低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(gbe)的製備工藝的製作方法
2023-07-17 20:38:26 1
專利名稱：低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(gbe)的製備工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及天然植物活性成分的提取技術，具體的說是一種低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的簡易製備工藝。
背景技術：
現有的如專利申請號為03114826.3的專利申請中提到了製備低銀杏酚酸含量的方法，但該製備方法中提取濃縮稀釋沉降時，需在-1℃～20℃的條件下進行，這樣使得生產的一般情況下，需加冷卻系統，從而使成本增加；另一方面，為除去銀杏酚酸，使成品中銀杏酚酸的含量低於5ppm，在該專利中使用了市場上少用且價格較貴的除酸樹脂DAD-1，使生產成本增加的同時，帶來除酸樹脂的額外的開發費用。
發明內容
為克服上述不足之處，本發明提供了一種低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，很好的解決了稀釋沉降時的溫度限制，其溫度為環境溫度，可以為-1℃～45℃，這樣生產時無需冷卻系統，同時沉降時無需靜置，縮短了生產周期；另外本發明公開的方法無需特殊的除酸樹脂，均採用國內市場上最為常見的苯乙烯型大孔吸附樹脂，尤其是D101和AB-8，材料價廉易得。
實現本發明目的的技術方案包括以下步驟以銀杏葉為原料①銀杏葉用25％～95％乙醇或30％～100％甲醇提取，得提取液；②將提取液濃縮回收乙醇或甲醇，得濃縮液；③濃縮液加水或純化水均勻稀釋，稀釋液用酸調pH值小於5後，過濾，得濾液；④濾液過大孔吸附樹脂柱吸附；⑤吸附柱用含水乙醇或甲醇洗脫，得洗脫液；⑥洗脫液可按以下4種不同的工藝路線，分別製得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(a)洗脫液直接用低極性有機溶劑萃取，或部分濃縮後用低極性有機溶劑萃取；所得萃取液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(b)洗脫液部分濃縮，加水稀釋或不加水，稀釋液或部分濃縮液過大孔吸附樹脂柱吸附；而後用含水醇類溶劑洗脫，洗脫液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(c)將洗脫液濃縮、乾燥所得的銀杏提取物為原料，用0％～95％乙醇或0～100％甲醇溶解，用低極性有機溶劑萃取，所得萃取液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(d)將洗脫液濃縮、乾燥所得的銀杏提取物為原料，用0％～90％乙醇或0％～90％甲醇溶解，過大孔吸附樹脂柱吸附；而後用含水醇類溶劑洗脫，洗脫液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物。
其中步驟③中所述的酸，可用不同濃度的無機酸和有機酸，也可用酸性化合物或上述各種酸的混合物；步驟③中所述的過濾，其過濾方式可採取抽濾、離心過濾或板框壓濾的過濾方式；步驟④和步驟⑥中的(b)、(d)所述的大孔吸附樹脂均為非極性或弱極性的大孔吸附樹脂，尤其是苯乙烯型大孔吸附樹脂，更好的是D101和AB-8型大孔吸附樹脂；步驟⑤中所述的洗脫，可先後分為兩次洗脫，第一次用的溶媒為0％～35％甲醇或0％～35％乙醇洗脫，第二次用溶媒為30％～90％甲醇或30％～90％乙醇洗脫，得洗脫液；步驟⑥中的(b)、(d)所述的含水醇類溶劑是30％～90％甲醇或30％～90％乙醇；步驟⑥中的(b)、(d)中所述的低極性有機溶劑是乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚、6號溶劑油、汽油、己烷、戊烷或庚烷，或是含有上述溶劑中的一種或多種的混合溶劑。
本發明提供的低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝的有益效果有1、解決了稀釋沉降時的溫度限制，在常溫下進行即可，無需特殊的除酸樹脂，均採用國內市場上常見的價廉且應用已久的苯乙烯型大孔吸附樹脂，尤其是D101和AB-8型大孔吸附樹脂，降低了生產成本；2、工藝參數無須特別要求，容易實現產品的生產控制狀態；3、整個工藝無須靜置等耗時操作，縮短了生產周期且生產產品得率一般穩定在2.5～3.3％之間。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步說明，但本發明不僅限於實施例的內容。
實施例一取銀杏葉25kg，用10、10、8倍量(溶劑體積比藥材重量，以下情況同此)60％乙醇，70℃攪拌提取三次，時間分別為2h、2h、1h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的1.5倍體積，加2倍體積的純化水，用稀鹽酸調pH值4.5～5.0，攪拌均勻，靜置30min後經三足離心機離心，得離心液，離心液過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，依次用20％乙醇、80％乙醇洗脫，收集80％乙醇洗脫液，減壓濃縮，溫度50～60℃，濃縮至約0.4倍洗脫液體積，再過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，用70％乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物0.75kg。銀杏總黃酮為32.6％、銀杏內酯11.2％，銀杏酚酸2.1ppm。樹脂再生後可重複使用(以下情況同此)。
實施例二取銀杏葉50kg，用12、10倍量70％乙醇，80℃攪拌提取二次，時間分別為2h、2h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的2.0倍體積，加2倍體積的純化水，用20％硫酸調pH1.0～2.0，攪拌均勻後，經高速離心機離心，得離心液，離心液過D101型大孔吸附樹脂吸附，依次用15％乙醇、60％乙醇洗脫，收集60％乙醇洗脫液，減壓濃縮，溫度50～60℃，濃縮至約0.5倍洗脫液體積，再過D101型大孔吸附樹脂，用70％乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物1.36kg。銀杏總黃酮為30.8％、銀杏內酯12.1％，銀杏酚酸3.4ppm。
實施例三取銀杏葉200kg，用12、10倍量80％乙醇，80℃攪拌提取二次，時間分別為2h、2h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的1.6倍體積，加3倍體積的純化水，用10％枸櫞酸調pH3.0～3.5，攪拌均勻後，經板框壓濾，得濾液，濾液過D101型大孔吸附樹脂吸附，依次用10％乙醇、80％乙醇洗脫，收集80％乙醇洗脫液，減壓濃縮，溫度45～55℃，濃縮至約0.8倍洗脫液體積，加入等體積的石油醚(60～90℃)萃取，下層再加入0.5倍體積的石油醚(60～90℃)萃取，取下層減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物6.0kg。銀杏總黃酮為29.68％、銀杏內酯10.8％，銀杏酚酸1.1ppm。
實施例四取銀杏葉200kg，用12、10倍量80％甲醇，60℃攪拌提取二次，時間分別為2h、2h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的2.1倍體積，加2.5倍體積的純化水，用維生素C調pH2.0～2.5，攪拌均勻後，靜置2h後，經三足離心機離心，得離心液，離心液過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，依次用25％乙醇、80％甲醇洗脫，收集80％甲醇洗脫液，減壓濃縮，溫度40～45℃，濃縮至約1.2倍洗脫液體積，加入等體積的6號溶劑油萃取，下層再加入0.8倍體積的6號溶劑油萃取，取下層減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物6.1kg。銀杏總黃酮為32.2％、銀杏內酯12.5％，銀杏酚酸1.4ppm。
實施例五取銀杏葉150kg，用10、8、8倍量60％甲醇，70℃攪拌提取三次，時間分別為2h、2h、1h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的2.0倍體積，加2倍體積的純化水，用硫酸銨調pH4.0～5.0，攪拌均勻，靜置8h後，經高速機離心，得離心液，離心液過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，依次用30％甲醇、75％甲醇洗脫，收集75％甲醇洗脫液，加入0.8倍體積的己烷萃取，下層再加入0.8倍體積的己烷萃取，取下層減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物4.1kg。銀杏總黃酮為32.7％、銀杏內酯11.6％，銀杏酚酸0.5ppm。
實施例六取銀杏葉180kg，用12、10倍量80％甲醇，60℃攪拌提取二次，時間分別為2h、2h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的2.0倍體積，加2倍體積的純化水，用20％磷酸調pH3.0～4.0，攪拌均勻後，經三足離心機離心，得離心液，離心液過D101型大孔吸附樹脂吸附，依次用水、20％乙醇、75％乙醇洗脫，收集75％乙醇洗脫液，減壓濃縮，溫度50～60℃，濃縮至約0.6倍洗脫液體積，再過AB-8型大孔吸附樹脂，用70％乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物5.0kg。銀杏總黃酮為34.8％、銀杏內酯12.9％，銀杏酚酸0.8ppm。
實施例七取銀杏葉150kg，用10、10倍量75％甲醇，60℃攪拌提取二次，時間分別為2h、2h，放出提取液，合併濃縮至藥材重量的2.0倍體積，加2倍體積的純化水，用10％硫酸調pH2.0～3.0，攪拌均勻後，經高速離心機離心，得離心液，離心液過AB-8型大孔吸附樹脂吸附，依次用水、15％乙醇、75％甲醇洗脫，收集75％甲醇洗脫液，減壓濃縮，溫度50～60℃，噴霧乾燥，得銀杏提取物4.7kg，其中銀杏總黃酮為31.8％、銀杏內酯13.2％，銀杏酚酸7.9ppm。
取上述銀杏提取物1kg，加15倍量60％甲醇溶解後，加入0.8、0.6倍體積量的石油醚(60～90℃)萃取兩次，取下層液，濃縮、噴霧乾燥得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物0.94kg。銀杏總黃酮為31.6％、銀杏內酯13.7％，銀杏酚酸0.7ppm。
取上述銀杏提取物1kg，加入10倍量40％甲醇溶解，再加入等體積的純水稀釋後，過D101大孔吸附樹脂吸附，依次用水、70％甲醇洗脫，70％甲醇洗脫液，減壓濃縮、噴霧乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物0.92kg。銀杏總黃酮為33.8％、銀杏內酯12.1％，銀杏酚酸0.4ppm。
權利要求
1.低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，其特徵在於它由以下步驟組成以銀杏葉為原料①銀杏葉用25％～95％乙醇或30％～100％甲醇提取，得提取液；②將提取液濃縮回收乙醇或甲醇，得濃縮液；③濃縮液加水或純化水均勻稀釋，稀釋液用酸調pH值小於5後，過濾，得濾液；④濾液過大孔吸附樹脂柱吸附；⑤吸附柱用含水乙醇或甲醇洗脫，得洗脫液；⑥洗脫液可按以下4種不同的工藝路線，分別製得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(a)洗脫液直接用低極性有機溶劑萃取，或部分濃縮後用低極性有機溶劑萃取；所得萃取液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(b)洗脫液部分濃縮，加水稀釋或不加水，稀釋液或部分濃縮液過大孔吸附樹脂柱吸附；而後用含水醇類溶劑洗脫，洗脫液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(c)將洗脫液濃縮、乾燥所得的銀杏提取物為原料，用0％～95％乙醇或0～100％甲醇溶解，用低極性有機溶劑萃取，所得萃取液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物；(d)將洗脫液濃縮、乾燥所得的銀杏提取物為原料，用0％～90％乙醇或0％～90％甲醇溶解，過大孔吸附樹脂柱吸附；而後用含水醇類溶劑洗脫，洗脫液濃縮、乾燥，得低銀杏酚酸含量的銀杏提取物。
2.根據權利要求1所述的低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，其特徵在於步驟③中所述的酸，可用不同濃度的無機酸和有機酸，也可用酸性化合物或上述各種酸的混合物；步驟③中所述的過濾，其過濾方式可採取抽濾、離心過濾或板框壓濾的過濾方式。
3.根據權利要求1所述的低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，其特徵在於步驟④和步驟⑥中的(b)、(d)所述的大孔吸附樹脂均為非極性或弱極性的大孔吸附樹脂，尤其是苯乙烯型大孔吸附樹脂，更好的是D101和AB-8型大孔吸附樹脂。
4.根據權利要求1所述的低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，其特徵在於步驟⑤中所述的洗脫，可先後分為兩次洗脫，第一次用的溶媒為0％～35％甲醇或0％～35％乙醇洗脫，第二次用溶媒為30％～90％甲醇或30％～90％乙醇洗脫，得洗脫液。
5.根據權利要求1所述的低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的製備工藝，其特徵在於步驟⑥中的(b)、(d)所述的含水醇類溶劑是30％～90％甲醇或30％～90％乙醇；步驟⑥中的(b)、(d)所述的低極性有機溶劑是乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚、6號溶劑油、汽油、己烷、戊烷或庚烷，或是含有上述溶劑中的一種或多種的混合溶劑。
全文摘要
本發明涉及天然植物活性成分的提取技術，具體的說是一種低銀杏酚酸含量的銀杏提取物(GBE)的簡易製備工藝。該方法製備所得的銀杏提取物中，銀杏總黃酮28～40％，銀杏內酯6～14％，銀杏酚酸＜5ppm。其製備方法包括提取、分離純化、濃縮、乾燥等步驟，與現有技術相比，本發明具有工藝簡單，周期短，易於操作控制，無需特殊設備和材料，成本低等特點，適合於大規模生產。
文檔編號C07H1/08GK101091730SQ200610093940
公開日2007年12月26日 申請日期2006年6月23日 優先權日2006年6月23日
發明者袁幹軍, 劉軍保, 陳志斌, 塗蓉, 黃紅謙, 蘇秋玲 申請人:海南醫學院