一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備及應用方法
2023-05-03 01:29:51
專利名稱：：一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備及應用方法
技術領域：
：本發明涉及生物製品
技術領域：
，更具體的是涉及微生物技術在動物養殖業中的應用。
背景技術：
：現代畜牧業發展通過遺傳育種、疾病控制、營養飼養三方面技術進步使養豬業的生長效率大大提高，從傳統的一年生長期，到現在的150天達100公斤以上，飼料係數從5:l發展到今天的2.s:i左右。在多數國家消除了豬肉稀缺供應的狀態，解決了一個供給數量的問題。但產量高了、生長周期短了，味道差了，用藥多了、藥物殘留多了，吃豬肉不安全了，質量下降了。這個問題在中國尤為突出。為解決藥物殘留問題，各國政府、機構出臺了大量的法規，限制和禁止抗生素在養豬、飼料中的濫用。中國嚴禁人畜抗生素共用；規範了飼料藥物添加劑的使用目錄；規定處方獸藥不得在商品飼料中添加，只能現場用藥；所有獸藥生產企業必須通過GMP驗收；從2006年1月1日開始，歐盟全面禁止在飼料中添加抗生素。為解決豬肉味道衰減問題，時尚起吃土豬肉、不餵飼料的豬等。在技術研究領域就改善現代豬肉風味有以下措施1、延長飼養期目前通常的養殖技術的一個目的就是提早出欄，提高生長速度，研究證明，隨增長速度的提高、養殖期的縮短而味道衰退；但延長飼養期措施卻減低了養殖場的生產效率、經營效益。2、採用放養養殖方式該方式雖然一定程度改善了味道，但其生產效率低下，與環保、現代養殖業發展方向背道而馳。3、通過育種措施，增加土豬的遺傳因素該措施還沒有肯定的改善風味的效果，沒有得到育種界的研究確認。4、補充鮮綠飼料、減少配合乾粉飼料使用該方法改善風味效果肯定，但對於大規模工廠化養殖場而言，沒有可行性，不利於機械化自動化操作，青綠飼料也不利保存、運輸，養殖飼料成本、豬場勞務成本也大幅提高。5、添加專門改善風味的中草藥飼料添加劑等。近年來在這方面的研究工作很多，很多有效果的研究結果。但中草藥的添加量大，價格高、有效成分不明確，是這個發展方向的嚴重障礙。使用微生物技術養豬，是一項有幾十年歷史的技術措施，早期的發酵飼料和目前的益生菌產品研究和應用都是這方面的具體發展。啤酒酵母、枯草芽孢桿菌、乳酸菌在養豬上都有使用。但什麼樣的乳酸菌在豬肉味道改善方面？有什麼效果？如何才能產業化生產？在研究和發明的報導中還很少。
發明內容本發明的目的就是為了解決現有技術之不足而提供的一種能保留現代畜牧業的高效率、高產量的同時，通過現代微生態生物技術能解決豬肉風味缺失、藥物殘留的問題的飼用乳酸菌製劑的製備方法。本發明的另一目的是提供該飼用乳酸菌製劑在養殖場的應用方法。本發明是採用如下技術解決方案來實現上述目的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於，它包括如下方法步驟a、活化菌種，取一種或多種乳酸桿菌作為母菌，採用活化用培養基，在培養溫度為284(TC環境下，斜面活化培養2448小時；b、放大培養，將活化的菌种放入裝有液體培養基的三角瓶中液體發酵，放大培養時間為2448小時，培養溫度2840°C;c、生產培養發酵，將放大培養液各100ml，接種到25升培養液中，培養溫度2840°C，48小時靜態培養，直至ra值降到3.5以下；d、製備活菌製劑，包括製成液體和乾粉兩種形態，在方法步驟c過程的生產液體發酵後，單一菌時取培養液上清液部分即為菌水產品；多種菌時，取培養液上清液部分等量混合即為菌水產品；e、將上述菌水產品，以1040升，加到100公斤有機固體載體中，攪拌均勻，然後在45t:以下乾燥至水分含量10%以下，粉碎，包裝即成所需要的菌粉產品。作為上述方案的進一步說明，所述乳酸桿菌包括一株植物乳桿菌，LactobacillusplantarumCGMCC1.0557，一株發酵乳桿菌LactobacillusfermentumdCGMCC1.1880，植物乳桿菌活化溫度30±2°C，培養48小時；發酵乳桿菌活化溫度38±2°C，培養48小時。所述活化用培養基採用0006液體培養基，該培養基按以下製得在1L蒸餾水中加入酪蛋白腖9llg，牛肉膏9llg，酵母提取物46g，葡萄糖46g，乙酸納46g，檸檬酸二胺23g，吐溫800.51.5g，K2HP0412g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031921g，瓊脂1013g;PH值至6.56.9。在所述方法步驟b的活化菌種在三角瓶放大培養過程中，採用的液體培養基按以下製得在25L的蒸餾水中加入酪蛋白腖9llg，牛肉膏9llg，酵母提取物46g，葡萄糖46g，乙酸納46g，檸檬酸二胺23g，吐溫800.51.5g，K2HP0412g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031921g，混合，調PH值至6.56.9。在所述方法步驟c的生產培養發酵過程，培養液按以下製得在25L的純淨水中加入脫脂大豆粉7882g，蔗糖1922g，檸檬酸二胺13g，K2HP0413g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031822g，調PH值至6.56.9。在所述方法步驟e的製備活菌製劑過程中，有機固體載體採用飼料原材料、或是沸石、麥飯石、碳酸鈣粉末，該固體載體在接種前經滅菌處理，水分含量10%以下。在所述方法步驟d的製備活菌製劑過程中，得到菌水活菌數CFU為5X107ml，ffl為2.5-4.5之間；菌粉為100%過60目的粉末，活菌數CFU〉107g，粉末粒度為100%過60目。本發明的飼用乳酸菌製劑的應用方法，其特徵在於，它是在豬出欄前使用時間不低於45天內，在豬的飼料中以萬分之五到百分之二的比例添加菌粉，在豬的飲用水中以萬分之五到百分之二的比例添加菌水，供豬採食和飲水。採用本專利技術解決方案所能達到的有益效果是1、本發明採用乳桿菌中的植物乳桿菌、發酵乳桿菌，或兩者配合同時使用，通過飼料和飲水，用到動物體內；它能排斥、抑制腸道有害菌的生長、尤其是腸道後端的腐敗桿菌的生長，從而減少腸道中由於微生物發酵產生的有害化學物質，乳桿菌的代謝產物，為低分子有機酸、游離的胺基酸等，進入血液和機體，改善豬肉的風味。2、成本低、使用方便，本發明的產品按目前市場原料價格，每頭豬從50公斤開始使用，每頭豬的成本不高於8元人民幣，但可節省抗生素使用成本20元左右，節省飼料費用10.5元。3、生產效益高，使用本發明的產品飼養的豬，豬肉價格由於味道明顯優於一般豬肉，在廣州、香港的售價是一般豬肉的兩倍，每頭豬按當前的市價，多盈利1000元以上。4、豬肉食物安全，豬發病率降低，豬很少、甚至不要使用抗生素，所以豬肉中沒有抗生素殘留，大大提高了豬肉及其加工產品的安全性。具體實施例方式本發明一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備及應用方法，具體表現為實施例1(1)活化菌種；使用兩株乳桿菌一株植物乳桿菌，LactobacillusplantarumCGMCC1.0557，一株發酵乳桿菌LactobacillusfermentumdCGMCC1.1880。將凍幹菌種，以斜面培養活化，植物乳桿菌活化溫度30士2t:，培養48小時；發酵乳桿菌活化溫度38士2t:，培養48小時；活化用培養基為tableseeoriginaldocumentpage6tableseeoriginaldocumentpage7(2)採用液體培養基，在三角瓶中，兩菌種分別放大培養，培養48小時；植物乳桿菌發酵溫度30±2°C;發酵乳桿菌發酵培養溫度38±2°C;所用培養基配方如下tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage8(3)將兩种放大培養液各lOOml，分別接種到25升培養液中，；培養液的配方為tableseeoriginaldocumentpage8(4)將放大培養液各100ml，接種到25升培養液中，培養液的配方為tableseeoriginaldocumentpage8tableseeoriginaldocumentpage9其中，植物乳桿菌發酵溫度30士2t:，48小時靜態培養，ra降到3.5以下，取培養液上清液部分即為菌水產品。菌水為淺黃色透明液體，ra為2.5到4.5之間，活菌數CFU為6.9X108/ml，略有酸潲水氣味。[OO48](5)製作菌粉；將上述菌水產品，以30升，加到100公斤有機固體載體中(玉米粉、次粉各佔50%)，攪拌均勻，然後在45t:以下乾燥，到水分含量10%以下，粉碎，包裝即成所需要的固體菌產品。有機載體在接種前經滅菌處理，水分含量10%，沒有黴變、沒有結塊。菌粉產品為100%過60目的粉末，含水量在10%以下，黃色，活菌含量CFU為6.5X108/g。(6)在豬場菌水、菌粉使用過程在廣東三水一個豬場，隨機選取體重約50公斤的1000頭豬試用。將該發明產品的乾粉菌以2%。添加到飼料中，攪拌均勻，直接飼喂，採用自由採食方式；將該發明的菌水產品以2。；添加到豬場飲水中，供自由飲用。直接連續使用該發明產品，在豬出欄前共47天；試用期，豬場做全場保健，使用金黴素一周，本產品沒有停用。使用效果1、飼養期豬場的臭味明顯降低，開膛宰殺時，沒有羶味；2、先後安排40人試吃。普遍結論採用清水，不加調料的方式，涮肉，和一般飼養方式養的豬肉比較，風味明顯改變，比一般的豬肉更鮮；湯比對照的清、湯表面的泡沫少。3、飼養成本沒有增加平均比對照減少飼料消耗7.7%，並節省抗生素使用成本，節省飼料。實施例2(1)活化菌種；使用1株乳桿菌-Lactobacillusplanta進CGMCC1.0557。將凍幹菌種，以斜面培養活化，植物乳桿菌活化溫度30士2t:，培養48小時；發酵乳桿菌活化溫度38士2t:，培養48小時。活化用培養基為9tableseeoriginaldocumentpage10(2)採用液體培養基，在三角瓶中，菌种放大培養，培養48小時，發酵溫度30±2°C;所用培養基配方如下tableseeoriginaldocumentpage10tableseeoriginaldocumentpage11清液部分即為菌水產品。菌水為淺黃色透明液體，ra為2.5到4.5之間，活菌數CFU為6.9X108/ml，略有酸潲水氣味。[OOSS](4)製作菌粉將上述菌水產品，以30升，加到100公斤固體載體中(輕質碳酸鈣、次粉各佔50%)，攪拌均勻，然後在45t:以下乾燥，到水分含量10%以下，粉碎，包裝即成所需要的固體菌產品。載體在接種前經滅菌處理，水分含量10%，沒有黴變、沒有結塊。菌粉產品為100%過60目的粉末，含水量在10X以下，黃色，活菌含量CFU為2.7X107g。(5)在豬場菌水、菌粉使用過程在廣東一個豬場，隨機選取體重約50公斤的2000頭豬試用。將該發明產品的乾粉菌以30;添加到飼料中，攪拌均勻，直接飼喂，採用自由採食方式；將該發明的菌水產品以3。；添加到豬場飲水中，供自由飲用。直接連續使用該發明產品，在豬出欄前50天；試用期，豬場發病，實驗組和全場一同使用中草藥添加劑10天左右，本產品沒有停用。在實驗室抑菌實驗，表明該添加劑對產品中植物乳桿菌生長沒有影響。使用效果1、飼養期豬場的糞便臭味明顯降低，開膛宰殺時，腸道內容物的氣味也明顯減少；2、先後三批，安排約60人試吃。普遍認為和一般飼養方式養的豬肉比較，風味明顯改變，比一般的豬肉更鮮，略有甜味；湯比對照的清、湯表面的泡沫少，豬肝、豬肚等內臟羶味明顯減少，豬肥肉不膩、豬皮脆。3、飼養成本沒有增加平均比對照減少飼料消耗7.7%，並節省抗生素使用成本，節省飼料。以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非對其限制；儘管參照較佳實施例對本發明進行了詳細的說明，所屬領域的普通技術人員應當理解。依然可以對本發明的具體實施方式進行修改或者對部分技術特徵進行等同替換；而不脫離本發明技術方案的精神，其均應涵蓋在本發明請求保護的技術方案範圍當中。權利要求一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於，它包括如下方法步驟a、活化菌種，取一種或多種乳酸桿菌菌種，採用活化用培養基，在培養溫度為28～40℃環境下，斜面活化培養24～48小時；b、放大培養，將活化的菌种放入裝有液體培養基的三角瓶中液體發酵，放大培養時間為24～48小時，培養溫度28～40℃；c、生產培養發酵，將放大培養液100ml，接種到25升培養液中，培養溫度28～40℃，24～48小時靜態培養，直至PH值降到3.5以下；d、製備活菌製劑，包括製成液體和乾粉兩種形態，在方法步驟c過程的生產液體發酵後，單一菌時取培養液上清液部分即為菌水產品；多種菌時，取培養液上清液部分等量混合即為菌水產品；e、將所述菌水產品，以10～40升，加到100公斤有機固體載體中，攪拌均勻，然後在45℃以下乾燥至水分含量10％以下，粉碎，包裝即成所需要的菌粉產品。2.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸桿菌製劑的製備方法，其特徵在於所述乳桿菌包括一植物乳桿菌，LactobacillusplantarumCGMCC1.0557，一發酵乳桿菌LactobacillusfermentumdCGMCC1.1880，植物乳桿菌活化溫度30士2t:，培養48小時；發酵乳桿菌活化溫度38士2t:，培養48小時。3.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於所述活化用培養基採用0006液體培養基，該培養基按以下製得在1L蒸餾水中加入酪蛋白腖9llg，牛肉膏9llg，酵母提取物46g，葡萄糖46g，乙酸納46g，檸檬酸二胺23g，吐溫800.51.5g，K2HP0412g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031921g，瓊月旨1013g;混合溶解，調PH值至6.56.9。4.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸桿菌製劑的製備方法，其特徵在於在所述方法步驟b的活化菌種在三角瓶放大培養過程中，採用的液體培養基按以下製得在25L的蒸餾水中加入酪蛋白腖911g，牛肉膏911g，酵母提取物46g，葡萄糖46g，乙酸納46g，檸檬酸二胺23g，吐溫800.51.5g，K2HP0412g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031921g，混合，調PH值至6.56.9。5.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於在所述方法步驟C的生產培養發酵過程，培養液按以下製得在25L的純淨水中加入脫脂大豆粉7882g，蔗糖1922g，檸檬酸二胺13g，K2HP0413g，MgS04.7H200.10.3g，MnS04.H200.040.06g，CaC031822g，調PH值至6.56.9。6.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於在所述方法步驟d的製備活菌製劑過程中，有機固體載體採用飼料原材料或是沸石、麥飯石、碳酸鈣粉末，該有機固體載體在接種前經滅菌處理，水分含量10%以下。7.根據權利要求1所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的製備方法，其特徵在於在所述方法步驟d的製備活菌製劑過程中，得到菌水活菌數CFU為5X107ml，PH為2.5-4.5之間；菌粉為100%過60目的粉末，活菌數CFU>108/g。8.—種權利要求16所述的一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸菌製劑的應用方法，其特徵在於，它是在豬出欄前不低於45天內，每次在豬的飼料中以萬分之五到百分之二的比例添加菌粉，在豬的飲用水中以萬分之五到百分之二的比例添加菌水，供豬採食和飲水。全文摘要本發明公開了一種可改善豬肉品質、風味的飼用乳酸桿菌製劑的製備方法及其應用方法，通過使用一種或多種乳桿菌，包括植物乳桿菌、發酵乳桿菌，通過複合靜態發酵，或者分別獨立發酵，然後製成的菌水和乾粉菌，菌水通過萬分之五到百分之二在豬飲水中添加，乾粉菌通過萬分之五到百分之二在飼料中添加兩種方式，使兩種活菌進入豬的腸道，影響豬的消化代謝。該項技術措施在豬出欄前至少要連續使用45天以上，從50kg或以前開始使用。提高豬的免疫力，大幅減少或避免使用抗生素，從而實現豬肉產品無藥殘；同時使豬肉味道出現明顯的鮮甜味，明顯區別於目前市場普通豬肉的味道。文檔編號C12R1/225GK101744119SQ20091019357公開日2010年6月23日申請日期2009年11月2日優先權日2009年11月2日發明者張方西,張生秘,許民強,黃宇慧申請人:許民強