一種女貞子多糖的製備方法

2023-05-02 18:43:06 3

專利名稱：一種女貞子多糖的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種女貞子多糖的製備方法，尤其是一種利用壓榨、Sevage法和超濾 膜技術提取純化女貞子多糖的方法。
背景技術：
女貞子多糖是女貞子具有多種功效的物質基礎之，現代藥理研究表明女貞子多糖 有抗氧化、抗衰老、增強免疫等功效，經鑑定主要由鼠李糖，阿拉伯糖，葡萄糖及巖藻糖四種 糖組成，分子量在2-100萬之間。鼠李糖為甘露糖6位的一個羥基被氫取代的衍生物，即6-脫氧-L-甘露糖。又稱 甲基戊糖。和墨角藻糖並列的典型6-脫氧己糖的一種。是甘露糖的第6位脫氧，最後變 成-CH3的化合物，天然分布的是L型，也有稱為6-脫氧-L-甘露糖(6-de-oxy-L-marmose) 的。分子式C6H1205。純品鼠李糖為無色結晶性粉末，能溶於水和甲醇，微溶於乙醇，其結晶 呈兩種形式，α型和β型。α型含有一分子結晶水，加熱後失去結晶水，轉變為β型(分 子量為164. 16) ； β型極易吸溼，在空氣中吸潮轉變為α型。常見的為α-L-鼠李糖，其分 子量為182. 11在通常的條件下得a-L-鼠李糖一水合物結晶，片狀晶體，熔點82_92°C，比 旋光度-7. 7° — +8. 9°，溶於水和乙醇；β -L-鼠李糖(無水)為針狀晶體有吸溼性，熔點 122-126°C，+38.4° —+8.9°，溶於水和乙醇。有甜味，在水溶液中以吡喃形式存在。有還 原性，用溴水氧化生成鼠李酸，經硝酸氧化生成L-阿拉伯三羥戈二酸。用鈉汞齊還原則得 鼠李糖醇。L-阿拉伯糖，又被稱為L(+)_樹膠醛糖、L(+)_阿戊糖、果膠糖等，英文名稱為 L-Arabinose，分子式C6H1205。L-阿拉伯糖為白色結晶性粉末，無氣味，有甜味(甜度為蔗糖 的 50%左右)，熔點 159-160°C，相對密度 1.625，比旋光度+190. 5° — +104. 5° (C = 3)， 溶於水，但溶解度低於蔗糖；對熱和酸的穩定性高。葡萄糖(glucose)生化簡寫G，是己醛糖，化學式=C6H12O6，分子量180。白色晶體， 易溶於水，味甜，熔點146 °C。巖藻糖(fucose)是六碳糖的一種，又稱6_脫氧_L_半乳糖，並可以看做是一種甲 基戌糖。自然界存在的巖藻糖絕大多數為L-巖藻糖，D構型的巖藻糖僅作為稀有糖，發現於 一些糖甘類化合物中。L-巖藻糖較大量地存在於海藻及樹膠中，也發現於某些細菌的多糖 中。巖藻糖作為糖蛋白中糖鏈的組成部分，廣泛存在於各類細胞表面的質膜上。巖藻糖比一 般六碳糖在第六碳原子上少一個羥基，所以巖藻糖比其他單糖親水性弱，而疏水性強一些。 在某些血型物質分子中的巖藻糖是一定的血型的標記。0-1^-巖藻糖結晶，熔點1451。分 子式=C6H12O5，分子量164。有關女貞子多糖的提取方法報導很少，方法比較局限。現有方法是原料脫脂，醇 提，水提、濃縮、萃取、脫色、洗滌、乾燥，得到產品，如張興輝等《不同產地女貞子中多糖的含 量測定》，李曼玲等《女貞子不同部位多糖的提取及含量測定》。脫脂使用石油醚，用量大、毒 性大；工藝所用有機溶劑種類多，容易導致有效成分流失。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種操作簡單，生產安全，純度較高的女貞子 多糖製備方法。為解決上述技術問題，本發明採用下列技術方案1)壓榨將女貞子提取過三萜酸的殘渣在常溫下壓榨，藥渣加入溫水浸泡3_5h， 常溫壓榨2-3次，合併壓榨液；2)洗滌將壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得殘留固體；3)脫蛋白殘留固體用去離子水復溶，用Sevage法去除少量的殘留蛋白質，得脫 蛋白溶液；4)超濾將脫蛋白溶液通過超濾膜濃縮，截留相烘乾即得女貞子多糖。上述的製備方法，其特徵在於1)步驟壓榨壓力為80-100Mpa，水溫30-50°C，每次 用量為原料的3-5倍量(V/W)。上述的製備方法，其特徵在於2)步驟無水乙醇3次用量分別為浸膏質量的4-6 倍、3-5 倍、3-4 倍(V/W)。上述的製備方法，其特徵在於3)步驟條件去離子水用量為殘留固體的10倍量， Sevage試劑為氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液，用量為水溶液的1/5。上述的製備方法，其特徵在於4)步驟超濾膜系統為聚礬中空纖維超濾膜系統，截 留分子量為20000。綜上所述，本發明存在以下優點本工藝採用浸泡壓榨提取女貞子多糖，溶劑簡 單；超濾除具有明顯的濾除膠體雜質的性能外，還具有良好的脫色效果；女貞子多糖在水 中的溶解度隨溫度變化敏感，結晶效果好；有機溶劑用量少，毒性低，生產較安全。採用上述技術方案製備女貞子多糖，操作簡單，成本較低，純度較高，利於大生產 操作。下面將結合具體實施方式
對本發明做進一步闡述，但本發明要求保護的範圍並不 局限於下列實施方式。
具體實施例方式實施例1取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次3L30°C溫水浸泡，80Mpa重複壓榨2 次，合併壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏282g，先後用1.2L、850ml、850ml無水乙醇洗滌浸膏。 殘留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除 去蛋白質。最後將剩餘溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統濃縮，烘乾 即得女貞子多糖3. 8g，經HPLC檢測，純度為98. 5%。實施例2取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次4L40°C溫水浸泡，90Mpa重複壓榨2 次，合併壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏294g，先後用1.5L、1.5L、900ml無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質。最後將剩餘溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統濃縮，烘乾即得女貞子多糖3. 9g，經HPLC檢測，純度為98. 6%。 實 施例3取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次5L40°C溫水浸泡，IOOMpa重複壓榨3 次，合併壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏302g，先後用1.5L、1.2L、1.2L無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質。最後將剩餘溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統濃縮，烘乾即 得女貞子多糖3. 8g，經HPLC檢測，純度為99. 2%。實施例4取女貞子提取過三萜酸的殘渣1kg，加入每次3L50°C溫水浸泡，IOOMpa重複壓榨3 次，合併壓榨液。壓榨液濃縮為浸膏282g，先後用1.6L、1.4L、850ml無水乙醇洗滌浸膏。殘 留固體用3L去離子水分散，加600ml氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液用Sevage法除去 蛋白質。最後將剩餘溶液通過截留分子量20000的聚礬中空纖維超濾膜系統濃縮，烘乾即 得女貞子多糖4. Og,經HPLC檢測，純度為99. 5%。
權利要求
一種女貞子多糖的製備方法，其特徵在於包含以下步驟1)壓榨將女貞子提取過三萜酸的乾燥殘渣加入溫水浸泡1-2h，常溫壓榨2-3次，合併壓榨液；2)洗滌將壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得殘留固體；3)脫蛋白殘留固體用去離子水復溶，用Sevage法去除少量的殘留蛋白質，得脫蛋白溶液；4)超濾將脫蛋白溶液通過超濾膜濃縮，截留相烘乾即得女貞子多糖。
2.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於1)步驟壓榨壓力為80-100Mpa，水溫 30-50°C，每次用量為原料的3-5倍量(V/W)。
3.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於2)步驟無水乙醇3次用量分別為浸膏質 量的 4-6 倍、3-5 倍、3-4 倍(V/W)。
4.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於3)步驟條件去離子水用量為殘留固體 的10倍量，Sevage試劑為氯仿正丁醇=5 1 (V/V)混合液，用量為水溶液的1/5。
5.如權利要求1所述的製備方法，其特徵在於4)步驟超濾膜系統為聚礬中空纖維超濾 膜系統，截留分子量為20000。
全文摘要
本發明涉及一種女貞子多糖的製備方法，工藝以女貞子提取過三萜酸的乾燥殘渣為原料，用每次3-5倍量(V/W)30-50℃溫水浸泡1-2小時，重複壓榨2-3次，合併的壓榨液低壓濃縮為浸膏，用無水乙醇洗滌3次，得到得固體用去離子水復溶，用Sevage法去除蛋白質，脫蛋白溶液用超濾膜濃縮，即得產品。該工藝操作簡單，成本較低，純度較高，利於大生產操作。
文檔編號C08B37/00GK101805413SQ201010137438
公開日2010年8月18日 申請日期2010年4月1日 優先權日2010年4月1日
發明者劉東鋒, 張翼, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司