碳2位取代型頭孢菌素衍生物及其合成方法與應用的製作方法

2023-07-07 02:28:41 1

專利名稱：：碳2位取代型頭孢菌素衍生物及其合成方法與應用的製作方法
技術領域：
：本發明屬於藥物合成
技術領域：
，涉及取代型頭孢菌素衍生物，特別是一類新的具有抗菌活性和13-內醯胺酶抑制能力的碳2位取代型頭孢菌素衍生物及其合成方法與應用。
背景技術：
：頭孢菌素是一類廣譜半合成抗生素，興起於20世紀60年代中期，80年代達到高潮。共合成5萬餘種，得到了50餘種廣譜、高效、長效、耐酶的半合成頭孢菌素。在抗感染治療中頭孢菌素以其菌譜廣,抗菌活力強,耐酸,耐酶,療效高,毒副作用相對較小等優點而廣泛應用於臨床,為人類戰勝各種細菌感染作出極大的貢獻。頭孢菌素的品種根據抗菌譜、抗菌活性、對6-內醯胺酶的穩定性以及腎毒性分類，已從第一代發展至第四代。進入20世紀90年代後，其發展趨勢已日漸平穩，但臨床廣泛的應用使得耐藥性菌引起的傳染病呈上升趨勢。有資料顯示，一些革蘭氏陰性桿菌，如克雷白桿菌、摩根桿菌、腸桿菌和不動桿菌等，對第三代頭孢菌素的耐藥率已達到70%80%左右。流感桿菌對第三代頭孢菌素的耐藥率已從1.7%增至7%，且有不斷上升態勢。近年來流感桿菌對第三代頭孢菌素的耐藥率己達到31.7%,由此可見，頭孢菌素的耐藥問題已成為目前十分嚴重的臨床問題。由於現有藥物尚難有效控制此等耐藥菌感染，促使藥物化學家努力研製新型抗耐藥性細菌藥物，設計並篩選具有新化學結構、新作用機制或新作用靶位的新抗菌藥。通過改造頭孢菌素結構從而獲得新型頭孢菌素衍生物是解決菌種耐藥性的有效方法。如對頭孢母核7位側鏈的改造；3位引入各種官能團以修飾原有結構；l位硫原子用生物電子等排體-O-、-碳112-取代的新6-內醯胺抗生素。但關於碳-2位取代的頭孢菌素類化合物在J3-內醯胺類抗生素中一直未進行深入探討，原因是在早期研究中發現該類化合物僅具有中等抗菌活性。但是自從人白細胞胰蛋白酶和B-內醯胺酶抑制劑被發現後，這種狀況大大改變。碳-2位取代的頭孢菌素類化合物可以增強對人白細胞胰蛋白酶和fi-內醯胺酶的抑制能力。若l-位硫為氧化形式，其抑制能力更強。
發明內容本發明的一個目的是提供一系列碳-2位取代型頭孢菌素衍生物。本發明的另一目的是提供碳-2位取代型頭孢菌素衍生物的製備方法。它以GCLE及其衍生物為原料，分別經Mannich縮合引入雙鍵、甲基化反應及在Mannich縮合基礎上進行的Michael加成反應對頭孢菌素母核的2位進行了修飾，得到一系列碳-2位取代的新化合物。本發明的再一目的是提供碳-2位取代型頭孢菌素衍生物作為活性成分的藥物組合物。本發明的還一個目的是提供碳-2位取代1位亞碸型頭孢菌素衍生物在治療金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌藥物方面的應用。本發明已成功合成一系列在碳-2位具有取代基的頭孢菌素衍生物以及1位S為亞碸形式的頭孢菌素衍生物，其通式如下碳-2位取代型頭孢菌素衍生物，其特徵用如下通式表示其中，&為16個碳原子的直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基、210個碳的有機酸酯取代烷基；R2為16個碳原子的直鏈垸基或19個含有氮、硫、氧等雜原子的直鏈或雜環烷基；R3為獨立氫原子、16個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、被12個碳原子的烷基取代的或未取代的37個碳原子的環烷基或取代及未取代的苄基；X為碳、硫、氧、亞碸等雜原子。通式(I)化合物優選以下結構化合物7formulaseeoriginaldocumentpage8R,選自甲基；亞甲基；二甲基；二乙氧甲醯基乙基；2-乙氧甲醯基-2-乙醯基乙R2為1-甲基四氮唑基-5-巰甲基；R3為獨立氫原子苄基；X選自硫原子；亞碸基。一系列碳-2位取代型頭孢菌素衍生物，優選的化合物化學名稱如下7-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸(以下簡稱化合物A);7-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(化合物B);7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸(以下簡稱化合物C);7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(以下簡稱化合物D);7-苯乙醯氨基-3-U-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸(以下簡稱化合物E);7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(以下簡稱化合物F);7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸(以下簡稱化合物G);7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(以下簡稱化合物H);碳2位取代型頭孢菌素衍生物的製備方法，包括以下步驟-(1)將GCLE(X)或(X')與溶劑溶解的甲巰四氮唑、有機鹼反應，得到化合物(II);(X)(x')(2)化合物(II)與酸酐及氧化劑反應得到化合物(III);R3\tiR3、(II)(III)(3)化合物(III)與有機鹼以摩爾比為l:2-4進行Mannich縮合反應，得到化合物(IV);R3\HVR3、(IV)(V)(4)將化合物固體(IV)還原得化合物固體(V)或將化合物固體(IV)與有機酸酯進行Michael加成反應，得產物(VI);formulaseeoriginaldocumentpage10(VI)formulaseeoriginaldocumentpage10(VII)(6)將化合物固體(VI)以還原劑還原後處理得化合物固體(VII);其中的R3為獨立氫原子、16個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、被12個碳原子的垸基取代的或未取代的37個碳原子的環垸基或取代及未取代的苄基。典型的(M)，(N)化合物的製備方法步驟如下(1)將甲巰四氮唑以適量溶劑溶解，滴加有機鹼。(2)將步驟1所得的澄清溶液與7-苯乙醯氨基一3-氯甲基一頭孢一3-烯一4-酸對甲氧基苄酯(GCLE)或GCLE衍生物反應。(3)用無機鹼溶液洗滌步驟2所得的反應液至中性。濃縮乾燥得固體。(4)將步驟3所得固體以適當有機溶劑溶解。滴加酸酐及過氧化氫氧化劑反應。(5)反應完畢以無機鹼中和步驟4反應液。過濾得固體。(6)步驟5所得固體與二乙胺進行Mannich縮合的摩爾比為1:4，優選1:2。反應溫度控制在306(TC，優選5053。C。反應時間為14h，優選2h。得化合物固體。(7)將步驟6所得產物以還原刑還原處理得化合物固體或將步驟6所得產物與有機酸酯進行Michael加成反應，產物以還原劑還原處理得化合物固體。其中可選用合適的有機溶劑有二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、甲苯等；可選用的有機鹼有三乙胺、三丁胺、二乙胺、苯胺、四甲基胍等；可選用的酸酐有乙酸酐、丙酸酐等；可選用的無機鹼有碳酸氫鈉、碳酸鈉、氨水、氫氧化鈉溶液；氧化劑係指過氧化氫、過氧乙酸；還原劑係指三氯化磷。典型的(M)，(N)化合物合成路線如下:(vn)其中的R3為獨立氫原子、16個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、被12個碳原子的垸基取代的或未取代的37個碳原子的環垸基或苯基。本發明化合物AD的製備方法步驟如下X為硫原子或亞碸基團；R3為獨立氫原子或苄基。(1)將甲巰四氮唑以適量溶劑溶解。05'C下滴加有機鹼。(2)將步驟1所得的澄清溶液與7-苯乙醯氨基一3-氯甲基一頭孢一3-烯一4-酸對甲氧基苄酯(GCLE)或其衍生物反應l~12h。以無機鹼溶液洗滌反應液至中性。濃縮乾燥得固體。(3)將步驟2所得固體以適當有機溶劑溶解。05"C下滴加酸酐及過氧化氫反應。(4)反應05h，以無機鹼中和步驟3反應液。過濾得固體。(5)步驟4所得固體與二乙胺進行Mannich縮合的摩爾比為1:2。反應溫度控制在53°C。反應時間為2h。將反應液滴入適量水中過濾得化合物A(C)固體。(6)將步驟5所得產物以適量有機溶劑溶解，05'C加入三氯化磷還原劑反應l~5h，水洗後以有機溶劑提取，濃縮得化合物B(D)固體。PCI,B(D)化合物E~H的製備方案步驟如下:為二乙氧甲醯基乙基、2-乙氧甲醯基、2-乙醯基乙基。1、將有機酸酯以適量有機溶劑混合，溶解。2、05'C條件下，滴加有機鹼，與化合物碳進行加成反應。3、反應02h後，加水終止反應。R30A(C)Mannich0134、以有機溶劑提取，水洗，乾燥有機層，濃縮得化合物固體E(G)。5、將步驟4產物固體以有機溶劑溶解，05'C加入還原劑。6、反應l5h，加水終止反應，水洗，合併有機層，乾燥濃縮得化合物固體F(H)。(G)冊本發明進一步公開了碳-2位取代型頭孢菌素衍生物的系列化合物作為抗菌劑在治療感染性疾病藥物中的應用，例如金黃色葡萄球菌(ATCC29213),肺炎克雷白桿菌等,引起的上呼吸道感染，皮膚軟組織感染，急性支氣管炎，肺炎等等。具體藥理實驗如下一、微量稀釋法測定本發明的8種新化合物對標準菌的最小抑菌濃度樣品化合物固體AH對照品LXI—頭孢克肟；LXII—頭孢地尼；Lxm—頭孢唑啉。試劑二甲基亞碸(DMSO),無菌生理鹽水培養基M-H肉湯培養基，M-H瓊脂培養基菌株標準金黃色葡萄球菌(ATCC29213);標準肺炎克雷白桿菌(ATCC-26114-7)均購自中國生物製品鑑定所(北京)。藥液的配製精確稱量1.6mg樣品，加l-2mLDMSO溶解後，加生理鹽水稀釋到5mL，用0.22iim直徑濾膜過濾除菌得2mL，再用無菌生理鹽水稀釋到5mL，得到濃度為128ng/mL的藥液，然後用肉湯培養基進行倍比稀釋得到濃度為64,32，16,8,4,2ug/mL的藥液備用。菌液的配製在無菌條件下，用無菌接種環取2-3個溼潤的菌落，加入到5mL生理鹽水中，濁度相當於第一個麥氏管的濁度，此時，菌液中的細菌含量是lX108CFU/mL備用o樣品的測定:在96孔板上的第A行與第H行分別加入200uL的肉湯培養基和200yL的菌液作為對照，第1列-第8列依次加入8個樣品，濃度從B到G由大到小(32,16,8,4，2,1)樣品及對照品對標準菌的MIC(嗎/mL)化合物標準金黃色葡萄球菌標準肺炎克雷白桿菌LXI<12LXII<1<1LXIII<132B88C41615D32H832結果本類結構具有抗G+菌的抑制作用。其中，化合物D對標準金黃色葡萄球菌的抗菌活性較優。二、定量測定本發明新化合物對6種臨床耐藥菌的抑菌活性樣品LXIII—頭孢唑啉、化合物D對照品萬古黴素試劑二甲基亞碸(DMSO)，無菌生理鹽水培養基M-H肉湯培養基，M-H瓊脂培養基菌株臨床金葡分離菌株(520，092615，0721，1264，1026，2)藥液的配製精確稱量1.6mg樣品，加l-2mLDMSO溶解後，加生理鹽水稀釋到5mL，用0.22ym直徑濾膜過濾除菌得2mL，再用肉湯稀釋到5mL，得到濃度為128yg/mL的藥液，然後用肉湯培養基進行倍比稀釋得到濃度為64,32，16，8，4，2ng/mL的藥液備用。菌液的配製在無菌條件下，用無菌接種環取2-3個溼潤的菌落，加入到5mL生理鹽水中，濁度相當於第一個麥氏管的濁度，此時，菌液中的細菌含量是lX108CFU/mL備用。樣品的測定；在96孔板上的第A行與第H行分別加入200UL的肉湯培養基和200"L的菌液作為對照，第1歹i」-第8列依次加入8個樣品，濃度從B到G由大到小(32,16,8,4，2,1).結果樣品及對照品對6種臨床耐藥菌的MIC(ng/mL)臨床菌520092615721126410262對照品萬古黴素<1<1<1<1<1<1對照品Lxin<132>32>32>32DS4164>32>32結果化合物D對這6;種臨床耐藥菌抑菌活'B三、本發明8種新化合物對P-內醯胺酶作用的影響樣品化合物AH對照品LXIII—頭孢唑啉。試劑二甲基亞碸(DMSO),PBS緩衝液(pH-6)培養基M-H肉湯培養基，M-H瓊脂培養基菌株臨床金葡分離菌株(0721、1264、1026、1226)藥液的配製精確稱量0.375mg樣品，加l-2mLDMS0溶解後，加滅菌的PBS緩衝液稀釋到5mL，得到濃度為75iig/mL的藥液，用0.22um直徑濾膜過濾除菌得2mL，再用PBS緩衝液稀釋到5mL，然後用肉湯培養基進行稀釋得到濃度為30，10,10/3yg/mL的藥液備用。菌液的配製在無菌條件下，用無菌接種環取2-3個溼潤的菌落，加入到5mL生理鹽水中，濁度相當於第一個麥氏管的濁度，此時，菌液中的細菌含量是lX10sCFU/mL備用。樣品的測定取2個96孔板，在96孔板上的第l-4列與7-10列分別加入100iiL的2種菌液，第5,11列加入200nL的菌液作為對照，第6列加入肉湯200iiL。向第1，7列分別加入100yL的LXIII,按照A-F順序依次向2-4列，8-10列按照濃度由低至高加入樣品60ixL，以及40yL的LXIII，此時樣品終濃度為1,3,9iig/mL，LXIII終濃度為5yg/mL，將96孔板放入培養箱24小時後觀察結果。結果含5嗎/mLLXIII的樣品對4種臨床耐藥菌的MIC(嗎/mL)tableseeoriginaldocumentpage17結果含5嗎/mL對照品LXIII的化合物A和化合物C兩個樣品對4種臨床菌抗菌活性較好，從而顯出對)3-內醯胺酶的抑制能力較強。生物活性測定結果顯示在本發明涉及的碳2位取代型頭孢菌素衍生物顯示出對G+菌的活性，尤其是化合物結構中1-位為硫形式、2-位為亞甲基形式、7位為苯乙醯氨基形式的化合物(化合物D)對標準菌的抗菌活性較優，但對臨床耐藥菌的抗菌活性相對較弱。顯示出本發明化合物具有的抗菌藥物用途。本發明的碳2位取代型頭孢菌素衍生物的生物活性測定結果還顯示出對P-內醯胺酶具有較強的結合能力，尤其當結構中1位亞碸形式的化合物(化合物A和化合物C)強於1位硫形式的化合物。本發明的化合物與己上市的頭孢菌素類藥物採取的是協同試驗方法測定對臨床耐藥菌的MIC，數據顯示出對恢復已上市的頭孢菌素類藥物(頭孢唑啉)對耐藥菌的敏感性有一定的效果，從而顯示出成為P-內醯胺酶抑制劑的用途。本發明公開了一種藥物組合，它包括含有通式(M、N)的化合物為活性成分以及藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組成的藥用組合物。本發明的系列化合物通常是以藥物組合物的形式服用的，可口服或非口服給藥，或者以和藥學上可接受的載體、賦形劑及其它添加劑形成的化合物(如片劑、緩釋製劑、膠囊劑、注射劑、溶液劑)安全的口服或非口服給藥。當口服給藥時，組合物可配製成片劑、糖衣劑或膠囊。為製備口服藥物組合物可採用乳糖或澱粉做載體，明膠，羧甲基纖維素鈉，甲基纖維素、聚乙烯吡咯垸酮等是合適的結合劑或成顆劑。作為崩解劑可選用澱粉或微晶纖維素，常以滑石粉，膠體矽膠，硬脂酸甘油酯，硬脂酸鈣或鎂等作為合適的抗粘合劑和潤滑劑。例如，可通過壓制溼顆粒來製備片劑。活性成分與載體以及選擇性的與一份崩解添加劑組成混合物，該混合物與粘合劑的含水溶液，醇性或含水醇性溶液在合適的設備中進行顆粒化，乾燥顆粒隨後加入其它的崩解劑，潤滑劑和抗粘劑將此混合物壓片。本發明的系列化合物可以注射劑形式給藥，雖然劑量依治療對象、給藥方式、症狀及其它因素而改變。當非腸道給藥時，本發明的組合物被製成注射製劑。具體實施例方式以下結合較佳實施例，對依據本發明提供的具體實施方式詳細說明如下；同時為了簡單和清楚的目的，下文恰當的省略了公知技術的描述，以免那些不必要的細節影響對本技術方案的描述。18實施例17-甲醯氨基-合成(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯11-1的(n-i)將甲巰四氮唑(3.250g、28mmo1)、150mL二氯甲垸加入反應瓶中，滴加三乙胺(3.65mL、28.7mmo1)，滴畢後再加入甲醯物(10.012g、25.2mm.ol),反應4h後過濾得白色固體11.661g，收率97.1%。.實施例27-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸的合成(in-i):(in-i)將化合物(II-l)(9.526g、20mrno1)、120mL甲苯加入反應瓶中，冰浴條件下加入乙酸酐(21.32mL、226mmo1)、過氧化氣(30%)(10.66mL、104mmo1)，2h後反應基本完畢，加飽和碳酸氫鈉溶液和亞硫酸氫鈉溶液以中和過量的乙酸酐和過氧化氫，過濾得8.985g白色固體，收率91.26%。實施例37-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸(A)的合成19將化合物(ni-l)(4.920g、lOmmol)、二乙胺(2.05mL、20mmol)、三氟乙酸a.48mL、20mmo1)、甲醛(37%)(1.90mL、20mmo1)、11.86mL叔丁醇、45mLl,4-二氧六環在50-53'C條件下反應2h，然後將反應液滴至400mL水中，過濾，得4.526g土黃色固體，收率89.80%。實施例47-甲醯氨基-3-(卜甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基節酯(B)的合成將化合物(A)(1.009g、2mmo1)、20mL二氯甲垸、0.5mLN,N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入三氯化磷(0.7mL、8mmo1)，2h後加水以終止反應，水洗，二氯甲烷抽提水層，合併二氯甲烷層乾燥，濃縮得棕黃色固體0.412g，收率42.21%，經柱層析純化，HPLC測得樣品的純度為95.59%。化合物A和B的^-NMR數據tableseeoriginaldocumentpage20實施例67-苯乙醯氨基-3-0-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯的合成(II-2):)、750mL二氯甲垸加入反應瓶中，冰浴條件下加三乙胺(I5mL、108mL)，滴畢後加入GCLE(50.083g、103mmol)，反應8h,用飽和碳酸鈉溶液洗反應液至中性，乾燥，濃縮得白色固體55.819g，收率95.94%。實施例77-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸的合成(III-2):將化合物(II-2)(29.000g、51mmo1)、360mL甲苯加入反應瓶中，冰浴條件下加入乙酸酐(27.5mL、291mmo1)、過氧化氫(30%)(15mL、0.147mmo1)，2h後反應基本完畢，加飽和碳酸氫鈉溶液和亞硫酸氫鈉溶液以中和過量的乙酸酐和過氧化氫，過濾得25.300g白色固體，收率84.84°/。。實施例87-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸(C)的合成將化合物(III-2)(25細g、42.9腿o1)、二乙胺(8.87mL、85.8mmo1)、三氟乙酸(6.6mL、85.8腿o1)、甲醛(37%)(8.5mL、85.8醒o1)、75mL叔丁醇、205mLl,4-二氧六環在50-53'C條件下反應2h，然後將反應液滴至400mL水中，過濾，得20.500g土黃色固體，收率80.39%，經柱層析純化，HPL碳測得樣品的純度為92.22%。實施例97-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(D)的合成將化合物(C)(5.946g，lOmmol)、100mL二氯甲烷、lOmLN，N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入三氯化磷(3.5mL、40mmo1)，2h後加水以終止反應，水洗，二氯甲烷提取水層，合併二氯甲垸層千燥，濃縮得棕黃色固體4.639g，收率80.15%。化合物C和D的iH-NMR數據cD3.561,3.664(2H，d，d,J-14Hz)3.487,3.539(2H,d,d,J=14Hz)3.740(3H,s)3.738(3H，s)3.876(3H,s)3細(3H,s)4.314,4.697(2H，d,d,J=13.6Hz)4.364，4.741(2H,d,d,J=13.6Hz)5.024(1H,d，J=4.8Hz)5,198(1H,d,M8Hz)5.196(2H，s)5掘(2H,s)5.876(1H,dd,J-8.0Hz,J=4.8Hz)5.737(lH,dd，J=8Hz,J=4.8Hz)6.234，6.496(2H,d,d,J=l.2Hz)5.740,6.105(2H,d,d,J=l.2Hz)6.905(2H,d，J=8.8Hz)6.898(2H,d,J=8.8Hz)7.27.3(5H,m)7.2~7.3(5H,m)7.360(2H,d,J-8.8Hz)7.339(2H,d，J=8.8Hz)8.494(lH,d,J=8.0Hz)9.224(lH，d,J=8.0Hz)實施例107-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸(E)的合成將丙二酸二乙酯(1.66mL、llmmol)、30mLN,N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入甲醇鈉(0.594g、llmmol)和化合物(C)(5.947g、lO腿ol)，0.5h後加水以終止反應，乙酸乙酯萃取，水洗，乾燥乙酸乙酯層，濃縮得到淺黃色固體5.816g，收率77.05%。實施例117-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基節酯(F)的合成22將化合物(E)(2.500g，3.312mmol)、50mL二氯甲垸、5mLN,N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入三氯化磷(5.8mL、66.24mmo1)，3h後加水以終止反應，水洗，二氯甲烷提取水層，合併二氯甲烷層乾燥，濃縮得棕黃色固體1.174g，收率47.98%。實施例127-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸(G)的合成將丙二酸二乙酯(1.5mL、12mrao1)、50mLN,N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入甲醇鈉(0.648g、12mmo1)和化合物(C)(5.947g、lOmmol)，0.5h後加水以終止反應，乙酸乙酯萃取，水洗，乾燥乙酸乙酯層，濃縮得到淺黃色固體5.990g，收率82.64%。實施例137-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯(H)的合成將化合物(G)(5.500g，7.59mmo1)、100mL二氯甲烷、lOmLN,N-二甲基甲醯胺加入反應瓶中，冰浴條件下加入三氯化磷(13.24mL、152mmo1)，3h後加水以終止反應，水洗，二氯甲垸提取水層，合併二氯甲垸層乾燥，濃縮得棕黃色固體3.242g，收率60.28%。化合物E和F的1H-NMR數據EF1.142(6H,m)U27(6H,m;)1.800,2.353(2H,m)1.985,2.443(2H,m)3.548,3.668(2H，d，d,J=14Hz)3.469,3.529(2H,d,d,J=14Hz)3.742(3H,s)3.739(3H，s)3841(2H,dd，J=9.6Hz,2.8Hz)3.654(2H，dd,J=8.8Hz,5.2Hz)3駕(3H,s)3.919(3H,s)3.957(IH,dd,J=10Hz，2.8Hz)3.875(lH,dd,J=9.2Hz，2.8Hz)4.040,4.123(4H,q，q,J=6.8Hz)4.033,4.098(4H,q,q，J=6.8Hz)4.148,4,340(2H,d，d，J=13.6Hz)4.107,4.289(2H，d，d，J=13.6Hz)23tableseeoriginaldocumentpage24權利要求1、碳-2位取代型頭孢菌素衍生物，用如下的通式表示其中，R1為1～6個碳原子的直鏈或支鏈的飽和或不飽和烷基、2～10個碳的有機酸酯取代烷基；R2為1～6個碳原子的直鏈烷基或1～9個含有氮、硫、氧雜原子的直鏈或雜環烷基；R3為獨立氫原子、1～6個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、被1～2個碳原子的烷基取代的或未取代的3～7個碳原子的環烷基或取代及未取代的苄基；X為碳、硫、氧、亞碸雜原子。2、如權利要求l所述的碳-2位取代型頭孢菌素衍生物，其化學結構式為N、-N、SF0(M)(N)其中R!為甲基、亞甲基、二甲基或二乙氧甲醯基乙基、2-乙氧甲醯基或2-乙醯基乙基；R3為獨立氫原子或苄基。3、如權利要求l或2所述碳-2位取代型頭孢菌素衍生物，其典型的化合物如下7-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸；7-甲醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-l-亞碸；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-亞甲基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2，2-二乙氧甲醯基)乙基-頭孢-3-烯-4-羧酸對甲氧基苄酯；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢_3-稀_4-羧酸對甲氧基苄酯-1-亞碸；7-苯乙醯氨基-3-(l-甲基四氮唑基-5-巰甲基)-2-(2-乙氧甲醯基，2-乙醯基)乙基-頭孢_3_烯-4-羧酸對甲氧基苄酯。4、權利要求2所述碳2位取代型頭孢菌素衍生物的製備方法，包括以下步驟-(1)將GCLE(X)或(X')與溶劑溶解的甲巰四氮唑、有機鹼反應，得到化合物(II);formulaseeoriginaldocumentpage3(2)化合物(II)與酸酐及氧化劑反應得到化合物(III);R3、H(II)(III)(3)化合物(III)與有機鹼以摩爾比為l:2-4進行Mannich縮合反應，得到化合物(IV);(IV)(V)(4)將化合物固體(IV)還原得化合物固體(V)或將化合物固體(IV)與有機酸酯進行Michael加成反應，得產物(VD;(6)將化合物固體(VI)以還原劑還原後處理得化合物固體(VII);(VII)其中的R3為獨立氫原子、16個碳原子的直鏈或支鏈的烷基、被12個碳原子的垸基取代的或未取代的37個碳原子的環垸基或取代及未取代的節基。5、權利要求4所述的製備方法，其中所述的溶劑係指二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿或甲苯；有機鹼係指三乙胺、三丁胺、二乙胺、苯胺或四甲基胍；酸酐係指乙酸酐或丙酸酐；氧化劑係指過氧化氫、過氧乙酸；無機鹼係指碳酸氫鈉、碳酸鈉、氨水或氫氧化鈉溶液；還原劑係指三氯化磷；有機酸酯係指乙酸乙酯、乙酸丁酯、丙二酸二乙酯、乙醯乙酸乙酯或乙醯乙酸丁酯。6、一種抗菌藥物組合物、它包括按照權利要求13任一項所述的化合物以及藥學上可接受的載體。7、權利要求13任一項所述化合物在製備治療革蘭氏陽性菌藥物方面的應用。8、權利要求13任一項所述化合物在製備治療金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌藥物方面的應用。全文摘要本發明涉及碳2位取代型頭孢菌素衍生物及其合成方法與應用。即以GCLE及其衍生物為原料經過Mannich縮合引入雙鍵、甲基化反應及在Mannich縮合基礎上進行的Michael加成反應對頭孢菌素母核的2位進行了修飾，獲得一系列化合物。所得目標化合物對革蘭氏陽性菌有一定的抗菌活性，其中1位為亞碸形式的2個化合物還顯示出與β-內醯胺酶的較強的結合能力。文檔編號C07D501/04GK101671351SQ20091007055公開日2010年3月17日申請日期2009年9月23日優先權日2009年9月23日發明者曉劉,紅孟,李玉荃,王亞江,平趙申請人:天津市醫藥集團技術發展有限公司