用於增強非特異性免疫功能的中藥獸用藥的製備方法

2023-08-08 18:59:11

專利名稱：用於增強非特異性免疫功能的中藥獸用藥的製備方法
技術領域：
本發明涉及獸藥領域，具體而言，本發明涉及一種用於提高生長性能、增強機體非 特異性免疫功能的獸用中藥組合物，以及由該獸用中藥組合物製成的獸用藥、該獸用藥的 製備方法以及該獸用中藥組合物的應用。
背景技術：
禽類是重要的經濟動物，而禽疫病一直制約著養禽業的發展。儘管目前有很多禽 類疫苗可以供為選擇，但它們大多是針對特異性免疫，起效慢，作用專一，禽類有時在疫苗 提供有效保護前就已經發生了病毒感染。非特異性免疫是抵抗微生物感染的第一道防線， 具有起效快，作用範圍廣的特點。因此，目前很多研究者都在尋找和鑑定能有效激活禽類非 特異性免疫的新型免疫調節劑。天然中藥中的某些藥物及其提取物，具有增強動物機體免疫力、促進生長、抑制病 原體等多種作用，並且利用中藥防治動物疾病符合綠色養殖之趨勢，目前許多大型養殖場 也越來越重視中藥保健品的增強免疫作用。因而研究中藥對禽類非特異性免疫功能及其生 長性能的影響就顯得頗為重要，具有一定的研究意義和應用價值。發明人在查閱相關文獻後發現，目前國內外尚未有能有效提高禽類生長性能，增 強禽類機體非特異性免疫功能的獸用中藥組合物。

發明內容
為了實現本發明的目的，本發明提供一種獸用中藥組合物，其由以下原料藥製成 白頭翁、黃芪、白朮、板藍根、黃芩、柴胡、大黃。該獸用中藥組合物能夠用於提高生長性能、 增強機體非特異性免疫功能。在所述獸用中藥組合物中，各原料藥組分優選的重量份配比為白頭翁10 30重 量份、黃芪10 30重量份、白朮5 15重量份、板藍根5 15重量份、黃芩5 15重量 份、柴胡5 15重量份、大黃5 15重量份；各原料藥組分更優選的重量份配比為白頭翁 20 30重量份、黃芪20 30重量份、白朮10 15重量份、板藍根10 15重量份、黃芩 10 15重量份、柴胡10 15重量份、大黃5 10重量份；各原料藥組分最優選的重量份 配比為白頭翁25重量份、黃芪25重量份、白朮10重量份、板藍根10重量份、黃芩10重量 份、柴胡10重量份、大黃10重量份。本發明還提供了一種用於提高生長性能、增強機體非特異性免疫功能的獸用藥， 其由所述的獸用中藥組合物和藥學可接受的輔料製成。所述獸用藥的劑型包括但不限於口 服溶液劑、顆粒劑、可溶性粉劑、預混劑。其中所用藥學可接受的輔料為本領域所屬技術人 員熟知的常用輔料，獸用藥的製備方法為本領域所屬技術人員熟知的常規方法，具體可參 見《獸藥製劑生產應用手冊》(江西科學技術出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》 (四川科學技術出版社，1995年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農業出版 社，2006年4月出版)。 3
本發明還提供了一種製備所述獸用藥的方法，該方法包括1)稱取原料藥白頭翁、黃芪、白朮、板藍根、黃芩、柴胡、大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍根、黃芩、大黃粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-4. 5小時，濾取 煎液備用。其中粉碎步驟優選將原料藥粉碎成粗粉；煎煮步驟優選分3次進行第1次加入 藥材8倍量的水煎煮3小時，第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，第3次加入藥材3倍 量的水煎煮1小時。3)將白朮、柴胡粉碎，加3-8倍量的水煎煮1-3小時，收集揮髮油備用，並濾取煎 液備用。其中粉碎步驟優選將原料藥粉碎成粗粉；煎煮步驟優選將原料藥在加水後、煎煮前 進行浸泡，其中浸泡時間優選為45分鐘；加水量優選為藥材8倍量的水，煎煮時間優選為3 小時。4)將步驟3)中濾得的藥渣加3-8倍量的水煎煮1-3小時，濾取煎液，與步驟3)中 所得的煎液合併備用。其中煎煮步驟優選分2次進行第1次加入藥材5倍量的水煎煮2 小時，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時。5)將步驟2)中所得煎液和步驟4)中所得的合併煎液合併，將合併液濃縮，使得 每Iml濃縮液相當於含0. 5g原料藥；然後向濃縮液中加入乙醇，調節pH值為5. 0 7. 5， 靜置，取上清液。其中加入乙醇的量優選為使乙醇終濃度為60%的量；調節pH值的試劑優 選為10% NaOH溶液。6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇後與步驟3)中所得的揮髮油合併，幹 燥製成浸膏粉，備用。7)將步驟6)製得的浸膏粉加入藥學可接受的輔料製成所述獸用藥，例如口服溶 液劑、顆粒劑、可溶性粉劑、預混劑，並使得每Ig或每Iml獸用藥相當於含有Ig原料藥。本發明還提供了一種所述獸用中藥組合物在製備用於提高生長性能、增強機體非 特異性免疫功能的獸用藥中的應用。本發明獸用中藥組合物、獸用藥特別適用於禽類動物，包括但不限於雞、鴨、鵝。本發明獸用藥可通過拌入飼料或兌入飲水的方式給藥，使動物通過自由採食或自 由飲水攝入本發明獸用藥。拌入飼料的藥物濃度為0.5% (W/W)，即每IOOg飼料拌入0.5g 本發明獸用藥；兌入飲水的藥物濃度為0. 3-0. 5% (W/W)，即每IOOg飲用水兌入0. 3-0. 5g 本發明獸用藥。給藥次數為一天一次，連續給藥5到7天。本發明所述獸用藥採用《中國獸藥典》2005年版二部附錄31頁的薄層色譜法進 行定性測定所述獸用藥中的黃芩苷、黃芩素、白頭翁提取物和大黃提取物；參照《獸藥質量 標準》2003年版定性測定所述獸用藥中的黃芪多糖；採用反相高效液相色譜法(參見王蓿， 等，反相高效液相色譜法測定白頭翁藥材中白頭翁皂苷B4的含量，《時珍國醫國藥》，2009 年11月，第20卷第11期)，測定藥品中白頭翁皂苷B4的含量。1)黃芩苷、黃芩素的定性測定取本發明所述獸用藥lg，加乙酸乙酯-甲醇(3 1)混合溶液30mL，加熱回流30 分鐘，放冷，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇5mL使其溶解，取上清液作為供試品溶液。另取黃 芩苷對照品、黃芩素對照品，加甲醇分別製成每ImL含lmg、0. 5mg的對照品溶液。照薄層色 譜法(附錄31頁)試驗，吸取供試品溶液，上述二種對照品溶液各1 μ L，分別點於同一聚醯 胺薄膜上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10 3 1 2)為展開劑，預飽和30分鐘，展
4開，取出，晾乾，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上， 顯兩個相同的暗色斑點。(2)白頭翁提取物的測定取本發明所述獸用藥4g，加乙醇20mL，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約6mL， 放冷，加丙酮適量，則生成沉澱，濾過，速取沉澱少量(約5g)，置試管中，加醋酐ImL使溶解， 沿管壁加硫酸lmL，兩液接界處顯紅色或紅紫色環。(3)大黃提取物的測定取本發明所述獸用藥0. lg，加甲醇20mL，浸泡1小時，濾過，取濾液5mL，蒸乾，殘渣 加水IOmL使溶解，再加鹽酸lmL，加熱回流30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次振搖提取，每 次20mL，合併乙醚液，蒸乾，殘渣加三氯甲烷ImL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照 藥材0. Ig,同法製成對照藥材溶液。再取大黃酸對照品，加甲醇製成每ImL含Img的溶液， 作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄31頁)試驗，吸取上述三種溶液各4 μ L，分別點於 同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠H薄層板上，以石油醚(30-60°C)-甲酸乙酯-甲 酸(15 5 1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供 試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同的五個橙黃色螢光主斑點；在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色螢光斑點，置氨蒸氣中燻後，斑點變為紅色。(4)黃芪多糖的測定取本發明所述獸用藥5g，加去離子水20mL，浸泡30分鐘，濾過，取濾液5mL，加2% α -萘酚乙醇溶液3滴，搖勻後，沿試管壁緩緩加硫酸0. 5mL，在兩液面交界處顯棕色環。(5)白頭翁皂苷B4的含量測量取本發明所述獸用藥lg，準確量取，置於具塞錐形瓶中，然後精密加入甲醇10ml， 超聲30分鐘，放冷，過濾，濾液置50ml量瓶中，用少量流動相(乙腈0. 磷酸(V V ； 28 72))洗滌容器及殘渣，洗液併入同一量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，過0.2μπι濾 膜，經反相高效液相色譜檢測，計算，白頭翁皂苷Β4的含量(g/g)均不得低於0. 4%。在本發明獸用中藥組合物中，白頭翁為毛莨科白頭翁Pulsatilla chinensis (Bge.) Regel的乾燥根，主要含有白頭翁皂苷、三萜酸、木脂素、白頭翁靈、白頭翁 英、白頭翁素、原白頭翁素、胡蘿蔔苷以及糖蛋白等成分。其中白頭翁皂苷有抗腫瘤、增強免 疫功能、抗阿米巴原蟲及殺菌等作用。白頭翁及白頭翁皂苷對雞增重、免疫器官功能有一 定的促進作用，略優於黃芪，對雞中性粒細胞的吞噬率有極顯著的增強作用，白頭翁及其皂 苷，作為免疫增強劑，具有很好的研究價值與應用前景。黃苗為豆科植物蒙古黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. )Bge. var. mongholicus (Bge. ) Hsiao 或膜莢黃苗 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge.的乾燥根， 是被普遍認為對動物免疫有促進作用的一味中藥。黃芪能增強網狀內皮系統的吞噬功能， 使白細胞及多核白細胞數量顯著增加，使巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數顯著上升，對體 液免疫、細胞免疫均有促進作用。黃芪具有增強病毒誘生幹擾素的能力。易感冒者在感冒 流行季節服用黃芪，不僅可使感冒次數明顯減少，而且可使感冒症狀減輕，病程縮短。同時 黃芪所含的有效成分黃芪多糖有明顯的抗疲勞、耐低溫作用，能使正常以及虛損小鼠的抗 疲勞時間明顯延長。黃芪還可使細胞的生理代謝增強，能促進血清和肝臟的蛋白質更新，對 蛋白質代謝有促進作用。黃芪對痢疾、肺炎雙球菌、溶血性鏈球菌A、B、C及金黃色、檸檬色、
5白色葡萄球菌等均有抑制作用。白朮為菊科植物白朮Atractylodes macrocephala Koidz的乾燥根莖，具有健脾 益氣，燥溼利水，止汗，安胎的功效。用於脾虛食少，腹脹洩瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動不 安等。白朮水煎液對胃腸運動有興奮作用，具有抗潰瘍，抗疲勞，能顯著增強白細胞吞噬金 黃色葡萄球菌的能力。同時白朮可促進小鼠紅細胞造血作用，能有效抑制脂質過氧化，降低 組織脂質過氧化物的含量，避免有害物質對組織細胞結構和功能的破壞。白朮對瘤細胞有 細胞毒作用，能降低瘤細胞的增殖率，減低瘤組織的侵襲性，提高機體抗腫瘤反應的能力。板藍根為十字花科菘藍Isatis indigotica Fort.的乾燥根，在臨床上具有清熱 涼血、抗菌抗病毒作用，其水浸液對枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌，八聯球菌、大腸桿菌、 傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌、痢疾(志賀氏、弗氏)桿菌、腸炎桿菌等都有抑制作用，同時板藍 根具有很好的解毒作用。板藍根所有含的板藍根多糖能顯著增加正常小鼠脾重，白細胞總 數及淋巴細胞數，還能明顯增強抗體形成功能，增強小鼠靜脈注射碳粒廓清速率。板藍根所 含成分靛玉紅，能增強動物的單核巨噬細胞系統的吞噬能力，提高機體免疫功能，具有一定 的抗癌作用。黃芩為唇形科植物黃芩Scutellaria baicalensis Georgi的乾燥根。其有較廣 的抗菌譜，在試管內對痢疾桿菌、白喉桿菌、綠膿桿菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌以及 腦膜炎球菌等均有抑制作用，煎劑作喉頭噴霧，對腦膜炎帶菌者亦有效，即使對青黴素等抗 菌素已產生抗藥性的金黃色葡萄球菌，對黃芩仍屬敏感。對多種皮膚致病性真菌，體外亦有 抑制效果，並能殺死鉤端螺旋體。黃芩所含黃芩苷、黃芩苷元有抗炎抗變態反應作用。黃芩 甙有降壓、利尿、鎮靜作用，能抑制小白鼠的自發活動，作用強度與劑量有關，黃芩煎劑可抑 制小鼠陽性條件反射，此作用可能是由於它加強了皮層抑制過程所致，可用於神經興奮性 增高及失眠的高血壓患者。黃芩根莖的酊劑靜脈注射，對士的寧中毒的蛙、貓、狗，可消除強 直性痙攣的症狀，並使動物免於死亡。柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狹葉柴胡Bupleurum scorzonerifolium ffilld.的乾燥根。按性狀不同，分別習稱「北柴胡」及「南柴胡」。其所 含的揮髮油(丁香酚、己酸、r-十一酸內酯和對甲氧基苯二酮)，柴胡皂苷(皂苷元A)對傷 寒、副傷寒疫苗、大腸桿菌液、發酵牛奶、酵母等所致發熱有明顯解熱作用，且能使動物正常 體溫下降。柴胡總皂苷、皂苷還具有鎮靜、鎮痛、鎮咳作用，對多種致炎劑所致踝關節腫和結 締組織增生性炎症均有抑制作用。柴胡皂苷元a和d、柴胡醇、α -菠菜留醇可以降血脂(在 實驗性高脂血症動物身上降低膽固醇、甘油三酯和磷酯)、保肝(對CCl4、酒精、傷寒疫苗、 卵黃、黴米、D-半乳糖胺等所致肝功能障礙有保護作用。表現轉氨酶降低，肝功能恢復、肝 損傷減輕)。柴胡中的柴胡多糖可使吞噬細胞、自然殺傷細胞功能增強，提高病毒特異性抗 體滴度，對流感病毒、肝炎病毒、牛痘病毒、I型脊髓灰白質炎病毒、皰疹病毒有較好的抑制 作用。大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim, ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的乾燥根及根莖。臨床常用於治療 大便燥結、熱結便秘，一般在用藥後6-19小時可排便。各種實驗證明大黃對多種革蘭氏陽 性菌、某些陰性菌及真菌有不同程度的抑制作用，其抑菌的有效成分為蒽醌衍生物，其中大 黃酸、大黃素、蘆薈大黃素的作用最強。大黃能活血祛淤、降壓及降血脂，促進膽汁分泌、膽囊收縮、疏通膽小管內膽汁淤結，增加膽管收縮功能，鬆弛奧狄氏括約肌，從而使膽汁排出 增加，起到利膽退黃作用，因而大黃有利膽退黃，保肝除溼作用。本發明獸用中藥組合物首次將白頭翁、黃芪、白朮、板藍根配伍，具有扶正祛邪、清 熱解毒、增強機體非特異性免疫功能的功效，能治療機體免疫功能低下、免疫耐受、內源性 毒素以及應激等所致的多種非典型性病症，生長性能下降，以及風熱感冒、流感、法氏囊病、 腸毒症候群等溼熱性病症。在雞群的臨床試驗中，本發明獸用中藥組合物能夠有效提高雞 群的採食量和體重，降低料重比和死亡率，增加單位容積白細胞和紅細胞的數量，提高雞群 的抗體水平，說明本發明獸用中藥組合物能有效提高禽類生長性能，增強禽類機體非特異 性免疫功能，且療效顯著，值得在市場中推廣運用。
具體實施例方式以下通過具體實施方式
的描述對本發明作進一步說明，但這並非是對本發明的限 制，本領域技術人員根據本發明的基本思想，可以做出各種修改或改進，但是只要不脫離本 發明的基本思想，均在本發明的範圍之內。實施例1製備本發明獸用藥預混劑1)稱取原料藥25g白頭翁、25g黃芪、IOg白朮、IOg板藍根、IOg黃芩、IOg柴胡、IOg
大黃；2)將白頭翁、黃芪、板藍根、黃芩、大黃乾燥後粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時，分別濾取煎液，合併3次煎液備用；3)將白朮、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然後加熱煎煮3小時， 收集揮髮油另外儲存備用，並濾取煎液備用；4)將步驟3)中過濾後的剩餘藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合併備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合併，將合併液減壓濃縮至200ml ；然後將濃 縮液中加入300ml乙醇，並以10% NaOH溶液調節pH值為7. 0，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇後與步驟3)中所得的揮髮油合併，噴 霧乾燥得10. Sg浸膏粉備用；7)將步驟6)製得的浸膏粉，按現有獸藥製備方法(參見《獸藥製劑生產應用手冊》 (江西科學技術出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學技術出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農業出版社，2006年4月出版))，製成 IOOg本發明獸用藥預混劑。實施例2 製備本發明獸用藥口服溶液1)稱取原料藥22. 5g白頭翁、22.5g黃芪、12.5g白朮、12. 5g板藍根、12. 5g黃芩、 12. 5g柴胡、5g大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍根、黃芩、大黃乾燥後粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時，分別濾取煎液，合併3次煎液備用；
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3)將白朮、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然後加熱煎煮3小時， 收集揮髮油另外儲存備用，並濾取煎液備用；4)將步驟3)中過濾後的剩餘藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合併備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合併，將合併液減壓濃縮至200ml ；然後將濃 縮液中加入300ml乙醇，並以10% NaOH溶液調節pH值為6. 5，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇後與步驟3)中所得的揮髮油合併，噴 霧乾燥得10. 2g浸膏粉備用；7)將步驟6)製得的浸膏粉，按現有獸藥製備方法(參見《獸藥製劑生產應用手冊》 (江西科學技術出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學技術出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農業出版社，2006年4月出版))，製成 IOOml本發明獸用藥口服溶液。實施例3 製備本發明獸用藥顆粒劑1)稱取原料藥24. 5g白頭翁、22.5g黃芪、12g白朮、12g板藍根、12g黃芩、IOg柴
胡、7g大黃。2)將白頭翁、黃芪、板藍根、黃芩、大黃乾燥後粉碎成粗粉，加水煎煮提取3次第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時，濾取煎液；第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，濾 取煎液；第3次加入藥材3倍量的水煎煮1小時，分別濾取煎液，合併3次煎液備用；3)將白朮、柴胡粉碎成粗粉，加8倍量蒸餾水浸泡45分鐘，然後加熱煎煮3小時， 收集揮髮油另外儲存備用，並濾取煎液備用；4)將步驟3)中過濾後的剩餘藥渣加水煎煮2次第1次加入藥材5倍量的水煎 煮2小時，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時；分別濾取煎液，將這兩次煎液與步驟3) 中所得的煎液合併備用；5)將步驟2)和步驟4)中所得的煎液合併，將合併液減壓濃縮至200ml ；然後將濃 縮液中加入300ml乙醇，並以10% NaOH溶液調節pH值為7. 5，靜置過夜，取上清液；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇後與步驟3)中所得的揮髮油合併，噴 霧乾燥得10. 5g浸膏粉備用；7)將步驟6)製得的浸膏粉，按現有獸藥製備方法(參見《獸藥製劑生產應用手冊》 (江西科學技術出版社，1994年12月出版)、《藥用輔料大全》(四川科學技術出版社，1995 年1月出版)、《中國獸藥典》2005年版二部(中國農業出版社，2006年4月出版))，製成 IOOg本發明獸用藥顆粒劑。以上三個實施例的質量控制結果如表1所示表1本發明實施例1-3的獸用藥質量控制結果
實施例1實施例2實施例3黃芩苷(定性)陽性陽性陽性
8 以下通過具體試驗例對本發明有益效果作進一步說明。試驗例1本發明獸用中藥組合物對雞生長性能的影響1.試驗藥品本發明實施例1-3製成的獸用藥。2.試驗動物20日齡「青腳麻」Al系肉雞10300隻，體況良好，無發病跡象，由四川 邦禾農業科技有限公司下屬雞場提供。3.動物分組與飼養管理將試驗用雞隨機分為4組，3個平行試驗組，1個對照組。採用集中拌料的方式分 別在試驗組雞群的2個生長階段(21-28日齡，51-58日齡)按每天料量5%。(W/W)的濃度 飼餵本發明獸用藥，讓雞群在12h內自由採食完畢，剩餘12h飼餵基礎日糧，對照組整個過 程只飼餵基礎日糧。同時在整個試驗階段，對雞群按照以下免疫程序接種新城疫、禽流感(H5W亞型， Re-5株；H9亞型)疫苗16 日齡禽流感H5W亞型，Re-5株0. 5ml/只(肌肉注射)，遼寧益康生物製品有限公司， 批號=20100203 ；30 日齡雞新城疫、禽流感(H9亞型)二聯滅活疫苗(La Sota株+WD株)0· 5ml/只(肌 肉注射)，上海海利生物藥品有限公司，批號20100310。4.生長性能測定在飼養開始與結束後，計算增重量、採食量、料重比、死亡率，其中增重量分別於試驗的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，逐只空腹稱重，計算雞 群在2個生長階段(21-28日齡，51-58日齡)的體重變化；採食量分別於試驗的第21d，第28d，第51d，第58d早晨，稱量各組飼料消耗量；料重比料重比=飼養期內飼料消耗總量(kg)/同一飼養期內增重量(kg)。5.數據處理與分析數據用SpSS13. 0軟體進行單因素方差分析，組間差異採用Duncan多重比較，顯著 水平為0. 05。數據結果用平均值士標準差(means 士 S. D)表示。本發明實施例1的獸用藥預混劑的試驗結果雞群在2個生長階段(21-28日齡，51_58日齡)飼養結束後的增重量、採食量、料
9重比、死亡率的結果見表2。表2本發明實施例1的獸用藥預混劑對雞增重量、採食量、料重比、死亡率的影響 注同行肩標字母相同表示無差異顯著(P > 0. 05)；同行肩標字母不同表示有差 異顯著(P 0. 05)；在雞群處於51-58 日齡時，試驗組每隻雞平均增重0. 356kg，對照組每隻雞平均增重0. 325kg，2個組別的增重 量差異顯著(P < 0. 05)。在21-28日齡的生長階段中，試驗組雞群的採食量增加量比對照組大；在51-58日 齡的生長階段中，試驗組的採食量大於對照組，但採食增加量不及對照組。同時由表2可 見，雞群在2個生長階段的料重比都顯著低於對照組，死亡率顯著低於對照組。本發明實施例2的獸用藥口服溶液和本發明實施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗結果在對本發明實施例2的獸用藥口服溶液的試驗中，在雞群處於21-28日齡時，試驗 組每隻雞平均增重0. 19kg，對照組每隻雞平均增重0. 16kg，2個組別的增重量差異顯著(P
<0. 05)；在雞群處於51-58日齡時，試驗組每隻雞平均增重0. 389kg，對照組每隻雞平均增 重0. 345kg，2個組別的增重量差異顯著(P<0. 05)。試驗組雞群的採食增加量在21-28日 齡，51-58日齡時，較對照組均有所增加，同時，雞群在2個生長階段的料重比都顯著低於對 照組，死亡率顯著低於對照組；在對本發明實施例3的獸用藥顆粒劑的試驗中，在雞群處於21-28日齡時，試驗組 每隻雞平均增重0. 175kg，對照組每隻雞平均增重0. 151kg，2個組別的增重量差異顯著(P
<0. 05)；在雞群處於51-58日齡時，試驗組每隻雞平均增重0. 376kg，對照組每隻雞平均增 重0. 342kg，2個組別的增重量差異顯著(P<0. 05)。試驗組雞群的採食增加量在21-28日 齡，51-58日齡時，較對照組均有所增加，同時，雞群在2個生長階段的料重比都顯著低於對 照組，死亡率顯著低於對照組。
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目前，國內外眾多的研究機構轉向從純天然植物中提取有效成分來調控畜禽消化 道內環境，並對其微生態進行調控，以減少抗生素作為畜禽促生長劑的使用。本試驗在正常 的養殖條件下對10300隻20日齡「青腳麻」Al系肉雞的生長性能的研究發現，在雞群的2 個生長階段(21-28日齡，51-58日齡)分別使用本發明獸用藥2周後，能明顯提高雞群的採 食量，降低料重比和死亡率，由此說明本發明獸用中藥組合物能夠有效提高飼料報酬，降低 死亡率，增強動物機體的免疫力。試驗例2本發明獸用中藥組合物對雞外周血白細胞、紅細胞數量的影響1.試驗藥品同試驗例1。2.試驗動物同試驗例1。3.動物分組與飼養管理同試驗例1。4.雞外周血白細胞和紅細胞數的測定將試驗組、對照組的雞群在60日齡分別隨機翼靜脈採血16份。用常規方法(《動 物生理學實驗》(第2版)，楊秀平主編，高等教育出版社，2009年8月出版)計數白細胞和 紅細胞。5.數據處理與分析同試驗例1。〈試驗結果〉本發明實施例1的獸用藥預混劑的試驗結果將試驗組、對照組的雞群在60日齡分別隨機翼靜脈採血16份後，用常規方法(《動 物生理學實驗》(第2版)，楊秀平主編，高等教育出版社，2009年8月出版)計數白細胞和 紅細胞，具體結果見表3。表3飼餵本發明實施例1的獸用藥預混劑後雞白細胞、紅細胞數量的變化(η = 16) 由試驗結果表3可知，試驗組的平均白細胞數為2. 73，對照組平均白細胞數為 2. 40，結果經方差分析後，差異顯著(P < 0. 05)；而試驗組的平均紅細胞數為2. 93，對照組 平均紅細胞數為2. 57，數據通過方差分析後，差異顯著(P < 0. 05)。即試驗組的平均紅細 胞數和平均白細胞數均顯著高於對照組。本發明實施例2的獸用藥口服溶液和本發明實施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗結果在對本發明實施例2的獸用藥口服溶液的試驗中，試驗組的平均白細胞數為 2. 88，對照組平均白細胞數為2. 47，結果經方差分析後，差異顯著(P <0.05)；而試驗組 的平均紅細胞數為3. 10，對照組平均紅細胞數為2. 69，數據通過方差分析後，差異顯著(P < 0. 05)；在對本發明實施例3的獸用藥顆粒劑的試驗中，試驗組的平均白細胞數為2. 89， 對照組平均白細胞數為2. 54，結果經方差分析後，差異顯著(P < 0. 05)；而試驗組的平均紅 細胞數為2. 97，對照組平均紅細胞數為2. 51，數據通過方差分析後，差異顯著(P < 0. 05)。近年來，已有研究報導指出，中草藥中含有生理活性物質，能起到刺激畜禽生長， 維持動物體內環境正常平衡。從根本上保護、維持畜禽的整體健康，增強機體的免疫功能， 調節體內有益微生物群落，充分發揮和提高機體本身預防疾病的潛在能力。機體免疫力的 強弱與免疫細胞的數量有關，因而免疫細胞的數量在一定程度上可以反映機體的免疫水 平。白細胞是機體防禦系統的一個重要組成部分，能吞噬異物產生抗體，在機體損傷治癒、 抗禦病原入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。已有研究證明紅細胞參與機體許多重 要的生理功能，其免疫功能是其他免疫細胞所無法替代的，它和白細胞一起在機體非特異 性免疫力方面發揮著非常重要的作用，因而本試驗通過計數雞外周血白細胞、紅細胞的數 量，從而可以在一定程度上了解本發明獸用中藥組合物對雞非特異性免疫功能的影響。
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由試驗結果可知，三個試驗組的平均紅細胞數和平均白細胞數均分別顯著高於對 照組。由此說明，雞服用本發明獸用藥後能提高單位容積白細胞、紅細胞的數量，從而對提 高雞群的非特異性免疫力有積極作用。試驗例3本發明獸用中藥組合物對雞血清抗體的影響〈試驗方法〉1.試驗藥品同試驗例1。2.試驗動物同試驗例1。 3.動物分組與飼養管理同試驗例1。4.雞血清抗體水平檢測於雞群60日齡，在試驗組和對照組分別隨機翼靜脈採血，做雞血清抗體檢測。檢 測指標為雞新城疫抗體水平、雞禽流感抗體水平，均採用間接血凝試驗。5.數據處理與分析同試驗例1。〈試驗結果〉本發明實施例1的獸用藥預混劑的試驗結果採用間接血凝試驗於雞群60日齡隨機翼靜脈採血，檢測了試驗組、對照組雞群新 城疫和禽流感的抗體水平，結果見表4。表4雞血清抗體檢測結果 注n表示樣品數；ND表示新城疫；AI表示禽流感；AI (H5Re_5)、AI (H9)分別表示 禽流感的2個亞型J表示平均抗體滴度。由表4可知，試驗組新城疫平均抗體滴度為10. 5高於對照組8. 4，差異顯著(P
<0. 05)；而檢測禽流感平均抗體滴度時，禽流感H5Re-5平均抗體滴度為6. 1高於對照組 5. 5，差異顯著(P < 0. 05)；禽流感H9平均抗體滴度為7. 5高於對照組6. 3，差異顯著(P
<0. 05)。本發明實施例2的獸用藥口服溶液和本發明實施例3的獸用藥顆粒劑具有相似試 驗結果在對本發明實施例2的獸用藥口服溶液的試驗中，試驗組新城疫平均抗體滴度為 11. 7高於對照組9. 4，差異顯著(P < 0. 05)，而檢測禽流感平均抗體滴度時，也得到了類似的結果。試驗組各禽流感亞型的平均抗體滴度均顯著高於對照組；在對本發明實施例3的獸用藥顆粒劑的試驗中，試驗組新城疫平均抗體滴度為 11. 5高於對照組8. 2，差異顯著(P < 0. 05)，而檢測禽流感平均抗體滴度時，也得到了類似 的結果。試驗組各禽流感亞型的平均抗體滴度均顯著高於對照組。本研究通過檢測雞群血清抗體滴度，評價了本發明獸用中藥組合物對增強新城 疫、禽流感(H5Re-5亞型，H9亞型)疫苗免疫效果的影響。由上述結果可知，在正常免疫接 種的同時採用本發明獸用藥配合使用，能夠起到協同作用，可有效增加免疫效果，比起單純 依靠疫苗，更能提高雞的抗體水平。
權利要求
一種用於增強機體非特異性免疫功能、提高生長性能的獸用藥的製備方法，該方法包括1)稱取原料藥白頭翁、黃芪、白朮、板藍根、黃芩、柴胡、大黃；2)將白頭翁、黃芪、板藍根、黃芩、大黃粉碎，加3 8倍量的水煎煮1 4.5小時，濾取煎液備用；3)將白朮、柴胡粉碎，加3 8倍量的水煎煮1 3小時，收集揮髮油備用，並濾取煎液備用；4)將步驟3)中濾得的藥渣加3 8倍量的水煎煮1 3小時，濾取煎液，與步驟3)中所得的煎液合併備用；5)將步驟2)中所得煎液和步驟4)中所得的合併煎液合併，將合併液濃縮，使得每1ml濃縮液相當於含0.5g原料藥；然後向濃縮液中加入乙醇，調節pH值為5.0～7.5，靜置，取上清液備用；6)將步驟5)中所得的上清液減壓回收乙醇後與步驟3)中所得的揮髮油合併，乾燥製成浸膏粉；7)將步驟6)製得的浸膏粉加入藥學可接受的輔料製成所述獸用藥，使得每1g或每1ml獸用藥相當於含有1g原料藥。
2.根據權利要求1所述的製備方法，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁10 30 黃芪10 30 白朮5 15板藍根5 15 黃芩5 15 柴胡5 15 大黃5 15。
3.根據權利要求2所述的製備方法，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁20 30 黃芪20 30 白朮10 15板藍根10 15 黃芩10 15 柴胡10 15 大黃5 10。
4.根據權利要求3所述的製備方法，其中所述原料藥的重量份配比為 白頭翁25 黃芪25 白朮10板藍根10 黃芩10 柴胡10 大黃10。
5.根據權利要求1所述的製備方法，其中在所述步驟2)中，所述煎煮分3次進行，第1 次加入藥材8倍量的水煎煮3小時，第2次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，第3次加入藥 材3倍量的水煎煮1小時。
6.根據權利要求1所述的製備方法，其中在所述步驟3)中，進一步包括將原料藥在加 水後、煎煮前進行浸泡的步驟，浸泡時間為45分鐘。
7.根據權利要求1所述的製備方法，其中在所述步驟4)中，所述煎煮分2次進行，第1 次加入藥材5倍量的水煎煮2小時，第2次加入藥材3倍量的水煎煮1小時。
8.根據權利要求1所述的製備方法，其中步驟5)中加入乙醇的量為使乙醇終濃度為 60%的量；調節pH值的試劑為10% NaOH溶液。
9.根據權利要求1-8中任一項所述的製備方法，其中所述獸用藥為口服溶液劑、顆粒 劑、可溶性粉劑或預混劑。
全文摘要
本發明涉及一種用於提高生長性能、增強機體非特異性免疫功能的獸用中藥組合物，它是由下列原料藥製成白頭翁、黃芪、白朮、板藍根、黃芩、柴胡、大黃。本發明還涉及由該獸用中藥組合物製成的獸用藥、該獸用藥的製備方法以及該獸用中藥組合物的應用。本發明所述的獸用中藥組合物具有扶正祛邪、清熱解毒、增強機體非特異性免疫功能的功效，能治療機體免疫功能低下、免疫耐受、內源性毒素以及應激等所致的多種非典型性病症，生長性能下降，以及風熱感冒、流感、法氏囊病、腸毒症候群等溼熱性病症。
文檔編號A61K36/71GK101926861SQ20101027071
公開日2010年12月29日 申請日期2010年8月31日 優先權日2010年8月31日
發明者楊莉, 田學華, 鄧仕偉, 陳金 申請人:四川華神農大動物保健藥品有限公司