國外的研究多是集中在腫瘤藥理研究、毒性試驗研究及其他用途上。苦杏仁甙有抗突變作用，能夠減少由安乃近、滅滴靈、絲裂黴素等引起的微核多染性紅細胞的數量；苦杏仁甙還具有預防和治療抗腫瘤藥阿脲引起的糖尿病的作用。苦杏仁甙現已作為治療牙斑藥的一種成分，生產為一種製劑。苦杏仁甙水解生成的苯甲醛經安息香縮合酶作用生成安息香，安息香具有鎮痛作用，因此用苦杏仁治療晚期肝癌可解除病痛苦，有的甚至不用服止痛藥。蛋白粉是一種富含蛋白質、碳水化合物、多種維生素及礦物質、具有很高營養價值的產品製劑，主要是從油料作物榨油後的油渣製取的。常用的提取方法有有機溶劑沉澱法、化學混凝法、冷凍法、鹼溶酸沉法等。有機溶劑沉澱法及化學混凝法在加入化學試劑回收蛋白的同時，引入新的汙染，且成本增大。冷凍法最大的缺點就是提取率低。鹼溶酸沉法因成本低，且得到的蛋白粉呈粉末狀，乾燥細膩，呈淡黃色，故應用更加廣泛。研究較多的是從花生製取花生蛋白粉，且已作為食品品質改良劑應用於許多食品的加工中。在治理荒漠化的同時，將荒漠化區域發展為食用油基地，並建立植物資源綜合利用的產業鏈，將種植、產業化開發和工業化生產有機結合，就會使荒漠化防治過程中產生可觀的經濟效益，形成沙產業，實現荒漠化治理的可持續發展，並拓展我國的可利用土地資源，將具有重要的社會、生態和經濟效益。
發明內容本發明的目的是提供一種從長柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，該方法實現了對油渣的綜合利用，增加了油渣的經濟開發價值。本發明的實現過程如下—種長柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，以長柄扁桃油渣為原料，溶劑回流法提取苦杏仁甙，粗品經重結晶即得純品；提取苦杏仁甙後殘渣再用鹼溶酸沉法提3取蛋白，乾燥後得到蛋白粉產品。提取苦杏仁甙所述溶劑為甲醇或無水乙醇，結晶溶劑為9297%乙醇或無水乙醇；調節溶液pH的鹼溶液為0.1lmo1/1NaOH、KOH或其碳酸鹽(Na2C03、K2C03)溶液，酸溶液為0.1lmol/1HC1、HN03或H2S04溶液。發明人嘗試使用不同的結晶溶劑，95%乙醇一次結晶得到的苦杏仁甙純度為95.93%，且呈白色晶體。無水乙醇一次結晶得到的苦杏仁甙純度只有67.23%，且呈微黃色粉末。使用不同的酸鹼溶液調節溶液的PH，對蛋白的提取率影響不大。具體提取方法包括如下步驟(1)將長柄扁桃油渣與乙醇或甲醇按照料液比(1:6)(1:30)g/ml提取苦杏仁甙，提取溫度5080°C;(2)提取結束後趁熱過濾，得到濾液及濾餅；(3)濾液減壓濃縮回收溶劑，粗品再經9297%乙醇重結晶三次，乾燥至恆重，即得苦杏仁甙純品；(4)濾餅乾燥後，按料液比(1:10)(1:30)g/ml加入蒸餾水，用0.1lmo1/LNaOH、KOH或其碳酸鹽溶液將pH值調至8.012.0，然後在206(TC提取，靜置後抽濾，收集濾液與濾餅；(5)再用0.1lmol/LHCl、HN03或H2S04溶液將濾液pH值調至3.06.O，靜置、離心，按料液比(1:5)(1:100)g/ml加入蒸餾水，再用0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸鹽溶液回調pH值至中性，攪拌使沉澱復溶，真空冷凍乾燥後即得蛋白粉產品。經西北大學分析測試中心及譜尼測試中心對苦杏仁甙、蛋白粉產品進行檢測，苦杏仁甙產品純度達到98%以上，滿足市場化需要。蛋白粉中蛋白含量為95.79%，屬高蛋白粉(蛋白含量80%以上)。含有植物中存在的18種胺基酸，總胺基酸含量為82.44g/100g。其中8種人體不能合成的必需胺基酸(賴氨酸、色氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸和纈氨酸)總量為21.68g/100g，佔胺基酸總量的26.30%(見表1)。除此之外，長柄扁桃蛋白粉還含有Ca、Mg、P、Fe、K等多種人體必需的礦質元素，不含Cd、As、Pb(見表2)。表1蛋白粉中胺基酸組成及含量(g/100g)tableseeoriginaldocumentpage4tableseeoriginaldocumentpage5發明人發現，苦杏仁甙及蛋白粉的提取次序非常重要。如果先採用鹼溶酸沉法提取蛋白，則天然存在的苦杏仁甙會發生構型變化，影響其功效。而在最佳工藝條件下，先採用乙醇回流提取苦杏仁甙，再採用鹼溶酸沉法提取蛋白，所得苦杏仁甙保持天然構象且純度較高，總收率為43.07%。蛋白粉中蛋白含量較高，總收率為41.52%，且營養成分_胺基酸及礦質元素含量豐富。本發明的優點使用榨油後油渣為原料，先回流提取苦杏仁甙，再採用鹼溶酸沉法提取蛋白，可得到苦杏仁甙、蛋白粉產品；長柄扁桃油渣的利用將治理沙漠和產品綜合開發有機結合，具有廣闊的發展前景。圖1為提取苦杏仁甙及製備蛋白粉工藝流程圖。具體實施例方式如圖1所示，在裝有回流冷凝管、機械攪拌器的250ml三頸瓶中，加入15g長柄扁桃油渣，無水乙醇150ml，攪拌加熱至7(TC，持續約60min。提取結束後趁熱過濾，得到濾液及濾餅。濾液減壓濃縮至幹得到粗品。按料液比l:20加入95%乙醇，加熱溶解，室溫靜置2處析晶。過濾，濾餅經105t:乾燥，苦杏仁甙產品純度為95.93%，再用95%乙醇結晶2次，苦杏仁甙產品純度可達到98%以上，總收率為43.07%。將提苦杏仁甙後濾餅自然風乾，精確稱取10.00g粉末(蛋白含量49.28%)於500ml燒杯中，按固液比1:15加入蒸餾水，用0.5mo1/1NaOH溶液將pH值調至9.0，然後在4(TC水浴中攪拌提取30min，靜置後抽濾，收集濾液與濾餅。考馬斯亮藍法測定提取液中蛋白含量為11.32mg/ml，蛋白質提取率為57.43X。再用0.5mo1/1HCl溶液將提取液的pH值調至4.5左右。靜置30min，離心機5000r/m離心10min，按料液比1:10加入雙蒸水，再用O.5mo1/1NaOH溶液回調pH值至7.0，攪拌使沉澱復溶，真空冷凍乾燥後即得蛋白粉產品。蛋白粉總收率為41.52%，蛋白含量為95.79%。權利要求長柄扁桃油渣提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步驟(1)以長柄扁桃油渣為原料，溶劑回流法提取苦杏仁甙，粗品經重結晶得純品；(2)提取苦杏仁甙後殘渣用鹼溶酸沉法提取蛋白，乾燥後得蛋白粉。2.根據權利要求l所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特徵在於步驟(1)中長柄扁桃油渣與乙醇/甲醇料液比(1:6)(1:30)g/ml，508(TC提取苦杏仁甙。3.根據權利要求1所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特徵在於重結晶使用9297%乙醇或無水乙醇。4.根據權利要求3所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特徵在於重結晶溶劑為95%乙醇。5.根據權利要求1所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特徵在於步驟(2)中所述鹼為0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸鹽溶液。6.根據權利要求l所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，其特徵在於步驟(2)中所述酸為0.1lmol/LHCl、腦3或H2S04溶液。7.根據權利要求1至6任意之一所述提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步驟(1)將長柄扁桃油渣與乙醇或甲醇按照料液比(1:6)(1:30)g/ml提取苦杏仁甙，提取溫度5080°C;(2)提取結束後趁熱過濾，得到濾液及濾餅；(3)濾液減壓濃縮回收溶劑，粗品再經9297%乙醇重結晶，乾燥至恆重，即得苦杏仁甙純品；(4)濾餅乾燥後，按料液比(1:10)(1:30)g/ml加入蒸餾水，用0.1lmol/LNa0H、K0H或其碳酸鹽溶液將pH值調至8.012.O，然後在206(TC提取，靜置後抽濾，收集濾液與濾餅；(5)再用0.1lmol/LHCl、HN03或H2S04溶液將濾液pH值調至3.06.0，靜置、離心，按料液比(1:5)(1:100)g/ml加入蒸餾水，再用0.1lmol/LNaOH、KOH或其碳酸鹽溶液回調pH值至中性，攪拌使沉澱復溶，真空冷凍乾燥後即得蛋白粉產品。全文摘要本發明公開一種從長柄扁桃油渣中提取苦杏仁甙及蛋白粉的方法，包括如下步驟(1)以長柄扁桃油渣為原料，溶劑回流法提取苦杏仁甙，粗品經重結晶得純品；(2)提取苦杏仁甙後殘渣用鹼溶酸沉法提取蛋白，乾燥後得蛋白粉。本發明使用榨油後油渣為原料，先回流提取苦杏仁甙，再採用鹼溶酸沉法提取蛋白，可得到苦杏仁甙、蛋白粉產品；長柄扁桃油渣的利用將治理沙漠和產品綜合開發有機結合，具有廣闊的發展前景文檔編號C07H1/08GK101768194SQ20091025465公開日2010年7月7日申請日期2009年12月31日優先權日2009年12月31日發明者張應龍,李冰,李聰,申燁華,範雲璽申請人:西北大學