一種檀香的組織培養快繁方法
2023-08-04 15:08:26 2
專利名稱：一種檀香的組織培養快繁方法
技術領域：
本發明涉及植物的組織培養培養繁殖技術，具體地說，涉及檀香樹的組織培養快速繁殖 技術。
背景技術：
檀香(S掛/臓a/6訓)為檀香科常綠喬木。主要分布於東南亞、澳洲和太平洋地區。人 類利用檀香已有數千年的歷史，因其木材可用於工藝雕刻和提煉檀香油而格外有名。在亞洲 地區，燻燒檀香木成為佛教、印度教、伊斯蘭教等宗教的重要儀式。檀香木是提取檀香油的 原材料，它含有a和e檀香醇等成分，可配製香水、香料、香皂和香燻等。檀香油具有抗菌成分，作為傳統中藥，檀香油可治療皮膚病如痔瘡、粉刺、痢疾、淋病等一些頑固疾病；此 外，檀香油還是非常理想的鎮靜劑。目前國際貿易檀香心材每噸可賣47,000美元，其價格一 直處於上升的趨勢；而在國內每斤檀香木價格在人民幣160元以上——檀香為世界上單位面 積收益第二高的植物，無愧為以斤認價的世界上最貴的木材。檀香素有"綠色黃金"之稱， 其經濟收益是其他林木的5-10倍。由於受檀香木材及其檀香油高額利益的驅動，導致原生檀 香樹木的大量減少和消失。太平洋島的檀香山因過去分布有大量的檀香原生樹而得名，但由 於過度的砍伐，如今的檀香山已無檀香天然分布。過去印度一直都是檀香的主要栽培和出口 國，由於無序的砍伐，其檀香資源幾乎耗盡。中國無檀香的天然分布，過去一直從國外進口， 對檀香其成品或半成品的需求一直較大。1962年華南植物園接受印尼華僑饋贈的檀香種子繁 育成功；1980年華南植物園直接從印度引種優良檀香種也獲得成功。經過幾十年的研究試驗， 我們已經篩選了幾十個滿足檀香正常生長所需的檀香寄主。經過國內多個地區的研究試驗表 明檀香在華南南熱帶、亞熱帶地區是可以推廣栽培的。目前國內正掀起檀香種植熱潮。優質 檀香種苗供不應求。然而由於檀香雌雄花器官異熟，通過種子繁殖的後代性狀高度分離，個 體之間差異很大，這對於需要種植幾十年的珍貴樹木來講，非常需要建立一套完整的組織培 養快繁體系。目前世界範圍內，已經有很多開展檀香組織培養的科研工作，在國內也有幾個 報導檀香組織培養的例子。但是檀香組織培養生根成苗在國內卻未成功，即是完整的檀香組 織培養的研究報導尚未見報導。發明內容本發明的目的是提出一種檀香的組織培養快繁方法，發明人在開展檀香組織培養的研究 中，從檀香組織培養的基本過程，包括芽的誘導、繁殖、生根、移栽等的階段，篩選最適培 養基和培養條件，使檀香能夠實現其有效繁殖，從而實現本發明的目的。本發明所提出的檀香的組織培養快繁方法，包括下述培養階段a) 不定芽的誘導階段取十年以上成年優質檀香樹嫩芽，經消毒後轉入到繁殖培養基 上培養，每天光照50-100 nmolm—2s—4-14小時，直至誘導形成不定芽；所述的誘導培養基 以MS基本培養基，附加瓊月旨0.6gL"，椰子乳50-100 ml L"，蔗糖30gL"， pH值5.4-5.8 為基礎，另配加NAA0.1-1.0 mg L"+BAP 0.5-2.0 mg L";b) 叢芽繁殖階段將不定芽轉入到繁殖培養基上以建立叢芽繁殖體系，每天光照80-120 p mol m—2 sH10-14小時， 一個月至一個半月繼代一次，所述的繁殖培養基以MS基本培養 基，附加瓊月旨0,6gr1,蔗糖30gL.1， pH值5.4-5.8為基石出，另力卩BAP 0.5-2.0 mg L"+NAA 0.1-0.5 mg L"+IBA0.5-2.0 mg L";c) 生根階段將發育至4-5 cm以上的叢芽分切轉入到生根培養基上光照培養誘導生根， 每天光照100-200 pmol m—2 s^l0-14小時，培養l-2個月誘導生根，試管苗生根後將培養瓶 轉到溫室中培養l-2個月以壯苗，所述的生根培養基以MS基本培養基，附加培養基質蛭石 30-40 gU1 (以利於通氣生根)，蔗糖20-30 g1/1， pH值5.4-5.8為基礎，另力n IBA 0.3-0.5 mgd)移栽階段將長根的試管苗移栽到室外，和合適的寄主植物共同培養。經試驗，使用本發明進行檀香樹的組織培養快速繁殖，試管苗成活率可達到95%，可以 有效解決檀香種植中的優質檀香種苗供應問題。
具體實施方式
實施例一1、 外植體從華南植物園檀香園採集的成年優質檀香植株的幼嫩腋芽；2、 培養過程a) 誘導階段檀香嫩芽外植體經75%酒精消毒10秒後，經無菌水洗2遍後，轉入0.1% 升汞中IO分鐘，最後經無水洗3次後將芽分切後轉到誘導培養基上光照培養。誘導培養基採 用MS基本培養基，附加瓊脂0.6gL"，椰子乳100mlL"，蔗糖30gL"， pH值5.5;另加 NAA0.5 mg L"+BAP 1.0 mg L",每天光照50-100 p mol m_2 s—!10小時。b) 繁殖階段將不定芽轉入到繁殖培養基上，每天光照120pmolm—2s—^4小時，繁殖 培養基採用MS基本培養基，瓊脂0.6 g L/1，蔗糖30 g L'1， pH值5.5;繁殖培養基包含了 BAP 0.8mgL"+NAA0.3mgL"+IBA0.8mgL—1， 一個月繼代一次，繁殖頻率達5-8;c) 生根階段將發育的叢芽分切轉入到生根培養基上，生根培養基採用MS基本培養基， 附加蛭石30 g U1,蔗糖30 g L"， pH值5.5;另加IBA0.3 mg L"，每天光照200 prnol m—2 s_114 小時，取4-5 cm以上的叢芽分切，放在該生根培養基上培養，2個月內能夠生根(既能夠保 證生根，也能夠使試管苗不會形成叢芽或側芽)；試管苗生根後將培養瓶轉到溫室中鍛鍊一個 月，促進檀香試管苗的更加強壯。d) 試管苗移栽階段當試管苗在瓶中長到8-10 cm高時，將試管苗從瓶中取出，洗淨後將試管苗移入有寄主植物(假蒿、長春花等)的塑膠袋中培養。塑膠袋中混有塘泥、沙、 特別微生物菌劑、和生根劑(IBA+ABT)等，培養3-4個月後，移到大田栽培。實施例二1、 外植體從廣東龍珠島檀香研究基地採集的成年優質檀香植株的幼嫩腋芽；2、 培養過程a) 誘導階段檀香嫩芽外植體經75%酒精消毒10秒後，經無菌水洗2遍後，轉入0.1% 升汞中IO分鐘，最後經無水洗3次後將芽分切後轉到誘導培養基上光照培養。誘導培養基採 用MS基本培養基，附加瓊脂0.6 g L"，椰子乳60 ml L—1，蔗糖30 g L—1， pH值5.6;另加NAA 0.2 mg L"+BAP 0.5 mg !/1，每天光照50-100 p mol m_2 s—110小時。b) 繁殖階段將不定芽轉入到繁殖培養基上，每天光照120pmolm—2s—44小時，繁殖 培養基採用MS基本培養基，附加瓊脂0.6gL—1，蔗糖30gL—1， pH值5.6;另力t]BAP0.5mg L"+NAA0.1 mglZ+IBAOJingL-1, —個半月繼代一次，繁殖頻率達5-8;c) 生根階段將發育的叢芽分切轉入到生根培養基上，生根培養基採用MS基本培養基， 附加蛭石35gL—1，以利於通氣生根。蔗糖30gU1， pH值5.6;另加IBA 0.4mg L—1，每天光 照200pmolm—、_114小時，取4-5 cm以上的叢芽分切，放在該生根培養基上培養2個月； 試管苗生根後將培養瓶轉到溫室中鍛鍊一個月，促進檀香試管苗的更加強壯。d)試管苗移栽階段當試管苗在瓶中長到8-10 cm高時，將試管苗從瓶中取出，洗淨 後將試管苗移入有寄主植物(假蒿、長春花等)的塑膠袋中培養。塑膠袋中混有塘泥、沙、 特別微生物菌劑、和生根劑(IBA+ABT)等，培養3-4個月後，移到大田栽培。實施例三 1 、 外植體從華南植物園檀香園採集的成年優質檀香植株的幼嫩腋芽；2、培養過程a) 誘導階段檀香嫩芽外植體經75%酒精消毒10秒後，經無菌水洗2遍後，轉入0.1% 升汞中IO分鐘，最後經無水洗3次後將芽分切後轉到誘導培養基上光照培養。誘導培養基 釆用MS基本培養基，附加瓊月旨0.6gL"，椰子乳100mlU1，蔗糖30gL"， pH值5.8;另 力口 NAA 1.0 mg L"+BAP 2.0 mg L4，每天光照50-100 p mol m—2 s_110小時。b) 繁殖階段將不定芽轉入到繁殖培養基上，每天光照120pmolm—2s—44小時，繁 殖培養基採用MS基本培養基，附加瓊脂0.6gL—1，蔗糖30gL—1， pH值5.8;另力nBAPl.O mgL"+NAA0.5mgL"+IBA1.0mgL", —個月至一個半月繼代一次，繁殖頻率達5-8;c) 生根階段將發育的叢芽分切轉入到生根培養基上，生根培養基採用MS基本培養 基，附加培養基質蛭石40gL"，蔗糖30gL—1， pH值5.8;另加IBA 0.5 mg L—1，每天光照 200 pmolm—2s—44小時，取4-5 cm以上的叢芽分切，放在該生根培養基上培養2個月；試管苗生根後將培養瓶轉到溫室中鍛鍊一個月，促進檀香試管苗的更加強壯。d)試管苗移栽階段當試管苗在瓶中長到8-10 cm高時，將試管苗從瓶中取出，洗淨後將試管苗移入有寄主植物(假蒿、長春花等)的塑膠袋中培養。塑膠袋中混有塘泥、沙、特別微生物菌劑、和生根劑(IBA+ABT)等，培養3-4個月後，移到大田栽培。
權利要求
1.一種檀香的組織培養快繁方法，其特徵在於包括下述培養階段a)不定芽的誘導階段取十年以上成年優質檀香樹嫩芽，經消毒後轉入到繁殖培養基上培養，每天光照50-100μmol m-2s-15-14小時，直至誘導形成不定芽；所述的誘導培養基以MS基本培養基，附加瓊脂0.6g L-1，椰子乳50-100ml L-1，蔗糖30g L-1，pH值5.4-5.8為基礎，另配加NAA 0.1-1.0mg L-1+BAP 0.5-2.0mg L-1；b)叢芽繁殖階段將不定芽轉入到繁殖培養基上以建立叢芽繁殖體系，每天光照80-120μmol m-2s-110-14小時，一個月至一個半月繼代一次，所述的繁殖培養基以MS基本培養基，附加瓊脂0.6g L-1，蔗糖30g L-1，pH值5.4-5.8為基礎，另加BAP 0.5-2.0mg L-1+NAA0.1-0.5mg L-1+IBA0.5-2.0mg L-1；c)生根階段將發育至4-5cm以上的叢芽分切轉入到生根培養基上光照培養誘導生根，每天光照100-200μmol m-2s-110-14小時，培養1-2個月誘導生根，試管苗生根後將培養瓶轉到溫室中培養1-2個月以壯苗，所述的生根培養基以MS基本培養基，附加培養基質蛭石30-40g L-1，蔗糖20-30g L-1，pH值5.4-5.8為基礎，另加IBA 0.3-0.5mg L-1；d)移栽階段將長根的試管苗移栽到室外，和合適的寄主植物共同培養。
2.根據權利要求1所述的檀香組織培養快繁方法，其特徵在於所述的寄主植物為假蒿 或長春花。
全文摘要
一種檀香(Santalum album)的組織培養快繁方法，本發明以檀香樹嫩芽為外植體，通過不定芽的誘導階段、叢芽繁殖階段、生根階段和移栽階段等各培養階段，調配和優選誘導、繁殖、生根、移栽等各培養階段的培養基配方和培養條件，實現了檀香種苗的組織培養快速繁殖。可以有效解決檀香種植中的優質檀香種苗供應問題。
文檔編號A01H4/00GK101213936SQ20071003298
公開日2008年7月9日 申請日期2007年12月29日 優先權日2007年12月29日
發明者何長信, 周俊芳, 張新華, 胡玉姬, 馬國華 申請人:中國科學院華南植物園