一種用於治療骨質疏鬆症的藥物組合物的製作方法

2023-07-19 22:05:51

專利名稱：一種用於治療骨質疏鬆症的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種用於治療骨質疏鬆症的藥物組合物，尤其涉及一種以植物中所提取的活性成分為原料製備而成的藥物組合物及其製備方法。
背景技術：
骨質疏鬆症是一種與內分泌功能有關的生理性退行性疾病，患者呈現骨組織顯微結構受損、骨質變薄、骨脆性增加等病理改變，在老年人群、更年期婦女中臨床發病率很高，給患者帶來很大的痛苦。
目前，臨床治療骨質疏鬆症主要採用鈣製劑和雌激素類兩類藥物，這兩類藥物，前者臨床療效不夠理想，後者長期服用會有明顯的毒副作用。

發明內容
本發明的目的是提供一種能有效治療骨質疏鬆症的無毒副作用的藥物組合物。
本發明的目的是通過以下途徑來實現的本發明藥物組合物含有下述重量配比的活性成分木豆素95～105，木豆素A 3～13，木豆素C 2～7，球松素55～65，牡荊素55～65，柚皮素二甲醚2～7，水楊酸15～25。
本發明藥物組合物各活性成分的重量配比是木豆素98～102，木豆素A 6～10，木豆素C 2～4，球松素58～62，牡荊素58～62，柚皮素二甲醚2～7，水楊酸15～25。
本發明藥物組合物各活性成分的優選重量份是木豆素100，木豆素A 8，木豆素C 2，球松素60，牡荊素62，柚皮素二甲醚2，水楊酸20。
本發明藥物組合物的各活性成分可採用本領域的常規方法從木豆的全植物或樹皮、葉、花、根、莖等部分中提取、分離、純化得到。
本發明藥物組合物各活性成分的一種優選的提取方法包括下列步驟將木豆的全植物或樹皮、葉、花、根、莖等部分粉碎、撕碎或搗碎，用過面80％乙醇加熱回流提取，每次1小時，將乙醇提取液合併後減壓濃縮得乙醇浸膏，用熱水(60～70℃)處理過濾，得濾液(A)和綠色粘膏狀濾渣(B)。A部分以乙酸乙酯提取後得提取物，將該提取物以丙酮攪拌過濾，所得濾渣呈土黃色粉末狀，即為牡荊素(粗品)，將濾液蒸乾後溶於20mL氯仿，並以2％氫氧化鈉提取，鹼提取液加鹽酸酸化後過濾，濾餅為水楊酸。
將綠色粘膏狀物B加入200g層析粗矽膠拌勻晾乾，研細後置預先裝入100g矽膠的連續提取器內，先後以石油醚(30-60℃°)和二氯甲烷連續洗脫，依次得到C，D1和D2三種洗脫液。D2部分有結晶析出，以少量冷二氯甲烷攪拌過濾，所得濾餅即為木豆素，將濾液蒸乾後與D1合併，加入適量丙酮攪拌過濾，棄去濾餅。濾液以矽膠柱層析，以石油醚-二氯甲烷(1∶9，1∶1)洗脫，先得木豆素A後得球松素。再用二氯甲烷洗脫矽膠柱先後得到E和F部分，將F部分加入適量石油醚，放置析晶，過濾，所得濾餅即為木豆素C，母液放入冰箱數天析晶過濾得柚皮素二甲醚。
本發明藥物組合物的各活性成分的化學結構式及理化特性如下 木豆素A 木豆素木豆素C 球松素 牡荊素柚皮素二甲醚 水楊酸木豆素C21H22O4，白色結晶，熔點176-178℃(正己烷-CH2Cl2)、EIMS m/z338「M」+；1H NMR(CDCl3)δ1.73，1.79(各3H，s，C＝C(CH3)2)，3.38(2H，dJ＝7Hz，ph-CH2-3.97(3H，s.OCH3)，5.20(1H，t，J＝7Hz，-CH-C-)，6.62(1H，s，H-6)，6.80，7.82(各1H，d，J＝16Hz，-CH＝CH-)，7.20-7.60(5H，m，B環H)。
木豆素的乙醯化物熔點158-160℃，EIMS m/z 380[M]+。
木豆素AC20H22O2。白色針晶，熔點76-78℃(正己烷-CH2Cl2)；EIMS m/z 294「M」+；1HNMK(CDCl3)δ1.76，1.83(各3H，s，C＝C(CH3)2)，3.43(2H，d J＝7Hz，ph-CH2-)，3.90(3H，s.OCH3)，5.28(1H，t，J＝7Hz，C＝CH)，6.69(2H，s，-CH＝CH)，7.08(2H，s，H-2，H-6)，7.30-7.62(5H，m，B環H)。
木豆素A的乙醯化物熔點69～70℃；1HNMRδ2.32(3H.s.OAc)。
木豆素CC20H22O2。白色針晶，熔點98-99℃(正己烷-CH2Cl2)；EIMS m/z 294「M」+；1HNMK(CDCl3)δ1.68，1.80(各3H，s，C＝C(CH3)2)，3.43(2H，d J＝7Hz，ph-CH2-)，3.80(3H，s.OCH3)，5.13(1H，t，J＝7Hz，-CH＝CH-)，6.40，6.71(各1H，d，J＝2.5，H-4，H-6)，6.84，7.38(各1H，d，J＝16Hz，-CH＝CH-)，7.21～7.58(5H，m，B環H)。
木豆素C的乙醯化物熔點60～62℃；EIMS m/z 336[M]+；1H NMRδ2.34(3H，s，OAc)。
球松素C10H14O4。白色片晶，熔點100-101℃(甲醇)；EIMS m/z 270「M」+；1HNMK(CDCl3)δ2.67-3.28(2H，m，JAB＝17Hz，JAX＝11Hz，JBX＝5Hz，CH2-3)，3.80(3H，s，OCH3)，5.43(1H，dd，JAX＝11Hz，JBX＝5Hz，H-2)，6.08(2H，s，H-6，H-8)，7.45(5H，s，B環H)球松素乙醯化物，熔點150～152℃(甲醇)；EIMS m/z 312[M]+；牡制素C21H20O10。黃色細微方晶，熔點258-260℃(水-吡啶)；EIMS m/z 414「M-H2O」+；1HNMR(DMSO-d6)δ3.83(6H，br，s，葡萄糖基H)，4.65(1H，d，J＝8Hz，糖端基H)，6.28(1H，s.H-3)，6.79(1H，s，H-6)，6.90，8.03(各2H，d，J＝9Hz，B環H)，10.40，10.88，13.20(各1H，s，加D2O消失，OH)牡荊素全乙醯化物，白色結晶，熔點256～258℃(HAc-EtOH)。
水楊酸C7H6O3，細微白色針晶，熔點160℃，EIMS m/z 133[M]+。
將提取純化後的各活性成分研成細粉，按所述重量份數混合均勻，即得本發明藥物組合物。本發明藥物組合物可以單獨使用，也可以用不同賦形劑加工成不同的劑型應用，如片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、酊劑、氣霧劑、膏劑、滴丸劑、膜製劑等。優選為口服製劑。這些賦形劑包括製藥工藝中常用的稀釋劑、崩解劑、潤滑劑、粘合劑、抗氧劑等本發明藥物組合物具有促進骨細胞形成及抑制骨細胞吸收作用，因而可以有效治療婦女更年期(或卵巢切除)，老年人或藥物引起的骨質疏鬆症。此外，本發明藥物組合物還具有消炎、抗滲出作用，可用於外傷、燒傷和口瘡的治療。本發明藥物組合物每天一次口服藥，有效劑量為50～150mg/kg。
以下通過具體實施方式
對本發明有益效果作進一步說明，以下實施方式僅用以說明本發明，不限制本發明的範圍。
具體實施例方式
試驗例1體外試驗用3H-胸腺嘧啶摻入法，用人的類成骨細胞HOSTE85與本發明藥物組合物作用48小時，結果本發明藥物在濃度為10-8g/mL時顯示受試細胞的增殖作用，與不給藥的空白對照組比較有明顯差異，P＜0.05。
試驗例2體內試驗採用「腎虛骨質病變試驗法」。即摘除受試雌性大鼠雙側卵巢致大鼠骨質疏鬆為模型(分為給藥和未給藥組)，以股骨抗彎強度(I)、礦物質含量(股骨灰分)(II)和子宮重量(II)為觀察指標，摘除卵巢8天後給藥，每日一次劑量為150、100、50(mg/kg)，連續灌胃給藥28天，結果比較給藥組(上述三種劑量)與未給藥的對照組的指標I、II、III均有顯著的差異，三個劑量組的P值分別為0.001，0.01和0.05，顯示出量效關係。組織學檢查，給藥組骨質增厚，小梁骨明顯增多。
試驗例3消炎試驗小白鼠36隻(由中國醫學科學院動物中心提供、每隻體重25g左右)分三組，每組12隻，分別為給藥組(I)、陽性對照組(II)和空白對照組(III)、小鼠禁食過夜(24小時)後灌胃給藥，I組給本發明藥物組合物120mg/kg(蒸餾水製成乳液)、II組給水楊酸118mg/kg、III組給等量蒸餾水，1小時後各組均用巴豆油致炎(每隻0.05ml)，4小時後以角膜環取左右兩耳、稱重，統計結果表明，I組炎症抑制率為41.4％，II組為25.7％，與III組比較有明顯差異，P值分別為0.01和0.05。
試驗例4抗滲出試驗雄性小白鼠(20-22g)，隨機分為空白對照組(8隻)、給藥組(10隻)、禁食過夜(24小時)後灌胃給藥(120mg/kg)，30分鐘後由尾靜脈注射2％靛藍煙脂紅(0.2ml/10g)，即時腹腔注射0.2ml/10g(0.41％醋酸)，30分鐘後腹腔注射蒸餾水(2ml/10g)，即時處死。按摩40次/只，取腹水1mL，加入三氯醋酸(0.1mL)離心，取上清液，以分光光度計660nm波長下進行比色。結果表明，給藥組的光密度與對照組有明顯差異P＜0.05。
實施例本發明藥物組合物各活性成分的提取、分離、純化。
將木豆葉1kg粉碎後，用過面80％乙醇加熱回流提取，每次1小時，合併的乙醇提取液減壓濃縮得乙醇浸膏250g，以熱水(60～70℃)處理過濾，得濾液(A)和綠色粘膏狀濾渣(B)。A部分以乙酸乙酯提取得9g提取物，該提取物以丙酮攪拌過濾得310mg土黃色粉末狀牡荊素(粗品)，濾液蒸乾後溶於20mL氯仿，並以2％氫氧化鈉提取，鹼提取液加鹽酸酸化後過濾，得100mg水楊酸。
綠色粘膏狀物B加入200g層析粗矽膠拌勻晾乾，研細後置預先裝入100g矽膠的連續提取器內，先後以石油醚(30-60°)和二氯甲烷連續洗脫，依次得到C(3g)，D1(11g)和D2(14g)。
D2部分有結晶析出，以少量冷二氯甲烷攪拌過濾，得木豆素(510mg)，濾液蒸乾後與D1合併，加入適量丙酮攪拌過濾，棄去濾餅。濾液以矽膠柱層析，以石油醚-二氯甲烷(1∶9，1∶1)洗脫依次得木豆素A(40mg)和球松素(300mg)。繼用二氯甲烷洗脫矽膠柱得E和F部分，後者加入適量石油醚，放置析晶，過濾得木豆素C(12mg)，母液放入冰箱數天析晶過濾得柚皮素二甲醚(13mg)。
將所得的上述重量的各活性成分研成粉末，混合均勻，即得本發明藥物組合物。也可加入不同的賦形劑，按本領域常規方法加工製成適宜的劑型。
權利要求
1.一種治療骨質疏鬆症的藥物組合物，其特徵在於含有下列重量配比的活性成分木豆素95～105，木豆素A3～13，木豆素C2～7，球松素55～65，牡荊素55～65，柚皮素二甲醚2～7，水楊酸15～25。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中各組分的重量配比為木豆素98～102，木豆素A6～10，木豆素C2～4，球松素58～62，牡荊素58～62，柚皮素二甲醚2～7，水楊酸15～25。
3.根據權利要求1所述的藥物組合物，其中各組分的重量配比為木豆素100，木豆素A8，木豆素C2，球松素60，牡荊素62，柚皮素二甲醚2，水楊酸20。
4.根據權利要求1、2或3所述的治療骨質疏鬆症的藥物組合物，其特徵在於加入不同的賦形劑後可加工成任何一種藥劑學上所說的劑型。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物，所述的藥物劑型為口服製劑。
6.權利要求1、2或3中的藥物組合物在製備治療骨質疏鬆症藥物中的用途。
7.權利要求1、2或3中的藥物組合物在製備治療外傷藥物中的用途。
8.權利要求1、2或3中的藥物組合物在製備治療燒傷藥物中的用途。
9.權利要求1、2或3中的藥物組合物在製備治療口瘡藥物中的用途。
全文摘要
本發明公開了一種新的用於治療骨質疏鬆症的藥物組合物，該藥物組合物含有下列重量份配比的活性成分木豆素95～105、木豆素A3～13、木豆素C2～7、球松素55～65、牡荊素55～65、柚皮素二甲醚2～7、水楊酸15～25。本發明藥物組合物加入不同的賦形劑後可加工成任何一種藥劑學上所說的劑型。本發明藥物組合物具有促骨形成和抗骨吸收作用，可有效治療更年期(或因病切除卵巢後)婦女、老年人和使用激素藥物引起的骨質疏鬆症。本發明藥物組合物同時具有消炎抗滲出作用，可用於外傷、燒傷和口瘡的治療。
文檔編號A61K31/60GK1666745SQ200410008458
公開日2005年9月14日 申請日期2004年3月12日 優先權日2004年3月12日
發明者陳迪華, 斯建勇, 潘瑞樂, 趙曉宏, 孫蘭, 嶽贇, 楊京, 沈連鋼 申請人:中國醫學科學院藥用植物研究所, 中國醫學科學院基礎醫學研究所