含有新穎前藥的分子組合物和其用途

2023-07-23 04:05:26

含有新穎前藥的分子組合物和其用途
【專利摘要】本發明提供新穎前藥組合物和其用途。
【專利說明】含有新穎前藥的分子組合物和其用途

【技術領域】
[0001] 本發明涉及含有新穎前藥的分子（PDCM)，其中所述PDCM包含一或多個含有至少 一個非天然編碼胺基酸的多肽。本發明大體上涉及使用化學以及重組DNA技術利用分子生 物學方法製造和選擇用於PDCM的多肽的領域。

【背景技術】
[0002] 治療性分子（如本文所述的那些）被稱為含有前藥的分子（PDCM)。PDCM包含一 或多個含有至少一個非天然編碼胺基酸的多肽。
[0003] 前藥包括（但不限於）生物活性母體化合物的化學衍生物，其在投與後最終在體 內釋放母體化合物。前藥可允許技工修改藥劑在體內的作用的起始和/或持續時間且可修 改藥物在體內的輸送、分布、可溶性或穩定性以及生物可用性。此外，前藥調配物可減小毒 性和/或以其它方式克服在投與藥物製劑時遇到的困難。一種策略是將藥物掩蓋為非活性 前藥，所述非活性前藥利用目標細胞的一些特殊特性解除掩蓋。丹米德S. R. (Denmeade，S. R.)等人，癌症研究（Cancer Research) 58, 2537-2540 (1998)。
[0004] 前藥是母體或活性化合物的生物惰性或實質上非活性形式。活性藥物的釋放速率 受到數種因素影響，包括（但不限於）鍵、連接基團或聚合物的類型、母體藥物與改性劑的 連接。這些前藥應僅在體內轉化成活性藥物。一旦前藥被注入患者，其就應有效轉化成活 性藥物。必須注意避免製備在出現足夠量的母體化合物水解之前例如經由腎臟或網狀內皮 系統消除的前藥。
[0005] 前藥可能的生物活性母體化合物包括（但不限於）細胞毒性劑、多肽、酶、毒素、 藥物、放射性核素、抗病毒劑、診斷探針、顯影劑以及其它通過從PDCM餘部解離而活化的藥 劑。
[0006] 細胞毒性劑的前藥具有治療性用途，因為其可將細胞毒性前藥傳遞到特定細胞 群體以實現以靶向方式酶促轉化成細胞毒性藥物。已出現許多針對用單克隆抗體藥物 結合物革C向腫瘤細胞的報導{塞拉（Sela)等人，免疫結合物（Immunoconjugates),第 189-216 頁（C.沃格爾（C. Vogel)編 1987);高斯（Ghose)等人，靶向藥物（Targeted Drugs),第 1-22 頁（E?戈德伯格（E. Goldberg)編 1983);迪勒（Diener)等人，抗體 介導的傳遞系統（Antibody Mediated Delivery Systems),第 1-23 頁（J?羅德韋爾 (J.Rodwell)編1洲8);彼得斯（Pietersz)等人，抗體介導的傳遞系統，第25-53頁 (J.羅德韋爾編1 988);布莫（Bumol)等人，抗體介導的傳遞系統，第55-79頁（J.羅 德韋爾編I988) ;G_A.彼得斯（G_A_ Pietersz)和K.克勞爾（K. Krauer)，2藥物革巴向雜 志（J. Drug Targeting)，183_215 (1994) ;R.V. J?夏裡（R.V.J. Chari), 31 先進藥物傳遞 綜述（Adv. Drug Delivery Revs. ),89-104(1998) ;W.A.布萊特勒（W.A. Blattler)和 R.V.J.夏裡，抗癌劑，癌症化學療法前沿（Anticancer Agents, Frontiers in Cancer Chemotherapy) ,317-338, ACS 會議系列 796 (ACS Symposium Series796);和 I?小島 (LOjima)等人編，美國化學協會（American Chemical Society) 2001}。細胞毒性藥物 如甲氨蝶呤（methotrexate)、道諾黴素（daunorubicin)、阿黴素（doxorubicin)、長春新鹼 (vincristine)、長春鹼（vinblastine)、美法侖（melphalan)、絲裂黴素 C(mitomycin C)、 苯丁酸氮芥（chlorambucil)、刺孢黴素（calicheamicin)以及美登醇（maytansinoid)已偶 聯到多種鼠類單克隆抗體。在一些情況下，藥物分子經由如血清白蛋白的中間載體分子與 抗體分子連接{伽裡特（Garnett)等人，46癌症研究（Cancer Res. )2407-2412 (1986);大 川（Ohkawa)等人，23 癌症免疫與免疫療法（Cancer Immunol. Immunother. )81-86(1986); 遠藤（Endo)等人，們癌症研究1076-1〇8〇 (198〇) }、葡聚糖{赫維茨（Hurwitz)等 人，2應用生物化學（Appl. Biochem.) 25-35 (1980);馬納比（Manabi)等人，34生物化 學藥理學（Biochem. Pharmacol. )289-291 (1985);迪爾曼（Dillman)等人，46 癌症研究 4886-4891(1986);和紹瓦勒（Shoval)等人，85美國國家科學院院刊（Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. A. )8276-8280(1988)}或多聚穀氨酸{冢田（Tsukada)等人，73國家癌症學會 雜誌（J. Natl. Cane. Inst. )721-729 (1984);加藤（Kato)等人，27 醫藥化學雜誌（J. Med. Chem. ) 1602-1607 (1984);冢田等人，52 英國癌症雜誌（Br. J. Cancer) 111-116(1985)}。一 系列廣泛的連接基團可用於製備這類免疫結合物，包括可裂解和非可裂解連接基團兩者。
[0007] 螯合為前藥的藥劑包括多肽。所述多肽可包含一或多個非天然編碼胺基酸。多肽 可螯合為前藥，從而例如調節多肽的釋放、將多肽靶向特定細胞類型或實現其它所需結果。 靶向需要在所需條件下（包括（但不限於）在所需部位處）產生治療有效量的活性藥物的 方式。
[0008] 多種多肽可與前藥連接以將前藥的母體或活性化合物傳遞到所需目標。所述多肽 包括（但不限於）具有已知結合特異性的靶向藥劑如抗原結合多肽（ABP)、肽和多肽。根 據所選細胞結合劑所結合的細胞類型，可在體內、離體或體外治療許多疾病。所述疾病包括 (但不限於）癌症，包括淋巴瘤、白血病、肺癌、乳房癌、結腸癌、前列腺癌、腎癌、胰臟癌等。
[0009] 前藥的釋放可通過許多方式實現，包括（但不限於）暴露於生理條件，通過酶促裂 解（包括（但不限於）利用由特定細胞類型分泌或表達的酶，利用通過誘導表達或過度表 達的酶），或通過暴露於特定條件或藥劑實現。作為PDCM的一部分的連接基團或聚合物可 變得不穩定且自身從活性化合物解離。PDCM中存在的鍵可能不穩定且在所需條件下釋放活 性化合物。
[0010] 共價連接親水性聚合物聚（乙二醇）（縮寫為PEG)是一種增加許多生物活性分子 (包括蛋白質、肽和尤其疏水性分子）的水溶性、生物可用性、增加其血清半衰期、增加其治 療半衰期、調節其免疫原性、調節其生物活性或延長其循環時間的方法。PEG已被廣泛用於 醫藥品或人工移植物以及生物相容性、無毒和無免疫原性極為重要的其它應用中。為了使 PEG的所需特性最大化，與生物活性分子連接的PEG聚合物的總分子量和水合狀態必須足 夠高，以便賦予通常與PEG聚合物連接相關的有利特徵，如增加的水溶性和循環半衰期，同 時不會不利地影響母體分子的生物活性。
[0011] PEG衍生物時常經由反應性化學官能團（如賴氨酸、半胱氨酸和組氨酸殘基、N端 和碳水化合物部分）與生物活性分子連接。蛋白質和其它分子通常具有有限數目的反應性 位點可供聚合物連接。通常，最適於經由聚合物連接而修飾的位點在受體結合中起到重要 作用，並且是保留分子的生物活性所必需的。因此，聚合物鏈與生物活性分子上此類反應性 位點的不加選擇的連接常常導致經聚合物修飾的分子的生物活性明顯減少或甚至全部喪 失。R.克拉克（R-Clark)等人，(19%).牛物化學雜誌（T_ Biol. Chem. )，271:21969-21977。 為形成聚合物分子量足夠賦予目標分子所需優勢的結合物，【背景技術】方法通常涉及大量聚 合物臂與分子的無規連接，由此增加母體分子的生物活性減少或甚至完全喪失的風險。
[0012] 形成用於將PEG衍生物與蛋白質連接的基因座的反應性位點受蛋白質結構支配。 蛋白質（包括酶）是由各種a -胺基酸序列構成，這些序列的一般結構為H2N一CHR一C00H。 一個胺基酸的 a氨基部分（H2N--)與相鄰胺基酸的羧基部分（一C00H)連接形成醯胺鍵， 其可表示為一(NH--CHR-CO) n--,其中下標"n"可等於數百或數千。R表示的片段可含有 關於蛋白質生物活性和連接PEG衍生物的反應性位點。
[0013] 舉例來說，在胺基酸賴氨酸的情況下，在e位置以及a位置中存在一NH2部分。 e -NH2在鹼性pH條件下自由反應。用PEG進行蛋白質衍生化領域中的很多技術都是針對 開發用於連接蛋白質中存在的賴氨酸殘基的 e--NH2部分的PEG衍生物。"用於先進聚乙 二醇化技術的聚乙二醇和衍生物（Polyethylene Glycol and Derivatives for Advanced PEGylation)"，奈克塔分子工程目錄（Nektar Molecular Engineering Catalog) ,2003,第 I-17頁。然而，這些PEG衍生物都具有共有的局限性，即，無法將其選擇性地安裝於蛋白質 表面上存在的常見的多種賴氨酸殘基上。在賴氨酸殘基對於蛋白質活性極為重要（例如存 在於酶活性位點中）的情況下，或在賴氨酸殘基對於介導蛋白質與其它生物分子的相互作 用起作用的情況下，如在受體結合位點的情況下，這將會成為顯著的局限性。
[0014] 用於蛋白質聚乙二醇化的現有方法的第二同樣重要的新增問題在於：除所需反應 之外，PEG衍生物可經歷與殘基的不合需要的副反應。組氨酸含有結構以--N(H)--表示的 反應性亞氨基部分，而許多與S-NH 2反應的化學反應性物質也可與一N(H)-反應。類似 地，胺基酸半胱氨酸的側鏈帶有游離硫氫基，結構上表示為-SH。在一些情況下，針對賴氨 酸e--NH 2基團的PEG衍生物還與半胱氨酸、組氨酸或其它殘基反應。這可產生經PEG衍 生化的生物活性分子的複雜不均勻混合物，並且有破壞作為目標的生物活性分子活性的風 險。需要開發出這樣的PEG衍生物，其允許在蛋白質內的單一位點引入化學官能團，隨後使 一或多種PEG聚合物能夠在蛋白質表面上明確界定且可預測的特定位點與生物活性分子 選擇性偶聯。
[0015] 除賴氨酸殘基外，此項技術中還曾就開發靶向其它胺基酸側鏈（包括半胱氨酸、 組氨酸和N端）的活性PEG試劑進行了大量嘗試。例如，參看以引用的方式併入本文中的 美國專利第6, 610, 281號，以及"用於先進聚乙二醇化技術的聚乙二醇和衍生物"，奈克塔 分子工程目錄，2003,第1-17頁。可以使用定點誘變和此項技術中已知的其它技術，將半 胱氨酸殘基位點選擇性地引入蛋白質結構中，並且可使由此得到的游離硫氫基部分與具有 硫醇反應性官能團的PEG衍生物反應。但這種方法比較麻煩，因為引入游離硫氫基會使所 得蛋白質的表達、摺疊和穩定性變得複雜。因此，需要具有一種將化學官能團引入生物活性 分子中的方式，其能使一或多種PEG聚合物與蛋白質選擇性偶聯，同時還與硫氫基以及蛋 白質中常見的其它化學官能團相容（即，不會與之發生不當副反應）。
[0016] 從此項技術的抽樣（sampling)中可以了解到，所開發的用於連接蛋白質側鏈，尤 其賴氨酸胺基酸側鏈上的一NH 2部分和半胱氨酸側鏈上的-SH部分的許多此類衍生物都證 實在其合成和使用方面存在問題。一些衍生物與蛋白質形成不穩定鍵，這些鍵將經歷水解， 並因此分解、降解，或者另外在水性環境（例如血流）中不穩定。一些衍生物可形成較為穩 定的鍵，但會在形成鍵之前經歷水解，這意味著PEG衍生物上的反應性基團可能會在連接 蛋白質之前就失活。一些衍生物略帶毒性，因此不太適於體內使用。一些衍生物反應過慢 而無法實際使用。一些衍生物會因連接到負責蛋白質活性的位點而導致蛋白質活性喪失。 -些衍生物對其將連接的位點不具特異性，這也會導致喪失所需活性以及缺乏結果的可再 現性。為克服與用聚（乙二醇）部分修飾蛋白質相關的挑戰，己開發出更穩定（例如，美國 專利6, 602, 498,其以引用的方式併入本文中）或與分子和表面上的硫醇部分選擇性反應 (例如，美國專利6,610, 2S1，其以引用的方式併入本文中）的PEG衍生物。此項技術中無 疑需要在生理環境中具化學惰性，而只有在需要的情況下才選擇性反應形成穩定化學鍵的 PEG衍生物。
[0017]近來，在蛋白質科學中已報導一種全新的技術，其有望克服與蛋白質的 位點特異性修飾相關的許多局限性。具體點說，已將新的組分加入到原核生物 大腸桿菌（Escherichia coli，E_coli)(例如 L?王（L. Wang)等人，(2001),科 學（Science)292:498-500)和真核生物釀酒酵母菌（Sacchromyces cerevisia， S. cerevisiae)(例如J.秦（J. Chin)等人，科學301 :964-7 (2003))的蛋白質生物合 成機器中，使得所述機器能夠在體內將非基因編碼胺基酸併入蛋白質中。已經使用此 方法將多種具有新穎化學、物理或生物學特性的新胺基酸，包括光親和標記和可光異 構化胺基酸、光交聯胺基酸（參見例如秦J.W. (Chin, J.W.)等人(2002)美國國家科 學院院刊，99:11020-11024 ;和秦J. W.等人，（2002)聿圍化學學會雜誌(LAm. Chem. D 124:9〇26-9027)、酮胺基酸、含有重原子的胺基酸和糖基化胺基酸有效地且高保真 地併入大腸桿菌中和酵母中響應於琥珀密碼子（TAG)的蛋白質中。參見例如J.W.秦 (J_ ff. Chin)等人，（2002),美國化學學會雜誌（Tournal of the American Chemical Society) 124:9026-9027 ： L W.真和 P. G.舒爾茨(P. G. Schultz), (2002),化學牛物化 學（ChemBioChem) 3 (11) :1135-1137 ;J.W?秦等人，(2002).美國國家科學院院刊（PMS United States of America)99:11020-11024 :和 L 王和 P. G.舒爾茨，(2002),化學誦訊 (Chem. Comm.), 1:1-11〇所有參考文獻都以全文引用的方式併入本文中。這些研究已證實， 有可能選擇性地以常規方式引入未見於蛋白質中、對可見於20種常見的基因編碼胺基酸 中的所有官能團具化學惰性且可用於有效選擇性反應而形成穩定共價鍵的化學官能團，如 酮基、炔基和疊氮部分。
[0018] 將非基因編碼的胺基酸併入到蛋白質中的能力允許引入可提供天然存在的官能 團（如賴氨酸的S-NH2、半胱氨酸的硫氫基-SH、組氨酸的亞氨基等）的有價值的替代物 的化學官能團。已知某些化學官能團對見於2〇種常見的基因編碼胺基酸中的官能團是惰 性的但完全且有效地反應以形成穩定的鍵。例如此項技術中已知，疊氮基和乙炔基在催化 量銅存在下，可在水性條件中進行胡伊斯根（Huisgen) [3+2]環加成反應。例如，參見託爾 諾（Tornoe)等人，(2002)有機化學雜誌（L Org. Chem.)67:3057-3064 :和眾壢坧豐平夫 (Rostovtsev)等人，(2002)應用化學國際版（Angew. Chem. Int. Ed. )41:25%-%叫-舉例 來說，通過將疊氮部分引入蛋白質結構中，能夠併入對見於蛋白質中的胺、硫氫基、羧酸、羥 基呈化學惰性但也與乙炔部分平穩並有效地反應以形成環加成產物的官能團。重要的是， 在不存在乙炔部分的情況下，疊氮基在其它蛋白質側鏈存在下且在生理條件下保持化學惰 性，而且不發生反應。
[0019] 本發明尤其解決與PDCM的活性和製造相關的問題並且還解決生物學或藥理學特 性改良的I3DCM的製造。


【發明內容】

[0020]本發明提供含有前藥的分子（PDCM)，其包含一或多個含有一或多個非天然編碼氨 基酸的多肽。在一些實施例中，PDCM是具有通式A-L-B的化合物，其中：A代表包含一或多 個非天然編碼胺基酸的多肽；L代表連接基團或聚合物；且B代表可分離的分子。在一些實 施例中，I 5DCM是具有通式A: :B的化合物，其中：A代表包含一或多個非天然編碼胺基酸的多 肽；"：："代表B的官能團與A中存在的非天然胺基酸之間的鍵；且B代表可分離的分子。在 一些實施例中，PDCM的多肽組分包含完整抗體重鏈。在一些實施例中，roCM的多肽組分包 含完整抗體輕鏈。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含抗體輕鏈的可變區。在一些實施 例中，PDCM的多肽組分包含抗體重鏈的可變區。在一些實施例中，Pdcm的多肽組分包含抗 體輕鏈的至少一個CDR。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含抗體重鏈的至少一個CDR。 在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含輕鏈的至少一個CDR和重鏈的至少一個CDR。在一 些實施例中，PDCM的多肽組分包含Fab。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含兩個或兩 個以上Fab'。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含scFv。在一些實施例中，PDCM的多 肽組分包含兩個或兩個以上scFv。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含微抗體。在一些 實施例中，PDCM的多肽組分包含兩個或兩個以上微抗體。在一些實施例中，ToCM的多肽組 分包含雙功能抗體。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含兩個或兩個以上雙功能抗體。 在一些實施例中，I 3DCM的多肽組分包含輕鏈的可變區和重鏈的可變區。在一些實施例中， H)CM的多肽組分包含完整輕鏈和完整重鏈。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含一或多 個Fc域或其部分。在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含以上實施例中的任一者的組合。 在一些實施例中，PDCM包含以上實施例中的任一者的同型二聚物、異質二聚物、同型多聚物 或異質多聚物。
[0021] rocM的多肽組分可為任何長度的多肽，包括（但不限於）源於胰高血糖素基因的 多肽，如GLP-1、T_ 2〇多肽和肽YY肽，其包含一或多個非天然編碼胺基酸。本發明可使用 具有治療活性的任何多肽、片段、類似物或其變異體。已提供可用於本發明的多肽的大量實 例。然而，所提供的清單並非窮舉性的且不以任何方式限制可用於本發明的多肽的數目或 類型。因此，從任何多肽（包括新穎多肽）製造的任何多肽和/或片段、類似物和變異體可 根據本發明修飾且以治療方式使用。
[0022] 在一些實施例中，非天然編碼胺基酸用連接基團連接於水溶性聚合物。在一些實 施例中，非天然編碼胺基酸用可生物降解的連接基團或前藥連接於水溶性聚合物。在一些 實施例中，非天然編碼胺基酸連接於醯基部分或醯基鏈。在一些實施例中，非天然編碼氨基 酸利用連接基團連接於醯基部分或醯基鏈。在一些實施例中，非天然編碼胺基酸利用聚合 物、聚（乙二醇）連接基團、另一分子或前藥連接於醯基部分或醯基鏈。在一些實施例中， 非天然編碼胺基酸連接於血清白蛋白。在一些實施例中，非天然編碼胺基酸利用連接基團、 聚合物、另一分子或前藥連接於血清白蛋白。在一些實施例中，連接基團是前藥。在一些實 施例中,連接基團為兩次裂解（dual cleavage)的前藥，其中第1步驟為如白蛋白的分子的 控制釋放並且第2步驟為釋放連接基團或其部分的第二次裂解。在一些實施例中，非天然 編碼胺基酸用連接基團連接於生物活性分子。在一些實施例中，非天然編碼胺基酸用可生 物降解的連接基團或前藥連接於生物活性分子。
[0023] 在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含一或多個翻譯後修飾。在一些實施例中， PDCM的多肽組分連接於連接基團、聚合物或生物活性分子。在一些實施例中，PDCM的多肽 組分連接於雙官能聚合物、雙官能連接基團或至少一個其它分子。在一些實施例中，包含非 天然編碼胺基酸的roCM的多肽組分連接於一或多個也可包含非天然編碼胺基酸的其它多 肽。
[0024] 在一些實施例中，非天然編碼胺基酸連接於連接基團、聚合物、水溶性聚合物、分 子或直接連接於前藥組分。在一些實施例中，水溶性聚合物包含聚（乙二醇）部分。在- 些實施例中，聚（乙二醇）分子是雙官能聚合物。在一些實施例中，雙官能聚合物連接於第 二多肽。
[0025] 在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含至少兩個與包含聚（乙二醇）部分或生物 活性分子的水溶性聚合物連接的胺基酸。在一些實施例中，至少-個胺基酸是非天然編碼 胺基酸。
[0026] 在一些實施例中，PDCM包含多肽,所述多肽至少含有利用雙官能連接基團連接於 分子的非天然編碼氣基酸。雙官能連接基團可在每一端處具有相同或不同的反應性基團。 與多肽或與分子形成的鍵在某些條件下可能是可降解或不穩定的。 PDCM的活性化合物可在 包括（但不限於）酸性PH值、酶的存在和活性、福射、生理條件等的條件下釋放。連接基團 可具有廣泛範圍的分子量或分子長度。較大或較小分子量的連接基團可用於提供多肽與所 連接實體之間的所需空間關係或構象。具有較長或較短分子長度的連接基團也可用於提供 多肽與所連接實體之間的所需空間或柔性。類似地，可利用具有特定形狀或構象的連接基 團在PDCM到達其目標之前或之後賦予多肽或所連接實體以特定形狀或構象。對多肽與所 連接實體之間的空間關係的此優化可為分子提供新的經調節的或所需特性。
[0027] 在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的PDCM的相應多 肽組分的親和力相比時調節PDCM的多肽組分對抗原、其目標或結合蛋白的親和力的取代、 添加或缺失。在一些實施例中， PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的PDCM的相 應多肽組分的穩定性相比時提高I 3DCM的多肽組分的穩定性的取代、添加或缺失。在一些實 施例中，PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的PDCM的相應多肽組分的免疫原性 相比時調節PDCM的多肽組分的免疫原性的取代、添加或缺失。在一些實施例中，PDCM的多 肽組分包含在與無取代、添加或缺失的I 3DCM的相應多肽組分的血清半衰期或循環時間相 比時調節rocM的多肽組分的血清半衰期或循環時間的取代、添加或缺失。
[0028] 在一些實施例中，PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的TOCM的相應 多肽組分相比時提高PDCM的相應多肽組分的水溶性的取代、添加或缺失。在一些實施例 中，PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的PDCM的相應多肽組分的可溶性相比時 提高宿主細胞中產生的rocM的多肽組分的可溶性的取代、添加或缺失。在一些實施例中， PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的I 3DCM的相應多肽組分的表達或合成相比 時提高宿主細胞中PDCM的多肽組分的表達或提高體外合成的取代、添加或缺失。在一些實 施例中，PDCM的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的PDCM的相應多肽組分的蛋白酶抗 性相比時提高PDCM的多肽組分的蛋白酶抗性的取代、添加或缺失。在一些實施例中，TOCM 的多肽組分包含在與無取代、添加或缺失的rocM的相應多肽組分的蛋白酶抗性相比時降 低PDCM的多肽組分的蛋白酶抗性的取代、添加或缺失。
[0029] 本發明的TOCM的特徵可不同於其單獨多肽組分的特徵。可改變的特徵包括（但 不限於）對抗原、目標或結合蛋白的親和力；穩定性；免疫原性；血清半衰期；循環時間；水 溶性；在宿主細胞中的表達；蛋白酶抗性；和定位在特定部位處的能力。
[0030] 在一些實施例中，PDCM的多肽組分中的胺基酸取代可以天然存在或非天然存在的 胺基酸進行，其限制條件為至少一個取代是以非天然編碼胺基酸進行。
[0031] 在一些實施例中，併入PDCM的多肽組分中的非天然編碼胺基酸殘基包含羰基、乙 醯基、氨氧基、肼基、醯肼基、氨基脲基、疊氮基或炔基。在一些實施例中，非天然編碼胺基酸 包含胺基。
[0032] 在一些實施例中，非天然編碼胺基酸包含羰基。在一些實施例中，非天然編碼氨基 酸具有以下結構：
[0033]

【權利要求】
1. 一種具有通式A-L-B的化合物，其中：A代表包含一或多個非天然編碼胺基酸的多 肽；L代表連接基團或聚合物；且B代表可分離的分子。
2. 根據權利要求2所述的化合物，其中A-L-B的一或多個組分在L水解之後變得有活 性。
3. 根據權利要求3所述的化合物，其中變得有活性的所述A-L-B的組分選自由以下組 成的群組：A、B或（A以及B)。
4. 根據權利要求2所述的化合物，其中連接基團L在生理條件下水解。
5. 根據權利要求2所述的化合物，其中所述連接基團L以酶促方式裂解。
6. 根據權利要求2所述的化合物，其中所述連接基團L利用酸性pH值水解。
7. 根據權利要求2所述的化合物，其中所述連接基團L利用輻射水解。
8. 根據權利要求2所述的化合物，其中所述連接基團L在目標部位處水解。
9. 根據權利要求1所述的化合物，其中所述可分離的分子B選自由以下組成的群組： 生物活性部分和生物惰性部分。
10. -種具有通式A::B的化合物，其中：A代表包含一或多個非天然編碼胺基酸的多 肽；"：："代表B的官能團與A中存在的非天然胺基酸之間的鍵；且B代表可分離的分子。
11. 根據權利要求10所述的化合物，其中A-: :B的一或多個組分在"：："水解之後變得 有活性。
12. 根據權利要求11所述的化合物，其中變得有活性的所述A: :B的組分選自由以下組 成的群組：A、B或（A以及B)。
13. 根據權利要求11所述的化合物，其中"：："在生理條件下水解。
14. 根據權利要求11所述的化合物，其中"：："利用酸性pH值水解。
15. 根據權利要求11所述的化合物，其中"：："利用輻射水解。
16. 根據權利要求11所述的化合物，其中"：："在目標部位處水解。
17. 根據權利要求10所述的化合物，其中所述可分離的分子B選自由以下組成的群組： 生物活性部分和生物惰性部分。
【文檔編號】A61K39/00GK104244989SQ201380021600
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年2月28日 優先權日:2012年2月29日
【發明者】苗振偉, 周豪崇, 布魯斯·E.·基梅爾 申請人:Ambrx公司