四唑基-苯基乙醯胺的葡糖激酶激活劑的製作方法
2023-08-13 08:13:26
專利名稱：四唑基-苯基乙醯胺的葡糖激酶激活劑的製作方法
葡糖激酶(GK)是在哺乳動物中發現的四種己糖激酶之一[Colowick，S.P.，The Enzymes，Vol.9(P.Boyer編輯)Academic Press，New York，NY，第1-48頁，1973]。己糖激酶催化葡萄糖代謝的第一步，即將葡萄糖轉化成葡萄糖-6-磷酸。葡糖激酶具有有限的細胞分布，其主要被發現於胰β-細胞和肝實質細胞中。此外，GK是這兩類細胞中葡萄糖代謝的限速酶，已報導這兩類細胞在整個身體的葡萄糖體內平衡起重要作用[Chipkin，S.R.，Kelly，K.L.和Ruderman，N.B.Joslin′s糖尿病(C.R.Khan和G.C.Wier編輯)，Lea和Febiger，Philadelphia，PA，第97-115頁，1994]。在GK顯示出最高活性的一半時，葡萄糖的濃度大約為8mM。而當葡萄糖在很低濃度(＜1mM)時，另外三種己糖激酶即被飽和。因此，當進食含碳水化合物餐後，隨著血中葡萄糖濃度從禁食(5mM)增加至餐後(約等於10-15mM)水平，通過GK途徑的葡萄糖流量提高[Printz，R.G.，Magnuson，M.A.，和Granner，D.K.，Afzn.Rev.Nutrition Vol.13(R.E.Olson，D.M.Bier，和D.B.McCormick編輯)，Annual Review，Inc.，Palo Alto，CA，第463-496頁，1993])。這些發現得益於10年前的假設GK在β-細胞和肝實質細胞中起到葡萄糖傳感器的作用(Meglasson，M.D.和Matschinsky，F.M.Amer.生理學雜誌(J.Physiol.)246，E1-E13，1984)。近年來，在轉基因動物中的研究已經證實GK確實在整個身體的葡萄糖體內平衡中發揮關鍵作用。不表達GK的動物在出生後幾日內死於嚴重的糖尿病，而過度表達GK的動物已經改善了葡萄糖耐受(Grupe，A.，Hultgren，B.，Ryan，A.等，細胞(Cell)83，69-78，1995；Ferrie，T.，Riu，E.，Bosch，F.等，FASEB J.，10，1213-1218，1996)。葡萄糖暴露的增加通過β-細胞中的GK與增加的胰島素分泌偶聯，通過肝實質細胞中的GK與增加的糖原沉積以及或許降低的葡萄糖產生偶聯。
發現II型青年成熟期突髮型糖尿病(MODY-2)是由GK基因突變後功能喪失而引起，表明GK在人體中也起葡萄糖傳感器的作用(Liang，Y.，Kesavan，P.，Wang，L.等，生物化學雜誌(Biochem.J.)309，167-173，1995)。通過鑑定表達突變型GK並伴隨增加的酶活性的患者，提供了進一步的證據支持GK在人的葡萄糖代謝的調節中扮演重要的角色。這些患者表現出與不正常提高的血漿胰島素水平相關的禁食低血糖(Glaser，B.，Kesavan，P.，Heyman，M.等，New England J.Med.338，226-230，1998)。儘管在大多數II型糖尿病患者中未發現GK基因的突變，能激活GK並由此增加GK傳感器系統的敏感性的化合物仍然被用於治療所有II型糖尿病的高血糖症狀。葡糖激酶激活劑能增加β-細胞和肝細胞中的葡萄糖代謝的流量，其會伴隨著增加的胰島素分泌。這些藥物將用於治療II型糖尿病。
本發明提供了一種選自下列化合物的四唑 其中Z為 或 ；R1或R2中的一個為 另一個為氫，滷素，低級烷基磺醯基，全氟低級烷基，氰基，或硝基；R3為環烷基；R4為-C(O)-NHR6，或通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代，n為0或1；R5為低級烷基，或全氟低級烷基；R6為氫或低級烷基；以及該四唑的藥用鹽。
在一個實施方案中，本發明涉及上式I的化合物，其中R1或R2中的一個為 ，另一個為滷素，低級烷基磺醯基，或全氟低級烷基；R3為環烷基；R4為-C(O)-NHR6，或通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代，n為0或1；R5為低級烷基，或全氟低級烷基；R6為低級烷基；及其藥用鹽。
在另一個實施方案中，本發明提供了式I的四唑，其包括下列式I-A和I-B化合物 其中R1、R2、R3、R4和n如上式I所定義，優選地其中R1為 ，R2為滷素，全氟低級烷基，或低級烷基磺醯基，R3為環烷基，R4為-C(O)-NHR6，或通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代，R5為低級烷基，或全氟低級烷基，R6為低級烷基，n為0或1，及其藥用鹽；和 其中R1、R2、R3、R4和n如上式I所定義，優選地其中R1或R2中的一個為 ，另一個為滷素，低級烷基磺醯基，或全氟低級烷基；R3為環烷基，R4為-C(O)-NHR6，或通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代，R5為低級烷基，或全氟低級烷基，R6為低級烷基，n為0，及其藥用鹽。
式I-A描述了當其不被氫化時的同分異構鍵。式I-B描述了當其被氫化時的鍵。因此，Δ表示式I-A中過雙鍵的反式構型，*表示式I-B中的不對稱碳原子。式I-B化合物的四唑優選為R構型。
式IA或IB化合物為在治療II型糖尿病中用於增加胰島素分泌的葡糖激酶激活劑。
本發明還涉及含有式I化合物和藥用載體和/或輔劑的藥物組合物。另外，本發明還涉及這些化合物作為治療活性物質的用途，以及它們在製備用於治療或預防II型糖尿病的藥物中的用途。本發明還涉及式I化合物的製備方法。此外，本發明涉及用於預防或治療II型糖尿病的方法，其包括對人或動物給藥式I化合物。
式I-A或式I-B的一個實施方案為四唑，其中R4為通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代。式I-A1表示作為式I-A化合物的這個實施方案。式I-B1表示作為式I-B化合物的這個實施方案。
式I-A或式I-B的另一個實施方案為四唑，其中R4為-C(O)-NHR6，其中R6為氫或低級烷基。式I-A2表示作為式I-A化合物的這個實施方案，式I-B2表示作為式I-B化合物的這個實施方案。
在本發明的大多數四唑中，優選R1為 。還優選R5為低級烷基(如甲基)。進一步優選R3為環戊基，儘管環己基和環庚基也是可能的。當R4為六元芳香雜環時，優選為取代或未取代的吡啶。當R4為五元芳香雜環時，優選為取代或未取代的噻唑。當被取代時，任何一個環優選被單取代，並且優選的取代基為滷素，如溴。R2優選為滷素(如氟或氯)或全氟低級烷基(如三氟甲基)，和R6優選為甲基。因此，式IA或IB的四唑可以包括這些方案中的一種或多種，它們以任意選擇的方式組合。此外，這些方案中的一種或多種可以應用到如本發明描述的任何四唑。例如，在具有取代的吡啶本發明的四唑中，優選的取代基為溴。
具體地，在式I-A1的四唑中，優選R1為 ，R5為低級烷基，和R3為環戊基(式I-A1a)。在式I-A1a的一個實施方案中，R4為六元芳香雜環，特別是取代或未取代的吡啶。在該四唑中，R2可以是滷素。一個例子為(E)-N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯胺。
在式I-A1的另一個實施方案中，R4為五元芳香雜環，特別是取代或未取代的噻唑。在該四唑中，R2可以是滷素或全氟低級烷基，或R2可以是低級烷基磺醯基。前者四唑的例子為
(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-丁-2-烯酸-噻唑-2-基醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，和(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺。
後者四唑的一個例子為(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基鬥N-噻唑-2-基-丙烯醯胺。
在式I-A1的另一個四唑中，R1為 ，R2為滷素，R4為取代或未取代的噻唑。在這些四唑中，R5為低級烷基或全氟低級烷基。R3可以是環己基，例如(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，和(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基丙烯醯胺。
或R3可以是環庚基，例如(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，和(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺。
本發明還涉及式I-A2的四唑(即式I-A的四唑)，其中R4為-C(O)-NHR6，其中R6為氫或低級烷基。
在這些優選的這些四唑中，R1為 ，R5為低級烷基，R3為環戊基，和R6為甲基，尤其是其中R2為滷素。該四唑的一個例子為(E)-1-{3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基-丙烯醯基}3-甲基-脲。
本發明還涉及式I-B的四唑，例如式I-B1的四唑(其中R4為如上面詳細描述的五元或六元芳香雜環)。
在該四唑中，R1優選為 ，R5為低級烷基，和R3為環戊基(式I-B1a)。在式I-B1a的一個實施方案中，R4為六元芳香雜環，特別是取代或未取代的吡啶。在該四唑中，R2可以是滷素。這些四唑的例子為N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，和N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺。
或者，R2可以是全氟低級烷基，例如N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺。
在式I-B1a的另一個實施方案中，R4為五元芳香雜環，特別是取代或未取代的噻唑。在該四唑中，R2可以是滷素或全氟低級烷基，或者R2可以是低級烷基磺醯基。這些四唑的例子為3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，和3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺。
在式I-B1的另一個四唑中，R1為 ，R3為環己基，和R4為取代或未取代的噻唑。在這些四唑中，R2為滷素。R5可以是低級烷基，例如在2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基丙醯胺中，或全氟低級烷基，例如在2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺中。
在本發明的任何四唑中，特別是式I-B1的某些四唑中，R2和R1可以互換，這樣R2為 。在這些四唑中，優選R1為低級烷基磺醯基，R4為取代或未取代的噻唑，和R3為環戊基。該四唑的一個例子為3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺。
本發明還涉及式I-B2的四唑(即式I-B的四唑)，其中R4為-C(O)-NHR6，其中R6為氫或低級烷基。
在該四唑中，優選R1為 ，R3為環戊基，R6為甲基，和R2為全氟低級烷基或滷素。該四唑的例子為1-{3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基}-丙醯基-3-甲基-脲，和1-{2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙醯基-3-甲基-脲。
在式I化合物中，優選的取代基R4為-C(O)-NHR6，任選被滷素取代的噻唑基，或任選被滷素取代的吡啶基。在式I-A化合物中，優選的取代基R4為噻唑基，被滷素取代的噻唑基，和被滷素取代的吡啶基。在式I-B化合物中，優選的取代基R4為被滷素取代的噻唑基和吡啶基。該芳香雜環R4的優選滷素取代基為溴。
在式I化合物中，R1或R2中的一個優選為 ，另一個為滷素，低級烷基磺醯基，或全氟低級烷基。
更優選地，R1為 或低級烷基磺醯基，和R2為滷素(其中優選氟和氯)，低級烷基磺醯基或全氟低級烷基。
在式I-A化合物中，R1優選為 ，和R2優選為滷素(其中優選氟和氯)，全氟低級烷基(其中優選三氟甲基)，或低級烷基磺醯基(其中優選甲基磺醯基)。
在式I-A化合物中，R1優選為 ，或低級烷基磺醯基，其中優選甲基磺醯基。
此外，如果R1為 ，R2優選為滷素(其中優選氟和氯)，或全氟低級烷基(其中優選三氟甲基)。
另一方面，如果R1為低級烷基磺醯基，R1優選為 在式I-A化合物中，優選的取代基R3為環戊基，環己基和環庚基。在式I-B化合物中，優選的取代基R3為環戊基和環己基，優選環戊基。
在式I化合物中，優選的取代基R5為甲基和三氟甲基。在式I-B化合物中，特別優選甲基。優選的取代基R6為甲基，和n優選為0。
按照本發明優選的化合物選自(E)-N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯胺，(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-丁-2-烯酸-噻唑-2-基醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，
(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基-]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺，(E)-1-{3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基-丙烯醯基}-3-甲基-脲，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺，3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，1-{3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基}-丙醯基-3-甲基-脲，和1-{2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙醯基-3-甲基-脲。
在本申請使用的術語″低級烷基″包括具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，如甲基，乙基，丙基，異丙基，優選甲基和乙基。在本申請使用的″環烷基″可以是3-8個碳原子，但優選5-7個碳原子的飽和烴環。在本申請使用的″全氟低級烷基″是指任何低級烷基基團，其中低級烷基基團中所有的氫被氟取代或置換，如三氟甲基，五氟乙基，七氟丙基等，其中優選三氟甲基。
在本申請使用的″低級烷基磺醯基″是指上述定義的低級烷基基團，其通過磺醯基基團中的硫原子結合到該分子的其餘部分上。優選的低級烷基磺醯基為甲基磺醯基。
本申請使用的術語″滷素″或″滷代″除非另有說明，表示所有四種滷素，即氟，氯，溴和碘(氟代，氯代，溴代和碘代)。
通過R4定義的芳香雜環是五或六元芳香雜環(例如具有至少一個雜原子的芳香環)，其通過環碳原子連接到式IA或式IB所示的醯胺基團上。該環含有1-3個選自氧、氮和硫的雜原子。發現氮與連接的環碳原子相鄰。優選的芳香雜環包括吡啶基和噻唑基。該環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素，優選溴單取代。
本申請使用的術語「反式」是指跨雙鍵相連的最大的取代基位於雙鍵的對側，具有″E″構型。術語「順式」是指跨雙鍵相連的兩個最大的取代基位於雙鍵的同一側。
在式I-B化合物中，″*″表示在該化合物中的不對稱碳原子，而且優選R旋光構型。式I-B化合物可以以純R型、或作為在所示不對稱碳具有R和S旋光構型的該化合物的外消旋或其它混合物的形式存在。優選純的R對映異構體。如上所述，本發明的化合物用作在治療II型糖尿病中增加胰島素分泌的葡糖激酶激活劑。雙鍵具有反式構型的式I-A化合物(通過Δ表示)具有該葡糖激酶活性。
本文使用的術語「藥用鹽」包括與無機或有機藥用酸的任何鹽，如鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，檸檬酸，甲酸，馬來酸，乙酸，琥珀酸，酒石酸，甲磺酸，對-甲苯磺酸等。術語「藥用鹽」還包括任何藥用鹼鹽，如胺鹽，三烷基胺鹽等。本領域普通技術人員應用標準技術可以很容易地形成這些鹽。
下列三個反應路線顯示了如何從已知的起始原料製備式IA或IB的四唑反應路線1四唑起始原料 R5′為低級烷基反應路線2四唑-烯烴的合成 R4′為五或六元芳香雜環，如或I所定義反應路線3外消旋的四唑的合成 R4′為五或六元芳香雜環，如式I所定義R1、R2、R3、R4、R5和n如式I-A和I-B所定義。如反應路線所示，R1和R2的位置是可互換的。因此，該反應路線包括和顯示了四唑或其前體在R2位，且在R1位是另一個R1/R2變量(氫，滷素，低級烷基磺醯基，全氟低級烷基，氰基，或硝基)的相同的反應、中間體和化合物，反之亦然。
本發明的化合物的製備是通過苯基-取代的四唑(II，II′，IV，或IV′)與環烷基-取代的丙烯酸低級烷基酯(VII)反應，得到四唑基-苯基環烷基丙烯酸酯(VIII)，將其水解或還原，水解得到相應的丙烯酸(propenoic或acrylic acid)(IX或XIII)，向其中加入所需的芳香雜環或脲/取代的脲，得到式I-A或式I-B化合物。該苯基-取代的四唑(II，II′，IV，或IV′)可以從適當的取代的苯胺製備，該取代的苯胺是已知和可購買的材料，或者本領域普通技術人員可以從已知原料製備。該環烷基-取代的丙烯酸低級烷基酯可以從環烷基滷化物製備，該環烷基滷化物是已知和可購買的材料，或者本領域普通技術人員可以從已知原料製備。下面更詳細地討論這些反應。
反應路線1顯示了如何獲得本發明化合物的原料。對於其中R5為低級烷基或全氟低級烷基的化合物，可以應用將胺轉化成亞胺的常規方法，例如在三苯膦在四氯化碳的混懸液中用有機鹼如三乙胺處理，取代的苯胺I與低級烷基或全氟低級烷基羧酸(對應於R5)反應。因此，通過亞氨基滷化物(例如氯化物)中間體，將其通過從亞氨基氯化物形成四唑的常規方法與疊氮化物如疊氮化鈉反應，進行該反應。
對於其中R5為低級烷基的本發明化合物，一個備選路線是在標準條件(如乙酸酐在四氫呋喃中)下醯化上述苯胺I，得到乙醯胺III，隨後通過從低級烷基醯胺形成四唑的常規方法與疊氮化物反應，得到四唑IV。
苯胺I，其中X為碘或溴，R1或R2為氫，硝基，氟，氯，溴，硫醇，和三氟甲基，或其中R1為硫甲基或其中R2為氰基，是已知和商業購買的，或本領域普通化學家可以從已知原料製備。本領域普通化學家也可以從已知原料製備其它的苯胺I化合物。
例如苯胺1，其中R1或R2為C1-C4低級烷基磺醯基，可以從苯胺I製備，其中R1或R2為硫醇。可以在標準條件下烷基化該硫醇，得到低級烷硫基，然後可以成相應的低級烷基磺醯基。可以使用將烷硫基取代基氧化成碸的任何常規方法進行該轉化。
苯胺I(其中R1為氰基(和X為溴))的製備，可以從苯胺I(其中R1為硝基和X為溴)，通過常規方法將硝基還原成胺，然後重氮化該胺得到相應的重氮鹽，且與標準的氰基基團轉移劑反應，得到苯胺I，其中R1為氰基。
苯胺I，其中R1或R2為全氟低級烷基，可以從相應的式VIII的滷代化合物製備。可以使用將芳香滷代基團轉化成所需的全氟低級烷基基團的任何常規方法(例如參見Katayama，T.；Umeno，M.，化學通訊(Chem.Lett.)1991，2073；Reddy，G.S.；Tam.，有機金屬(Organometallics)，1984，3，630；Novak，J.；Salemink，C.A.，合成(Synthesis)，1983，7，597；Eapen，K.C.；Dua，S.S.； Tamboroski，C.，有機化學雜誌(J.Org.Chem.)1984，49，478；Chen，Q，-Y.；Duan，J.-X.J.Chem.Soc.Chem.Comm.1993，1389；Clark，J.H.；McClinton，M.A.；Jone，C.W.；Landon，P.；Bisohp，D.；Blade，R.J.，四面體通訊(Tetrahedron Lett.)1989，2133；Powell，R.L.；Heaton，C.A，美國專利號5,113,013)。
苯胺I，其中R1或R2為碘，可以從相應的式VIII的硝基化合物製備。還原該硝基得到胺，重氮化該胺得到重氮鹽，然後通過常規方法(例如參見Lucas，H.J.和Kennedy，E.R.，Org.Synth.Coll.Vol.II 1943，351)將其轉化成碘代化合物。
對於式I-A化合物，上述四唑與丙烯酸低級烷基酯(VIII)偶合，最終得到四唑基-苯基環烷基丙烯酸IX，其可以與雜芳香胺或脲或低級烷基脲偶合，得到式I-A化合物。
反應路線2更詳細地顯示了如何獲得式I-A化合物。R3為環烷基。為了獲得環烷基-2-碘-丙烯酸甲酯VII，可以按照區域和立體選擇性1，4-共軛加成，有機鋅試劑Va(通過常規方法從可商業購買的V製備)或可商業購買的格氏試劑Vb和可溶的銅試劑與丙炔酸低級烷基酯反應，得到乙烯基銅中間體，其在標準條件下經碘解(iodonolysis)製備VII，其中R3和該碘取代基之間為順式關係。通過在非質子溶劑如四氫呋喃中用氰化銅和氯化鋰處理Va或Vb得到的環烷基銅氰基鋅或滷化鎂中間體進行該加成。然後化合物VII與活化的鋅金屬(Knochel和Rao，四面體(Tetrahedron)4929，1993)反應，得到乙烯基鋅中間體，其可以在Pd(O)源存在下與化合物II或化合物IV偶合，得到四唑-苯基-環烷基丙烯酸甲酯VIII，苯基-取代的四唑置換該碘化物，得到雙鍵的反式構型。
然後化合物VIII在標準鹼性條件下水解得到相應的酸IX。然後在將胺加成到酸的常規條件下，可以通過將所需的雜芳香胺偶合到化合物IX上，形成雜環化合物X。在將酸轉化成脲的常規條件下，可以通過將脲或低級烷基脲偶合到化合物IX上，形成脲化合物XI。
化合物VIII為式I-B化合物的起始原料。如反應路線3所示，通過將化合物VIII還原成四唑苯基-環烷基丙酸低級烷基酯XII，可以獲得這些化合物。其可以通過在標準條件下還原劑存在下應用常規金屬催化劑如鎳獲得。然後在標準條件下水解化合物XII，得到相應的酸XIII。然後在將胺加成到酸的常規條件下，可以通過將所需的雜芳香胺偶合到化合物XIII上，形成雜環化合物XIV。在將酸轉化成脲的常規條件下，可以通過將脲或低級烷基脲偶合到化合物XIII上，形成脲化合物XV。
如果需要製備不含其它對映異構體的式I-B化合物的R對映異構體，可以通過常規化學方法將式XIII化合物從其外消旋體分離成這些異構體。其中優選的化學方法為將式XIII化合物與旋光的鹼反應。可以利用任何常規的旋光的鹼進行該拆分。其中優選的旋光的鹼為旋光的胺鹼，如α-甲基苄基胺，奎寧，脫氫樅胺，和α-甲基荼胺。應用旋光的有機胺鹼拆分有機酸的任何常規技術可以用於進行該反應。
在拆分步驟中，式XIII化合物與旋光的鹼在惰性有機溶劑介質中進行反應，以產生式XIII化合物的具有兩種R和S異構體的旋光的胺的鹽。在形成這些鹽當中，溫度和壓力並不重要，該鹽的形成可以在室溫和大氣壓力下進行。可以通過常規方法如分級結晶分離R和S鹽。結晶後，通過用酸水解可以將每種鹽轉化成分別具有R和S構型的式X的化合物。其中優選的酸為稀的酸水溶液，即從約0.001N-2N的酸水溶液，如硫酸水溶液或鹽酸水溶液。通過測定式XIII的旋光純的結晶酸的旋光性，可以獲得該結晶物質的構型。如果該結晶酸具有負轉動，那麼該結晶酸具有R構型。在整個反應路線中可進行通過該拆分方法製備式XIII的構型，以製備所需的式IB所需的R構型。通過應用相應於式XII化合物的任何低級烷基酯的酶促酯水解，可以獲得R和S異構體的分離(參見例如Ahmar，M.；Girard，C.；Bloch，R，Tetrahedron Lett，1989，7053)，其導致形成相應的手性酸和手性酯。通過從酯中分離酸的常規方法分離該酯和酸。式XIII化合物的外消旋體的拆分的優選方法是通過形成相應的非對映的酯或醯胺。這些非對映的酯或醯胺可以通過式XIII的羧酸與手性醇或手性胺偶合進行製備。可以通過羧酸與醇或胺的常規偶合方法進行該反應。然後，式XIII化合物的相應的非對映異構體可以應用任何常規的方法進行分離。然後可以水解得到的純的非對映異構體的酯或醯胺，以產生相應的純的R或S異構體。該水解反應可以應用沒有外消旋化的水解酯或醯胺的常規已知方法進行。
實施例中描述的IA或式IB的全部化合物按照生物活性實施例A描述的過程在體外激活葡糖激酶。
按照生物活性實施例B描述的過程，當口服給藥時，測試並發現下列化合物具有卓越的體內葡糖激酶激活的活性N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，和(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺。
根據它們激活葡糖激酶的能力，上述式I化合物可以用作治療II型糖尿病的藥物。因此，如上所述，含有式I化合物的藥物也是本發明的一個目的，以及同樣地，還有製備該藥物的方法，其包括將一種或多種式I化合物以及，必要時，一種或者多種其它的治療上有價值的物質製成蓋侖(galenical)給藥劑型，例如，通過將式I化合物與藥用載體和/或輔劑組合。
該藥物組合物可以口服給藥，例如以片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬或者軟明膠膠囊，溶液劑，乳劑或者混懸劑的形式。給藥也可以通過直腸進行，例如使用栓劑；局部給藥或者經皮膚給藥，例如使用軟膏劑，霜劑，凝膠劑或者溶液劑；或者胃腸外給藥，例如使用可注射溶液的靜脈內、肌肉內、皮下、鞘內或經皮給藥。並且，給藥可以是舌下給藥或作為氣溶膠例如噴霧劑的形式。為了製備片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬明膠膠囊，本發明的化合物可以與藥學惰性的，有機或無機賦形劑一起混合。合適的片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬明膠膠囊的賦形劑的實例包括乳糖，玉米澱粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或者其鹽。軟明膠膠囊的合適的賦形劑包括例如植物油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇等；但是，根據該活性成分的性質，可能有軟明膠膠囊根本不需要任何賦形劑的情況。為了製備溶液劑和糖漿劑，可以使用的賦形劑包括例如水，多元醇，糖類，轉化糖和葡萄糖。為了製備注射溶液，可以使用的賦形劑包括例如水，醇，多元醇，甘油，和植物油。為了製備栓劑和局部給藥或經皮膚給藥用劑，可以使用的賦形劑包括例如天然或者硬化油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇。該藥物組合物還可以含有防腐劑，增溶劑，穩定劑，潤溼劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調味劑，改變滲透壓的鹽，緩衝劑，包衣劑或者抗氧化劑。如上所述，它們也可以含有其它的治療上有價值的活性劑。先決條件是用於製備該製劑的所有輔劑都是非毒性的。
使用的優選劑型為靜脈內、肌肉內或口服給藥，最優選口服給藥。給藥式(I)化合物的有效量的劑量根據特殊活性成份的性質、患者的年齡和要求以及施用方式來確定。通常，考慮大約1-100mg/kg體重/天的劑量。
通過下列實施例可以更好地理解本發明，其目的是為了舉例說明，而不是為了限制本發明，本發明通過後附的權利要求進行限定。實施例1 2-[4-[(5-甲基)-1-四唑基]-3-氟苯基]-3-環戊基N-噻唑-2-基丙醯胺 將2-氟-4-碘代苯胺(4.74g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。其後對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮，得到粗製的殘渣。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱該殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5.12g，92％)，其為白色結晶固體mp152-154℃；EI-HRMS m/e理論值C8H7FINO(M+)278.9556，實際值278.9559。
將N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5g，18.24mmol)在乙腈(100mL)中的混懸液冷卻至0℃，然後用疊氮化鈉(3.56g，54.7mmol)處理。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(13.6g，48mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(3.45g，62％)，其為白色固體mp 122-124℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6FIN4(M+)303.9621，實際值303.9615。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(在實施例7中製備，2.21g，7.5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(10mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(90mg，0.16mmol)和三苯膦(160mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.52g，5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末，然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(1.14g，68％)，其為淡黃色固體mp111-114℃；EI-HRMS m/e理論值C17H19FN4O2(M+)330.1492，實際值330.1493。
將氯化鎳(II)六水合物(115mg，0.24mmol)和(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(400mg，1.21mmol)在甲醇(10mL)中的溶液冷卻至0℃，分兩次用硼氫化鈉(275mg，3.63mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(30mL)和乙酸乙酯(50mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸甲酯(400mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C17H21FN4O2(M+)332.1648，實際值332.1645。
將3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸甲酯(400mg，1.2mmol)在乙醇(8mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(2.5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱5小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(40mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸(360mg，94％)，其為黃色固體EI-HRMS m/e理論值C16H19FN4O2(M+)318.1487，實際值318.1492。
將三苯膦(288mg，1.1mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(196mg，1.1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸(175mg，0.55mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(275mg，2.75mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(50mL)和1N鹽酸水溶液(25mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×25mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，2/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺(80mg，36％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C19H21FN6OS(M+)400.1482，實際值400.1476。
將氯化鎳(II)六水合物(180mg，0.8mmol)和(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸甲酯(695mg，2.0mmol)在甲醇(15mL)中的溶液冷卻至0℃，分五次用硼氫化鈉(454mg，12mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2天。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(50mL)和乙酸乙酯(75mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸甲酯(815mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C17H21ClN4O2(M+)348.1353，實際值348.1359。
將2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸甲酯(690mg，2.0mmol)在乙醇(20mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(4mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱3小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×60mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸(604mg，90％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C16H19ClN4O2(M+)334.1196，實際值334.1193。
將三苯膦(236mg，0.9mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(196mg，1.1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸(151mg，0.45mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(135mg，1.35mmol)處理，得到的混懸液在20℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(30mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×20mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，2/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙醯胺(80mg，42％)，其為白色固體mp 190-193℃，EI-HRMS m/e理論值C19H21ClN6OS(M+)416.1186，實際值416.1183。實施例4 2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺 在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.94g，5mmol)處理鋅粉(16.34g，250mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(0.54g，5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用環己基碘化物(21g，100mmol)在無水四氫呋喃(30mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至60℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌3小時，然後將得到的混合物冷卻至25℃，用無水四氫呋喃(60mL)稀釋。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約3小時)。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.95g，100mmol)在無水四氫呋喃(110mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用注射器加入新鮮製備的鋅溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至0℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.56g，90mmol)處理。將得到的反應混合物在-70℃至-50℃下攪拌15小時，然後緩慢地用碘(34.26g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(400mL)和氫氧化銨(100mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×500mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×500mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，9/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(26.3g，99％)，其為淡粉色油EI-HRMS m/e理論值C10H15IO2(M+)294.0117，實際值294.0114。
將三苯膦(11.7g，44.8mmol)在四氯化碳(8mL，83mmol)中的混懸液冷卻至0℃，然後用三乙胺(2.5mL，18mmol)和乙酸(1.15mL，20mmol)處理。將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後用2-氯-4-碘苯胺(5.07g，20mmol)在四氯化碳(12mL，加熱得到溶液)中的溶液處理。將得到的淡棕色混懸液升溫至25℃，然後將其回流過夜。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。然後將得到的固體殘渣用己烷(50mL)和二氯甲烷(50mL)稀釋。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌。在真空下濃縮濾液，將得到的殘渣用二乙醚(100mL)洗滌。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌，並在真空下濃縮濾液。將得到的殘留物再用己烷(100mL)稀釋，通過過濾收集沉澱的固體。最終在真空下濃縮濾液，得到液體狀的亞氨基氯化物中間體(4.08g)。將該粗製的亞氨基氯化物中間體用疊氮化鈉(1.04g，16mmol)和乙酸(10mL)處理。該反應為放熱反應，將得到的反應混合物在25℃下攪拌1小時。然後將反應混合物在70℃下加熱2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在亞氨基氯化物中間體。將混濁的黃色混懸液冷卻至25℃，然後用水(100mL)稀釋，乙酸乙酯(2×75mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1己烷/二乙醚)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(350mg，6％)，其為白色固體mp128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(94mg，0.5mmol)處理鋅粉(320mg，5mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(55mg，0.5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(588mg，2mmol)在無水四氫呋喃(2mL)的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(2mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(4mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(27mg，0.05mmol)和三苯膦(57mg，0.2mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(320.5mg，1mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在50℃下加熱15小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(30mL)中，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1/1己烷/乙酸乙酯/二氯甲烷)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(233mg，64％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C18H21ClN4O2(M+)360.1353，實際值360.1354。
將氯化鎳(II)六水合物(78mg，0.328mmol)和(E)-2-[3氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(295mg，0.82mmol)在甲醇(8mL)中的溶液冷卻至0℃，分四次用硼氫化鈉(186mg，4.92mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌24小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用水(30mL)和乙酸乙酯(50mL)稀釋。分離兩相。有機層連續用3N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸甲酯(285mg，96％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C17H21ClN4O2(M+)362.1509，實際值362.1516。
將2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸甲酯(278mg，0.76mmol)在乙醇(6mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(1.5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱5小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(20mL)稀釋，二乙醚(1×40mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸(226mg，85％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C17H21ClN4O2(M+)348.1353，實際值348.1354。
將三苯膦(281mg，1.07mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(190.4mg，1.07mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸(220mg，0.63mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(189mg，1.89mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌15小時。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(50mL)和1N鹽酸水溶液(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺(79mg，29％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C20H23ClN6OS(M+)430.1343，實際值430.1343。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(2mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(110mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在5分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(在實施例4中製備，1.32g，4.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)中的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(4mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(8mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(54mg，0.1mmol)和三苯膦(104mg，0.4mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-三氟甲基-1H-四唑(1.12g，3mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在50℃下加熱15小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(70mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(908mg，73％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C18H18ClF3N4O2(M+)414.1070，實際值414.1075。
將氯化鎳(II)六水合物(77mg，0.324mmol)和(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(674mg，1.62mmol)在甲醇(15mL)中的溶液冷卻至0℃，分四次用硼氫化鈉(184mg，4.86mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌20小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用水(50mL)和乙酸乙酯(100mL)稀釋。分離兩相。有機層連續用3N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸甲酯(640mg，95％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C18H20ClF3N4O2(M+)416.1527，實際值416.1529。
將2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸甲酯(634mg，1.52mmol)在乙醇(10mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(3mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱5小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×60mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸(375mg，61％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C17H18ClF3N4O2(M+)402.1070，實際值402.1067。
將三苯膦(409mg，1.56mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(277 mg，1.56mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙酸(370mg，0.92mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(276mg，2.76mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌15小時。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(100mL)和1N鹽酸水溶液(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，3/2己烷/乙酸乙酯)純化，得到2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺(83mg，18％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C20H20ClF3N6OS(M+)484.1060，實際值484.1068。實施例7 3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺 將2-(三氟甲基)-4-溴苯胺(4.8g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃。將反應混合物在25℃下攪拌2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱得到粗製的殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(5.07g，90％)，其為無定形白色固體EI-ERMS m/e理論值C9H7BrF3NO(M+)281.8352，實際值281.8348。
將N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(2.41g，8.54mmol)在乙腈(40mL)中的混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，在25℃下得到澄清溶液。將得到的溶液用疊氮化鈉(1.24g，19.1mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(3.59g，12.7mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，2/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.85g，70％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C9H6BrF3N4(M+)305.9728，實際值305.9733。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(710mg，11mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.54g，5.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)中的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(4mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(6mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(81mg，0.15mmol)和三苯膦(156mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.05g，3.5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下攪拌過周末。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×35mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(1.03g，77.6％)，其為淡黃色固體EI-HRMS m/e理論值C18H19F3N4O2(M+)380.1460，實際值380.1453。
將氯化鎳(II)六水合物(102mg，0.428mmol)和(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(814mg，2.14mmol)在甲醇(20mL)中的溶液冷卻至0℃，分五次用硼氫化鈉(265mg，7mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(50mL)和乙酸乙酯(75mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基苯基]-丙酸甲酯(815mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C18H21F3N4O2(M+)382.1617，實際值382.1617。
將3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸甲酯(870mg，2.27mmol)在乙醇(12mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(8mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱3小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×60mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸(781mg，93％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C17H19F3N4O2(M+)368.1460，實際值368.1460。
將三苯膦(213mg，0.84mmol)在二氯甲烷(12mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(196mg，1.1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸(150mg，0.4mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(122mg，1.22mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌15小時。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(30mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×20mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/2己烷/乙酸乙酯)純化，得到3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺(128mg，70％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C20H21F3N6OS(M+)450.1449，實際值450.1454。實施例8 N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺 將三苯膦(213mg，0.84mmol)在二氯甲烷(12mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(144mg，0.84mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用3-環戊基-2[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸(在實施例7中製備，150mg，0.4mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將該反應混合物用2-氨基-5-溴吡啶(122mg，1.22mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌15小時。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×20mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺(90mg，42％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C22H22BrF3N6O(M+)522.0991，實際值522.0989。實施例9 3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺 在25℃下，將亞硝酸異戊酯(10.05mL，75mmol)在二甲基二硫化物(49.5mL，550mmol)中的溶液用4-溴-2-硝基苯胺(10.85g，50mmol)處理。該反應為放熱反應，並伴隨有氣體冒出。將得到的棕色反應混合物加熱至80-90℃，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。將得到的殘留物溶解於乙酸乙酯(300mL)中。連續用1N鹽酸水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1至5/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到4-溴-1-甲基硫烷基-2-硝基-苯(12.05g，97％)，其為棕色固體EI-HRMSm/e理論值C7H6BrNO2S(M+)246.9372，實際值246.9368。
將4-溴-1-甲基硫烷基-2-硝基-苯(12.05g，48.6mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液冷卻至-10℃，然後用3-氯過苯甲酸(86％級，25.2g，145.8mmol)處理。將反應混合物在-10℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後在真空下濃縮反應混合物。將得到的殘渣溶解於乙酸乙酯(300mL)中。有機層連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(4×200mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到黃色固體。從熱的乙醇(50mL)和乙腈(10mL)中重結晶，隨後用己烷(300mL)稀釋，得到沉澱。通過過濾收集固體，用己烷(100mL)洗滌，得到4-溴-1-甲磺醯基-2-硝基-苯(8.68g，62％)，其為白色固體mp175.5-177℃；EI-HRMS m/e理論值C7H6BrNO4S(M+)278.9201，實際值278.9210。
將4-溴-1-甲磺醯基-2-硝基-苯(8.65g，30.9mmol)在甲醇(300mL，即使在熱的條件下也未完全溶解於甲醇中)中的混懸液依次用氯化銨(24.8g，463.5mmol)、鋅粉(20.2g，309mmol)和水(100mL)處理。開始，反應為放熱反應，並且棕色消失。將反應混合物在25℃下攪拌1小時。然後過濾反應混合物，殘渣用甲醇(50mL)和乙酸乙酯(100mL)洗滌。在真空下濃縮濾液，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×200mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，8/1-6/1-4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到5-溴-2-甲磺醯基-苯基胺(5.7g，74％)，其為白色固體mp107-109℃；EI-HRMS m/e理論值C7H8BrNO2S(M+)248.9459，實際值248.9451。
將5-溴-2-甲磺醯基-苯基胺(5.7g，19.5mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中25℃下的溶液用乙醯氯(6.28g，80mmol)處理。得到的溶液在25℃下攪拌過夜，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將反應混合物用水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×100mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×200mL)萃取合併的有機萃取液，通過無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到棕色固體。將該棕色固體用二乙醚(50mL)和己烷(50mL)處理。通過過濾收集白色固體，用己烷(50mL)洗滌，得到N-(5-溴-2-甲磺醯基-苯基)-乙醯胺(4.55g，80％)，其為白色固體mp157-160℃；EI-HRMS m/e理論值C9H10BrNO3S(M+)290.9565，實際值290.9560。
將N-(5-溴-2-甲磺醯基-苯基)-乙醯胺(350mg，1.2mmol)在乙腈(6mL)中25℃下的溶液用疊氮化鈉(78mg，1.2mmol)處理。將反應混合物冷卻至0℃，用三氟甲磺酸酐(0.24mL，1.2mmol)處理。得到的反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後在真空下濃縮反應混合物。得到的殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩相，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，8/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(5-溴-2-甲磺醯基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(254mg，67％)，其為白色固體mp174-184℃；EI-HRMS m/e理論值C9H9BrN4O2S(M+)315.9630，實際值315.9634。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(93mg，0.5mmol)處理鋅粉(330mg，5mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(54mg，0.5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(在實施例7中製備，420mg，1.5mmol)在無水四氫呋喃(1mL)的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(3mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(3mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(27mg，0.05mmol)和三苯膦(52mg，0.2mmol)10分鐘，然後用1-(5-溴-2-甲磺醯基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(237mg，0.75mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下加熱過周末。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(30mL)中，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，3/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(266mg，91％)，其為白色固體mp 164-166℃，EI-HRMS m/e理論值C18H22N4O4S(M+)390.1362，實際值390.1368。
將氯化鎳(II)六水合物(12.2mg，0.05mmol)和(E)-3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(100mg，0.26mmol)在甲醇(5mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用硼氫化鈉(29mg，0.77mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(10mL)和乙酸乙酯(25mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×25mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸甲酯(105mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C18H24N4O4S(M+)392.1518，實際值392.1526。
將3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸甲酯(102mg，0.26mmol)在乙醇(3mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(0.6mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱3小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(20mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×25mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸(88mg，89％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C17H22N4O4S(M+)378.1362，實際值378.1364。
將三苯膦(100mg，0.38mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(68mg，0.38mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙酸(85mg，0.22mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(55mg，0.55mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(30mL)和1N鹽酸水溶液(25mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×25mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，2/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺(42mg，41％)，其為白色固體mp 148-154℃；EI-HRMS m/e理論值C20H24F3N6O3S2(M+)460.1351，實際值460.1356。實施例10 1-{3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基}-丙醯基}-3-甲基-脲 將2-(三氟甲基)-4-溴苯胺(4.8g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃。將反應混合物在25℃下攪拌2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱得到粗製的殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(5.07g，90％)，其為無定形白色固體EI-ERMS m/e理論值C9H7BrF3NO(M+)281.8352，實際值281.8348。
將N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(2.41g，8.54mmol)在乙腈(40mL)中的混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，在25℃下得到澄清溶液。將得到的溶液用疊氮化鈉(1.24g，19.1mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(3.59g，12.7mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，2/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.85g，70％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C9H6BrF3N4(M+)305.9728，實際值305.9733。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(710mg，11mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.54g，5.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)中的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(4mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(6mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(81mg，0.15mmol)和三苯膦(156mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.05g，3.5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下攪拌過周末。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×35mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(1.03g，77.6％)，其為淡黃色固體EI-HRMS m/e理論值C18H19F3N4O2(M+)380.1460，實際值380.1453。
將氯化鎳(II)六水合物(102mg，0.428mmol)和(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(814mg，2.14mmol)在甲醇(20mL)中的溶液冷卻至0℃，分五次用硼氫化鈉(265mg，7mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(50mL)和乙酸乙酯(75mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基苯基]-丙酸甲酯(815mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C18H21F3N4O2(M+)382.1617，實際值382.1617。
將3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸甲酯(870mg，2.27mmol)在乙醇(12mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(8mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱3小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×60mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸(781mg，93％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C17H19F3N4O2(M+)368.1460，實際值368.1460。
在2-3分鐘內，將3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙酸(368mg，1.0mmol)在氟苯(1.5mL)和N，N-二甲基甲醯胺(6μL)中25℃的溶液逐滴用草醯氯(107.7μL，1.21mmol)處理。將該澄清溶液在25℃下攪拌1小時，然後用甲基脲(322mg，2.0mmol)處理。將得到的混懸液在70℃(浴溫度)下加熱10分鐘，然後用吡啶(162μL，2.0mmol)處理。然後將反應混合物在70℃下攪拌20小時。然後將反應混合物冷卻至25℃，用乙酸乙酯(30mL)和3N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，用乙酸乙酯(1×20mL)萃取水層。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)萃取合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/1至1/2己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-{3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯基}-3-甲基-脲(338mg，80％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C19H23F3N6O2(M+)424.1834，實際值424.1833。實施例11 1-{2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙醯基}-3-甲基-脲 將三苯膦(11.7g，44.8mmol)在四氯化碳(8mL，83mmol)中的混懸液冷卻至0℃，然後用三乙胺(2.5mL，18mmol)和三氟乙酸(1.15mL，20mmol)處理。將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後用2-氯-4-碘苯胺(5.07g，20mmol)在四氯化碳(12mL，加熱得到溶液)中的溶液處理。將得到的淡棕色混懸液升溫至25℃，然後將其回流過夜。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。然後將得到的固體殘渣用己烷(50mL)和二氯甲烷(50mL)稀釋。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌。在真空下濃縮濾液，將得到的殘渣用二乙醚(100mL)洗滌。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌，並在真空下濃縮濾液。將得到的殘留物再用己烷(100mL)稀釋，通過過濾收集沉澱的固體。最終在真空下濃縮濾液，得到液體狀的亞氨基氯化物中間體(4.08g)。將該粗製的亞氨基氯化物中間體(4.08g，大約13mmol)用疊氮化鈉(1.04g，16mmol)和乙酸(10mL)處理。該反應為放熱反應，將得到的反應混合物在25℃下攪拌1小時。然後將反應混合物在70℃下加熱2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在亞氨基氯化物中間體。將混濁的黃色混懸液冷卻至25℃，然後用水(100mL)稀釋，乙酸乙酯(2×75mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1己烷/二乙醚)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(350mg，6％)，其為白色固體mp 128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(在實施例10中製備，1.26g，4.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(3mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(4mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(54mg，0.1mmol)和三苯膦(104mg，0.4mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(875mg，2.73mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末；然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×35mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸甲酯(859mg，91％)，其為淡黃色半固體EI-HRMS m/e理論值C17H19ClN4O2(M+)346.1196，實際值346.1190。
將氯化鎳(II)六水合物(180mg，0.8mmol)和(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸甲酯(695mg，2.0mmol)在甲醇(15mL)中的溶液冷卻至0℃，分五次用硼氫化鈉(454mg，12mmol)處理。加入後，將該黑色反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2天。在真空下濃縮該反應混合物，殘渣用3N鹽酸水溶液(50mL)和乙酸乙酯(75mL)稀釋。分離兩相。有機層用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到外消旋的2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸甲酯(815mg，99％)，其為粘稠油狀物EI-HRMS m/e理論值C17H21ClN4O2(M+)348.1353，實際值348.1359。
將2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸甲酯(690mg，2.0mmol)在乙醇(20mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(4mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱3小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×60mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸(604mg，90％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C16H19ClN4O2(M+)334.1196，實際值334.1193。
在2-3分鐘內，將2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙酸(303mg，0.9mmol)在氟苯(1mL)和N，N-二甲基甲醯胺(3μL)中25℃的溶液逐滴用草醯氯(97μL，1.09mmol)處理。將該澄清溶液在25℃下攪拌1小時，然後用甲基脲(201mg，2.72mmol)處理。將得到的混懸液在70℃(浴溫度)下加熱10分鐘，然後用吡啶(146.6μL，1.81mmol)處理。然後將反應混合物在70℃下攪拌20小時。然後將反應混合物冷卻至25℃，用乙酸乙酯(30mL)和3N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，用乙酸乙酯(1×20mL)萃取水層。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)萃取合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-{2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙醯基}-3-甲基-脲(110mg，31％)，其為白色固體mp 185-186℃。EI-HRMS m/e理論值C18H23ClN6O2(M+H)+391.1649，實際值391.1659。實施例12(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將2-氟-4-碘代苯胺(4.74g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。其後對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮，得到粗製的殘渣。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱該殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5.12g，92％)，其為白色結晶固體mp152-154℃；EI-HRMS m/e理論值C8H7FINO(M+)278.9556，實際值278.9559。
將N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5g，18.24mmol)在乙腈(100mL)中的混懸液冷卻至0℃，然後用疊氮化鈉(3.56g，54.7mmol)處理。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(13.6g，48mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(3.45g，62％)，其為白色固體mp122-124℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6FIN4(M+)303.9621，實際值303.9615。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(2.21g，7.5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(10mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(90mg，0.16mmol)和三苯膦(160mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.52g，5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末，然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(1.14g，68％)，其為淡黃色固體mp111-114℃；EI-HRMS m/e理論值C17H19FN4O2(M+)330.1492，實際值330.1493。
將(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(720mg，2.18mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(30mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(690mg，100％)，其為白色固體mp182-185℃；EI-HRMSm/e理論值C16H17FN4O2(M+)316.1336，實際值316.1334。
將三苯膦(262mg，1mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(178mg，1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(158mg，0.5mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(150mg，1.5mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(39mg，20％)，其為白色固體mp158-162℃；EI-HRMS m/e理論值C19H19FN6OS(M+)398.1325，實際值398.1323。實施例13(E)-N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯胺 將2-氟-4-碘代苯胺(4.74g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。其後對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮，得到粗製的殘渣。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱該殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5.12g，92％)，其為白色結晶固體mp152-154℃；EI-HRMS m/e理論值C8H7FINO(M+)278.9556，實際值278.9559。
將N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5g，18.24mmol)在乙腈(100mL)中的混懸液冷卻至0℃，然後用疊氮化鈉(3.56g，54.7mmol)處理。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(13.6g，48mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(3.45g，62％)，其為白色固體mp 122-124℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6FIN4(M+)303.9621，實際值303.9615。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(2.21g，7.5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(10mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(90mg，0.16mmol)和三苯膦(160mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.52g，5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末，然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(1.14g，68％)，其為淡黃色固體mp 111-114℃；EI-HRMS m/e理論值C17H19FN4O2(M+)330.1492，實際值330.1493。
將(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(720mg，2.18mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(30mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(690mg，100％)，其為白色固體mp 182-185℃；EI-HRMSm/e理論值C16H17FN4O2(M+)316.1336，實際值316.1334。
將三苯膦(262mg，1mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(178mg，1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(158mg，0.5mmol)處理。將該澄清溶液在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基-5-溴吡啶(260mg，1.5mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和水(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，3/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯胺(66mg，28％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C21H20BrFN6OS(M+)470.0866，實際值470.0864。實施例14(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將2-氯-4-碘苯胺(25g，96.66mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(50.6g，500mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。然後將反應混合物在真空下濃縮，以除去四氫呋喃。將殘渣從乙醚(50mL)和己烷(50mL)中結晶。收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(23.87g，84％)，其為白色結晶固體EI-HRMS m/e理論值C8H7ClINO(M+)295.1526，實際值295.1532。
將N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(2.39g，8.09mmol)在乙腈(40mL)中的25℃混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，得到澄清溶液。然後將得到的溶液用疊氮化鈉(1.05g，16.18mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後用三氟甲磺酸酐(3.42g，12.13mmol)處理反應混合物，將得到的反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜。然後在真空下濃縮反應混合物。殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋，分離兩相。水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.53g，59％)，其為白色固體mp 128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.26g，4.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(3mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(4mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(54mg，0.1mmol)和三苯膦(104mg，0.4mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(在實施例4中製備，875mg，2.73mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末，然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×35mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸甲酯(859mg，91％)，其為淡黃色半固體EI-HRMS m/e理論值C17H19ClN4O2(M+)346.1196，實際值346.1190。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸甲酯(160mg，0.46mmol)在乙醇(5mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(1mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(10mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸(155mg，100％)，其為白色固體mp 216-219℃；EI-HRMS m/e理論值C16H17ClN4O2(M+)332.1040，實際值332.1048。
將三苯膦(165mg，0.63mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(112mg，0.63mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙烯酸(123mg，0.37mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(92.5mg，0.93mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(36mg，23％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C19H19ClN6OS(M+)414.1029，實際值414.1029。實施例15(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將三苯膦(11.7g，44.8mmol)在四氯化碳(8mL，83mmol)中的混懸液冷卻至0℃，然後用三乙胺(2.5mL，18mmol)和三氟乙酸(1.15mL，20mmol)處理。將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後用2-氯-4-碘苯胺(5.07g，20mmol)在四氯化碳(12mL，加熱得到溶液)中的溶液處理。將得到的淡棕色混懸液升溫至25℃，然後將其回流過夜。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。然後將得到的固體殘渣用己烷(50mL)和二氯甲烷(50mL)稀釋。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌。在真空下濃縮濾液，將得到的殘渣用二乙醚(100mL)洗滌。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌，並在真空下濃縮濾液。將得到的殘留物再用己烷(100mL)稀釋，通過過濾收集沉澱的固體。最終在真空下濃縮濾液，得到液體狀的亞氨基氯化物中間體(4.08g)。將該粗製的亞氨基氯化物中間體(4.08g，大約13mmol)用疊氮化鈉(1.04g，16mmol)和乙酸(10mL)處理。該反應為放熱反應，將得到的反應混合物在25℃下攪拌1小時。然後將反應混合物在70℃下加熱2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在亞氨基氯化物中間體。將混濁的黃色混懸液冷卻至25℃，然後用水(100mL)稀釋，乙酸乙酯(2×75mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1己烷/二乙醚)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(350mg，6％)，其為白色固體mp128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.94g，5mmol)處理鋅粉(16.34g，250mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(0.54g，5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用環己基碘化物(21g，100mmol)在無水四氫呋喃(30mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至60℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌3小時，然後將得到的混合物冷卻至25℃，用無水四氫呋喃(60mL)稀釋。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約3小時)。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.95g，100mmol)在無水四氫呋喃(110mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用注射器加入新鮮製備的鋅溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至0℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.56g，90mmol)處理。將得到的反應混合物在-70℃至-50℃下攪拌15小時，然後緩慢地用碘(34.26g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(400mL)和氫氧化銨(100mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×500mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×500mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，9/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(26.3g，99％)，其為淡粉色油EI-HRMS m/e理論值C10H15IO2(M+)294.0117，實際值294.0114。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(94mg，0.5mmol)處理鋅粉(320mg，5mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(55mg，0.5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(588mg，2mmol)在無水四氫呋喃(2mL)的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(2mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(4mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(27mg，0.05mmol)和三苯膦(57mg，0.2mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(320.5mg，1mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在50℃下加熱15小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(30mL)中，用乙酸乙酯(3×20mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1/1己烷/乙酸乙酯/二氯甲烷)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(233mg，64％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C18H21ClN4O2(M+)360.1353，實際值360.1354。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(209mg，0.58mmol)在乙醇(3mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(1.2mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(10mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸(203mg，99％)，其為棕色固體FAB-HRMS m/e理論值C17H19ClN4O2(M+)347.1275，實際值347.1283。
將三苯膦(290mg，1.1mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(195mg，1.1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸(192mg，0.55mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(166mg，1.66mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(40mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×25mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，7/3至2/3己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(86mg，36％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C20H21ClN6OS(M+)428.1186，實際值428.1189實施例16(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基丙烯醯胺 將2-氯-4-碘苯胺(25g，96.66mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(50.6g，500mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。然後將反應混合物在真空下濃縮，以除去四氫呋喃。將殘渣從乙醚(50mL)和己烷(50mL)中結晶。收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(23.87g，84％)，其為白色結晶固體EI-HRMS m/e理論值C8H7ClINO(M+)295.1526，實際值295.1532。
將N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(2.39g，8.09mmol)在乙腈(40mL)中的25℃混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，得到澄清溶液。然後將得到的溶液用疊氮化鈉(1.05g，16.18mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後用三氟甲磺酸酐(3.42g，12.13mmol)處理反應混合物，將得到的反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜。然後在真空下濃縮反應混合物。殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋，分離兩相。水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.53g，59％)，其為白色固體mp128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.94g，5mmol)在無水四氫呋喃(5mL)中的溶液處理鎂金屬(4.81g，200mmol)和無水四氫呋喃(10mL)的混合物。將得到的溶液混合物攪拌10分鐘，以活化鎂金屬。然後在5分鐘內逐滴用五分之一份的環庚基溴化物(17.7g，100mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理該反應混合物。將得到的反應混合物攪拌5-10分鐘，已開始該放熱反應。然後逐滴加入其餘部分的環庚基溴化物溶液，同時控制內部溫度低於50℃。加入完成後，將該溶液攪拌1小時，然後用無水四氫呋喃(80mL)稀釋。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(110mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用新鮮製備的環庚基溴化鎂處理。加入後，將反應混合物升溫至-10℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.57g，90mmol)處理。將得到的反應混合物在-70℃至-50℃下攪拌15小時，然後緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(400mL)和氫氧化銨(100mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×400mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×400mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1至10/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環庚基-2-碘-丙烯酸甲酯(17.86g，64％)，其為無色油狀物EI-HRMS m/e理論值C11H17IO2(M+)308.0273，實際值308.0273。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(280mg，1.5mmol)處理鋅粉(980g，15mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(162mg，1.5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後將該反應混合物逐滴用(E)-3-環庚基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.54g，5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至60℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下，攪拌在無水四氫呋喃(12mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(81mg，0.15mmol)和三苯膦(156mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.28g，4mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。得到的磚紅色溶液在45-50℃下加熱20小時。將反應混合物冷卻至25℃，然後倒入飽和氯化銨水溶液(100mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸甲酯(1.29g，85％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C19H23ClN4O2(M+)374.1509，實際值374.1509。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸甲酯(1.20g，3.2mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(6.5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×70mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸(1.01g，87％)，其為白色固體。
將三苯膦(1.45g，5.54mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(986mg，5.54mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸(1.00g，2.77mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(832g，8.32mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌3天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基丙烯醯胺(810mg，66％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C21H23ClN6OS(M+)442.1 343，實際值442.1343。實施例17(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺 將2-氯-4-碘苯胺(25g，96.66mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(50.6g，500mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌15小時。然後將反應混合物在真空下濃縮，以除去四氫呋喃。將殘渣從乙醚(50mL)和己烷(50mL)中結晶。收集固體，用己烷洗滌，得到N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(23.87g，84％)，其為白色結晶固體EI-HRMS m/e理論值C8H7ClINO(M+)295.1526，實際值295.1532。
將N-(2-氯-4-碘-苯基)-乙醯胺(2.39g，8.09mmol)在乙腈(40mL)中的25℃混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，得到澄清溶液。然後將得到的溶液用疊氮化鈉(1.05g，16.18mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後用三氟甲磺酸酐(3.42g，12.13mmol)處理反應混合物，將得到的反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜。然後在真空下濃縮反應混合物。殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋，分離兩相。水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.53g，59％)，其為白色固體mp128-130.5℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6ClIN4(M+)319.9327，實際值319.9325。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.94g，5mmol)在無水四氫呋喃(5mL)中的溶液處理鎂金屬(4.81g，200mmol)和無水四氫呋喃(10mL)的混合物。將得到的溶液混合物攪拌10分鐘，以活化鎂金屬。然後在5分鐘內逐滴用五分之一份的環庚基溴化物(17.7g，100mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理該反應混合物。將得到的反應混合物攪拌5-10分鐘，已開始該放熱反應。然後逐滴加入其餘部分的環庚基溴化物溶液，同時控制內部溫度低於50℃。加入完成後，將該溶液攪拌1小時，然後用無水四氫呋喃(80mL)稀釋。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(110mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用新鮮製備的環庚基溴化鎂處理。加入後，將反應混合物升溫至-10℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.57g，90mmol)處理。將得到的反應混合物在-70℃至-50℃下攪拌15小時，然後緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(400mL)和氫氧化銨(100mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×400mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×400mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1至10/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環庚基-2-碘-丙烯酸甲酯(17.86g，64％)，其為無色油狀物EI-HRMS m/e理論值C11H17IO2(M+)308.0273，實際值308.0273。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(280mg，1.5mmol)處理鋅粉(980g，15mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(162mg，1.5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後將該反應混合物逐滴用(E)-3-環庚基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.54g，5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至60℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下，攪拌在無水四氫呋喃(12mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(81mg，0.15mmol)和三苯膦(156mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.28g，4mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。得到的磚紅色溶液在45-50℃下加熱20小時。將反應混合物冷卻至25℃，然後倒入飽和氯化銨水溶液(100mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸甲酯(1.29g，85％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C19H23ClN4O2(M+)374.1509，實際值374.1509。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸甲酯(1.20g，3.2mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(6.5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(50mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×70mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸(1.01g，87％)，其為白色固體。
將三苯膦(1.45g，5.54mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(986mg，5.54mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯酸(1.00g，2.77mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(832g，8.32mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌3天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(810mg，66％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C21H23ClN6OS(M+)442.1343，實際值442.1343。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(300mg，0.69mmol)和N-溴琥珀醯亞胺(123mg，0.69mmol)在四氯化碳(3mL)中25℃的混懸液用過氧化苯甲醯(8.4mg，0.035mmol)處理。將得到的反應混合物加熱至90℃，在該溫度下攪拌過夜。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。將殘渣溶解於乙酸乙酯(50mL)中。然後用水(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌有機相，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺(118mg，33％)，其為無定形固體EI-HRMSm/e理論值C21H22BrClN6OS(M+)520.0448，實際值520.0448。實施例18(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將三苯膦(13.11g，50mmol)在四氯化碳(8mL，83mmol)中的混懸液冷卻至0℃，然後用三乙胺(2.78mL，20mmol)和三氟乙酸(1.3mL，16.6mmol)處理。將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後用2-氯-4-碘苯胺(5.07g，20mmol)在四氯化碳(10mL)中的溶液處理。將得到的淡棕色混懸液升溫至25℃，然後將其回流過夜。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。然後將得到的固體殘渣用己烷(50mL)和二氯甲烷(50mL)稀釋。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌。在真空下濃縮濾液，將得到的殘渣用二乙醚(100mL)洗滌。通過過濾收集沉澱的固體，用己烷洗滌，並在真空下濃縮濾液。將得到的殘留物再用己烷(100mL)稀釋，通過過濾收集沉澱的固體。最終在真空下濃縮濾液，得到棕色液體狀的亞氨基氯化物中間體(5.88g)。將該粗製的亞氨基氯化物中間體(5.88g，大約16mmol)用疊氮化鈉(1.04g，16mmol)和乙酸(10mL)處理。將得到的反應混合物在70℃下加熱2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在亞氨基氯化物中間體。將混濁的黃色混懸液冷卻至25℃，然後用水(100mL)稀釋，乙酸乙酯(2×75mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，8/1己烷/二乙醚)純化，得到1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-三氟甲基-1H-四唑(5.2g，69％)，其為淡黃色固體mp 71-73℃；EI-HRMS m/e理論值C8H3ClF3IN4(M+)373.9043，實際值373.9044。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.94g，5mmol)處理鋅粉(16.34g，250mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(0.54g，5mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用環己基碘化物(21g，100mmol)在無水四氫呋喃(30mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至60℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌3小時，然後將得到的混合物冷卻至25℃，用無水四氫呋喃(60mL)稀釋。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約3小時)。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.95g，100mmol)在無水四氫呋喃(110mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用注射器加入新鮮製備的鋅溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至0℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.56g，90mmol)處理。將得到的反應混合物在-70℃至-50℃下攪拌15小時，然後緩慢地用碘(34.26g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(400mL)和氫氧化銨(100mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×500mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×500mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，9/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(26.3g，99％)，其為淡粉色油EI-HRMS m/e理論值C10H15IO2(M+)294.0117，實際值294.0114。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(2mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(110mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在5分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環己基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.32g，4.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)中的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(4mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(8mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(54mg，0.1mmol)和三苯膦(104mg，0.4mmol)10分鐘，然後用1-(2-氯-4-碘-苯基)-5-三氟甲基-1H-四唑(1.12g，3mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在50℃下加熱15小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(70mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(908mg，73％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C18H18ClF3N4O2(M+)414.1070，實際值414.1075。
將(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸甲酯(833mg，2mmol)在乙醇(10mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(4mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(20mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸(606mg，75％)，其為棕色固體FAB-HRMS m/e理論值C17H16ClF3N4O2(M+H)+401.0992，實際值401.0987。
將三苯膦(772mg，2.96mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(526mg，2.96mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-2[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-丙烯酸(594mg，1.48mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(444mg，4.44mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(70mL)和1N鹽酸水溶液(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×100mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，5/1至3/2己烷/乙酸乙酯)得到(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(82mg，11％)，其為無定形固體EI-HRMS m/e理論值C20H18ClF3N6OS(M+)482.0903，實際值482.0906。實施例19(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將2-(三氟甲基)-4-溴苯胺(4.8g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃。將反應混合物在25℃下攪拌2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱得到粗製的殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(5.07g，90％)，其為無定形白色固體EI-ERMS m/e理論值C9H7BrF3NO(M+)281.8352，實際值281.8348。
將N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(2.41g，8.54mmol)在乙腈(40mL)中的混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，在25℃下得到澄清溶液。將得到的溶液用疊氮化鈉(1.24g，19.1mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(3.59g，12.7mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，2/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.85g，70％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C9H6BrF3N4(M+)305.9728，實際值305.9733。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)純化，得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(710mg，11mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(1.54g，5.5mmol)在無水四氫呋喃(2mL)中的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(4mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(6mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(81mg，0.15mmol)和三苯膦(156mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.05g，3.5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下攪拌過周末。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×35mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(1.03g，77.6％)，其為淡黃色固體EI-HRMS m/e理論值C18H19F3N4O2(M+)380.1460，實際值380.1453。
將(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸甲酯(199mg，0.52mmol)在乙醇(3mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(2mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(10mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸(172mg，90％)，其為黃色糊狀物EI-HRMSm/e理論值C17H17F3N4O2(M+)366.1309，實際值366.1309。
將三苯膦(204mg，0.78mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(138mg，0.78mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙烯酸(143mg，0.39mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(117mg，1.17mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和1N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，1/2己烷/乙酸乙酯)得到(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(27mg，15.5％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C20H19F3N6OS(M+)448.1293，實際值448.1285。實施例20(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺 將2-硝基-4-溴苯胺(7.07g，32.6mmol)在無水四氫呋喃(33mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(6.66g，65.2mmol)處理。將反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃。將反應混合物在25℃下攪拌15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示只存在起始原料。然後在25℃下，用乙醯氯(5mL)和吡啶(5mL)緩慢處理反應混合物。將得到的橙色混懸液在25℃下攪拌2小時，然後用水(50mL)處理。橙色化合物用乙酸乙酯(2×70mL)萃取。用3N鹽酸水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮得到黃色固體。用乙醚(50mL)和己烷(50mL)處理該黃色固體。過濾收集該固體，並且用己烷洗滌得到N-(4-溴-2-硝基-苯基)-乙醯胺(6.82g，81％)，其為黃色固體mp100-102℃；EI-HRMS m/e理論值C8H7BrN2O3(M+)257.9640，實際值257.9641。
將N-(4-溴-2-硝基-苯基)-乙醯胺(1.18g，4.55mmol)在乙腈(25mL)中的混懸液冷卻至0℃，然後用疊氮化鈉(838mg，13.65mmol)處理。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(2.88g，10.25mmol)處理。將得到的反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(70mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH40M，矽膠，4/1己烷/乙酸乙酯)得到1-(4-溴-2-硝基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.16g，90％)，其為白色固體mp 124-126℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6BrN5O2(M+)282.9705，實際值282.9700。
將1-(4-溴-2-硝基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.13g，3.98mmol)在甲醇(40mL，即使在熱的條件下也未完全溶解於甲醇中)中的混懸液依次用氯化銨(3.19g，59.7mmol)、鋅粉(2.60g，39.8mmol)和水(20mL)處理。加入後開始，反應為放熱反應。將反應混合物在25℃下攪拌1小時。然後過濾反應混合物，殘渣用甲醇(50mL)和乙酸乙酯(100mL)洗滌。在真空下濃縮濾液，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×200mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到5-溴-2-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基胺(0.90g，97％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C8H8BrN5(M+)252.9963，實際值252.9962。
在25℃下，將亞硝酸異戊酯(402μL，3mmol)在二甲基二硫化物(2mL，22mmol)中的溶液緩慢用5-溴-2-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基胺(0.51g，2mmol)處理。該反應為放熱反應。將得到的棕色反應混合物加熱至80-90℃2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物冷卻至25℃，然後在真空下濃縮。將得到的殘留物溶解於乙酸乙酯(50mL)中。連續用1N鹽酸水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，6/1至5/1己烷/乙酸乙酯)得到1-(4-溴-2-甲基硫烷基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(0.8g)，其為棕色固體，其不經過進一步純化和鑑定用於下一步反應。
將1-(4-溴-2-甲基硫烷基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(0.8g，大約2mmol)在二氯甲烷(12mL)中的溶液冷卻至-10℃，然後用3-氯過苯甲酸(86％級，2.0g，12mmol)處理。將反應混合物在-10℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌過周末。這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後在真空下濃縮反應混合物。將得到的殘渣溶解於乙酸乙酯(60mL)中。有機層連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到黃色固體。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，3/1己烷/乙酸乙酯)得到1-(4-溴-2-甲磺醯基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(313mg，49％)，其為白色固體mp175-176℃；EI-HRMS m/e理論值C9H9BrN4O2S(M+)315.9630，實際值315.9630。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥該有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(330mg，5mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(440mg，1.5mmol)在無水四氫呋喃(1mL)的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(3mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(4mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(27mg，0.05mmol)和三苯膦(52mg，0.2mmol)10分鐘，然後用1-(4-溴-2-甲磺醯基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(297mg，0.94mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下加熱過周末。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(30mL)中，用乙酸乙酯(3×25mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(289mg，78％)，其為無定形黃色固體EI-HRMS m/e理論值C18H22N4O4S(M+)390.1362，實際值390.1363。
將(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(273mg，0.7mmol)在乙醇(5mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(1.5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(20mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(262mg，100％)，其為黃色固體EI-HRMSm/e理論值C17H20N4O4S(M+)376.1205，實際值376.1204。
將三苯膦(262mg，1mmol)在二氯甲烷(6mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(178mg，1mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(190mg，0.5mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(250mg，2.5mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和水(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，3/1己烷/乙酸乙酯)得到(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺(42mg，18％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C20H22N6O3S2(M+)458.1195，實際值458.1192。實施例21(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸噻唑-2-基醯胺 將2-(三氟甲基)-4-溴苯胺(4.8g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用乙酸酐(8.2g，80mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘，然後升溫至25℃。將反應混合物在25℃下攪拌2小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。從二乙醚(50mL)和己烷(50mL)中沉澱得到粗製的殘渣。通過過濾收集固體，用己烷洗滌，得到N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(5.07g，90％)，其為無定形白色固體EI-ERMS m/e理論值C9H7BrF3NO(M+)281.8352，實際值281.8348。
將N-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-乙醯胺(2.41g，8.54mmol)在乙腈(40mL)中的混懸液用二氯甲烷(5mL)處理，在25℃下得到澄清溶液。將得到的溶液用疊氮化鈉(1.24g，19.1mmol)處理，然後將反應混合物冷卻至0℃。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(3.59g，12.7mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×30mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，2/1己烷/乙酸乙酯)得到1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.85g，70％)，其為白色固體EI-HRMS m/e理論值C9H6BrF3N4(M+)305.9728，實際值305.9733。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(0.56g，3mmol)處理鋅粉(3.92g，60mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(4mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(0.32g，3mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在5分鐘內將該反應混合物逐滴用環戊基甲基碘化物(4.2g，20mmol)在無水四氫呋喃(7mL)的溶液處理。在加入期間，將溫度升高至50℃。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌過夜，然後將得到的混合物冷卻至25℃，用無水四氫呋喃(5mL)稀釋。停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，將氯化鋰(1.7g，40mmol，在高真空、130℃下予乾燥2小時)和氰化銅(1.79g，20mmol)在無水四氫呋喃(20mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用注射器加入新鮮製備的鋅溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(1.52g，18mmol)處理。將得到的反應混合物在-40℃至-30℃下攪拌4小時，然後緩慢地用碘(6.85g，27mmol)在無水四氫呋喃(10mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌1小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(90mL)和氫氧化銨(10mL)組成的溶液中，用二乙醚(3×50mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×100mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的醚萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH40M，Silica，9/1己烷/二乙醚)得到(E)-4-環戊基-2-碘-丁-2-烯酸甲酯(4.56g，86％)，其為無色油狀物EI-HRMS m/e理論值C10H15IO2(M+)294.0116，實際值294.0114。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(330mg，5mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-4-環戊基-2-碘-丁-2-烯酸甲酯(590mg，2mmol)在無水四氫呋喃(1mL)的溶液處理。加入後，將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(3mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2小時)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(7mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(38mg，0.07mmol)和三苯膦(73mg，0.28mmol)10分鐘，然後用1-(4-溴-2-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-四唑(350mg，1.4mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在40-45℃下加熱20小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(30mL)中，用乙酸乙酯(3×25mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)得到(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸甲酯(360mg，65％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C19H21F3N4O2(M+)394.1617，實際值394.1621。
將(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸甲酯(359mg，0.9mmol)在乙醇(5mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(3mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(20mL)稀釋，二乙醚(1×30mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×30mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸(340mg，98％)，其為黃色固體EI-HRMSm/e理論值C18H19F3N4O2(M+)380.1460，實際值380.1460。
將三苯膦(450mg，1.72mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液冷卻至0℃，然後用N-溴琥珀醯亞胺(306mg，1.72mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後用(E)4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸(326mg，0.86mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液處理。將該反應混合物在0℃下攪拌15分鐘，然後升溫至25℃，在該溫度下攪拌1.5小時。然後將該反應混合物用2-氨基噻唑(257mg，2.57mmol)處理，得到的混懸液在25℃下攪拌2天。然後在真空下濃縮該反應混合物，以除去二氯甲烷，殘渣用乙酸乙酯(20mL)和水(30mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×15mL)萃取。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40S，Silica，3/1己烷/乙酸乙酯)得到(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丁-2-烯酸噻唑-2-基醯胺(52mg，13％)，其為無定形白色固體EI-HRMS m/e理論值C21H21F3N6OS(M+)462.1450，實際值462.1451。
將N-(2-氟-4-碘-苯基)-乙醯胺(5g，18.24mmol)在乙腈(100mL)中的混懸液冷卻至0℃，然後用疊氮化鈉(3.56g，54.7mmol)處理。然後將反應混合物用三氟甲磺酸酐(13.6g，48mmol)處理。將得到的混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌過夜，在這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。然後將該反應混合物在真空下濃縮。得到的殘渣用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀釋。分離兩層，水層用乙酸乙酯(1×50mL)萃取。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液。通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，矽膠，4/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(3.45g，62％)，其為白色固體mp 122-124℃；EI-HRMS m/e理論值C8H6FIN4(M+)303.9621，實際值303.9615。
在氬氣氛下，將氯化鋰(8.48g，200mmol，在高真空、130℃下予乾燥3小時)和氰化銅(8.96g，100mmol)在無水四氫呋喃(100mL)中的混合物在25℃下攪拌10分鐘，得到澄清溶液。將反應混合物冷卻至-70℃，然後緩慢地用2.0M環戊基氯化鎂在二乙醚(55mL，110mmol)中的溶液處理。加入後，將反應混合物升溫至-30℃，在該溫度下攪拌5分鐘。將反應混合物再冷卻至-70℃，然後緩慢地用丙炔酸甲酯(7.99g，95mmol)處理。將得到的反應混合物在-60℃至-50℃下攪拌過夜。然後將反應混合物緩慢地用碘(34.3g，135mmol)在無水四氫呋喃(30mL)中的溶液處理，同時溫度保持在-70℃至-60℃。加入碘溶液後，除去冷卻浴，然後將反應混合物升溫至25℃，在該溫度下攪拌2小時。然後將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(200mL)和氫氧化銨(50mL)組成的溶液中，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取有機化合物。連續用飽和硫代硫酸鈉水溶液(1×300mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×300mL)洗滌合併的有機萃取液。然後，通過無水硫酸鎂乾燥有機層，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，20/1己烷/二乙醚)得到(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(25.8g，97％)，其為黃色油EI-HRMS m/e理論值C9H13IO2(M+)279.9960，實際值279.9961。
在氬氣氛下，用1，2-二溴乙烷(187mg，1mmol)處理鋅粉(650mg，10mmol，Aldrich，-325目)和無水四氫呋喃(1mL)的混合物。然後用空氣加熱槍加熱該鋅混懸液至沸騰，然後將其冷卻，再加熱。將該過程重複三次，以確實將該鋅粉活化。然後用三甲基甲矽烷基氯化物(108mg，1mmol)處理該活化的鋅粉混懸液，將該混懸液在25℃下攪拌15分鐘。然後在3分鐘內將該反應混合物逐滴用(E)-3-環戊基-2-碘-丙烯酸甲酯(2.21g，7.5mmol)在無水四氫呋喃(3mL)的溶液處理。然後將得到的反應混合物在40-45℃下攪拌1小時，然後在25℃下攪拌過夜。然後用無水四氫呋喃(5mL)稀釋該反應混合物，停止攪拌以使過量的鋅粉沉降(大約2h)。在分別的反應燒瓶中，在氬氣氛、25℃下攪拌在無水四氫呋喃(10mL)中的二(二亞苄基丙酮)鈀(O)(90mg，0.16mmol)和三苯膦(160mg，0.6mmol)10分鐘，然後用1-(2-氟-4-碘-苯基)-5-甲基-1H-四唑(1.52g，5mmol)和新鮮製備的鋅化合物在四氫呋喃中處理。將得到的磚紅色溶液在25℃下攪拌過周末，然後在40-45℃下加熱4小時。將該反應混合物冷卻至25℃，然後將其倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取有機化合物。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。快速色譜(Merck矽膠60，230-400目，4/1至1/1己烷/乙酸乙酯)純化，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(1.14g，68％)，其為淡黃色固體mp111-114℃；EI-HRMS m/e理論值C17H19FN4O2(M+)330.1492，實際值330.1493。
將(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸甲酯(720mg，2.18mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用1N氫氧化鈉水溶液(5mL)處理。將該溶液在45-50℃下加熱15小時，這時對反應混合物進行薄層色譜分析，顯示不存在起始原料。將反應混合物在真空下濃縮以除去乙醇。將殘渣用水(30mL)稀釋，二乙醚(1×50mL)萃取，以除去任何中性雜質。然後用1N鹽酸水溶液酸化水層，用乙酸乙酯(2×50mL)萃取得到的酸。用飽和氯化鈉水溶液(1×100mL)洗滌合併的有機層，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮，得到(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(690mg，100％)，其為白色固體mp 182-185℃；EI-HRMSm/e理論值C16H17FN4O2(M+)316.1336，實際值316.1334。
在2-3分鐘內，將(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯酸(158mg，0.5mmol)在氟苯(1mL)和N，N-二甲基甲醯胺(2μL)中25℃的溶液逐滴用草醯氯(54μL，0.6mmol)處理。將該澄清溶液在25℃下攪拌1小時，然後用甲基脲(111mg，1.5mmol)處理。將得到的混懸液在70℃(浴溫度)下加熱10分鐘，然後用吡啶(81μL，1mmol)處理。然後將反應混合物在70℃下攪拌20小時。然後將反應混合物冷卻至25℃，用乙酸乙酯(30mL)和3N鹽酸水溶液(30mL)稀釋。分離兩層，用乙酸乙酯(1×20mL)萃取水層。連續用飽和碳酸氫鈉水溶液(1×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(1×50mL)萃取合併的有機萃取液，通過無水硫酸鎂乾燥，過濾，並在真空下濃縮。Biotage色譜(FLASH 40M，Silica，1/1己烷/乙酸乙酯)得到(E)-1-{3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯基}-3-甲基-脲(41mg，22％)，其為白色固體mp186-192℃；EI-HRMS m/e理論值C18H21FN6O2(M+)372.1710，實際值372.1708。生物活性實施例實施例A體外葡糖激酶活性葡糖激酶分析通過葡萄糖-6-磷酸的產生與NADH的產生相偶聯，來分析葡糖激酶(GK)，其中NADH的產生有來自腸繫膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH，0.75-1kunits/mg；Boehringer Mannheim，Indianapolis，IN)作為偶聯酶(反應路線2)。 反應路線2重組人肝GK1在大腸桿菌中作為穀胱甘肽S-轉移酶融合蛋白(GST-GK)被表達[Liang等，1995]，並在穀胱甘肽瓊脂糖凝膠4B親合柱上用生產商(Amersham Pharmacia Biotech，Piscataway，NJ)提供的方法色譜純化。以前的研究已經證明天然GK和GST-GK的酶的性質基本上相同(Liang等，1995；Neet等，1990)。
在25℃下，在來自Costar(Cambridge，MA)的96孔平底組織培養板中進行分析，終培養體積為120μl。培養混合物含有25mM Hepes緩衝液(pH，7.1)，25mM KCI，5mM D-葡萄糖，1mM ATP，1.8mM NAD，2mMMgCl2，1μM山梨糖醇-6-磷酸，1mM二硫蘇糖醇，實驗藥物或10％DMSO，1.8單位/ml G6PDH，和GK(見下)。所有有機試劑純度＞98％，除了D-葡萄糖和Hepes來自Sigma Chemical Co，St Louis，MO，其它來自Boehringer Mannheim。將測試化合物溶解於DMSO，然後加入體積為12μl的不含GST-GK的培養混合物，至DMSO的終濃度為10％。將該混合物置於SPECTRAmax 250微平板分光光度計(Molecular DevicesCorporation，Sunnyvale，CA)的控溫槽中預保溫10分鐘，使溫度平衡，然後加入20μl GST-GK起始反應。
加入酶後，監測10分鐘的保溫期中，340nm處的光密度(OD)的增加，作為GK活性的測量。加入足夠的GST-GK，以使含10％DMSO、而無測試化合物的孔在10分鐘的保溫期中，OD340從0.08增加到0.1單位。初步實驗表明，GK反應在這個時間段中呈線性，甚至在產生GK活性增加了5倍的激活劑存在時也如此。比較了對照孔與含測試GK激活劑的孔中的GK活性，並計算使GK活性增加50％的激活劑的濃度，即SC15。合成實施例描述的所有式IA或IB化合物的SC15都低於或等於30μM。實施例B葡糖激酶激活劑體內篩選方案禁食2小時後，以50mg/kg體重的劑量通過管飼法對C57BL/6J小鼠經口給藥葡糖激酶(GK)激活劑。在給藥後6小時研究期中，進行血中葡萄糖測定5次。
給小鼠(n＝6)稱重，在經口給藥前禁食2小時。將GK激活劑濃度配製成6.76mg/ml(在Gelucire載體(乙醇∶Gelucire 44/14∶PEG400適量4∶66∶30v/w/v)中)。小鼠經口給藥7.5μL製劑/克體重，即等於50mg/kg體重的劑量。即將給藥前，通過剪掉動物尾部的一小部分(～1mm)，收集15μL血到塗肝素的毛細管中進行分析，得到每劑量的(0時)血糖含量。給藥GK激活劑後，在給藥後1，2，4和6小時，從相同尾部傷口得到其它的血糖含量。通過在6小時研究期間比較通過載體處理的6個小鼠和用GK激活劑處理的6個小鼠的平均血糖值，對結果進行分析。由於本發明的化合物在兩個連續檢驗時間點比單用載體顯示出血糖在統計學上顯著地(p≤0.05)降低，因此認為本發明的化合物是有活性的。
權利要求
1.選自式I化合物的四唑 其中 或 Z為R1或R2中的一個為 ，另一個為氫，滷素，低級烷基磺醯基，全氟低級烷基，氰基，或硝基；R3為環烷基；R4為-C(O)-NHR6，或通過環碳原子連接到所示醯胺基團的五-或六-元芳香雜環，其中該芳香雜環含有1-3個選自氧、硫和氮的雜原子，其中第一個雜原子是與連接的環碳原子相鄰的氮，所述芳香雜環是未取代的，或在不與所述連接的碳原子相鄰的環碳原子的位置上被滷素單取代；R5為低級烷基，或全氟低級烷基；R6為氫或低級烷基；n為0或1；Δ表示越過雙鍵的反式構型；*表示不對稱碳原子；以及該四唑的藥用鹽。
2.按照權利要求1的四唑，選自式I-A化合物 其中R1，R2，R3，R4和n如權利要求1所定義，Δ表示過雙鍵的反式構型。3.按照權利要求1的四唑，選自式I-B化合物
其中R1，R2，R3，R4和n如權利要求1所定義，*表示不對稱碳原子。
4.按照權利要求1-3中任何一項的四唑，其中R4為-C(O)-NH-R6，任選被滷素取代的噻唑基，或任選被滷素取代的吡啶基。
5.按照權利要求4的四唑，其中R4為任選被滷素取代的噻唑基或任選被滷索取代的吡啶基。
6.按照權利要求1-5中任何一項的四唑，其中R1為 ，R2為滷素，低級烷基磺醯基，或全氟低級烷基。
7.按照權利要求1-6中任何一項的四唑，其中R5為甲基或三氟甲基。
8.按照權利要求1-7中任何一項的四唑，其中R3為C5-C7-環烷基。
9.按照權利要求1-8中任何一項的四唑，其中R6為甲基。
10.按照權利要求1-9中任何一項的四唑，其中n為0。
11.按照權利要求1-3中任何一項的四唑，其中R1或R2中的一個為 ，另一個為滷素，低級烷基磺醯基，或全氟低級烷基；R3為C5-7-環烷基；R4為-C(O)-NH-R6，任選被滷素取代的噻唑基，或任選被滷素取代的吡啶基；R5為低級烷基或全氟低級烷基；R6為低級烷基，和n為0或1。
12.按照權利要求1-11中任何一項的四唑，其選自(E)-N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙烯醯胺，(E)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-4-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基-]-丁-2-烯酸-噻唑-2-基醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-3-環戊基-2-[3-甲磺醯基-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基-]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基丙烯醯胺，(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-內烯醯胺，(E)-1-{3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基-丙烯醯基}-3-甲基-脲，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺，3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-甲磺醯基-3-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，1-{3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基}-丙醯基-3-甲基-脲，和1-{2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-丙醯基-3-甲基-脲。
13.按照權利要求1-11中任何一項的四唑，其選自N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-丙醯胺，N-(5-溴-吡啶-2-基)-3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-丙醯胺，3-環戊基-2-[4-(5-甲基-四唑-1-基)-3-三氟甲基-苯基]-N-噻唑-2-基-丙醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-三氟甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環己基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，(E)-N-(5-溴-噻唑-2-基)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環庚基-丙烯醯胺，(E)-2-[3-氯-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-3-環戊基-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺，和(E)-3-環戊基-2-[3-氟-4-(5-甲基-四唑-1-基)-苯基]-N-噻唑-2-基-丙烯醯胺。
14.一種藥物組合物，其含有權利要求1-13中任何一項的化合物和藥用載體和/或輔劑。
15.製備按照權利要求14的藥物組合物的方法，其包括將按照權利要求1-13中任何一項的式I化合物與藥用載體和/或輔劑組合。
16.按照權利要求1-13中任何一項的化合物，其作為治療活性物質。
17.按照權利要求1-13中任何一項的化合物用於治療或預防II型糖尿病的用途。
18.按照權利要求1-13中任何一項的化合物在製備用於治療或預防II型糖尿病的藥物中的用途。
19.一種用於預防或治療II型糖尿病的方法，其包括對人或動物給藥權利要求1-13中任何一項的化合物。
20.製備按照權利要求1-13中任何一項的四唑的方法，所述方法包括(a)將下式的化合物R4』-NH2其中R4』為如式1中R4所定義的五-或六-元芳香雜環，偶合到下式的化合物 其中R1，R2，R3和n如權利要求1所定義；或(b)將下式的化合物 其中R6如權利要求1所定義，偶合到下式的化合物 其中R1，R2，R3和n如權利要求1所定義；或(c)將下式的化合物R4』-NH2其中R4』為如式1中R4所定義的五-或六-元芳香雜環，偶合到下式的化合物 其中R1，R2，R3和n如權利要求1所定義；或(d)將下式的化合物 其中R6如權利要求1所定義，偶合到下式的化合物 其中R1，R2，R3和n如權利要求1所定義。
21.按照權利要求20的方法製備的化合物。
22.如上文所述的本發明。
全文摘要
式(1)四唑基－苯基乙醯胺，其中Z為(2)，R
文檔編號C07D277/28GK1466584SQ01816347
公開日2004年1月7日 申請日期2001年8月9日 優先權日2000年8月15日
發明者阿奇犬塔羅·西杜瑞, 阿奇犬塔羅 西杜瑞 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司