天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其製備方法
2023-08-03 11:56:36 2
專利名稱：天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其製備方法。這種口服與注射用表面活性劑，是製備乳劑脂質體的常用輔料。
在藥物製劑生產中作為注射用的表面活性劑較少。現有的作為注射用表面活性劑，如精製豆磷脂與蛋黃卵磷脂，一般用於脂肪乳劑(O/W型)與脂質體的製備。而作為油包水乳劑(W/O型)的乳化劑，可注射用的尚未見報導。粗製豆磷脂的方法已在專利CN1047083A中公開報導，它是從大豆磷脂粉中精製提取而得。蛋黃卵磷脂(O/W型)的製備方法也有公開報導，如專利US4，857，236中公開了從蛋黃中提取卵磷脂的方法，它採用石油醚、低級醇和水為混合溶劑，再經矽膠柱分離，來提高蛋黃卵磷脂含量和除掉浴血卵磷脂，製成水包油乳劑的乳化劑。柱分離的主要缺點是容易掛柱，不易洗脫，不適於工業生產。日本公開特許公報中公開的昭62-263192，是以乙醇與正乙烷和水的混合溶劑提取分離蛋黃磷脂，再經過超濾膜處理，提高蛋黃卵磷脂的含量。超過濾膜要求嚴格，藥理指標不好滿足，不適於大規模生產。昭62-246525是以市售的混合磷脂再精製的方法，來提高蛋黃卵磷脂的含量，除掉雜質等等。以上專利多是為了提高卵磷脂的含量及除掉雜質，提高親水性為目的，是作為水包油乳劑與脂質體的藥用輔料。其除掉雜質的目的僅為提純蛋黃卵磷脂，而對於除掉降壓、致敏、致熱等雜質未見報導。但是，在實際應用中往往需要親油性乳化劑，如製備注射用的多層乳劑，動脈栓塞給藥的油包水乳劑(W/O)等，均需要親油性表面活性劑，且其藥理安全限度必須達到要求。迄今為止，還無此類藥用輔料可以工業化生產。
本發明的目的是提供一種天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其製備方法，該輔料無毒副作用，有效除掉降壓物、致敏物、致熱物等雜質，其製備方法簡便，易於工業化生產。
本發明的目的是這樣實現的該蛋黃磷脂-6基本組成重量比為卵磷脂6-7，腦磷脂1.0-0.6，膽固醇0.3-0.7，維生素E1.0-0.6，其親水親油平衡值為6-8。
其製備工藝步驟是取脫脂蛋黃粉用溶劑低級烷醇浸提，其用量為低級烷醇∶蛋黃粉＝(3-5)∶1，在40-60℃溫度下，浸提1-2小時，浸提三次，合併三次浸提液;
在浸提液中於40-60℃下加入吸附劑活性氧化鋁拌勻，其用量為活性氧化鋁∶蛋黃粉＝(0.3-0.8)∶10，吸附1-2小時後，靜置過濾。
在濾液中加入藥用活性炭拌勻，其用量為活性炭∶蛋黃粉＝(0.1-0.5)∶10，吸附1-2小時後，靜置降至室溫抽濾，在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽乾即得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
將抽乾得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3-6倍無水乙醇溶解，於0-4℃下冷藏12-24小時，濾除沉澱物，收集濾液，真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽乾後於滅菌條件下鋁箔包裝抽真空封存，即得精製蛋黃磷脂-6。
由於本發明採用市售蛋黃粉以低級烷醇溶劑提取、精製蛋黃磷脂，所以原料來源易得，方便簡便，易於工業化生產。溶劑乙醇等低級烷醇，減壓下它的沸點低，易於使溶劑清除乾淨，其與水互溶性好，能把水除淨，可有效避免帶入有害雜質。所用溶劑量以蛋黃粉中磷脂全部提出為宜。用量多浪費且增加後處理工作量，用量少提取不完全。提取液中蛋黃磷脂的分離提純方法，不採用現有技術中的矽膠柱分離法，超濾膜處理法，而是採用適量低級烷醇溶劑提取後，以吸附劑活性氧化鋁或其它吸附劑活性炭、矽膠、白陶土等除掉降壓物;以藥用活性炭吸附法除掉熱源雜質;以無水乙醇沉澱法除致敏物。因此，本發明分離提純方法製備的蛋黃磷脂-6基本組成為卵磷脂、腦磷脂、膽固醇、維生素E四種，此外還有少量溶血磷脂、磷脂酸等成分，其親水親油值與乳化能力，也因上述組分的含量不同而不同。所得產品蛋黃磷脂-6檢測結果表明，其基本成分含量達到藥理安全限度檢查要求，是一種可作為注射用的親油性表面活性劑。蛋黃磷脂-6不僅可作輔料，而且對於防止和治療某些神經系統、心臟、肺及代謝方面的疾病都有重要作用。
以下結合實施方法對本發明作進一步說明。
實施方法一將市售蛋黃粉採用常規脫脂方法製取脫脂蛋黃粉，也可直接採用市售脫脂蛋黃粉。
低級烷醇可選用甲醇或乙醇或丙醇，優先選用乙醇，特別是藥用94-95%乙醇為宜。也可將94-95%工業乙醇精製後使用。以下實施方法中只以94-95%乙醇為例，不一一列舉其它低級烷醇。
稱取100克脫脂蛋黃粉加入95%乙醇300ml於50℃下拌勻，浸提1小時，浸提三次。合併三次浸提液。在浸提液中加入吸附活性氧化鋁3.0克，於50℃下拌勻，吸附1小時後，靜置過濾。在濾液中加入藥用活性炭2.0克，於50℃下拌勻，吸附1小時後，靜置降至室溫抽濾，濾液在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽乾得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
將上述抽乾得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3倍無水乙醇，充分溶解於0-4℃下冷藏12小時，濾除沉澱物，收集濾液。在真空減壓充氮條件下回收乙醇。充分抽乾，於滅菌條件下，用鋁箔包裝抽真空封存，即得精製蛋黃磷脂-6。
實施方法二稱取100克脫脂蛋黃粉加入94%乙醇400ml，其餘工藝步驟同實施方法一。
實施方法三稱取100克脫脂蛋黃粉加入95%乙醇500ml於50℃下拌勻，浸提1小時，浸提三次。合併三次浸提液，在浸提液中加入吸附劑活性氧化鋁8.0克，於55℃下拌勻，吸附1小時，靜置過濾，濾液中加入藥和活性炭5.0克，於55℃拌勻，吸附1小時後，靜置降至室溫抽濾。以下工藝步驟同實施方法一。
對所得產品10克蛋黃磷脂-6分析結果如下其主要成分為卵磷脂(PC)6.5±0.5克腦磷脂(PE)0.8±0.2克膽固醇(Ch)0.5±0.2克維生素E(VE)0.8±0.2克以凱氏定氮法測得含氮量1.40±0.15%含磷量3.00±0.20%酸值10.19-11.14碘價65.74-68.67過氧化值3.78meq/kg丙酮不溶物72.1-76.9%正已烷不溶物0.58-1.18%蛋黃磷脂-6親水親油值測定應用NMR法測得結果如下HLB＝18.24R+1.80
平均HLB＝6.59±0.13蛋黃磷脂-6的靜脈注射安全限度試驗結果如下1、熱原檢測按中國藥典標準與規定測得結果如表1以家兔進行熱原檢測室溫18-19℃表1
2、過敏實驗以豚鼠按表2分組給藥，劑量mL/rat，結果如表2 3、降壓檢測3.0%蛋黃磷脂-6
以家貓實驗，先進行貓的靈敏度檢測，合格的貓進行降壓實驗，按藥典規定測得結果如表3表3 結果dT所致反應均不大於dS所致的一半，全部合格。
4、溶血試驗按常規體外、體內溶血試驗取兔血與在兔體內注射測得結果，3.0%蛋黃磷脂-6無溶血現象。
5、刺激試驗以家兔股四頭肌法、眼結膜法、耳殼法等三種方法測得結果，此天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6無刺激性。
6、急性毒性試驗按常規方法測定蛋黃磷脂-6的LD50＞20g/kg，說明此天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6毒性很小。
7、一般藥理實驗以家貓作實驗動物，測定心率、血壓、呼吸的變化，注射1.3mL/kg，3.0%蛋黃磷脂-6觀測5個時間點數據統計，如下表4。
3.0%蛋黃磷脂-6對貓的心率、血壓、呼吸的影響(X±SD，n＝5)表4 測量結果，給藥前後連續觀測1小時，對5個時間點進行統計處理貓的心率、血壓、呼吸無顯著差異。(P＞0.05)。
權利要求
1.一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6，其特徵是基本組成重量比為卵磷脂6-7，腦磷脂1.0-0.6，膽固醇0.3-0.7，維生素E1.0-0.6，其親水親油平衡值為6-8。
2.一種製備權利要求1的蛋黃磷脂-6的方法，其特徵是包括以下步驟取脫脂蛋黃粉用溶劑低級烷醇浸提，其用量為低級烷醇蛋黃粉＝(3-5)∶1，在40-60℃溫度下，浸提1-2小時，浸提三次，合併三次浸提液;在浸提液中於40-60℃下加入吸附劑活性氧化鋁拌勻，其用量為活性氧化鋁∶蛋黃粉＝(0.3-0.8)∶10，吸附1-2小時後，靜置過濾;在濾液中加入藥用活性炭拌勻，其用量為活性炭∶蛋黃粉＝(0.1-0.5)∶10，吸附1-2小時後，靜置降至室溫抽濾，在真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽乾即得天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6。
3.根據權利要求2所述的方法，其特徵是將抽乾得到的蛋黃磷脂-6加入其重量的3-6倍無水乙醇溶解，於0-4℃下冷藏12-24小時，濾除沉澱物，收集濾液，真空減壓充氮條件下回收乙醇，抽乾後於滅菌條件下鋁箔包裝抽真空封存，即得精製蛋黃磷脂-6。
4.根據權利要求2所述的方法，其特徵是所用低級烷醇為甲醇或乙醇或丙醇。
5.根據權利要求2所述的方法，其特徵是所用低級烷醇為藥用94-95%乙醇。
全文摘要
本發明涉及一種藥用輔料天然親油性表面活性劑蛋黃磷脂-6及其製備方法，其基本組成為卵磷脂6—7，腦磷脂1.0—0.6，膽固醇0.3—0.7，維生素E1.0—0.6，其親水親油平衡值為6—8。其製備工藝步驟是將脫脂蛋黃粉用溶劑低級烷醇浸提，浸提液用吸附劑活性氧化鋁、藥用活性炭除雜，以無水乙醇沉澱法進行精製，取得精製蛋黃磷脂-6。該製劑無毒副作用，有效除掉降壓物、致敏物、致熱物等雜質，其製備方法簡便，易於工業化生產。
文檔編號A61K47/06GK1107069SQ9411264
公開日1995年8月23日 申請日期1994年11月25日 優先權日1994年11月25日
發明者蘇德森 申請人:瀋陽藥科大學