一種化療結腸癌複合注射劑的製備方法

2023-08-03 16:58:56

專利名稱：一種化療結腸癌複合注射劑的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種癌症化療製劑的製備方法，具體地說是一種化療結腸癌複合注射
劑的製備方法。
背景技術：
隨著環境汙染的加劇和飲食結構的變化，結腸癌發病率和死亡率逐年增加，嚴重 危害人民群眾健康。在結腸癌的治療方案中，化療仍然是目前其綜合治療措施中的主要手 段。目前在各種腫瘤的化療過程中所使用的化療藥物普遍存在的不足是抗腫瘤的化療藥物 缺乏選擇性，在殺滅癌細胞的同時也損傷了健康細胞，降低人體的免疫功能，出現許多毒副 作用，影響化療藥物的臨床應用，為了提高抗腫瘤藥物的療效，並減輕對正常細胞的損傷和 毒性作用，醫學界多次嘗試把抗體、脂質體、激素和其他大分子作為腫瘤化療藥物的載體， 以便增加藥物的靶向性，即"靶向治療"。但在實際臨床應用過程中存在的一個主要問題是 肝臟和脾臟的網狀內皮系統把血液中的這些複合物作為外來有害物而迅速從血流中清除， 從而減少了藥物-大分子複合物對腫瘤細胞的作時間而影響了藥物的治療效果。因此將藥 與其他物質結合，使其象制導飛彈一樣精確，只殺死腫瘤細胞，對正常肌體無毒副作用，將 是攻克癌症的又一裡程碑。

發明內容
本發明的一種治療結腸癌複合注射製劑的製備方法，是按以下方式實現的，根據
不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經過
對低密度脂蛋白的提純製得靶向藥物的載體，然後與治療癌症的阿克拉黴素靶向藥物進行
複合，將複合後低密度脂蛋白_阿克拉黴素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體
內達到治療結腸癌的目的。
具體製備步驟如下 1)低密度脂蛋白的製備 (1) KBr-NaEDPA溶液的製備稱取KBr 1. 080g，加入0. 0022mol/L的NaEDPA100ml 的水溶液中溶解攪拌均勻； (2)根據不同血型，分別取血庫血漿200ml，300r/m離心IO分鐘，取上清液，用 KBr-NaEDPA溶液調密度為1. 01 P ，溫度控制在4°C ，用離心機於47000r/m的轉速離心18小 時，吸除上層的VLDL，剩餘部分備用； (3)將吸除上層的VLDL後的剩餘液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調整密度為 1. 063 P ，控制溫度4°C ，用離心機於47000r/m的轉速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋 白備用； 2)對低密度脂蛋白進行透析提純 (1)透析液的製備稱取Na2HP04. 12H20 179g，NaCl 58. 44g， EDTA1000mg溶於蒸餾 水中調整體積至1000ml，再用2mol/L HC1調PH = 7. 4備用；
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(2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，控制溫度4°C ， 電磁攪拌透析24-48小時備用，透析過程中要換6次透析液，每次更換透析液500ml ;
(3)向透析後的溶液中加入20ii g/ml凝血酶，溫度升至24。C，攪拌處理10分鐘， 用0. 22 m微孔濾膜過濾除菌，分瓶裝，每瓶含LDL 40mg，置4。C溫度下保存備用；
3)低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射劑的製備，採用溫育交換法，精稱ACM原 料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調整總體積為20ml，4(TC水 浴，恆溫振蕩3小時，然後將溶液裝透析袋中置於500ml透析液中，控制溫度4t:，避光透析 48小時，除去游離ACM，再經0. 22 i！ m微孔濾膜過濾除菌後，製成低密度脂蛋白_阿克拉黴 素複合注射劑，包裝瓶上標註血漿原料血型，置溫度fC下保存備用。
本發明的有益效果如下 通過臨床實踐證明，低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑治療結腸癌已獲得滿 意療效，且無明顯化療毒副作用。包括結腸癌在內的多種腫瘤細胞特別是耐藥性腫瘤細胞 膜上，低密度脂蛋白受體的活性明顯增強，腫瘤細胞對低密度脂蛋白的攝取明顯增加。低密 度脂蛋白作為抗腫瘤藥物阿克拉黴素的載體實現治療腫瘤的藥物靶向作用的可行性引起 了廣泛的關注。 低密度脂蛋白較其他人工合成的載體具有更多的優點(1)對於具有細胞毒付作 用的高親脂性藥物來說，低密度脂蛋白是一種適合的傳輸載體；另一方面，在其內藥物也避 免了血漿中酶的水解；(2)低密度脂蛋白是一種生理的載體，不會被網狀內皮系統清除，從 而延長了抗腫瘤藥物的血漿半衰期；(3)腫瘤細胞通過低密度脂蛋白受體途徑內在化和代 謝細胞外的低密度脂蛋白，這種高效的過程可以引起不同的藥理性作用，可是消除一些抗 藥性的機制。
具體實施例方式本發明的化療結腸癌複合劑的製備方法，其製備步驟如下
1)低密度脂蛋白的製備 (1)製備KBr-NaEDPA溶液稱取KBrl. 080g，加入0. 0022mol/L的NaEDPA100ml的 水溶液中溶解攪拌均勻備用。 (2)根據血庫存放的血漿原料血型，分別取血漿200ml， 300r/m離心10分鐘，取上 清液，用KBr-NaEDPA溶液調密度為1. 01 P ，溫度控制在4。C，用離心機於47000r/m的轉速 離心18小時，吸除上層的VLDL溶液，留下剩餘部分備用； (3)將吸除上層的VLDL後的剩餘液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調整密度為 1. 063 P ，控制溫度4°C ，用離心機於47000r/m的轉速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋 白備用； 2)對低密度脂蛋白進行透析提純 (1)透析液的製備稱取Na2HP04. 12H20 179g，NaCl 58. 44g， EDTA1000mg溶於蒸餾 水調整體積至1000ml，用2mol/L HC1調Kl = 7. 4備用； (2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，加電磁攪拌，
控制溫度4t:，攪拌透析24-48小時，透析過程中更換6次透析液500ml ; (3)向透析後的溶液中加入20 ii g/ml凝血酶，溫度升至24。C，攪拌處理10分鐘，用0. 22 m微孔濾膜過濾除菌，分瓶包裝，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置4。C溫度下保存備 用， 3)低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑的製備採用溫育交換法精稱阿克拉 黴素原料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調整總體積為20ml ， 置4(TC水浴恆溫振蕩3小時，然後將溶液裝透析袋中於溫度4t:避光透析48小時，除去遊 離阿克拉黴素，再經0. 22 P m微孔濾膜過濾除菌後，製成本發明的低密度脂蛋白-阿克拉黴 素複合靜脈注射，包裝瓶上標註血漿原料血型，置溫度fC下保存備用。
臨床應用每天靜脈輸注低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合靜脈注射藥物_次，20 天為一療程，需要3-5個療程，療程之間間隔10天。
臨床典型病例 1、楊xx，男，72歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現腹腔內淋巴結廣泛轉移， 術後15天，給予低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射每天一次，治療3個療程， 隨訪3年，未復發。 2、崔xx，女，結腸癌晚期，給予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治 療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復發。
3、劉xx，男，66歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現縱膈及主動脈轉移，術後 15天給予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復 發。 4、李xx，女，75歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現廣泛腹腔淋巴結轉移，術 後15天低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復發。
5、李xx，男，57歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現腹膜後轉移，術後15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復發。
6、張xx，男，78歲，結腸癌晚期，給予低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射劑靜脈 注射治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復 發。 7 、馬xx，女，64歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現腹腔淋巴結轉移，術後15 天給予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復發。
8、吳xx，男，72歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現胸腔內轉移，術後15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復發。
9、馬xx，女，74歲，結腸癌晚期，給予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈 注射治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復 發。 10、曹xx，男，72歲，結腸癌中晚期，行手術切除，術中發現縱膈轉移，術後15天給 予低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑靜脈注射治療3個療程，隨訪3年，未復發。
療效統計使用本發明的低密度脂蛋白_阿克拉黴素複合注射劑，共治療結腸癌 患者185人，有效率達100%，3年存活率達96%以上。
權利要求
一種化療結腸癌複合注射劑的製備方法，其特徵在於根據不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經過對低密度脂蛋白的提純製得靶向藥物的載體，然後與治療癌症的阿克拉黴素靶向藥物進行複合，將複合後低密度脂蛋白-阿克拉黴素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體內達到治療結腸癌的目的，製備步驟如下1)低密度脂蛋白的製備(1)KBr-NaEDPA溶液的製備稱取KBr 1.080g，加入0.0022mol/L的NaEDPA100ml的水溶液中溶解攪拌均勻；(2)根據不同血型，分別取血庫血漿200ml，300r/m離心10分鐘，取上清液，用KBr-NaEDPA溶液調密度為1.01ρ，溫度控制在4℃，用離心機於47000r/m的轉速離心18小時，吸除上層的VLDL，剩餘部分備用；(3)將吸除上層的VLDL後的剩餘液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調整密度為1.063ρ，控制溫度4℃，用離心機於47000r/m的轉速，離心20小時，吸取上面的低密度脂蛋白備用；2)對低密度脂蛋白進行透析提純(1)透析液的製備稱取Na2HPO4.12H2O 179g，NaCl 58.44g，EDTA1000mg溶於蒸餾水中調整體積至1000ml，再用2mol/L HCl調PH＝7.4備用；(2)將低密度脂蛋白裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，控制溫度4℃，電磁攪拌透析24-48小時備用，透析過程中要換6次透析液，每次更換透析液500ml；(3)向透析後的溶液中加入20μg/ml凝血酶，溫度升至24℃，攪拌處理10分鐘，用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分瓶裝，每瓶含低密度脂蛋白40mg，置4℃溫度下保存備用；3)低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射製劑的製備，採用溫育交換法，精稱阿克拉黴素原料藥80mg，加入到含有40mg低密度脂蛋白的溶液中，加蒸餾水調整總體積為20ml，40℃水浴，恆溫振蕩3小時，然後將溶液裝透析袋中置於500ml透析液中，控制溫度4℃，避光透析48小時，除去游離阿克拉黴素，再經0.22μm微孔濾膜過濾除菌後，製成低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射製劑，包裝瓶上標註血漿原料血型，置溫度4℃下保存備用。
全文摘要
本發明提供一種化療結腸癌複合注射劑的製備方法，該根據不同血型分別取血庫原料血漿，通過離心和密度調整處理，從中提取出低密度脂蛋白，經過對低密度脂蛋白的提純製得靶向藥物的載體，然後與治療癌症的阿克拉黴素靶向藥物進行複合，將複合後低密度脂蛋白-阿克拉黴素藥物注射到與藥物原料血漿血型相同的患者體內達到治療結腸癌的目的。通過臨床實踐證明，本發明的低密度脂蛋白-阿克拉黴素複合注射製劑在臨床治療結腸癌上已獲得滿意療效，且無明顯化療毒副作用，共治療結腸癌患者185人，有效率達100％，3年存活率達96％以上，具有很好的推廣使用價值。
文檔編號A61K47/42GK101757633SQ20081023874
公開日2010年6月30日 申請日期2008年12月23日 優先權日2008年12月23日
發明者曹瑩瑩 申請人:曹瑩瑩