用於製備糖原磷酸化酶抑制劑的中間體的製作方法
2023-08-02 12:28:06
專利名稱：用於製備糖原磷酸化酶抑制劑的中間體的製作方法
技術領域：
本發明提供了用於製備某些N-(吲哚-2-羰基)-β-丙氨醯胺化合物的新方法和中間體，所述化合物是糖原磷酸化酶抑制劑，用於治療諸如血膽甾醇過多、高血糖、高胰島素血、高脂血、高血壓、動脈粥樣硬化、糖尿病、糖尿病性心肌病、感染、組織局部缺血和心肌局部缺血的疾病，並用於抑制腫瘤生長。
背景技術：
儘管早期發現了胰島素且隨後被廣泛用於治療糖尿病，以及後來發現了磺醯脲類(例如，ChlorpropamideTM(Pfizer)、TolbutamideTM(Upjohn)、AcetohexamideTM(E.I.Lilly)、TolazamideTM(Upjohn)和縮二胍(例如，PhenforminTM(Ciba Geigy)和MetforminTM(G D.Searle))並用作口服降血糖藥，但治療糖尿病的治療方案仍然不令人滿意。對於合成降血糖藥無效的約10％糖尿病患者(1型糖尿病，胰島素依賴型糖尿病)，有必要使用胰島素，且需要每日多次給藥，通常是通過自我注射給藥。需要頻繁測定尿或血液中的糖水平，來確定胰島素的合適劑量。施用過量胰島素會導致低血糖，其後果是輕度血糖不正常至昏迷或甚至死亡。非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)的治療通常由配合飲食、運動、諸如磺醯脲類的口服藥劑和胰島素(對於較嚴重的病例)組成。然而，臨床有效的降血糖藥會產生其它副作用，因而限制了其應用。在任何情況下，當上述藥劑中的一種藥劑可能在單個病例中失敗時，另一種藥劑也許會成功。很顯然，人們不斷需要副作用可能更小或在其它藥物無效的情況下能產生效力的降血糖藥。
動脈粥樣硬化，一種動脈疾病，在美國和西歐被認為是主要死亡原因。導致動脈粥樣硬化發展和閉塞性心臟病的病理順序是眾所周知的。在該順序中的最早期是在頸動脈、冠狀動脈、腦動脈和主動脈中形成「脂肪條紋」。由於主要在平滑肌細胞內和在動脈和主動脈內膜層的巨噬細胞中發現存在脂質沉積物，因此，這些損傷呈黃色。人們還假設，在脂肪條紋中發現的大部分膽固醇本身又導致形成所謂的「纖維斑塊」，纖維斑塊由充滿了脂質並且被細胞外脂質、膠原、彈性硬蛋白和蛋白聚糖包圍的聚集的內膜平滑肌細胞構成。這些細胞加上基質形成了纖維帽，所述纖維帽覆蓋了深部細胞碎片沉積物和更多的細胞外脂質，其主要包括游離的和酯化的膽固醇。纖維斑塊形成緩慢，並很可能及時鈣化和壞死，進而促進了所謂的「並發性損害」，所述並發性損害導致表徵先期動脈粥樣硬化的動脈閉塞、附壁血栓形成傾向和動脈肌痙攣。
流行病學證據明確證實了高脂血是導致由動脈粥樣硬化引起的心血管疾病(CVD)的主要危險因素。近年來，醫學人士重新強調降低血漿膽固醇水平，尤其是降低低密度脂蛋白膽固醇水平，以此作為預防CVD的最重要步驟。現已知，所謂「正常」膽固醇上限明顯低於迄今為止所知道的水平。因此，大部分西方人現被認為處於高度危險之中。這種獨立的危險因素包括葡萄糖耐受不良、左心室肥大、高血壓和男性化。心血管疾病尤其常見於糖尿病患者，這至少部分是由於在這類人群中存在多種獨立的危險因素。因此，成功地治療一般人群，尤其是糖尿病患者的高脂血症在醫學上極其重要。
高血壓是作為各種其它病症，如腎動脈狹窄、嗜鉻細胞瘤或內分泌紊亂的繼發症狀產生於人體的病症。然而，高血壓也出現在許多病因或病症未知的患者中。而這種原發性高血壓通常與諸如肥胖、糖尿病和高甘油三酯血症的疾病有關，這些病症之間的關係尚未闡明。另外，許多患者在完全不存在任何其它疾病或病症跡象的情況下表現出高血壓症狀。
已知，高血壓能直接引起心力衰竭、腎衰竭和中風，這些病症都能導致患者猝死。高血壓還能導致動脈粥樣硬化加重和冠心病，這些病症使患者逐漸虛弱，並長時間能導致患者死亡。
原發性高血壓的確切病因尚不知曉，但許多因素被認為對該病的發作產生影響。這些因素中有緊張、情緒失控、無規律激素釋放(高血壓蛋白原酶、血管緊張素和醛甾酮系統)、腎功能失調引起的過量鹽和水、導致血管狹窄的管壁增厚和脈管系統肥大以及遺傳因素。
對原發性高血壓的治療已考慮了上述因素。因此，已開發出許多β-阻滯劑、血管收縮藥、血管緊張肽轉化酶(ACE)抑制劑等，並作為抗高血壓藥上市。已證明，使用上述藥物治療高血壓有利於預防諸如心力衰竭、腎衰竭和腦出血(中風)的猝死。然而，由於長期患高血壓導致的動脈粥樣硬化加重或心臟病仍然難以解決。這意味著，儘管高血壓正在被緩解，但該治療並未針對原發性高血壓的根本病因。
高血壓還與高血液胰島素濃度(一種被稱作高胰島素血的病症)有關。胰島素，一種肽激素，其主要作用是促進葡萄糖利用、蛋白質合成以及中性脂質的形成和存儲，尤其還促進血管細胞生長和增加腎的鈉保留。後面的這些功能可以在不影響葡萄糖水平的條件下實現，並已知是導致高血壓的原因。例如，外周脈管系統生長會導致外周毛細管狹窄；而鈉保留會增加血液體積。因此，降低高胰島素血患者體內的胰島素水平能夠預防由高胰島素濃度引起的異常血管生長和腎鈉保留，從而緩解高血壓。
心臟肥大是造成突然死亡、心肌梗死和充血性心力衰竭的非常危險的因素。這些心臟突發事件至少部分是由於局部缺血和再灌注後對心肌損傷的敏感性增大而造成的，所述局部缺血和再灌注可以在門診病人和手術期間發生。目前，防止或最大限度地減小心肌手術期間的不利結果，尤其是手術期間的心肌梗死，是不適當的醫學需要。心臟和非心臟手術都伴有心肌梗死或死亡的巨大危險，並且大約7百萬進行非心臟手術的病人被認為具有危險，在某些情況下，手術期間死亡和嚴重心臟併發症的發生率高達20-25％。另外，對於每年400,000進行冠狀動脈分流術的患者，手術期間心肌梗死的發生率估計為5％，死亡率為1-2％。目前，在該領域尚無商用的藥物療法用以減少手術期間心肌局部缺血對心臟組織造成的損傷或增加心臟對局部缺血發作的抵抗力。可以預料，這種療法將用於救生和減少住院治療、提高高危患者的生存質量和降低總保健費用。在局部缺血和再灌注後觀察到的心肌損傷的機理未被完全了解，然而，已有報導(M.F.Allard等，Am.J.Physiol.，267，H66-H74，(1994))，在肥大的大鼠心臟中，局部缺血前的糖原降低與局部缺血後左心室功能恢復的改善有關。
肝臟葡萄糖產生是2型糖尿病療法的重要目標。在吸收後(禁食)狀態下，肝臟是血漿葡萄糖水平的主要調節器，在2型糖尿病患者體內，肝臟葡萄糖產生的速率明顯高於正常個體。同樣，在餐後(吃飽)狀態下，肝臟在血漿葡萄糖供應總量中起著恰當的較小作用，此時，在2型糖尿病患者體內肝臟葡萄糖的產生處於異常高水平。
糖原分解是中止肝臟葡萄糖產生的一個重要目標。肝臟通過糖原分解(葡萄糖聚合物糖原的分解)和糖異生作用(由2-和3-碳前體合成葡萄糖)產生葡萄糖。一些證據表明，在2型糖尿病患者體內，糖原分解可能對肝臟葡萄糖產出起著重要作用。首先，在正常的吸收後人體內，估計高達75％的肝臟葡萄糖產生源於糖原分解。其次，患有包括Hers疾病(糖原磷酸化酶缺乏)在內的肝臟糖原貯積病的患者表現出陣發性低血糖。這些觀察結果表明，糖原分解可能是肝臟葡萄糖產生的重要過程。
通過糖原磷酸化酶的組織特異性異構重整，在肝臟、肌肉和腦中催化糖原分解。該酶將糖原大分子切斷，釋放出葡萄糖-1-磷酸和新的短糖原大分子。迄今已報導了兩類糖原磷酸化酶抑制劑葡萄糖和葡萄糖類似物[J.L.Martin等，Biochemistry，30，10101，(1991)]及咖啡因和其它嘌呤類似物[P.J.Kasvinsky等，J.Biol.Chem.，253，3343-3351和9102-9106(1978)]。現已假定，這些化合物與一般的糖原磷酸化酶抑制劑具有通過減少肝臟葡萄糖產生和降低糖血來治療2型糖尿病的潛在用途。例如，參見T.B.Blundell等，Diabetologia，35(Supp1，2)，569-576(1992)和Martin等，同上。
最近，特別是在PCT國際申請公開WO97/31091和共同授讓的US6107329、6277877和6297269中公開了糖原磷酸化酶抑制劑。共同授讓的US6107329、6277877和6297269，其全部內容引入本發明書作為參考，公開了下文所述的式(I)化合物的新的取代的N-(吲哚-2-羰基)-β-丙氨醯胺化合物，包括5-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-羥基-1-吡咯烷基]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺；其某些衍生物；其製備方法；含有所述化合物或所述衍生物的藥物組合物；和通過對需要進行治療的哺乳動物給藥所述化合物，所述藥物組合物或所述衍生物來治療糖原磷酸化酶依賴性疾病或病症的方法。
本發明涉及上述US6107329、6277877和6297269中公開的N-(吲哚-2-羰基)-β-丙氨醯胺，包括5-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-二羥基-1-吡咯烷基]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(I)的改進的製備方法、所涉及的某些中間體和所述中間體的製備方法。
與上述現有技術公開的方法相比，下文詳述的本發明的改進方法具有某些優點，包括，例如，降低了用於人類給藥的最終產物的製備成本、使在上述最終產物的製備中形成的雜質降至最低和減少了製備上述最終產物所需的合成步驟。
發明概述本發明提供了用於製備某些N-(吲哚-2-羰基)-β-丙氨醯胺化合物的新方法和中間體，所述化合物是糖原磷酸化酶抑制劑，用於治療諸如血膽甾醇過多、高血糖、高胰島素血、高脂血、高血壓、動脈粥樣硬化、糖尿病、糖尿病性心肌病、感染、組織局部缺血和心肌局部缺血的疾病，並用於抑制腫瘤生長。
發明詳述本發明提供了用於製備某些N-(吲哚-2-羰基)-β-丙氨醯胺化合物的新方法和中間體。更具體地說，本發明提供了製備化合物5-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-二羥基-1-吡咯烷基]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(I)的新方法。本發明還提供了用於製備上述化合物的中間體和用於製備所述中間體的方法。
在本發明的一個方面，提供了製備下式(I)化合物的方法， 所述方法包括下述步驟(a)使下式(Ia)化合物與3-吡咯啉偶合，
得到下式(Ib)的醯胺衍生物，和 (b)將步驟(a)中形成的醯胺衍生物(Ib)氧化，得到式(I)化合物。
在上述步驟(a)的偶合反應中，將根據上述US6,107,329、6,277,877和6,297,269中公開的方法製得的式(Ia)化合物與3-吡咯啉偶合， 得到式(Ib)化合物， 上述偶合反應可採用本領域技術人員已知的標準合成方法進行。例如，在1-羥基苯並三唑(HOBT)、2-乙氧基-1-乙氧基-羰基-1，2-二氫醌(EEDQ)、CDI/HOBT、丙烷膦酸酐(PPA)或二乙基磷醯基氰等存在下，在諸如二氯甲烷、乙腈、乙醚、四氫呋喃的非質子反應惰性溶劑中，任選在諸如三乙胺或N，N′-二異丙基乙胺(Hunig鹼)的叔胺鹼存在下，使用諸如1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)的合適偶合劑，可以進行上述偶合反應。一般在大約0℃-所用溶劑的約回流溫度下進行上述偶合反應。在一個優選的實施方案中，在選自三乙胺或Hunig鹼的有機鹼存在下，使用EDC和催化量的HOBT，在四氫呋喃中於常溫下進行偶合反應。在上述偶合反應中特別優選使用Hunig鹼。3-吡咯啉原料可從市場購得。
上述步驟(b)中的氧化反應可以採用本領域技術人員已知的將烯烴轉化成順式二醇的合成方法進行。上述氧化反應可以使用氯化釕(III)，以高碘酸鈉作為共氧化劑，使用AgO(J.Org.Chem.，61，4801(1996))、四氧化鋨或帶有N-甲基嗎啉N-氧化物(NMO)的催化劑，在諸如乙腈、四氫呋喃、烷基醚等反應惰性極性有機溶劑中進行。在一個優選的實施方案中，使用催化量的四氧化鋨和N-甲基嗎啉N-氧化物(NMO)，在四氫呋喃中將(Ib)氧化為化合物(I)(Rosenberg等，J.Med.Chem，33，1962(1990))。
然後，優選根據本領域技術人員的已知方法分離出步驟(b)的產物。
在本發明的另一方面，提供了式(I)化合物的製備方法， 所述方法包括下述步驟(a)將下式(Ia)化合物
與(3aR，6aS)-四氫-2，2-二甲基-4H-1，3-二氧雜戊環烯並-[4，5-c]吡咯對甲苯磺酸鹽(IVi)偶合， 得到下式(IIa)的丙酮化合物衍生物，和 (b)裂解步驟(a)中形成的丙酮化合物衍生物(IIa)，得到式(I)化合物。
可以採用上文公開的製備化合物(Ib)的方法將化合物(Ia)與(IVi)偶合，形成丙酮化合物衍生物(IIa)。優選，在Hunig鹼存在下使用EDC和HOBT進行偶合。可以使用催化量的HOBT，即，其用量小於1當量。一般，在偶合步驟中，其用量為約0.05-0.50當量，然而，以酸(Ia)計，一般優選以大約0.15-0.25摩爾當量的催化比使用HOBT。雖然丙酮化合物(IIa)可以直接用於隨後的裂解步驟，但為了改善顏色和提高純度，有時可能優選在上述裂解步驟前分離出丙酮化合物(IIa)。分離低極性丙酮化合物(IIa)可以清除高極性雜質，然後，在脫保護步驟之後，通過結晶分離出高極性產物(I)，從而清除可能存在的低極性雜質。
採用一般的已知方法，例如，在水存在下，用諸如鹽酸或氫溴酸的無機酸或用諸如甲磺酸或對甲苯磺酸的有機酸處理已分離的丙酮化合物(IIa)，可以將丙酮化合物(IIa)轉化成化合物(I)。
或者，通過製備和就地裂解丙酮化合物(IIa)，也可方便地製備化合物(I)。可以採用上文概述的方法製備在合適溶劑中的丙酮化合物(IIa)的溶液。還可以根據已知方法，例如，在水存在下用諸如鹽酸或氫溴酸的無機酸水溶液或用諸如甲磺酸或對甲苯磺酸的有機酸處理丙酮化合物(IIa)溶液，將丙酮化合物(IIa)方便地就地轉化成化合物(I)，在下文實施例5中描述。然後，所製得的化合物(I)可以根據已知的製備方法分離出來。
在本發明的另一方面，提供了式(I)化合物的製備方法， 所述方法包括下述步驟(a)將下式(Ia)化合物
與順-3，4-二羥基吡咯烷對甲苯磺酸鹽(Vi)偶合， 得到下式(IIIa)的乙醇溶劑化物， (b)將步驟(a)中形成的乙醇溶劑化物(IIIa)去溶劑化，製得式(I)化合物。
根據上文描述的用於製備化合物(Ib)和丙酮化合物(IIa)的那些偶合方法，可以將化合物(Ia)偶合以形成乙醇溶劑化物(IIIa)。優選，在諸如三乙胺的叔胺鹼或Hunig鹼存在下，使用EDC和HOBT進行偶合反應。特別優選使用Hunig鹼。
可以通過下述步驟將乙醇溶劑化物(IIIa)脫溶劑化形成化合物(I)將(IIIa)溶解在諸如乙酸乙酯或甲苯的非質子溶劑中，蒸餾溶液除去殘留乙醇，用水處理該溶液，使得水濃度為約1％-3％，並使水溶液升至回流溫度，在此溫度下開始結晶(I)。一般優選在回流前向水溶液中加入品種。回流時間可以是幾小時至一天或多天，優選回流約8-20小時。一旦基本上完成結晶，優選在常壓下，通過共沸蒸餾除去過量水，然後冷卻淤漿至大約5-30℃，優選，冷卻至大約室溫，這時，根據標準方法，例如，通過過濾，分離出(I)。
在本發明的又一方面，提供了製備式(I)化合物的方法，
所述方法包括將下式(Ia)化合物 與順-3，4-二羥基吡咯烷游離鹼(V)偶合，得到式(I)化合物。
化合物(Ia)與順-3，4-二羥基吡咯烷游離鹼(V)偶合形成化合物(I)的反應也可採用上文描述的用於製備化合物(Ib)、丙酮化合物(IIa)或乙醇溶劑化物(IIIa)的那些偶合方法進行。根據下文詳細描述的幾種合成方法，例如包括實施例18中公開的方法，可以製得順-3，4-二羥基吡咯烷游離鹼(V)。然後，優選將製得的式(I)化合物用本領域技術人員已知的標準方法分離出來。
本發明的另一方面提供了化合物(V)和其酸加成鹽的合成方法，該化合物或其酸加成鹽是製備化合物(I)的中間體。這些示範性合成方法詳細描述在下述反應圖解1-7中。順-3，4-二羥基吡咯烷對甲苯磺酸鹽(Vi)可從市場購得。
一方面，本發明提供了化合物(V)或其酸加成鹽的製備方法，所述方法包括下述反應圖解1略述的步驟。
反應圖解1 如反應圖解1所示，在有機鹼或布朗斯臺德鹼存在下，在非質子溶劑中，用BOC-酸酐保護3-吡咯啉原料(Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，WI)。然後，根據已知方法，例如，四氧化鋨氧化法，使用具有共氧化劑的催化量的四氧化鋨，使用氯化釕(III)/高碘酸鈉(Shing，T.K.M.等，Angew.Chem.Eur.J.，2，50(1996)或Shing，T.K.M.等，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，33，2312(1994))、高錳酸鉀或本領域技術人員公知的類似試劑和條件，可以將被保護的N-BOC-3-吡咯啉產物混合物(Va)氧化成相應的二醇(Vb)。隨後，在諸如四氫呋喃、二氯甲烷或乙腈的反應惰性溶劑存在下，用諸如三氟醋酸、甲磺酸等合適酸，可以脫去(Vb)的BOC保護基，形成(V)。
優選，然後將化合物(V)以游離鹼或其酸加成鹽的形式分離出來，其中，所述酸加成鹽可根據已知方法製得。所述酸加成鹽可包括，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、醋酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽和4-甲基苯磺酸鹽(對甲苯磺酸鹽)。通過化合物(V)與合適的共軛酸反應，可以容易地製得所述酸加成鹽。當所需的鹽是一元酸的鹽(例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、甲苯磺酸鹽、醋酸鹽等)、二元酸的氫鹽(例如，硫酸氫鹽、丁二酸氫鹽等)或三元酸的二氫鹽(例如，磷酸二氫鹽、檸檬酸二氫鹽等)時，至少使用1摩爾當量的酸，通常使用摩爾過量的酸。然而，如果所需的上述鹽是硫酸鹽、半丁二酸鹽、磷酸鹽或磷酸氫鹽時，一般使用適當的和化學計算當量的酸。一般將游離鹼和酸混合在共溶劑中，然後從中沉澱出所需的酸加成鹽，或者，通過濃縮母液或通過加入非溶劑引起的沉澱作用來分離出所需的酸加成鹽。特別優選的化合物(V)的酸加成鹽包括對甲苯磺酸鹽(Vi)和鹽酸鹽。
可用於製備化合物(V)或其酸加成鹽的另一種方法包括下列反應圖解2略述的步驟。
反應圖解2 如反應圖解2所述，在諸如氫硼化鈉的合適還原劑存在下，在諸如醚(四氫呋喃或甲基叔丁基醚)的反應惰性溶劑或其它合適溶劑中，將二溴二酮原料還原，得到順式和反式醇(VIa)和(VIa′)混合物。然後，在諸如碳酸氫鈉的合適鹼存在下，用苄胺將醇(VIa)和(VIa′)環化，得到二醇(VIb)。現已表明，使用諸如碘化鉀的添加劑提高了環化速率。參見，例如，Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH，New York，337-339(1989)。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的反應惰性溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(VIb)的苄基保護基，形成化合物(V)，隨後，如果需要的話，可以形成酸加成鹽。
可用於製備(V)或其酸加成鹽的另一種備擇方法包括反應圖解3中描述的步驟。
反應圖解3
在反應圖解3中，用苄胺將內消旋酒石酸環化，得到二醇(VIIb)。該環化反應通常在高於室溫的溫度下，在諸如二氯甲烷、四氫呋喃或乙酸乙酯的反應惰性溶劑中進行。參見，例如，March，Advanced Organic Chemistry，4th Ed.，Wiley Interscience，420(1992)。本領域技術人員知道，加入諸如二環己基碳化二亞胺、N，N′-碳醯二咪唑或1，2-二氫-2-乙氧基-1-喹啉羧酸乙酯(EEDQ)的偶合劑有助於由羧酸形成所述醯胺鍵。然後，在三氟化硼存在下，用諸如氫化鋁鋰、乙硼烷或氫硼化鈉的已知還原劑，將二醇(VIIb)還原成二醇(VIb)。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的合適溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(VIb)的苄基保護基，形成化合物(V)，隨後，如果需要的話，可以形成酸加成鹽。
用於製備化合物(V)或其酸加成鹽的又一種方法包括反應圖解4中所述的步驟。
反應圖解4 在反應圖解4中，在標準條件下，例如，使用氫溴酸和乙酸進行處理，或者，採用Talekar，D.G等，Indian J.Chem.，Sect.B，25B(2)，145-51(1986)或Lee，E.，等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，23，3395-3396(1999)中描述的方法，將丁四醇原料轉化成二乙酸酯(VIIIa)。然後，在諸如碳酸氫鈉的合適鹼存在下，用苄胺環化二乙酸酯(VIIIa)，得到(VIb)。如上所述，如果需要或合適的話，可以使用有助於環化的諸如碘化鉀的添加劑。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的合適溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(VIb)的苄基保護基，形成化合物(V)，隨後，如果需要的話，可以形成酸加成鹽。
製備化合物(V)或其酸加成鹽的又一種方法包括反應圖解5所示的步驟。
反應圖解5 在反應圖解5中，採用本領域技術人員已知的條件，例如，使用過氧化氫和甲酸，或者，使用間氯過苯甲酸和水，將(E)-1，4-二氯-2-丁烯二羥基化，得到二醇(IXa)。然後，在諸如碳酸氫鈉的合適鹼存在下，用苄胺將二醇(IXa)環化，得到二醇(VIb)。如上所述，如果需要或合適的話，可以使用有助於環化的諸如碘化鉀的添加劑。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的反應惰性溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(VIb)的苄基保護基，形成化合物(V)，隨後，如果需要的話，可以形成酸加成鹽。
又一種製備化合物(V)或其酸加成鹽的方法包括反應圖解6所示的步驟。
反應圖解6 在反應圖解6中，根據本領域技術人員已知的合成方法，將(Z)-1，4-二氯-2-丁烯二羥基化，得到二醇(IXa)。例如，可以在反應惰性非質子溶劑中，如在乙腈或諸如氯仿、二氯甲烷或四氯化碳的滷代烴溶劑中，使用高碘酸鈉和釕鹽的混合物進行該氧化反應。如果合適或需要的話，也可以使用含反應惰性非質子溶劑的溶劑混合物，例如，乙腈和乙酸乙酯。在一個優選的實施方案中，在冷卻的乙腈/乙酸乙酯溶劑混合物中，使用氯化釕(III)水合物和高碘酸鈉進行該氧化反應。然後，在諸如碳酸氫鈉的合適鹼存在下，用苄胺將二醇(IXa)環化，得到二醇(VIb)。如上所述，如果需要和/或合適的話，可以使用有助於環化的諸如碘化鉀的添加劑。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的合適溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(VIb)的苄基保護基，形成化合物(V)，隨後，如果需要，可以形成酸加成鹽。
又一種製備化合物(V)或其酸加成鹽的方法包括反應圖解7中所述的步驟。
反應圖解7 如反應圖解7所述，在有機鹼或布朗斯臺德鹼存在下，在非質子溶劑中，用BOC-酸酐保護氨基二醇原料。然後，使用本領域技術人員通常已知的方法，將BOC保護的二醇(XIa)氧化為二醛(XIb)。例如，可以使用諸如高錳酸鉀、四氧化釕、二氧化錳或瓊斯試劑(鉻酸和硫酸水溶液)的強氧化劑氧化二醇(XIa)。或者，使用諸如亞鉻酸銅、阮內鎳、乙酸鈀、氧化銅等試劑，通過催化脫氫，將(XIa)氧化成(XIb)。其它的例子參見，例如，March，AdvancedOrganic Chemistry，2 edition，Wiley-Interscience，1992。然後，通過頻哪醇偶合，可以將二醛(XIb)環化成BOC-保護的二醇(Vb)。進行該偶合反應的已知方法可以包括使用諸如鈉、鎂或鋁的活性金屬或者通過使用三氯化鈦的直接電子傳遞。然後，如上所述，通過用上述的合適的酸進行處理，可以除去(Vb)的BOC-基團。
優選，然後，化合物(V)以游離鹼或酸加成鹽形式分離出來，其中，所述酸加成鹽可以製備如上。
本發明的另一方面提供了下述化合物(IV)和其酸加成鹽的製備方法，該化合物和其酸加成鹽也是製備化合物(I)的中間體。在下述反應圖解8-10中描述了示範性的合成方法。一方面，可以根據反應圖解8所示的方法製備化合物(IV)或其酸加成鹽。
反應圖解8 如反應圖解8所示，通過形成核糖的丙酮化合物衍生物(XIIa)來保護核糖。形成所述丙酮化合物可以採用各種方法，例如，採用Greene，T.W.，等，Protective Groups in Organic Synthesis，2ndEdition，Wiley-Interscience，(1991)中描述的方法。舉例來說，可以在碘存在下使用丙酮來形成保護的二醇(XIIa)。可以使用試劑，包括使用高碘酸鈉在甲醇溶液中將(XIIa)氧化成(XIIb)。可以根據已知方法，例如，在諸如乙酸的酸存在下，使用氫化物鋁鋰或氫硼化鈉來還原(XIIb)。在二氯甲烷或類似的反應惰性溶劑中，通過用苄胺處理(XIIb)，來製備胺(IVc)。
隨後，使用標準方法，例如，在諸如醇或醚的合適溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，可以除去(IVc)的苄基保護基，形成化合物(IV)。
優選，化合物(IV)以游離鹼或其酸加成鹽的形式分離出來，其中所述酸加成鹽可以製備如上。特別優選的化合物(IV)的酸加成鹽是對甲苯磺酸鹽(IVi)和鹽酸鹽。
另一種製備化合物(IV)或其酸加成鹽的方法包括反應圖解9所示的步驟。
反應圖解9 其中Piv表示新戊醯基，即，(CH3)3C(O)-。
如反應圖解9所示，採用標準方法保護內消旋赤蘚糖醇，形成二新戊醯衍生物(XIIIa)。優選在諸如吡啶的強有機鹼存在下，用新戊醯氯進行該保護。用對甲苯磺酸(tosic acid)的丙酮溶液或用2，2-二甲氧基丙烷(DMP)處理(XIIIa)，通過形成丙酮化合物(XIIIb)，可以保護得到的二醇(XIIIa)。隨後，使用標準方法，例如，使用Greene，T.W.，等，Protective Groups in OrganicSynthesis，2ndEdition，Wiley-lnterscience，(1991)中公開的方法，可除去(XIIIb)的piv-基，得到脫保護的衍生物(XIIIc)。舉例來說，可以在諸如醇的含水溶劑中，用諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀的強無機鹼進行(XIIIb)的脫保護。在合適的反應惰性溶劑中，在諸如三乙胺的鹼存在下，將二醇(XIIIc)進行甲磺酸酯活化，得到化合物(XIIId)。在諸如有機胺的鹼存在下，用苄胺環化(XIIId)，得到(IVc)。隨後，可以根據標準方法，例如，在諸如醇或醚的合適溶劑中，使用諸如鈀碳的催化劑進行氫化，除去(IVc)的苄基保護基，形成化合物(IV)。
優選，化合物(IV)以游離鹼或其酸加成鹽的形式分離出來，其中所述的酸加成鹽可製備如上。
另一方面，本發明提供了製備化合物(IV)或其優選的對甲苯磺酸加成鹽的通常優選的方法，該方法如下列反應圖解10所示。
反應圖解10 用本領域技術人員已知的合成方法，可以將N-苄基馬來醯亞胺氧化為二醇(VIIb)。例如，可以在反應惰性非質子溶劑中，如在乙腈或諸如氯仿、二氯甲烷或四氯化碳的滷代烴溶劑中，使用高碘酸鈉和釕鹽的混合物進行該氧化反應。如果合適或需要的話，也可以使用含反應惰性非質子溶劑的溶劑混合物，例如，乙腈和乙酸乙酯。在優選的實施方案中，在低於室溫的溫度下，在乙腈/乙酸乙酯溶劑混合物中，使用氯化釕(III)水合物和高碘酸鈉進行該氧化反應。
根據本領域技術人員已知的合成方法可以形成丙酮化合物(IVb)。例如，可以在諸如硫酸、對甲苯磺酸或甲磺酸的酸催化劑存在下，將二醇(VIIb)與丙酮、2，2-二甲氧基丙烷或其混合物進行縮合，進行該保護反應。在優選的實施方案中，使用催化量的甲磺酸，通過在2，2-二甲氧基丙烷中縮合二醇(VIIa)，來進行該保護反應。
可以根據本領域技術人員已知的合成方法，將丙酮化合物(IVb)還原為(IVc)。例如，可以在諸如甲苯或乙醚的反應惰性非質子溶劑中，使用氫化硼或氫化鋁配合物，包括，例如，BH3THF、BH3醚合物或Red-Al(氫化雙(2-甲氧基乙氧基)鋁鈉；Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，WI)，進行該還原反應。在優選的實施方案中，在甲苯中，使用Red-Al，將保護的丙酮化合物(IVb)還原成(IVc)。
可以根據本領域技術人員已知的合成方法將(IVc)脫保護。例如，在諸如甲醇或乙醇的極性質子溶劑中，或在諸如四氫呋喃的非質子溶劑中，或在所述溶劑的混合物中，使用鈀鹽或諸如Pd(OH)2的配合物或Pd/C，進行上述脫保護反應。或者，可以在氫化轉移條件下，即，在環己烯中，使用Pd/C進行該脫保護反應。在優選的實施方案中，在甲醇中，使用Pd(OH)2/C進行該脫保護反應。
然後，優選將脫保護的化合物(IV)以其優選的對甲苯磺酸酸加成鹽(IVi)的形式分離出來，所述酸加成鹽可製備如上或從市場購得。
實施例通過下述實施例說明本發明，但是，應當理解的是，下述實施例僅用於說明而不是限制本發明。
順式-3，4-二羥基吡咯烷對甲苯磺酸鹽(Vi)從Aldrich Chemical Co.，FineChemicals Division，Milwaukee，WI.購得。
實施例15-氯-N-[(1S，2R)-3-(2，5-二氫-1H-吡咯-1-基)-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(Ib) 在溫度20-25℃下，在100ml四氫呋喃中，使5.00g(0.0134mmol)(αR，βS)-β-[[(5-氯-1H-吲哚-2-基)羰基]氨基]-α-羥基-苯丁酸(Ia)樣品(用上述US6,107,329、6,277,877和6,297,269公開的方法製得)和3-吡咯啉(1.11g，0.015mmol)(Aldrich Chemical Co.，Milwaukee，WI)成為淤漿。用0.6g(0.33當量)1-羥基苯並三唑水合物(HOBT)處理該混合物，並冷卻至0-5℃。在0-5℃，用15分鐘，向混合物中加入N，N-二異丙基乙胺(2.08ml，2.1當量)。然後，在-10-6℃，用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(2.78g，1.1當量)處理混合物。使反應混合物升至約20℃，並在室溫攪拌約24小時。用水(50ml)和乙酸乙酯(50ml)處理反應混合物得到兩相混合物。分層並分離出有機層，濃縮，通過部分真空蒸餾得到固體。分離出總計5.1g(收率92.7％)純目標化合物。
實施例25-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-二羥基-1-吡咯烷基]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(I) 將1.59g(3.75mmol)(Ib)樣品，N-甲基嗎啉N-氧化物(413mg，3.52mmol)和四氧化鋨(3.6g，0.352mmol)混合在15ml四氫呋喃中，並在氮氣氣氛下攪拌所得混合物過夜。真空蒸發溶劑，在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配殘餘物。分層後，用亞硫酸鈉溶液洗滌有機層兩次，然後用碳酸氫鈉溶液洗滌。用乙酸乙酯回洗含水洗液，用硫酸鈉乾燥，用脫色炭一起攪拌並真空蒸發。將殘餘物吸附在矽膠上，進行快速色譜分離，用乙酸乙酯∶甲醇(9∶1)洗脫。合併含有產物的餾份，用脫色炭處理，並蒸發至泡沫狀，用己烷研製過夜，得到505mg(收率25％)黃褐色固體，熔點150-155℃。
實施例35-氯-N-[(1S，2R)]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)-3-[(3aR，6aS)-四氫-2，2-二甲基-5H-1，3-二氧雜環戊烯並[4，5-c]吡略-5-基]丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(IIa)
在20-25℃，將25g(0.067mol)(Ia)和22.2g(0.070mol)(IVi)在125ml二氯甲烷和125ml四氫呋喃中攪拌。在20-25℃，將N，N-二異丙基乙胺(23.4ml，0.134mol)用15分鐘加入該混合物中。將反應溶液冷卻至0-10℃並用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(14.2g，0.0741mol)和羥基苯並三唑水合物(HOBT)(10.0g，0.074mol)處理。在-6--10℃下攪拌反應混合物大約30分鐘。用大約45分鐘使反應混合物升至室溫，並攪拌約2小時。用50％氫氧化鈉水溶液處理反應混合物，使pH大約為10，使兩相混合物分層。採用部分真空，通過旋轉式蒸發將有機層濃縮至油狀物。分離出總計31g(88％收率)目標化合物。
實施例45-氯-1H-吲哚-2-羧酸-[(1S-苄基-3-((3R，4S)-二羥基-吡咯烷-1-基)-(2R)-羥基-3-氧代丙基]-醯胺(I) 將2.0g丙酮化合物(IIa)樣品溶解在10ml四氫呋喃和10ml水的混合物中。用6N鹽酸調節pH至1.8，並加熱回流溶液。回流過夜後，用50％氫氧化鈉調節pH至大約7-8，常壓蒸餾混合物以除去四氫呋喃。分層，用10ml水洗滌有機層，並向合併的有機層中加入25ml庚烷。將得到的白色晶形沉澱攪拌大約1小時，過濾收集，用庚烷洗滌。將固體真空乾燥過夜，得到1.7g目標化合物。
實施例55-氯-1H-吲哚-2-羧酸-[(1S-苄基-3-((3R，4S)-二羥基-吡咯烷-1-基)-(2R)-羥基-3-氧代丙基]-醯胺(I) 將10g(0.027mol)樣品(Ia)、8.88g(0.028mol)樣品(IVi)和0.06g(0.044mol)HOBT混合在50ml四氫呋喃中，將得到的淤漿冷卻至-10-5℃。加入總計4.15g(0.032mol)Hunig鹼和5.66g(0.03mol)EDC，在室溫下攪拌得到的溶液大約12小時。用50ml水稀釋溶液，用1.5ml濃HCl調節pH至大約1.7。然後加熱回流反應混合物大約10小時。用50％氫氧化鈉調節pH至6.5-7.5，在大約90℃的罐溫度下常壓蒸餾溶液至小體積。加入總計100ml乙酸乙酯，用50ml水洗滌有機層，用50ml甲苯稀釋有機層。混合物回流過夜，室溫攪拌大約10小時，過濾。在大約45℃下真空乾燥殘餘固體，得到10.4g(86.6％收率)目標產物。
實施例65-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-二羥基-1-吡咯烷基]-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺，乙醇鹽(IIIa)
將53kg(142.2mol)樣品(Ia)懸浮在35加侖N，N-二甲基甲醯胺中。用乙酸乙酯(70加侖)處理得到的混合物並冷卻至0-5℃。依次用N，N-二異丙基乙胺(36.6kg，284.3mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(30kg，156.4mol)和1-羥基苯並三唑水合物(24kg，156.38mol)處理冷卻的混合物。然後用順-3，4-二羥基吡咯烷、對-甲苯磺酸鹽(Vi)(41.1kg，149.3mol)處理反應混合物，並在0-5℃攪拌反應混合物大約30分鐘。然後將反應混合物升至室溫，並攪拌大約6小時。用水(175加侖)處理反應混合物，攪拌大約1小時，然後靜置。分離出水相，並用乙酸乙酯(2×35加侖)洗滌2次。合併乙酸乙酯層，用碳酸氫鈉水溶液(2×23.8kg碳酸氫鈉水(70加侖)溶液和1×11.9kg碳酸氫鈉水(35加侖)溶液)洗滌3次。將乙酸乙酯溶液與20加侖乙酸乙酯和35加侖水合併，攪拌大約30分鐘，然後靜置。分離出乙酸乙酯層，用脫色炭(0.55kg)處理，然後攪拌大約15分鐘。過濾混合物以除去炭，真空濃縮溶液至大約80加侖體積。使用乙醇(4×55加侖)通過蒸餾除去(displace)乙酸乙酯，進而形成最終大約110加侖的濃稠白色淤漿。在室溫下攪拌產物大約18小時。過濾分離出總計83.2kg目標化合物的乙醇-溼濾餅。
實施例75-氯-1H-吲哚-2-羧酸-[(1S-苄基-3-((3R，4S)-二羥基-吡咯烷-1-基)-(2R)-羥基-3-氧代丙基]-醯胺(I)
合併74kg樣品(IIIa)和88加侖乙酸乙酯並在室溫下攪拌得到的淤漿直至全溶解。常壓蒸餾濃縮混合物，直至收集大約44加侖餾出液(餾出液折射率＝1.3716)。冷卻至低於大約40℃時形成濃稠的白色淤漿。向淤漿中加入水(6.11)，形成幾乎透明的溶液，然後，用2-3小時加入庚烷(54加侖)。在室溫攪拌得到的淤漿大約2.5天。濾出固體，用乙酸乙酯(8加侖)洗滌，然後在氮氣流中吹乾。將固體溶解在乙酸乙酯中，室溫攪拌溶液大約11天，從而逐漸形成固體產物。濾出固體，在30-45℃下真空乾燥，得到目標化合物(30.9kg，71.6％收率)。
實施例8順-3，4-二羥基-2，5-琥珀醯亞胺(VIIb) 將N-苄基馬來醯亞胺(50.0kg)的乙腈(125L)溶液和859L乙酸乙酯與在352L水中的0.499kg氯化釕(III)水合物的含水混合物合併，並將得到的反應混合物冷卻至大約5℃。向反應溶液中攪拌下分小批加入高碘酸鈉(74.4kg)，同時保持反應溫度為3-5℃。在添加結束後，用硫代硫酸鈉(45kg)水(38L)溶液終止反應，使得到的淤漿粒化大約20分鐘。抽濾分離無機鹽，用乙酸乙酯洗滌濾餅。用水洗滌合併的濾液並靜置。用乙酸乙酯萃取水層，合併富含產物的有機層並用8kg氯化鈉的水(72L)溶液洗滌。在大約75℃下常壓蒸餾濃縮有機萃取液，冷卻至室溫，粒化2-4小時。向冷卻的淤漿(5-15℃)中加入己烷(360L)並繼續粒化大約1小時。抽濾收集沉澱的固體，依次用乙酸乙酯和己烷充分洗滌，然後在大約40-50℃下真空乾燥，得到白色固體狀的目標化合物(42.0kg，71％收率)。
實施例9(3aR，6aS)-二氫-2-二甲基-5-(苯基甲基)-4H-1，3-二氧雜環戊烯並[4，5-c]吡咯-4，6(5H)-二酮(IVb) 向在117.2L 2，2-二甲氧基丙烷中的58.6kg(IVa)的淤漿中加入1.72L甲磺酸，室溫攪拌反應混合物6-9小時直至反應結束。向反應混合物中加入總計322L異丙醚，並使得到的淤漿粒化。冷卻至-10--15℃後，再繼續粒化2小時。過濾收集測定的固體，用異丙醚洗滌，在40-45℃下真空乾燥大約12小時，得到目標化合物(57.8kg，84％收率)。
實施例10(3aR，6aS)-四氫-2，2-二甲基-5-(苯基甲基)-4H-1，3-二氧雜環戊烯並-[4，5-c]吡咯(IVc)
將總計56.1kg(IVb)和563L甲苯合併，並使混合物升至50-60℃直至幾乎全溶解。將得到的溶液過濾以除去微量不溶物，然後將其加入277.6kgRed-Al(65重量％的氫化二(2-甲氧基乙氧基)鋁甲苯溶液)的甲苯(141L)溶液中。將得到的溶液加熱回流大約4小時，然後冷卻至大約室溫。向反應溶液中緩慢加入224L 50％氫氧化鈉水(623L)溶液，同時仔細維持內部溫度在10-30℃。添加結束後，攪拌混合物大約20分鐘，靜置分層。用74加侖水洗滌有機層2次，乾燥，通過用甲醇常壓蒸餾除去甲苯。得到的油狀物(93％收率)直接用於下一步驟。
實施例11(另一個製備方法)(3aR，6aS)-四氫-2，2-二甲基-5-(苯基甲基)-4H-1，3-二氧雜環戊烯並-[4，5-c]吡咯(IVc) 將47.5kg(IVb)的四氫呋喃(378.5L)溶液蒸餾濃縮至大約3/4體積，冷卻，並抽查水含量。保持溫度為10-20℃，在氮氣下，以大約1.0kg/分鐘的速率加入總計263kg硼烷-四氫呋喃配合物(2M，在四氫呋喃中)。室溫下攪拌反應混合物大約4小時，此後，通過加入238.5ml甲醇終止反應，在添加過程中保持溫度為10-20℃。加入甲醇後，在室溫攪拌混合物大約1小時，然後在35-45℃攪拌大約2小時，然後升至回流溫度，通過在55-65℃下常壓蒸餾濃縮反應混合物至大約145L，用甲醇除去四氫呋喃。冷卻混合物至30-50℃，加入473L甲醇，如上所述，再次進行常壓蒸餾，濃縮混合物至最終體積為大約145L。冷卻濃縮物至大約室溫並加入大約1L水。得到的目標化合物溶液直接用於下一步驟。
實施例12(3aR，6aS)-四氫-2，2-二甲基-4H-1，3-二氧雜環戊烯並[4，5-c]吡咯，對-甲苯磺酸鹽(IVi) 將195L(IVc)樣品與7.1kg 20％炭(50％水分溼度)載氫氧化鈀混合在氫化容器中，混合物在大約50psig下氫化大約10-20小時。反應結束後，過濾混合物以除去催化劑，用甲醇充分洗滌濾餅。常壓蒸餾濃縮反應混合物至大約80L，加入288L甲基乙基酮。常壓蒸餾，使溶液體積降至大約133L，過濾溶液。然後，將得到的溶液用34.6kg對-甲苯磺酸的甲基乙基酮(102L)溶液處理大約1小時，使混合物在10-20℃粒化大約5小時。將淤漿冷卻至0-5℃，再粒化2小時。過濾收集沉澱的產物，用冷甲基乙基酮洗滌，在40-45℃下真空乾燥，得到白色晶狀固體目標化合物(44.8kg，74％收率)。
實施例133，4-O-異亞丙基-D-呋喃核糖(XIIa)
向裝有電磁攪拌棒的500ml燒瓶中加入D-核糖(20.0g，0.13mol)。加入丙酮(200ml)並開始攪拌。加入碘(0.01g，0.40mmol)並在室溫下攪拌溶液直至得到透明棕色溶液。加入硫代硫酸鈉(0.50g，3.16mmol)並攪拌淤漿直至溶液變為無色。向淤漿中加入硅藻土(5.00g)並過濾混合物。真空濃縮濾液，得到25.0g(99％收率)呈粘稠黃色油狀物的目標化合物，其被直接使用而無需進一步提純。
薄層色譜分析(乙酸乙酯；矽膠；使用磷鉬酸顯色)顯示出四個斑點Rf＝0.89，0.72主斑點(產物)，0.38和0.00。
′H NMR(300MHz；CDCI3)δ6.47(d，1H)，5.32(d，1H)，4.96(t，1H)，4.82(d，1H)，4.53(d，1H)，4.32(m，1H)，3.64(m，2H)，1.48(s，3H)，1.32(s，3H)。
實施例143，4-O-異亞丙基-2-羥基-5-甲氧基呋喃(XIIb) 向裝有回流冷凝器、機械攪拌器和溫度控制器的三頸燒瓶中加入(XIIa)(20.0g，0.11mol)和無水甲醇(500ml)。然後，將攪拌的反應混合物放置在氮氣氣氛下。加入高碘酸鈉(44.8g，0.21mol)並將攪拌的混合物加熱至大約40℃過夜。使溶液冷卻至室溫，加入硅藻土(10g)，並過濾淤漿。將得到的濾液濃縮為溶解在300ml二氯甲烷中的粘稠油狀物。得到的濾液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)、2％硫代硫酸鈉水溶液(200ml)和飽和氯化鈉水溶液(200ml)洗滌。用硫酸鎂乾燥有機層，過濾並真空濃縮，得到13.2g(66％收率)黃色油狀目標化合物。
薄層色譜分析(1∶1 乙酸乙酯/己烷；矽膠；使用磷鉬酸顯色)顯示出兩個斑點Rf＝0.82，0.66主斑點(產物)。
′H NMR(300MHz；CDCI3)[非對映體混合物δ5.43(2s)，5.41 and 5.28(2d)，5.05(s，1H)，4.85(s，1H)，4.68(m，1H)，3.98 and 3.98(s)，3.43(s，3H)，3.36(s，3H)，1.53(s，3H)，1.38(s，3H)，147(s，3H)，1.32(s，3H)。
實施例15順-3，4-O-異亞丙基-N-苄基吡咯烷(IVc) 將二氯甲烷(400ml)加入裝有均壓添加漏鬥、機械攪拌器和溫度計的三頸燒瓶中。加入硼氫化鈉(7.20g，0.19mol)，開始攪拌，將淤漿用冰浴冷卻至大約5℃。用大約45分鐘滴加乙酸(37.1g，0.62mol)。移開冷卻浴，使反應混合物升至室溫，並在室溫攪拌大約2小時。加入苄胺(7.10g，0.07mol)，隨後立即加入(XIIb)(12.0g，0.63mol)在30ml二氯甲烷中的溶液。溶液在室溫下攪拌過夜。用飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)終止反應，並將得到的兩相混合物劇烈攪拌大約30分鐘。分離出有機層，並用二氯甲烷(200ml)萃取水層。依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)和10％氯化鈉水溶液(200ml)洗滌合併的有機萃取液。將合併的有機萃取液用硫酸鎂乾燥、過濾並真空濃縮。得到14.5g(98.6％收率)黃色油狀目標化合物。
薄層色譜分析(20％乙酸乙酯/己烷；矽膠；使用磷鉬酸顯色)顯示出兩個斑點Rf＝0.36主斑點(產物)，0.02。
′H NMR(300MHz；CDCI3)δ7.2-7.4(m，5H)，4.65(d，2H)，3.62(s，2H)，3.06(d，2H)，2.17(dd，2H)，1.58(s，3H)，1.32(s，3H)。
實施例16順-3，4-二羥基-N-苄基吡咯烷鹽酸鹽(VIb) 向裝有回流冷凝器和磁力攪拌棒的圓底燒瓶中加入(IVd)(5.00g，0.02mol)。加入乙醇(10ml)並開始攪拌。加入濃鹽酸(7ml，0.09mol)並加熱溶液至回流。大約4小時後，使溶液冷卻至室溫並真空濃縮得到粘稠油狀物。加入乙醇(10ml)，並在室溫下攪拌得到的溶液。滴加乙酸異丙酯(35ml)，使產物結晶。攪拌淤漿過夜，過濾並用乙酸異丙酯(20ml)洗滌濾餅。將濾餅在室溫減壓(約30mmHg)下乾燥過夜，得到2.7g(56％收率)灰白色固體目標化合物，熔點122-123℃。
1H NMR(300MHz；CDCI3)δ7.58(m，2H)，7.45(m，3H)，5.48(br d，2H)，4.38(d，1H)，4.32(br s，2H)，4.25(br s，1H)，4.08(br s，1H)，3.42(m，1H)，3.32(m，2H)，3.13(m，1H)，3.02(m，1H)。
實施例17順-3，4-二羥基吡咯烷(V)
將3.34kg樣品(VIb)溶解在1.8L乙酸乙酯中，並將其加入到669g 10％Pd/C(50％水分溼度)在9加侖甲醇中的混合物中。在大約50psi壓力攪拌下，將得到的混合物加氫大約73小時。濾除催化劑，用甲醇衝洗濾餅。真空濃縮濾液，得到1.98kg部分結晶的琥珀色粘稠油狀物。向油狀殘餘物中加入大約2L異丙醇，將得到的懸浮液共沸蒸餾，除去殘餘的微量水，收集得到大約1L餾出物。另外加入1L異丙醇，得到的懸浮液在室溫下攪拌大約48小時。過濾混合物，收集的固體用420ml異丙醇洗滌，室溫下真空乾燥產物，得到826g所需游離鹼的吸溼白色固體，熔點108-119℃。由濃縮的濾液得到另外的97g產物。
′H NMR(DMSO-d6)δ2.46-2.51(m，2H，2′H，5′H)，2.81-2.87(m，2H，2″H，5″H)，3.30(br s，1H，1-NH)，3.74-3.77(m，2H，3-H，4-H)，439(br s，2H，都為OH)。
13C NMR(DMSO-d6)52.62，71.93。
元素分析，C4H9NO2計算值C，46.59；H，8.80；N，13.58。測定值C，46.62，H，9.36；N，13.43。
實施例185-氯-N-[(1S，2R)-3-[3R，4S]-3，4-二羥基-1-吡咯烷基-2-羥基-3-氧代-1-(苯基甲基)丙基]-1H-吲哚-2-甲醯胺(I)
將3.05kg(Ia)溶解在6.1L二甲基甲醯胺與4加侖乙酸乙酯的混合物中。冷卻反應溶液至0-5℃，並用羥基苯並三唑水合物(HOBT)(1.38kg)處理，再用1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(1.72kg)處理。保持內部溫度為大約5℃，加入總計884.4g順-3，4-二羥基吡咯烷游離鹼(V)，在室溫下攪拌反應混合物大約15小時。然後冷卻反應混合物至10-15℃，用39L水緩慢終止反應。除去下層產物層，然後用大約2加侖乙酸乙酯洗滌水層。合併有機層和產物層，並用碳酸氫鈉溶液洗滌3次(使用1.37kg碳酸氫鈉在4加侖水中的溶液洗滌一次，然後用687g碳酸氫鈉在2加侖水中的溶液洗滌2次)。用脫色炭處理有機層，過濾，用1加侖乙酸乙酯洗滌殘餘物。濃縮濾液至大約2加侖體積，用16L乙醇稀釋，然後真空濃縮至8L體積。另外加入10L乙醇，得到的懸浮液攪拌過夜。再加入10L乙醇，過濾混合物。收集的固體用3L乙醇洗滌，在大約35℃下真空乾燥，得到2.47kg目標化合物。
權利要求
1.下列結構式化合物
2.下列結構式化合物
全文摘要
本發明提供了用於製備某些N－(吲哚－2－羰基)－β－丙氨醯胺化合物的新方法和中間體，所述化合物是糖原磷酸化酶抑制劑，用於治療諸如血膽甾醇過多、高血糖、高胰島素血、高脂血、高血壓、動脈粥樣硬化、糖尿病、糖尿病性心肌病、感染、組織局部缺血和心肌局部缺血的疾病，並用於抑制腫瘤生長。
文檔編號C07D403/12GK1592749SQ03801545
公開日2005年3月9日 申請日期2003年1月6日 優先權日2002年1月18日
發明者馬克·T·巴裡拉, 弗蘭克·R·布希, 米歇爾·A·庫圖裡爾, 蘇珊·L·奧裡爾, 彼得·R·羅斯, 德裡克·L·蒂克納, 哈裡·O·託比亞森, 格雷戈裡·J·威思布羅 申請人:輝瑞產品公司