用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法
2023-07-11 15:55:21
專利名稱：用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種用於核酸純化、蛋白分離的單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球製備方法。
背景技術：
磁性微球具有粒徑小、表面積大、磁性可根據不同需求在表面進行活性基團修飾等特點，在生物醫學領域具有廣泛的應用前景，現已廣泛應用於生物分子(核酸、蛋白)的分離純化、免疫診斷等生物醫學領域。實際應用中一般要求微球具有單分散性、粒徑大小可控、快速磁響應性等特點。磁性微球形狀和大小的均一性保證了其表面物理化學性質的一致，為與生物分子之間提供最佳的反應動力學，從而獲得高質量的結果和可重複性。磁性微球的快速磁響應速度保證了僅需較弱的外磁場即可實現快速、高效地分離與操控，適合於高通量自動化操作。專利號為02111035. 2的中國專利公開了一種二氧化矽磁性微球及其製備方法， 利用磁性粒子與聚電解質在氧化矽微球模板表面層自組裝並在最外層再包裹納米二氧化矽的磁性微球，該方法工藝繁瑣，表面自組裝效果難以穩定，無法實現大規模工業生產。專利號為200710053066. 7的中國專利公開了一種超順磁性微球及其製備方法， 在多孔或中空微球內就地合成磁性納米粒子，從而賦予微球具有磁性。該方法獲得的磁性微球粒徑大小及分布可控，不容易團聚，但是微球的磁性物質含量較低，磁響應速度較慢。專利申請號為200910200743. 2的中國專利申請公開了具有二氧化矽包覆的磁性微球的製備方法，利用納米顆粒易於在兩相溶液界面上排列形成由油溶性磁性納米顆粒穩定的水包油乳液或微乳液，並進一步在該液滴的表面發生正矽酸四乙酯的水解，形成二氧化矽包覆層。該方法獲得的磁性微球粒徑較小(50-400nm)，且粒徑分布較寬。專利號為200710100330. 8的中國專利公開了一種核殼結構磁性微球形氧化鋁及其製備方法，將Me2+、Fe2+及引入水滑石層板製備Me-Fe2+-Fe3+-LDHs層狀前驅體，經高溫焙燒後形成尖晶石型鐵氧體Mei^e2O4,再利用Na2SiO3 · 9H20或矽酸酯水解在Mei^e2O4表面包覆一層S^2保護層，然後利用有機醇鋁水解法在其表面多次包覆氧化鋁層，最終得到磁性微球形氧化鋁Mei^e2O4-SiO2-Al2O3。該方法獲得的磁性微球形貌較差，顆粒之間團聚嚴重， 很難獲得穩定的應用測試結果。專利號為200610017068. 6的中國專利公開了單分散二氧化矽包覆的中空結構磁性微球及其製備方法，以表面帶有功能基團的單分散聚合物微球為模板，利用聚合物表面的功能基團與磁性納米粒子間的配位作用使它們複合，然後溶膠-凝膠法包覆二氧化矽殼層，再將複合粒子高溫煅燒，得到了單分散二氧化矽包覆的中空結構磁性微球。此方法獲得的微球粒徑均勻，但磁含量較低、工藝繁瑣、微球團聚嚴重，不適合工業化生產及應用。 Younan Xia等在Nano letteH2002，Vol2，No. 3，183-186)發表的「Modifying the surfaceproperties of superparamagnetic iron oxidenanoparticles through a sol-gel approach」報導了利用溶膠-凝膠方法，在單個顆粒表面包覆氧化矽得到了單分散的氧化矽磁性微球。此方法合成出來的微球磁含量很低，磁響應速度非常慢，無法滿足實際應用。現有的磁性微球製備技術無法同時實現快速磁響應、單分散粒徑可控(0. 5 50um)的要求，無法滿足生物分離、檢測對純化效率、高靈敏度、高通量的要求。
發明內容
本發明的目的是克服現有技術存在的不足，提供一種用於核酸純化、蛋白分離的單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球的製備方法。本發明的目的通過以下技術方案來實現用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，包括以下步驟1)首先將親水性磁性納米粒子均勻地分散在水中，置於50 90°C的恆溫水浴中， 邊攪拌邊加入氨水和0. 01 20. Owt%表面化學修飾劑，經過1 6小時表面化學修飾後， 升溫至65 95°C並敞開反應體系將過量的氨水蒸發完全，經過洗滌和真空乾燥後得到表面親油疏水性的磁性納米粒子粉末；將粉末再分散到有機溶劑中，得到磁性納米粒子有機溶劑分散液，磁性納米粒子的濃度為0. 1 30wt% ；2)將得到的0. 1 30wt%的磁性納米粒子有機溶劑分散液即油相，在0. 01 LOMI^a保護氣體保護條件下從模板微孔分散器擠出，與含有0.01 10. Owt %表面活性劑的水溶液即水相相接觸，逐步生長成油滴；油滴在剪切作用下最終脫離模板微孔分散器表面進入水相中，形成單分散的懸浮液；將懸浮液置於減壓反應器中，於30 60°C減壓蒸發掉油滴中的有機溶劑，使得富含磁性納米粒子的油滴收縮成磁性粒子組合體；3)採用溶膠-凝膠方法對磁性納米粒子組合體進行氧化矽包覆，以水和有機醇的混合液為溶劑，混合液中水與有機醇的質量比8 1 1 8，氨水為催化劑，正矽酸四乙酯為形成殼層的矽源，以磁性納米粒子組合體為待包覆的基核；將計量的正矽酸四乙酯充分溶解在有機醇中，加入到預先溶解氨水的磁性納米粒子組合體的水懸浮液中，充分攪拌，於室溫反應12 48小時，經洗滌和80 200°C真空乾燥後，得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球。進一步地，上述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法， 其中，步驟1)所述的親水性磁性納米粒子為Fe、Co、Ni、Mn、Fe3O4, y -Fe203> FeCo合金、半導體納米晶中的一種或多種的混合物。步驟1)所述的表面化學修飾劑為十一烯酸、十八烯酸、油菜酸、扁油酸、蓖麻油酸、棕櫚油酸、亞油酸、4-乙基辛酸、鯊油酸、亞麻酸中的一種或多種的混合物。步驟1)所述的有機溶劑為環己烷、正己烷、正庚烷、環庚烷、正辛烷、異辛烷、甲苯、二甲苯、環丁酮、甲基乙基酮、戊酮中的一種或多種的混合物。步驟幻所述的表面活性劑為十二烷基硫酸鈉、聚乙烯醇、吐溫20、吐溫80、十二烷基苯磺酸納、油酸山梨醇酯、 十六烷基三甲基溴化銨中的一種或多種的混合物。步驟幻所述的保護氣體為氮氣。步驟 3)所述的有機醇為甲醇、異丙醇、丙醇、乙醇中的一種。步驟幻獲得的氧化矽磁性微球的粒徑為0. 5 50 μ m。本發明技術方案突出的實質性特點和顯著的進步主要體現在本發明採用表面化學修飾劑改性磁性納米粒子，利用模板法製備磁性納米粒子組合體，採用溶膠-凝膠方法對組合體進行氧化矽包覆，最終得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球。製備的氧化矽磁性微球具有粒徑均一、尺寸可控、磁響應速度快的特點，易實現工業化規模生產，可廣泛應用於生物分離、檢測等領域。本發明結合磁性納米粒子自組裝、懸浮液穩定機制和溶膠-凝膠技術，突破了傳統方法製備磁性微球所面臨的磁性含量低、氧化矽包覆過程易發生不可逆團聚、微球粒徑大小及分布難以控制等瓶頸問題。
下面結合附圖對本發明技術方案作進一步說明圖1 實施例1獲得的氧化矽磁性微球在5千倍率下的照片；圖2 實施例1獲得的氧化矽磁性微球在2萬倍率下的照片。
具體實施例方式本發明採用表面化學修飾劑改性磁性納米粒子獲得具有親油疏水性的表面並分散在有機溶劑中，然後利用模板法高壓剪切作用製備富含磁性納米粒子的油滴，並藉助於表面活性劑所賦予的靜電、空間位阻效應穩定油滴懸浮於水中，通過緩慢蒸髮油滴中的有機溶劑使其逐步收縮成磁性納米粒子組合體，然後以上述獲得的磁性納米粒子組合體為基核，採用溶膠-凝膠方法對該組合體進行氧化矽包覆，形成一層厚度均勻、大小可控的氧化矽殼層，經過多次乙醇洗、水洗後，最終得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球。具體工藝流程是1)利用高速分散機的強烈剪切作用將親水性磁性納米粒子均勻地分散在水中，親水性磁性納米粒子為Fe、Co、Ni、Mn、Fe3O4, y-Fe203> FeCo合金、半導體納米晶中的一種或多種的混合物，置於50 90°C的恆溫水浴中，邊攪拌邊加入氨水和 0.01 20. 表面化學修飾劑，表面化學修飾劑為十一烯酸、十八烯酸、油菜酸、扁油酸、蓖麻油酸、棕櫚油酸、亞油酸、4-乙基辛酸、鯊油酸、亞麻酸中的一種或多種的混合物，經過1 6小時表面化學修飾後，表面化學修飾可以在合成磁性納米粒子過程中進行，也可以是對直接採購市售現成的磁性納米粒子進行修飾，升溫至65 95°C並敞開反應體系將過量的氨水蒸發完全，經過洗滌和真空乾燥後得到表面親油疏水性的磁性納米粒子粉末；將粉末再分散到有機溶劑中，有機溶劑為環己烷、正己烷、正庚烷、環庚烷、正辛烷、異辛烷、甲苯、二甲苯、環丁酮、甲基乙基酮、戊酮中的一種或多種的混合物，得到磁性納米粒子的有機溶劑分散液，磁性納米粒子的濃度為0. 1 30wt% ；2)將得到的0. 1 30wt%的磁性納米粒子有機溶劑分散液(稱為油相)通過氮氣壓力裝置於0. 01 1. OMI^a壓力下從模板微孔分散器擠出，與含有0. 01 10. Owt %表面活性劑的水溶液(稱為水相)接觸，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉(SDS)、聚乙烯醇(PVA)Ji 溫20(Tween 20)、吐溫80 (Tween 80)、十二烷基苯磺酸納、油酸山梨醇酯(Span 80)、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)中的一種或多種的混合物，逐步生長成一定尺寸的油滴；油滴在剪切作用下最終脫離模板微孔分散器表面進入水相中，形成單分散的懸浮液；將上述懸浮液置於減壓反應器中，於30 60°C減壓蒸發掉油滴中的有機溶劑，使得富含磁性納米粒子的油滴收縮成磁性粒子組合體；3)採用溶膠-凝膠方法對磁性納米粒子組合體進行氧化矽包覆，溶膠-凝膠方法進行殼層包覆中有機醇為甲醇、異丙醇、丙醇、乙醇中的一種。以質量比8 1 1 8的水和有機醇為溶劑，氨水為催化劑，正矽酸四乙酯為形成殼層的矽源，以磁性納米粒子組合體為待包覆的基核；將計量的正矽酸四乙酯充分溶解在有機醇中，加入到預先溶解氨水的磁性納米粒子組合體的水懸浮液中，充分攪拌，於室溫反應12 48小時，經洗滌和80 200°C真空乾燥後，得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球，氧化矽磁性微球的粒徑為0. 5 50 μ m。實施例11)製備!^e3O4磁性納米粒子及表面修飾用高速分散機將50g !^e3O4納米粒子分散於250ml去離子水中，混勻後倒入三口燒瓶，並置於50°C水浴中，充氮氣，攪拌0.5小時後，將IOg氨水加入反應體系中開始反應。10 分鐘後加入0. 005g十一烯酸。1小時後將水浴升溫到65°C後，敞開三口瓶並保溫1小時， 待氨水全部蒸發出來後結束反應。磁鐵吸附分離出黑色的固體，然後用水和無水乙醇反覆各洗三次後，50°C真空乾燥，得到F^O4粉末，備用。2)製備!^e3O4磁性納米粒子組合體取SDS溶解於去離子水中配成0.01wt%的水溶液，並調整pH值為9.0。取一定量的I^e3O4粉末分散到環己烷中配成環己烷分散液，Fe3O4固含量為0. 。將0. Iwt% !^e3O4環己烷分散液通過氮氣壓力裝置於0. OlMPa壓力下從模板微孔反應器擠出，與含有0. Olwt %表面活性劑SDS的水溶液接觸，形成單分散的油滴懸浮液。將上述懸浮液置於減壓反應器中，於30°C減壓蒸發掉油滴中的環己烷，使得含有!^e3O4的油滴收縮成磁性納米粒子組合體。3)溶膠-凝膠方法包覆殼層於500mL圓底燒瓶中依次加入0. 25g磁性納米粒子組合體、200g去離子水、250g 無水乙醇，5mL 25wt%的濃氨水和2. 5mL正矽酸四乙酯，充分攪拌30分鐘，於室溫反應12 小時，再將得到的產物用去離子水、無水乙醇各洗滌三次，200°C真空乾燥2小時，最終得到平均粒徑約為500nm的氧化矽磁性微球，氧化矽包覆厚度約為lOnm。從圖1和圖2可以看出，微球平均粒徑為500nm，粒徑CV值小於5%。實施例21) Fe3O4磁性納米粒子製備及表面修飾用高速分散機將50g Fe3O4納米粒子分散於250ml去離子水中，混勻後倒入三口燒瓶，並置於75°C水浴中，充氮氣，攪拌0.5小時後，將IOg氨水加入反應體系中開始反應。10 分鐘後加入0. 5g十八烯酸。1小時後將水浴升溫到85°C，散開三口瓶並保溫1小時，待氨水全部蒸發出來後結束反應。磁鐵吸附分離出黑色的固體，然後用水和無水乙醇反覆各洗三次後，50°C真空乾燥，得到Fe53O4磁性納米粒子粉末，備用。2)製備!^e3O4磁性粒子組合體取PVA溶解於去離子水中配成0.5wt%的水溶液，並調整pH值為9. O。取一定量的狗304粉末分散到正庚烷中，配成正庚烷分散液，Fe3O4固含量為1. Owt %。將得到的1.0Wt%的磁性納米粒子正庚烷分散液通過氮氣壓力裝置於0. IMI^a壓力下從模板微孔反應器擠出，與含有PVA的水溶液接觸進入水溶液，從而形成單分散的油滴懸浮液。將上述懸浮液置於減壓反應器中，於45°C蒸髮油滴中的正庚烷，使得含有磁性納米粒子的油滴收縮成組合體。
3)溶膠-凝膠方法包覆殼層向500mL圓底燒瓶中依次加入0. 25g磁性粒子組合體、IOOg去離子水、250g異丙醇、5mL 25wt%的濃氨水和2mL正矽酸四乙酯，充分攪拌，於室溫反應M小時，再將得到的產物分別用無水乙醇、去離子水、無水乙醇各洗滌三次，200°C真空乾燥2小時，最終得到平均粒徑約為1. 0 μ m的氧化矽磁性微球，氧化矽包覆厚度約為lOnm。實施例31) Fe3O4磁性納米粒子製備及表面修飾用高速分散機將50g Fe3O4納米粒子分散於250ml去離子水中，混勻後倒入三口燒瓶，並置於90°C水浴中，充氮氣，攪拌0.5小時後，將IOg氨水加入反應體系中開始反應。10 分鐘後加入IOg亞麻酸。1小時後將水浴升溫到95°C，敞開三口瓶並保溫1小時，待氨水全部蒸發出來結束反應。磁鐵吸附分離出黑色的固體，然後用水和無水乙醇反覆各洗三次後， 50°C真空乾燥，得到磁性納米粒子粉末，備用。2)製備磁性粒子組合體取吐溫80溶解於去離子水中配成5. Owt%的水溶液，並調整pH值為9. O。取一定量I^e3O4分散到甲基乙基酮中Je3O4固含量為IOwt %。將得到的10wt%的磁性納米粒子甲基乙基酮分散液通過氮氣壓力裝置於1. OMPa 壓力下從模板微孔反應器擠出，與含吐溫80的水溶液接觸進入水溶液，從而形成單分散的油滴懸浮液。將上述油滴懸浮液置於減壓反應器中，於60°C減壓蒸髮油滴中的甲基乙基酮， 使得含有磁性納米粒子的油滴收縮成組合體。3)溶膠-凝膠方法包覆殼層於500mL圓底燒瓶中依次加入0. 25g組合體、30g去離子水，240g丙醇，充分攪拌， 再加入5mL 25wt%的濃氨水和ImL正矽酸四乙酯，於室溫反應48小時，再將得到的產物用去離子水、無水乙醇各洗滌三次，200°C真空乾燥2小時，最終得到平均粒徑約為5um的氧化矽磁性微球，氧化矽包覆厚度約為lOnm。實施例41) FeCo磁性納米粒子製備及表面修飾採用市售已經製備好的的i^eCo磁性納米粒子。於三口燒瓶中加入250ml去離子水和35g FeCo磁性納米粒子，置於80°C恆溫水浴，充氮氣，攪拌0. 5小時後將IOg氨水加入反應體系，10分鐘後加入7g十八烯酸。1小時後將水浴升溫到95°C，敞開三口瓶並保溫 1小時，待氨水全部蒸發出來結束反應。磁鐵吸附分離出黑色的固體，然後用水和無水乙醇反覆各洗三次後，50°C真空乾燥，得到表面修飾的i^eCo磁性納米粒子粉末，備用。2)製備磁性粒子球狀組合體取吐溫20溶解於去離子水中配成10. Owt %的水溶液，並調整pH值為9.0。取一定量的!^Co分散到正辛烷中，FeCo固含量為30wt%。將得到的30wt%的磁性納米粒子正辛烷分散液通過氮氣壓力裝置於1. OMI^a壓力下從模板微孔反應器擠出，與含吐溫20的水溶液接觸，進入水溶液形成單分散的油滴懸浮液。將上述懸浮液置於減壓反應器中，於40°C減壓蒸髮油滴中的正辛烷，使得含有磁性納米粒子的油滴收縮成組合體。3)溶膠-凝膠方法包覆殼層
向500ml圓底燒瓶中依次加入0. 25g組合體、50克去離子水、250g異丙醇、7mL 25wt %的濃氨水和0. 5mL正矽酸四乙酯，攪拌，於室溫反應48小時，再將得到的產物分別用無水乙醇、去離子水、無水乙醇各洗滌三次，200°C真空乾燥2小時，最終得到平均粒徑約為 15um的氧化矽磁性微球，氧化矽包覆厚度約為lOnm。實施例51) Fe磁性納米粒子製備及表面修飾採用市售已經製備好的的!^e磁性納米粒子。於三口燒瓶中加入250ml去離子水和20g Fe磁性納米粒子，置於90°C恆溫水浴，充氮氣，攪拌0. 5小時後加入IOg氨水，10分鐘後加入2g十八烯酸。1小時後將水浴升溫到95°C，敞開三口瓶並保溫1小時，將燒瓶敞口使氨水全部蒸發出來結束反應。磁鐵吸附分離出黑色的固體，然後用水和無水乙醇反覆各洗三次後，50°C真空乾燥，得到表面修飾的!^e磁性納米粒子粉末，備用。2)製備磁性粒子球狀組合體取SDBS溶解於去離子水中配成5. Owt%的水溶液，並調整pH值為9. O。取一定量的狗分散到丙酮中液，Fe固含量為10. Owt%。將含10. Owt %磁性納米粒子的丙酮分散液通過氮氣壓力裝置於0. 2MPa壓力下從模板微孔反應器擠出，與含SDBS的水溶液接觸，進入水溶液形成單分散的油滴懸浮液。將上述懸浮液置於減壓反應器中，於30°C減壓蒸髮油滴中的丙酮，使得含有磁性納米粒子的油滴收縮成組合體。3)溶膠-凝膠方法包覆殼層向500ml圓底燒瓶中依次加入0. 25g組合體、80克去離子水、240g甲醇、7mL 25wt %的濃氨水和0. 2mL正矽酸四乙酯，攪拌，於室溫反應48小時，再將得到的產物分別用無水乙醇、去離子水、無水乙醇各洗滌三次，200°C真空乾燥2小時，最終得到平均粒徑約為 5um的氧化矽磁性微球，氧化矽包覆厚度約為lOnm。將實施例2獲得的氧化矽磁性微球與現有產品進行性能對比，如表1。表 權利要求
1.用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於包括以下步驟1)首先將親水性磁性納米粒子均勻地分散在水中，置於50 90°C的恆溫水浴中，邊攪拌邊加入氨水和0. 01 20. Owt%表面化學修飾劑，經過1 6小時表面化學修飾後，升溫至65 95°C並敞開反應體系將過量的氨水蒸發完全，經過洗滌和真空乾燥後得到表面親油疏水性的磁性納米粒子粉末；將粉末再分散到有機溶劑中，得到磁性納米粒子有機溶劑分散液，磁性納米粒子的濃度為0. 1 30wt% ；2)將得到的0.1 30wt%的磁性納米粒子有機溶劑分散液即油相，在0. 01 1. OMPa 保護氣體保護條件下從模板微孔分散器擠出，與含有0. 01 10. 0wt%表面活性劑的水溶液即水相相接觸，逐步生長成油滴；油滴在剪切作用下最終脫離模板微孔分散器表面進入水相中，形成單分散的懸浮液；將懸浮液置於減壓反應器中，於30 60°C減壓蒸發掉油滴中的有機溶劑，使得富含磁性納米粒子的油滴收縮成磁性粒子組合體；3)採用溶膠-凝膠方法對磁性納米粒子組合體進行氧化矽包覆，以水和有機醇的混合液為溶劑，混合液中水與有機醇的質量比8 1 1 8，氨水為催化劑，正矽酸四乙酯為形成殼層的矽源，以磁性納米粒子組合體為待包覆的基核；將計量的正矽酸四乙酯充分溶解在有機醇中，加入到預先溶解氨水的磁性納米粒子組合體的水懸浮液中，充分攪拌，於室溫反應12 48小時，經洗滌和80 200°C真空乾燥後，得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球。
2.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟1)所述的親水性磁性納米粒子為!^e、Co、Ni、Mn、Fe304、γ-Fe2O3、FeCo 合金、半導體納米晶中的一種或多種的混合物。
3.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟1)所述的表面化學修飾劑為十一烯酸、十八烯酸、油菜酸、扁油酸、蓖麻油酸、棕櫚油酸、亞油酸、4-乙基辛酸、鯊油酸、亞麻酸中的一種或多種的混合物。
4.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟1)所述的有機溶劑為環己烷、正己烷、正庚烷、環庚烷、正辛烷、異辛烷、甲苯、二甲苯、環丁酮、甲基乙基酮、戊酮中的一種或多種的混合物。
5.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟幻所述的表面活性劑為十二烷基硫酸鈉、聚乙烯醇、吐溫20、吐溫80、 十二烷基苯磺酸納、油酸山梨醇酯、十六烷基三甲基溴化銨中的一種或多種的混合物。
6.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟2)所述的保護氣體為氮氣。
7.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟3)所述的有機醇為甲醇、異丙醇、丙醇、乙醇中的一種。
8.根據權利要求1所述的用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，其特徵在於步驟幻獲得的氧化矽磁性微球的粒徑為0. 5 50 μ m。
全文摘要
本發明涉及用於核酸純化、蛋白分離的單分散氧化矽磁性微球的製備方法，先採用表面化學修飾劑改性磁性納米粒子獲得具有親油疏水性的表面並分散在有機溶劑中，利用模板法高壓剪切作用製備富含磁性納米粒子的油滴，並藉助於表面活性劑所賦予的靜電、空間位阻效應穩定油滴懸浮於水中，通過緩慢蒸髮油滴中的有機溶劑使其逐步收縮成磁性納米粒子組合體，以上述獲得的磁性納米粒子組合體為基核，採用溶膠-凝膠方法對該組合體進行氧化矽包覆，形成厚度均勻、大小可控的氧化矽殼層，經過多次乙醇洗、水洗後，最終得到單分散粒徑可控、核殼結構的氧化矽磁性微球。本發明製備的氧化矽磁性微球具有粒徑均一、磁響應速度快等特點，易實現工業化規模生產。
文檔編號C12N15/11GK102151527SQ20101055607
公開日2011年8月17日 申請日期2010年11月23日 優先權日2010年11月23日
發明者劉照關, 範新文 申請人:蘇州照康生物技術有限公司