一種常春藤皂苷類衍生物、其鹽的製備方法及其抗腫瘤的用途的製作方法

2023-05-03 09:45:51

專利名稱：一種常春藤皂苷類衍生物、其鹽的製備方法及其抗腫瘤的用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥技術領域，涉及一種常春藤皂苷類成分3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 —2)[ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物、其鹽的製備方法及其抗腫瘤的用途。本發明提供的含該類成分衍生物及其鹽的藥物比原型藥物有相當或更強的抗腫瘤活性，同時還可明顯的增強其它抗腫瘤藥物的活性和降低這些藥物的毒副作用。
背景技術：
3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷具有較強的抗腫瘤活性，能抑制人腫瘤細胞(人膠質瘤、人肝癌、人紅白血病、人中分化胃腺癌、人乳腺癌、人宮頸癌、人低分化胃腺、人早幼粒細胞性白血病、人結腸腺癌、人黑色素瘤、人前列腺癌)生長與增殖，誘導腫瘤細胞分化、凋亡，抑制腫瘤新生血管生成、抑制腫瘤的侵潤和轉移、增強機體免疫力和降低化療藥物毒副作用等抗腫瘤活性。對這些細胞生長半效抑制濃度基本上均小於lOug/ml，與順鉬效果相當，有些細胞株如膠質瘤 U251、SHG-44、小鼠黑色素瘤B16等抑制效果均優於順鉬，其對肝癌H22、S180、SMMC-7721、 人膠質瘤SHG-44的生長抑制活性與環磷醯胺相當。對於3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷類衍生物、其鹽及其用途目前尚未見報導。

發明內容
本發明的目的是提供了 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷類成分的衍生物、其鹽及其抗腫瘤用途。本發明提供了一種3-0- α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷類成分的衍生物及其鹽，具有如下結構特徵(見附圖1)
其中R可為烷基、氨基、烯烴基、滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團； 所述的鹽為鉀鹽、鈉鹽、銨鹽、鎂鹽或鈣鹽；
本發明提供的3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L- 口比喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽中， 所述烷基是具有1-10個碳原子的烷基； 所述的烯烴基是具有1-10個碳原子的烯烴基； 所述的氨基為具有1-10個碳原子的伯胺、仲胺、叔胺基； 所述的滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團為氯和臨床上常用的抗腫瘤藥物。本發明提供的3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽中，所述的烷基是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基； 所述的烯基為乙烯、丙烯、丁烯基、戊烯基； 所述的氨基是甲胺、乙胺、二乙胺、丙胺；
所述的滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團為環磷醯胺、巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶。本發明提供了 3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽在製備抗腫瘤藥物中的應用。本發明提供的3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-a_L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽可以和藥學上可接受的載體混合製成藥物組合物用於製備抗腫瘤藥物。本發明提供的含有3-0- α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]_α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽的藥物可用於治療腫瘤。本發明提供的含有3-0- α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]_α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽比原型藥物具有相當或更強的抗腫瘤活性，同時還可明顯的增強其它抗腫瘤藥物的活性和降低這些藥物毒性。


圖1是本發明化合物的通用結構式的示意圖。具有實施方式
下面通過實施例對本發明給予進一步的說明，當然，本發明不僅限於下述的實施例。實施例1 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 —4)]-a-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲酯(化合物1)
3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol)溶於甲醇(10 mL)中，冰水浴，加入⑶I (N，N』 -羰基二咪唑0. 32 mg，2 mmol )，室溫攪拌2 h，減壓濃縮，加入50 mL水，析出大量固體，抽濾，水洗，烘乾得白色固體(65%)。實施例2 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙酯(化合物2)
3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol)溶於乙醇(10 mL)中，冰水浴，加入⑶I (N，N』 -羰基二咪唑0. 32 mg，2 mmol)，室溫攪拌2 h，減壓濃縮，加入50 mL水，析出大量固體，抽濾，水洗，烘乾得白色固體(60%)。實施例3 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲醯胺(化合物3)
將皂苷3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖_(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol)溶於THF (10 mL)中，冰水浴，加入CDI (0.32 mg，2 mmol),室溫攪拌2 h，將反應液滴加到40%甲胺水溶液中，減壓濃縮，加入50 mL水，析出大量固體，抽濾，水洗，烘乾得白色固體(75%)。實施例4 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 —4)]-a_L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙醯胺(化合物4)將3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0. 9g，l mmol)溶於THF (10 mL)中，冰水浴，加入CDI (0.32 mg，2 mmol), 室溫攪拌2 h，將反應液滴加到40%乙胺水溶液中，減壓濃縮，加入50 mL水，析出大量固體， 抽濾，水洗，烘乾得白色固體(70%)。實施例5 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷丙醯胺(化合物5)
將3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0. 9g，l mmol)溶於THF (10 mL)中，冰水浴，加入CDI (0.32 mg，2 mmol), 室溫攪拌2 h，將反應液滴加到40%丙胺水溶液中，減壓濃縮，加入50 mL水，析出大量固體， 抽濾，水洗，烘乾得白色固體(65%)。實施例6 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鈉鹽(化合物6)
將3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol)溶於甲醇(10 mL)中，加入IM甲醇鈉溶液(2 mL)，室溫攪拌 1 h，抽濾，少量甲醇洗，烘乾得白色固體(85%)。實施例7 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鉀鹽(化合物7)
將3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol)溶於甲醇(10 mL)中，加入IM甲醇鉀溶液(2 mL)，室溫攪拌 1 h，抽濾，少量甲醇洗，烘乾得白色固體(80%)。實施例8 製備3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷環磷醯胺衍生物(化合物8)
3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷(0.9g，l mmol )，溶於NaOH溶液(0.5 M，2 mL)中，製得皂苷鈉鹽水溶液，將其緩慢滴加到環磷醯胺的DMF溶液(0.2 M，5 mL)中，室溫攪拌0.5 h。將反應液倒入冰水中，抽濾，水洗，烘乾得白色固體(50%)。抗腫瘤藥理作用
從整體、細胞水平，體內體外實驗相結合，全面觀察了 3-0-A-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)[ B-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-A-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷各衍生物的抗腫瘤作用，體外實驗結果表明，3-0-A -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ B -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - A -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷各衍生物對體外人肝癌、膠質瘤、胃癌、乳腺癌、白血病等14種腫瘤細胞均有較好的抑制作用，其對各種受試細胞的半效抑制濃度(IC50)都小於lOug/ml ； 體內試驗表明，各衍生物對人肝癌、膠質瘤、胃癌、白血病等體內裸鼠異體移植瘤呈現較強的抗癌活性。1.各衍生物對體外人17腫瘤細胞的半效抑制濃度
採用MTT法，選擇15種人腫瘤細胞系，考察不同濃度的各衍生物對人腫瘤細胞增殖的影響。收集對數期各腫瘤細胞，調整細胞懸液濃度至1 X IO6個/mL，於96孔板每孔加入100 yL，置於5% C02，37°C孵箱中孵育M h後，至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板)，加入濃度梯度的藥物皂苷(1. 5625,3. 125,6. 25、12. 5、25 μ g/mL)，每個濃度設5個復孔。待藥物與細胞作用48 h後，計算藥物對細胞生長的抑制率(％)。實驗結果提示，各衍生物對各種受試細胞的生長抑制效應均呈現出良好的濃度依賴關係，各衍生物這些細胞生長半效抑制濃度均小於lOug/ml，對肝癌肝癌、膠質瘤、胃癌、白血病等細胞株的生長抑制作用尤其顯著。表1各衍生物對各種受試細胞生長的半效抑制濃度(IC50, μ g/mL)
2.利用小鼠移植性腫瘤模型研究了各衍生物對肝癌H22的影響取接種H22肉瘤細胞7d的小鼠，脫頸椎處死，無菌條件下抽取腹水，用無菌生理鹽水調整瘤細胞濃度為2 X IO7 /ml,每隻小鼠右側腋窩消毒後皮下接種0.2 ml瘤細胞懸液。 小鼠接種瘤細胞對h後開始給藥，正常組及荷瘤模型組每天灌服PBS 0.5ml/只；陽性對照組腹腔注射環磷醯胺40mg/kg，隔日1次；各衍生物劑量為50mg/kg，連續給藥14天。 最後一次給藥後M h，稱量各組KM鼠的體重、胸腺重量、胸腺重量，剝離腫瘤組織稱重， 並無菌取脾臟稱重。實驗結果提示，各衍生物均可明顯降低H22荷瘤鼠瘤重，抑瘤率在80%左右，與環磷醯胺效果相當，見表2。表2各衍生物對H22荷瘤鼠瘤重及抑瘤率的影響(n=10，； 士 s)
權利要求
1.一種3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物，具有如下結構(見附圖1)其中R可為烷基、氨基、烯烴基、滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團。
2.按照權利要求1所述的3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物，其特徵在於所述烷基是具有1-10個碳原子的烷基；所述的烯烴基是具有1-10個碳原子的烯烴基；所述的氨基為具有1-10個碳原子的伯胺、仲胺、叔胺基；所述的滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團為氯和臨床上常用的抗腫瘤藥物。
3.按照權利要求2所述的3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物，其特徵在於所述的烷基是甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基；所述的烯基為乙烯、丙烯、丁烯基、戊烯基；所述的氨基是甲胺、乙胺、二乙胺、丙胺；所述的滷素或藥學上可接受的抗腫瘤活性基團為氯、環磷醯胺、巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶。
4.一種3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β _D_吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物的鹽，其特徵在於其為3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2)[ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物的鈉鹽、鉀鹽、銨鹽、 鎂鹽或鈣鹽。
5.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽的藥物組合物，其特徵在於該組合物是以3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽為主要成分，並含有藥學上可接受的載體。
6.3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽在製備抗腫瘤藥物中的應用。
7.3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽中的3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲酯或3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)[ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙酯或3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲醯胺或 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙醯胺或3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷丙醯胺或3-0-a-L-吡喃鼠李糖-(1 —2)[ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鈉鹽或3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)[ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鉀鹽或3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 —2)[ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷環磷醯胺衍生物在製備抗腫瘤藥物中的應用。
8.3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物及其鹽中的3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲酯或3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)[ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙酯或3-0-α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷甲醯胺或 3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷乙醯胺或3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷丙醯胺或3-0-α-L-吡喃鼠李糖-(1 — 2) [ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鈉鹽或3-0-α -L-吡喃鼠李糖_(1 — 2)[ β -D-吡喃葡萄糖-(1 — 4) ] - α -L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷鉀鹽或3-0- α -L-吡喃鼠李糖-(1 —2)[ β-D-吡喃葡萄糖-(1 — 4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷環磷醯胺衍生物在抗人膠質瘤細胞SHG-44、人肝細胞性肝癌BEL-7402、人肝細胞性肝癌SMMC-7721、人膠質瘤細胞U251、人紅白血病細胞Κ-562、人中分化胃腺癌SGC-7901、人乳腺癌SK-BR-3、人宮頸癌Hela、人低分化胃腺BGC-823、人早幼粒細胞性白血病HL-60、人結腸腺癌HCT-116、 人結腸腺癌HT-29、人乳腺癌MCF-7、小鼠黑色素瘤B-16腫瘤中的應用。
全文摘要
本發明屬於醫藥技術領域，提供一種3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物、其鹽的製備方法及其抗腫瘤的用途。常春藤皂苷3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物、其鹽的結構如下所示。常春藤皂苷3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷衍生物、其鹽可以和藥學上可接受的載體結合製成藥物組合物，並用於製備抗腫瘤藥物。本發明提供的含該類成分衍生物及其鹽的藥物比原型藥物有相當或更強的抗腫瘤活性，同時還可明顯的增強其它抗腫瘤藥物的活性和降低這些藥物的毒副作用。
文檔編號A61K31/704GK102199184SQ20111008601
公開日2011年9月28日 申請日期2011年4月7日 優先權日2011年4月7日
發明者馮育林, 劉豔麗, 李俊, 李笑然, 楊世林, 簡暉, 羅曉健, 羅穎穎, 許瓊明, 陳蘭英 申請人:江西本草天工科技有限責任公司