順氯氨鉑和2,2'-二硫代-二(乙磺酸鹽)(二巰乙磺酸鈉)的組合物的製作方法

2023-07-23 22:06:01

專利名稱：順氯氨鉑和2,2'-二硫代-二(乙磺酸鹽)(二巰乙磺酸鈉)的組合物的製作方法
背景技術：
發明領域本發明涉及順二胺二氯鉑(順氯氨鉑)組合物，其為一種廣泛使用的抗癌藥。
相關領域的描述順氯氨鉑的一個最重要和常見的劑量限定毒性是腎毒性(引起腎損傷)。為了使順氯氨鉑與細胞DNA中某些核酸序列反應，首先必須通過用水取代氯配基形成一水或二水物質而使其化學轉化為活性物質。順氯氨鉑的水化合物可與親核物質反應，這些親核物質包括DNA上的咪唑氮或巰基(其也存在於形成人腎小管上皮的細胞中)。
順氯氨鉑易於與含有巰基的化合物反應。在半胱氨酸、穀胱甘肽和高半胱氨酸中存在巰基。金屬硫蛋白是一個含有約30％半胱氨酸殘基的7kDa蛋白質。細胞中增加的金屬硫蛋白和穀胱甘肽濃度與順氯氨鉑治療的藥物耐受有關。因此，如果能增加來自2-硫基乙磺酸鹽的巰基的局部腎小管濃度，就可通過化學滅活腎小管中反應性順氯氨鉑「水化合物」而減低順氯氨鉑的毒性。按照下式通過水解順氯氨鉑形成水化合物
Kempf等在British J.Cancer，52，937-939(1985)中描述了使用2-巰基乙磺酸鈉(「巰乙磺酸鈉」)預防順氯氨鉑在大鼠腎中的腎毒性。該文獻說明，巰乙磺酸鈉唯一的已知代謝物是其二硫化物-二巰乙磺酸鈉，其不能與順氯氨鉑反應。按照該文獻，靜脈內給予巰乙磺酸鈉後，二硫化物可通過自氧化而自動形成並主要存在於血流中。然後而硫化物由腎臟消除。該作者將順氯氨鉑靜脈內給予大鼠，並且在每次注射順氯氨鉑前2小時口服給予巰乙磺酸鈉，然後在最後注射順氯氨鉑後每日口服數次給藥4天。
由Kempf等設計的治療方案複雜又不實際。但是，巰乙磺酸鈉不能與順氯氨鉑同時給藥，因為它們互相反應。需要尋求一種替代方法而可使巰乙磺酸鈉與順氯氨鉑同時給藥。
發明概述出乎意料地發現，2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)，特別是其的鈉鹽-二巰乙磺酸鈉，可基本上同時或近乎同時與順氯氨鉑一起給藥。這種磺酸鹽不被半胱氨酸及血流中的其它巰基蛋白質幹擾，從而有效地降低順氯氨鉑的腎毒性。這是特別意外的，因為人們懷疑巰乙磺酸鈉可與血流中的半胱氨酸反應。已報導了尿中增加了半胱氨酸的消除，這與對人受試者給予巰乙磺酸鈉有關參見B.Sidau和I.C.Shaw，J.Chromatography 311，234-238，(1984)。如果巰乙磺酸鈉代謝為二巰乙磺酸鈉(如上述Kempf等所述)是顯著的，那麼有可能二巰乙磺酸鈉與半胱氨酸反應。另外，如果巰乙磺酸鈉與半胱氨酸反應，也許二巰乙磺酸鈉不是巰乙磺酸鈉的主要代謝物。
巰乙磺酸鈉廣泛用於降低或預防出血性膀胱炎轉化為uroepithilium(可引起輸尿管、膀胱和尿道出血)的危險，這種疾病與使用某些噁唑膦抗癌藥(包括環磷醯胺、異環磷醯胺和氯乙環磷醯胺)有關。為了相同的目的已檢測了二巰乙磺酸鈉參見Brock等，J.Cancer Res.Clin.Oncol.108，87-97 1984和Eur.J.Cancer Clin.Oncol.17，1155-1163(1981)。噁唑磷導致的uroepithilial毒性在化學、生物化學、解剖學以及病理學上都不同於給予順氯氨鉑後觀察到的腎毒性。在噁唑磷的情況下，所產生的丙烯醛是一種毒性代謝物，巰乙磺酸鈉加成到丙烯醛的雙鍵上，得到穩定的硫醚加成物，其對uroepithelium沒有損害作用並可在尿中排洩。
本發明的一方面是提供一種適用於對癌症患者給藥的組合物，其包括順氯氨鉑和2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的可藥用形式。該磺酸鹽可以任何一種可藥用鹽形式存在，特別是二鈉鹽(二巰乙磺酸鈉)或以游離酸或其混合物形式存在。優選其以鈉鹽形式存在。組合物優選的形式是水溶液，通常是滅菌注射水溶液。這種溶液含有2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)陰離子和可藥用陽離子(特別是Na+和H+)而為電中性。
使用本發明的組合物可有助於確保患者接受正確的劑量，降低開出兩種藥物的錯誤，減少另外需要降低腎毒性的預防措施的數量並且避免醫源性併發症(給予速尿或高滲鹽水-見下文)。
已發現本發明組合物在動物試驗中具有強的抗腫瘤活性。它們也可保護不受順氯氨鉑誘導的骨髓抑制或腎毒性。
本發明另外提供了2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的可藥用形式，特別是二鈉鹽(二巰乙磺酸鈉)在生產與順氯氨鉑基本上一起或順序(次序可顛倒，特別是給予一者後24小時內給予另一者，這樣磺酸鹽和順氯氨鉑同時存在於患者血液中)給予患者的藥物中的應用。在專利法允許的地方，特別是澳大利亞，這一概念可表示為將磺酸鹽和順氯氨鉑在如上基本上相同的時間給予患者。因此，本發明另外使磺酸鹽和順氯氨鉑順序(次序可顛倒)給藥，特別是給予一者後24小時內給予另一者，或者接近足夠的時間以使磺酸鹽進入血流時順氯氨鉑也存在於其中或者是當順氯氨鉑進入血流時磺酸鹽也存在於其中，因此本發明的原理(通過體內與2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)相互作用降低順氯氨鉑的腎毒性)可發揮作用。
附圖簡要說明

圖1至3在有或沒有增加靜脈內2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)(BNP7787)劑量下靜脈內給予順氯氨鉑(6mg/kg)治療後第5天的數值-圖1血清肌酸酐(mg/dl)；圖2BUN(血清尿素氮)(mg/dl)；圖3WBC(白細胞計數)(千數/mm3)。
圖4和圖5結腸腫瘤Fischer大鼠對靜脈內注射順氯氨鉑和2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)(BNP7787)的反應-圖4腫瘤重量中值(mg)，天數-圖5平均體重(％初始體重)，天數優選實例的描述典型的本發明組合物為溶液。可採取任何適當形式配製順氯氨鉑，其與乙磺酸鹽共同存在時不為配伍禁忌或者對順氯氨鉑的活性不相容。製劑類型取決於給藥途徑，常規地為非腸道給藥，優選注射給藥。
本發明將在下文主要討論2，2′-二硫代-二(乙磺酸)二鈉(二巰乙磺酸鈉)的滅菌水溶液，但是本領域的技術人員易於使用本發明的原理製備其它順氯氨鉑製劑及其它形式的磺酸鹽。所述的其它形式包括磺酸的一鈉鹽、一鉀鹽、鈉-鉀鹽、二鉀鹽、鈣鹽和鎂鹽。
通常水溶液的pH值低於7.0而大於1.0，更常規的是在2和6之間，優選4和6之間。這有助於防止形成順氯氨鉑的水合物。相同的pH值也有助於防止巰乙磺酸鈉的形成，巰乙磺酸鈉可與順氯氨鉑種類反應。優選使用鹽酸或磷酸降低pH值。溶液優選含有氯離子，例如由氯化鈉提供，選擇性通過使用鹽酸降低pH值來增加氯離子，這因為順氯氨鉑的穩定性與溶液中的氯離子濃度成正比。此外，血漿中高濃度的氯離子可提供十分有利於維持順氯氨鉑的非反應性中性二氯化物的環境。中性二氯順氯氨鉑可進入細胞，例如癌細胞，這由於細胞內的氯離子濃度低，有利於順氯氨鉑二氯化物轉化為一水或二水化物。然後水合順氯氨鉑可與細胞DNA中的某些核酸形成螯合交聯。
順氯氨鉑誘導的腎毒性是臨床上重要的問題，其與肌酸酐清除的降低、升高的肌酸酐、升高的血清尿素氮、升高的尿酸和低鎂血有關。常用的預防措施是儘量降低該併發症的發生，包括a.非腸道給予高滲(3％)氯化鈉；b.甘露糖醇利尿；c.事先和/或事後的水化治療(口服或非腸道)d.通過給予利尿劑如速尿進行強迫利尿；或者e.口服或非腸道給予硫代硫酸鹽。
這些措施對受治療患者引入了另外的危險性。例如，給予高滲鹽水(氯化鈉30mg/ml)可導致醫源性高鈉血症。高鈉血是危及生命的醫療緊急狀況，對於高血鈉患者或充血性心力衰竭的患者禁給予高滲鹽水。使用強利尿劑如速尿來增加腎排出尿可增加醫源性低血鉀、低血鈉、低血鈣、血容量降低、代謝性鹼中毒和低氯血。所有這些狀況都危及生命。在應用本發明時應避免。
本發明一個優選的實例是注射用、滅菌、穩定水溶液或懸浮液，其包括順氯氨鉑、2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)、氯化鈉和鹽酸或磷酸，特別是一種單位劑量形式。為了保持無菌，將其貯存在密閉容器中。該溶液特別適用於對癌症患者靜脈內給藥。順氯氨鉑優選的濃度在約0.1mg/ml和約1.0mg/ml之間。2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的優選濃度在1mg/ml和其最大溶解度之間，對於二巰乙磺酸鈉來說最大溶解度約為320mg/ml(在水或鹽水溶液中測量)，優選在5mg/ml和100mg/ml之間。氯化鈉優選的濃度在1和25mg/ml之間，更優選在9和25mg/ml之間，鹽酸或磷酸的濃度為足夠提供或維持pH在2至6的範圍內，更優選4至6的範圍內。如果需要，該組合物也包含一種緩衝液來維持pH值，特別是醋酸鈉或磷酸鈉，單獨或聯合。
優選地，本發明的組合物含有甘露糖醇，例如，當組合物是溶液時，優選其的濃度在約10和25之間，更優選在10和15mg/ml之間。
本發明的組合物可通過將各成分混合(次序不限)而製備。
可使用活性主藥的相同相對比例和選擇性的其它組分製備本發明的其它組合物。因此順氯氨鉑與磺酸鹽(二鈉鹽)的重量比優選1∶1至1∶3200，更優選1∶5至1∶1000。
當用2，2′-二硫代-二(乙磺酸)的其它鹽替代二鈉鹽時，磺酸鹽的濃度或比例可根據摩爾數調整。1克二鈉鹽-二巰乙磺酸鈉相當於4.63毫摩爾2，2′-二硫代-二(乙磺酸)陰離子。
優選將2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)製備成凍幹形式，然後與順氯氨鉑混合或單獨在給予順氯氨鉑前或後給藥。磺酸鹽的水溶液或凍幹在寬pH值範圍內是穩定的，特別是1.5至9。因此，當單獨給予磺酸鹽時，優選4至9的pH值範圍。本發明的順氯氨鉑-磺酸鹽組合物優選以凍幹貯存。凍幹可用滅菌水、葡萄糖(5％)和水、「正常」生理鹽水或乳酸化Ringers溶液再配製。然後優選將再配製溶液經無菌0.2微米濾器過濾以避免藥物產品的微聚集。
通常是非腸道給予順氯氨鉑或含有其的本發明組合物，例如靜脈內、動脈內、腹膜內、皮下、腔內或胸膜內。優選的模式是注射水溶液或懸浮液，優選靜脈內給藥。可將磺酸鹽與順氯氨鉑分開非腸道(如上)或口服給藥。
也可有各種不同的聯合給藥方案，例如(a)一次給予本發明組合物，(b)先給予磺酸鹽，然後在24小時內給予順氯氨鉑，或者(c)先給予磺酸鹽，然後1小時後給予順氯氨鉑，接著同時給予順氯氨鉑和磺酸鹽，給予順氯氨鉑後1小時，給予磺酸鹽。
當口服給予磺酸鹽時，可將其製備成藥物製劑領域中任何常規形式。口服給藥的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。它們可含有賦形劑如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或者載體。其它選擇性添加劑包括藥物製劑領域中熟知的填充劑、粘合劑、潤溼劑、崩解劑、溶液阻滯劑、吸收加速劑、溼潤劑、吸收劑、潤滑劑或緩衝劑。
類似的固體組合物也可作為填充物用於軟和硬-填充的明膠膠囊，其使用乳糖或奶糖等賦形劑以及高分子量的聚乙二醇等。
優選將組合物配製成2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)在腸道的特定部位緩釋。用於這種組合物的包埋劑的實例有聚合物和蠟。
口服給藥用液體劑型包括生理可接受的乳劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑和酏劑。
本發明的組合物可給予未用抗癌藥物治療的患者，或者給予先前治療過或接觸抗癌藥的患者。此外，其也可與另一種抗癌藥物特別是5-FU、爭光黴素、VP-16(依託泊苷)、環磷醯胺、異環磷醯胺、甲醯四氫葉酸、甲氨蝶呤或長春鹼聯合給予癌症患者。
下述非限定性實施例闡明了本發明。涉及到的小瓶是指「琥珀色瓶」，其可防止順氯氨鉑暴露在螢光下。
實施例1(a)2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的製備通過用等摩爾量的碘在水中將2-巰基乙磺酸鹽氧化而製備2，2′-二硫代-二(乙磺酸)二鈉，如前L.Lamaire和M.Reiger在J.Org.Chem.26，1330-1，(1961)中報導。
(b)2，2′-二硫代-二乙磺酸鹽的穩定性將50毫克如此製備的磺酸鹽溶於1毫升水中，通過進入1N鹽酸水溶液調節溶液PH值至1.5、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0，或者通過進入1N氫氧化鈉水溶液調節PH值至8.0、9.0、10.0或11.0。然後於室溫攪拌溶液24形式，減壓除去水，將殘餘物溶於光譜級D2O。質子NMR譜僅給出相應於起始物的峰。
將PH1.5的溶液加熱至100℃10分鐘，此時質子NMR譜沒有變化。
注意到巰乙磺酸鈉和二巰乙磺酸鈉顯示出特徵峰，通過其可監測二巰乙磺酸鈉降解為巰乙磺酸鈉。
(c)順氯氨鉑和2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)穩定溶液的製備將純鹽酸(99.999％)加到滅菌、注射用、0.9％w/v的氯化鈉水溶液(美國藥典級)中，所得pH範圍在2.0至6.0中。加入1mg/ml純順氯氨鉑的上述氯化鈉溶液，室溫暗處攪拌(1500-2500rpm)約60至90分鐘而充分溶解。然後，加入如上製備的15mg二巰乙磺酸鈉(每毫升溶液)，攪拌混合物直至充分溶解。另外加入純鹽酸將最終的pH值調節到2.0至6.0的範圍內。通過無菌0.2微米濾器(從VWR Scientific獲得)過濾將溶液滅菌並貯存在無菌注射小瓶中。每個小瓶含有約0.9毫克順氯氨鉑和14.3毫克2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)(每毫升溶液)。
實施例2在無菌注射用0.9％w/v氯化鈉水溶液(美國藥典級)中加入15mg/ml二巰乙磺酸鈉的氯化鈉溶液，通過在室溫攪拌(1500-2500)5-10分鐘使其充分溶解。加入純(99.999％)鹽酸調節溶液pH值至2.0至6.0的範圍內。加入1mg/ml純(99.999％)順氯氨鉑的二巰乙磺酸鈉溶液，在暗處攪拌混合物直至充分溶解。剩下的步驟如實施例1(c)，得到類似的組合物溶液。
實施例3重複實施例2，只是在15mg/ml無菌二巰乙磺酸鈉水溶液中加入氯化鈉晶體的9mg/ml二巰乙磺酸鈉溶液。每個小瓶含有約1.0毫克順氯氨鉑和14.3毫克二巰乙磺酸鈉(每毫升注射溶液)。
實施例4
重複實施例1(c)步驟，只是使用0.5mg/ml順氯氨鉑和30mg/ml二巰乙磺酸鈉。每個小瓶含有0.5毫克順氯氨鉑和30.0毫克二巰乙酸鈉(每毫升注射溶液)。
實施例5重複實施例1(c)步驟，只是將美國藥典級氯化鉀晶體溶於酸性氯化鈉溶液中而得濃度為0.1％w/v的KCl，此外使用30mg/ml二巰乙磺酸鈉。每個小瓶含有1.0毫克順氯氨鉑和30.0毫克二巰乙酸鈉(每毫升注射溶液)。
實施例6重複實施例1(c)步驟，只是將純甘露糖醇(99+％純度，從AldrichChemical Company購得)溶於氯化鈉溶液，得到濃度為1.0％w/v的甘露糖醇，此外使用30mg/ml二巰乙磺酸鈉。每個小瓶含有1.0毫克順氯氨鉑和30.0毫克二巰乙酸鈉(每毫升注射溶液)。
實施例7重複實施例1(c)步驟，只是將未過濾的含有順氯氨鉑和2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)酸性氯化鈉溶液用市售裝置凍幹。將凍乾物於室溫貯存在琥珀色小瓶中，其可在需要給予患者前避光6個月至1年。其可用滅菌水(美國藥典)重新配製，如果需要，再用鹽酸或磷酸酸化至pH2.0至6.0，然後將溶液通過無菌0.2微米濾器。
實施例82，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)(BNP7787)在Fishcher大鼠中對順氯氨鉑-誘導的腎毒性和骨髓抑制的體內保護作用本實施例顯示了對接受腎毒性劑量的順氯氨鉑(6mg/kg，靜脈內一次注射)的Fischer大鼠(150-200克)一次靜脈內注射1000mg/kg的2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)(BNP7787)後的體內保護作用，這兩種藥物同時(基本上同時)給藥。
在良好的實驗室條件下，將Fischer大鼠(每組10隻)如下處理
組1未處理組2正常生理鹽水組31000mg/kg BNP7787組46mg/kg順氯氨鉑組56mg/kg順氯氨鉑和37mg/kg BNP 7787組66mg/kg順氯氨鉑和111mg/kg BNP 7787組56mg/kg順氯氨鉑和333mg/kg BNP 7787組56mg/kg順氯氨鉑和1000mg/kg BNP 7787在第5天測量肌酸酐(圖1)、血清尿素氮(BUN)(圖2)(兩者都為mg/dl)以及平均血漿白細胞計數(千/mm3)(圖3)，每日將動物稱重。
圖1至3以條形表形式表示結果，其中組1至8按次序從左至右。如圖1和2所示，BNP7787具有顯著的腎保護作用(333和1000mg/kgBNP7787時100％)。如圖3所示，高劑量(333和1000mg/kg)的2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)所得到的白細胞數目分別為6800和6200。它們在未處理對照組白細胞數值的15％內。單獨用順氯氨鉑和低劑量(37mg/kg)2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)處理組的第5天的白細胞計數分別為約4800和4500，其表示比未處理對照組降低了32％至36％。Fischer大鼠模型與順氯氨鉑誘導的人腎毒性高度相關。
因此，此項研究表明了2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)在保護腎不受順氯氨鉑誘導的腎毒性和骨髓抑制方面的劑量依賴性效應，包括高劑量磺酸鹽時的100％腎保護作用。
實施例9通過非腸道給予2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)對順氯氨鉑抗腫瘤活性的增強作用在有或沒有基本上同時靜脈內給予BNP7787(1000mg/kg)逐漸加大劑量靜脈內給予順氯氨鉑(6mg/kg和9mg/kg)通過腫瘤體積和動物體重變化估計的重量變化而測量的抗腫瘤活性和毒性是在具有皮下WARD結腸癌腫瘤(約3.0克)的Fischer大鼠中研究的。WARD腫瘤會在未處理對照大鼠中在約7天內從3.0克長至約10克。
結果如圖4和5所示，其中平均體重(圖4)和中值腫瘤體重(圖5)為縱坐標，橫坐標為時間(天數)。在兩個圖中，說明如下圓圈＝未處理，對照黑圈＝BNP7787，1000mg/kg倒三角＝順氯氨鉑(CDDP)，6mg/kg黑倒三角＝順氯氨鉑，9mg/kg方塊＝順氯氨鉑，6mg/kg，加BNP7787，1000mg/kg黑方塊＝順氯氨鉑，6mg/kg，加BNP7787，1000mg/kg如圖4所示，未處理的帶腫瘤大鼠用BNP7787處理後在約6天內體重僅減輕約2至4％，而單獨用順氯氨鉑(6mg/kg和9mg/kg)處理的大鼠在6天中體重減輕至8％。在兩種劑量水平的順氯氨鉑(6mg/kg和9mg/kg)時靜脈內給予BNP7787明顯對腎損害有保護作用，由於這些大鼠比所有其它處理組大鼠增加了更多的體重(方塊和黑方塊與三角和黑三角對比)。這一現象說明，用BNP7787處理可防止或降低其它順氯氨鉑相關的毒性，包括神經毒性和嘔吐，這會導致大鼠體重減輕。
另外，BNP7787可加強6mg/kg和9mg/kg劑量組的順氯氨鉑的抗腫瘤活性(圖5的方塊和黑方塊)。僅以6mg/kg和9mg/kg劑量用順氯氨鉑處理的大鼠對中值腫瘤重量的最大降低以是從3000毫克分別降低至700和500毫克。先以6mg/kg和9mg/kg劑量用順氯氨鉑處理，然後一次靜脈內給予1000mg/kgBNP7787的大鼠對中值腫瘤重量的最大降低以是從3000毫克分別降低至300和100毫克。
權利要求
1.適於給予癌症患者的組合物，包括順氯氨鉑和2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的可藥用形式。
2.權利要求1的組合物，其形式為pH值2至6的滅菌注射水溶液或懸浮液。
3.權利要求2的組合物，其中pH值為4至6。
4.權利要求2或3的組合物，另外含有緩衝劑。
5.權利要求2、3或4的組合物，其中含有氯陰離子和鈉及氫陽離子。
6.權利要求5的組合物，其含有0.1至1.0mg/kg的順氯氨鉑、1.0至320mg/ml的該磺酸鹽、10至25mg/ml的氯化鈉以及可提供所需pH值的鹽酸或磷酸。
7.權利要求6的組合物，另外含有10至25mg/ml的甘露糖醇。
8.權利要求1、2、3、4、5、6或7的組合物，為凍幹形式。
9. 2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的可藥用形式在生產與順氯氨鉑聯合給予患者的藥物中的用途，兩者基本上同時或順序給藥，這樣磺酸鹽和順氯氨鉑可在患者血液中同時存在。
10.權利要求9的用途，使用乙磺酸鹽水溶液的凍幹形式。
全文摘要
順氯氨鉑與2，2′-二硫代-二(乙磺酸鹽)的可藥用形式聯合給藥可降低順氯氨鉑的腎毒性和骨髓抑制並加強其抗腫瘤活性。優選將順氯氨鉑和磺酸鹽配製成組合物，特別是含有氯離子和鈉及氫陽離子的滅菌注射用溶液。
文檔編號A61P43/00GK1165483SQ95196231
公開日1997年11月19日 申請日期1995年11月14日 優先權日1994年11月14日
發明者F·H·豪斯希爾, K·哈裡德斯, D·默拉裡, D·G·雷迪, P·西薩拉姆魯 申請人:比奧紐默裡克藥物公司