油桐組培苗瓶內生根的方法與流程
2023-07-23 15:37:51
本發明屬於油桐無性繁殖技術，涉及一種油桐組培苗瓶內生根的方法。
背景技術：
油桐（Vernicia fordii (Hemsl.) Airy Shaw），大戟科油桐屬，屬落葉喬木，樹皮灰色，枝條粗壯，葉卵圓形，花雌雄同株，花萼外面密被棕褐色微柔毛；花瓣白色，有淡紅色脈紋，倒卵形，子房密被柔毛，核果近球狀，種皮木質。花果期3-9月。分布於中國的陝西、河南、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、湖南、湖北、廣東、海南、廣西、四川、貴州、雲南等省區。油桐與油茶、核桃、烏桕並稱中國四大木本油料植物。油桐生於1000米以上的地區，喜溫暖 ，忌嚴寒 。冬季氣溫落差18℃有利於油桐生長發育 ，但長期處在－10℃以下會引起凍害。適生於緩坡及向陽穀地，盆地及河床兩岸臺地。富含腐殖質、土層深厚、排水良好、中性至微酸性沙質壤土最適油桐生長。
油桐栽培方式有桐農間作、營造純林、零星種植和林桐間作等。組織培養技術是一種快速無性繁殖技術，選擇油桐優良家系或者無性係為材料，通過組織培養方法繁殖苗木，既可以滿足生產上的數量要求，又可保持母本性狀。然而在組培過程中，常常出現生根率低、生根不統一、根係數量少以及根系不粗壯的問題。
技術實現要素：
本發明的目的在於提供一種能提高油桐組培苗的生根率，根係數量以及根系萌發整齊度的油桐組培苗瓶內生根的方法。
為了實現上述發明目的，本發明的技術方案如下：
一種油桐組培苗瓶內生根的方法，選取增殖繼代油桐小苗，先進行預生根培養，然後再進行生根培養，置於適宜環境中培養，獲得帶根組培苗，主要操作步驟如下：
（1）取材：選取經常規組培中壯芽培養35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表後，在超淨工作檯上的無菌空間內，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，於節下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄，備用；
（2）預生根培養：將步驟（1）修剪後的單芽接種於預生根培養基中,在特定的光溫環境中進行預生根培養；
（3）生根培養：待步驟（2）中的單芽經過30～35d預生根培養後，將單芽轉接入生根培養基，在特定的光溫環境中進行生根培養。
以上所述的預生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IBA 1.0～2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0～2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT1#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良ER培養基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
以上步驟（2）和步驟（3）所述的光溫環境為：溫度20±1℃，溼度55～70%，光照強度2000～2500lux，光照15～16h/d。
本發明具有的優點及有益效果如下：
1、本發明採用1/2改良ER培養基作為基本培養基，同時重點調整了與油桐生根的相關的微量元素和有機成分，使得培養基更科學，更有針對性，更易促使油桐繼代芽生根，效果顯著。
2、本發明在生根誘導前採用低濃度IBA和抗壞血酸（VC）對繼代單芽進行預生根培養，然後再進行生根培養，可使組培苗髮根統一，髮根速度快，根系粗壯且數量較多。
3、本發明在增殖繼代單芽經過30～35d時間預生根培養後轉入生根培養，即可達到預生根培養效果，又避免了小苗在預生根培養階段長出根系而使後期生根培養髮根不整齊。
4、本發明的在特定的光溫條件下進行預生根和生根培養，適應油桐組培苗的生長特性，促進苗木的生長。
5、本發明縮短了油桐繼代芽生根周期，生根率高，根系多，質量好，生根組培苗移栽成活率高，可實現油桐組培產業化育苗，為人工無性系林的建設提供優質種苗，具有較好的經濟效益、社會效益和生態效益。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步說明。
實施例1：
選取經常規組培中壯芽培養35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表後，在超淨工作檯上的無菌空間內，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，於節下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪後的單芽接種於預生根培養基中, 所述的預生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IBA 1.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度55～60%，光照強度2000lux，光照16h/d的環境中進行預生根培養。待單芽經過30～35d預生根培養後，將單芽轉接入生根培養基，所述的生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IAA 1.0mg/L+ABT1#0.5 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度55～60%，光照強度2000lux，光照16h/d環境中進行生根培養。培養15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
實施例2：
選取經常規組培中壯芽培養35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表後，在超淨工作檯上的無菌空間內，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，於節下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪後的單芽接種於預生根培養基中, 所述的預生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IBA 1.5mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度60～65%，光照強度2000lux，光照15h/d的環境中進行預生根培養。待單芽經過30～35d預生根培養後，將單芽轉接入生根培養基，所述的生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IAA 1.5mg/L+ABT1#1.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度60～65%，光照強度2000lux，光照15h/d的環境中進行生根培養。培養15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
實施例3：
選取經常規組培中壯芽培養35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表後，在超淨工作檯上的無菌空間內，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，於節下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪後的單芽接種於預生根培養基中, 所述的預生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IBA 2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.5mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度65～70%，光照強度2500lux，光照15h/d的環境中進行預生根培養。待單芽經過30～35d預生根培養後，將單芽轉接入生根培養基，所述的生根培養基其原料含量為：1/2改良ER培養基+IAA 2.0mg/L+ABT1#2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，溼度65～70%，光照強度2500lux，光照15h/d的環境中進行生根培養。培養15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。