製備紫杉醇的方法

2023-08-05 12:57:36 1

專利名稱：製備紫杉醇的方法
技術領域：
本發明涉及製備紫杉醇的方法。
紫杉醇是一種具有廣譜抗腫瘤活性的、源自天然的分子，其具有以下結構式 該化合物最初是從短葉紫杉(Taxus brevifolia)的樹皮和其它天然資源中獲取的，並可按照科技和專利文獻中所描述的眾多方法通過半合成方法製備。
美國專利US 4,924,011公開了一種紫杉醇的半合成方法，其中，將10-脫乙醯基漿果赤黴素III的C-7羥基用三烷基甲矽烷基保護，隨後將C-10乙醯化。將得到的中間體與(2R，3S)-N-苯甲醯基-2-O-(1-乙氧基乙基)-3-苯基-異絲氨酸反應並將得到的產物脫保護以得到紫杉醇。
WO93/06094公開了使β-內醯胺前體與7-O-三乙基甲矽烷基-漿果赤黴素III反應、隨後用弱酸水解來製備紫杉醇的方法。
根據美國專利US 5,476,954的描述，紫杉醇是以在C-7位被2，2，2-三氯乙氧羰基(TROC)酯化的10-脫乙醯基漿果赤黴素III作為起始物質進行製備的。
根據美國專利US 5,917,062和美國專利US 6,020,507，用苄氧羰基(CBZ)或叔丁氧基羰基(Boc)保護C-7羥基，之後對C-10羥基進行選擇性的乙醯化。
從文獻中可以明顯看出紫杉醇半合成的一個關鍵的方面是選擇性地保護二萜部分(10-脫乙醯基漿果赤黴素III骨架)上的羥基。C-7位的反應活性最強，因此將其用隨後易於除去的基團功能基化。最常用的基團是三乙基甲矽烷基(TES)，其在合成中所涉及的其它羥基的酯化反應條件下是穩定的並可提供約85％的轉化收率。當隨後在C-10位引入乙醯基時，收率大約為85％。
現已發現了一種合成紫杉醇的新方法，與已知的方法相比，該新方法可提供較高的最終收率和其它優點。
本發明的方法包括以下步驟a)保護10-脫乙醯基漿果赤黴素III(10-DAB III)的7位和10位羥基， 其中R＝R』＝三氯乙醯基，或者R』＝乙醯基並且R選自叔丁氧基羰基和三氯乙醯基，b)用3-苯基-2-環氧丙酸將13位的羥基酯化， c)如果7位和10位的保護基都是三氯乙醯基，則(1)除去7位和10位的保護基團，(2)隨後在10位進行選擇性的乙醯化，(3)用疊氮化鈉使環氧化物開環；
或者，c』)如果R』＝乙醯基並且R＝三氯乙醯基，則用疊氮化鈉使環氧化物開環並同時使7位脫保護， d)將疊氮基還原為氨基，
e)進行苯甲醯化生成終產物。
起始物質是從歐洲紫杉(Taxus baccata)的葉子中提取的10-脫乙醯基漿果赤黴素III(10-DAB III)。在第一步中，將10-DAB III的C-7和C-10羥基定量酯化。當R＝R』＝三氯乙醯基時，使10-DAB III在三乙胺和催化量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下與三氯乙醯氯在二氯甲烷中反應。當R≠R』時，首先在鈰、鈧、鐿鹽，優選CeCl3.7H2O的存在下用乙酸酐對10-DAB III進行選擇性的乙醯化。隨後用叔-丁氧基羰基或三氯乙醯基對得到的漿果赤黴素III的C-7位進行保護。可以通過使漿果赤黴素III在DMAP和乙基二異丙基胺的存在下與叔丁氧基焦碳酸酯反應或者依照美國專利US 5,917,062中所述的方法進行反應引入叔丁氧基羰基。可以通過使漿果赤黴素III與三氯乙醯氯在吡啶中反應將三氯乙醯基引入至7位。
在隨後的步驟b)中，在二環己基碳二亞胺、DMAP和對-甲苯磺酸的存在下，用3-苯基-2-環氧丙酸、優選用其銨鹽在甲苯中將13位的羥基酯化，從而獲得(2R，3R)-3-苯基-2，3-環氧-丙酸漿果赤黴素III酯。
當保護基團R和R』都是三氯乙醯基時，可以使用Zheng等人在「Tetrahedron Lett.，1995，36，2001」和Datta等人在「J.Org.Chem.，1995，60，761」中所述的條件和試劑將它們除去。優選使用兩個當量的氫氧化銨除去兩個三氯乙醯基。然後，在鈰、鈧或鐿鹽，優選CeCl3.7H2O的存在下，用乙酸酐選擇性地將脫保護了的化合物在10位乙醯化。
在文獻(Yamaguchi T.，Tetrahedron Letters 39，5575-78，1998)所報導的條件下，使得到的化合物在甲酸甲酯的存在下與疊氮化鈉在含水甲醇中發生反應，生成相應的疊氮化物。
或者，當R＝三氯乙醯基並且R』＝乙醯基(d)時，將環氧乙烷與疊氮化鈉反應生成在7位脫保護的相應的疊氮化物，其相當於步驟(c』)中所得到的化合物。
在隨後的步驟(d)中將疊氮化物還原為胺。可以用催化氫化或用PPh3進行還原反應。將所得產物的氨基在最後一步(e)中苯甲醯化得到紫杉醇。可以在進行還原反應的同時用苯甲酸酐進行苯甲醯化反應，或者在還原反應之後使用化學計算量的苯甲醯氯在碳酸鉀的存在下將分離出來的還原產物苯甲醯化。
以下實施例更為詳細地闡明了本發明。
實施例17-三氯乙醯基-漿果赤黴素III的合成在25ml的圓底燒瓶中，將0.603g(1.03mmol，1.0當量)漿果赤黴素III在磁力攪拌、25℃、氮氣環境下溶解於9.7ml無水吡啶中。向該澄清的淺黃色溶液中滴加138μl(1.23mmol，1.23當量)三氯乙醯氯。加入完成30分鐘後，生成白色沉澱。在與上述相同的條件下，向反應混懸液中再滴加120μl(1.07mmol，1當量)三氯乙醯氯。20分鐘後，溶液呈黃褐色。通過TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，2∶3)觀察到起始物質漿果赤黴素III幾乎已全部轉化。用二氯甲烷稀釋反應混合物。將得到的溶液用CuSO4飽和溶液反覆洗滌直至吡啶被完全除去(溶液不再呈藍色)。將有機相在真空下濃縮、用MgSO4乾燥、過濾、蒸除溶劑，得到0.612g具有以下光譜特徵的黃白色粉末(相當於7-三氯乙醯基漿果赤黴素III)1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.08(s，3H，Me)，1.13(s，3H，Me)，1.86(s，3H，Me)，1.97(ddd，1H，J1＝14.4 Hz，J2＝10.3 Hz，J3＝1.9 Hz，C6-H)，2.13(d，3H，J＝1，2Hz，Me)，2.15(s，3H，Me)，2.30(s，3H，Me)，2.32-2.28(m，2H，C14-H2)，2.68(ddd，1H，J1＝14.4 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，4.04(d，1H，J＝7.0 Hz，C3-H)，4.17(dd，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C20-H)，4.34(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.86(t，1H，J＝7.5 Hz，C13-H)，4.98(dd，1H，J1＝9.5 Hz，J2＝1.7 Hz，C5-H)，5.65(d，1H，J＝7.0 Hz，C2-H)，5.70(dd，1H，J1＝10.4 Hz，J2＝7.4 Hz，C7-H)，6.42(s，1H，C10-H)，7.52-7.46(m，2H，芳族)，7.62(m，1H，芳族)，8.10(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.8，15.5，20.4，20.9，22.8，26.9，32.5，38.6，43.0，47.2，56.2，68.1，74.5，75.5，76.5，77.0，79.0，80.5，83.7，89.9，129.0，129.4，130.3，132.0，134.0，145.4，160.8，167.2，169.2，171.0，201.9。
實施例2(2』R，3』R)-7-三氯乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)的合成將0.164g(1.00mmol，1當量)新製備的3-苯基-2-環氧丙酸在0℃下溶解於30ml無水甲苯中。隨後在氮氣環境、0℃下加入0.5g(1mmol，0.68當量)7-(三氯乙醯基)-漿果赤黴素III[7-(TCA)-漿果赤黴素III]。最後，依次加入二環己基碳二亞胺(DCC，0.21g，1.00mmol，1.0當量)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.084g，0.68mmol，0.66當量)和對甲苯磺酸(p-TSA，0.17g，0.10mmol，0.1當量)。然後將溶液在磁力攪拌和氮氣流下加熱至70℃。通過TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，3∶2)監控反應進程。第一個點(Rf＝0.28)對應於7-(TCA)-漿果赤黴素III環氧酯。第二個點(Rf＝0.11)對應於7-(TCA)-漿果赤黴素III。3個小時後，將混合物冷卻並過濾出懸浮的固體。用二氯甲烷洗滌沉澱的二環己基脲(DCU)。將合併的有機相濃縮至幹。通過快速色譜法(SiO2，正己烷/乙酸乙酯，3∶2)將得到的粗品(0.919g)進行色譜分離。得到0.100g(0.14mmol，20％)未反應的7-TCA-漿果赤黴素III和0.435g(0.49mmol，73％)具有以下光譜特徵的(2』R，3』R)-7-三氯乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.11(bs，6H，2Me)，1.25(bs，1H，OH)，1.76(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.84(s，3H，Me)，2.02-1.92(m，3H，C14-H2+C6-H)，2.13(s，3H，Me)，2.39(s，3H，Me)，2.69(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，3.92(d，1H，J＝6.9 Hz，C3-H)，3.97(d，1H，J＝4.7 Hz，C2′-H)，4.15(dd，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝8.3 Hz，C20-H)，4.33(d，1H，J＝4.7 Hz，C3′-H)，4.97(dd，1H，J1＝9.5 Hz，J2＝1.8 Hz，C5-H)，5.63(d，1H，J＝6.8 Hz，C2-H)，5.65(dd，1H，J1＝10.7Hz，J2＝7.33 Hz，C7-H)，6.02(dt，1H，J1＝8.8 Hz，J2＝1.8 Hz，C13-H)，7.45-7.30(m，5H，芳族)，6.34(s，1H，C10-H)，7.49(m，2H，芳族)，7.64(m，1H，芳族)，8.00(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.8，14.9，20.8，21.0，22.5，26.5，32.4，35.7，43.2，46.7，56.0，56.1，57.9，70.9，74.5，74.8，76.4，76.7，79.0，80.6，83.6，89.8，126.8，128.7，128.9，129.2，129.3，130.2，132.6，133.0，134.1，141.3，160.7，166.3，167.1，169.1，170.1，201.3。
實施例3(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-疊氮基-2』-羥基-3』-苯基-丙酸酯)的合成在裝備有磁力攪拌器的25ml單口圓底燒瓶中，將0.397g(0.45mmol，1當量)(2'R，3』R)-7-三氯乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)於25℃下懸浮於10.0ml甲醇中。依次加入1.26ml水、1.26ml甲酸甲酯和0.735g(11.3mmol，25.0當量)疊氮化鈉。將溫度升至50℃，通過TLC(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12.0∶2.0∶0.3)監測反應的進程。觀察到起始物質消失並同時生成Rf值分別為0.22和0.29的兩種產物。隨後證實Rf值為0.29的產物為最終產物，而Rf值為0.22的產物為生成的反應中間體(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)。隨著時間的推移，Rf值為0.29的產物增加而Rf值為0.22的產物減少。46小時後，反應液呈黃褐色，並且其中有白色沉澱(未反應的疊氮化鈉)。46小時後加入水使反應停止，觀察到另兩個點，Rf值分別為0.38和0.13(未回收的分解產物)。將沉澱的乳白色固體過濾、用水洗滌然後用乙酸乙酯洗滌。得到兩相均澄清的兩相混合物。將兩相分離，用乙酸乙酯將水相萃取三次，將合併的有機相濃縮並用MgSO4乾燥。將混合物過濾、蒸除溶劑得到0.335g黃白色粉末。通過快速色譜法(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12∶2∶0.3)將得到的粗品純化，得到0.279g(0.36mmol，80％，Rf＝0.22)(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-疊氮基-2』-羥基-3』-苯基-丙酸酯)。
得到的化合物具有以下光譜特徵
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.14(s，3H，Me)，1.25(bs，4H，Me+OH)，1.67(s，3H，Me)，1.87(ddd，1H，J1＝13.9 Hz，J2＝11.1 Hz，J3＝2.5 Hz，C6-H)，1.93(d，3H，J＝0.8 Hz，Me)，2.08(d，2H，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.24(s，3H，Me)，2.26(s，3H，Me)，2.55(m，2H，C6-H+C7-OH)，3.28(d，1H，J＝8.4Hz，C2′-OH)，3.77(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，4.15(dd，IH，J1＝8.2 Hz，J2＝0.8 Hz，C20-H)，4.28(d，1H，J＝8.2 Hz，C20-H)，4.41(m，2H，C7-H+C2′-H)，4.93(dd，1H，J1＝9.6 Hz，J2＝2.0 Hz，C5-H)，4.96(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，5.64(d，1H，J＝7.2 Hz，C2-H)，6.17(dt，1H，J1＝7.9 Hz，J2＝1.2 Hz，C13-H)，6.30(s，1H，C10-H)，7.46-7.32(m，5H，芳族)，7.46-7.32(m，5H，芳族)，7.50(m，2H，芳族)，7.63(m，1H，芳族)，8.06(m，2H，芳族)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δppm＝9.8，15.3，21.1，21.9，22.6，27.0，35.6，35.8，43.3，45.9，58.8，68.1，72.0，72.4，75.1，75.3，75.8，76.7，79.4，81.3，84.6，127.9，128.9，129.2，129.5，130.3，133.4，134.1，135.3，142.2，167.2，170.5，171.5，203.8。
實施例4N-脫苯甲醯基-紫杉醇的合成在25ml雙口圓底燒瓶中，將0.102g(0.13mmol，1.0當量)(2』R，3』R)-7-羥基-漿果赤黴素III-13-(3』-疊氮基-2』-羥基-3』-苯基-丙酸酯)溶解於5.2ml新蒸餾的二氯甲烷中，向形成的淺黃色溶液中加入水(0.05ml)，然後加入0.071g(0.26mmol，2.0當量)PPh3。使混合物在室溫、磁力攪拌下進行反應。16小時後用TLC(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)監測反應的進程。起始物質(Rf＝0.61)已消失，觀察到Rf＝0.19的點。用氯仿稀釋混合物(淺黃色並有白色沉澱)以終止反應。之後，用蒸餾水、然後用氯化鈉飽和溶液(鹽水)洗滌混合物。用MgSO4乾燥亮黃色的有機相，然後過濾並蒸除溶劑。得到0.177g赭黃色油狀物。將粗品經快速色譜法(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)處理，得到0.074mg(0.10mmol，76％)N-脫苯甲醯基-紫杉醇(淺黃色粉末)。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.07(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.38-1.22(bs，2H，2OH)，1.75(s，3H，Me)，1.88(s，3H，Me)，1.90(s，3H，Me)，1.93(s，3H，Me)，2.20-1.96(m，6H，C14-H2+C6-H，NH2+OH)，2.52(ddd，1H，J1＝15.7 Hz，J2＝9.5 Hz，J3＝5.9 Hz，C6-H)，3.88(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，4.10(d，1H，J＝4.0 Hz，C20-H)，4.17(d，1H，J＝4.0 Hz，C20-H)，4.22(d，1H，J＝8.0 Hz，C2′-H)，4.26(d，1H，J＝8.0 Hz，C3′-H)，4.56(dd，1H，J1＝11.6 Hz，J2＝6.9 Hz，C7-H)，4.84(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.83(d，1H，J＝7.2 Hz，C2-H)，6.25(t，1H，J＝8.0 Hz，C13-H)，6.51(s，1H，C10-H)，7.20-7.00(m，8H，芳族)，8.13(m，2H，芳族)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝9.8，15.2，21.1，22.0，22.7，27.0，30.0，35.4，35.8，43.3，45.9，58.7，71.3，72.3，75.2，75.8，76.6，79.3，81.2，84.6，127.2，128.5，128.9，129.0，129.4，130.3，133.1，134.1，142.6，167.1，170.4，171.5，173.2，203.9。
實施例5紫杉醇的合成在10ml的圓底燒瓶中，將0.031g(0.041mmol，1.0當量)N-脫苯甲醯基-紫杉醇溶解於1.25ml乙酸乙酯中。向該澄清的黃色溶液中加入1.25ml碳酸氫鈉飽和水溶液。在強烈的磁力攪拌下，向形成的兩相混合物中滴加7.1ml(0.064mmol，1.5當量)苯甲醯氯。通過TLC(SiO2，氯仿/甲醇9∶1)監測反應的進程。起始物質消失後，觀察到Rf＝0.50的單點。用乙酸乙酯稀釋反應混合物。將有機相與水相分離，用乙酸乙酯萃取水相(萃取三次)。將合併的有機相用MgSO4乾燥、過濾並濃縮。將粗品(0.037g)溶於二氯甲烷/乙醚的1∶1的混合物中，然後加入正戊烷以使紫杉醇沉澱(0.030g，0.035mmol，86％)，得到的紫杉醇具有文獻中所報導的光譜特徵。
實施例6(2』R，3』R)-7，10-雙-三氯乙醯基-10-脫乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)的合成在100ml的圓底燒瓶中，將0.178g(1.09mmol，1.0當量)新製備的3-苯基-2-環氧丙酸在0℃下溶解於30ml無水甲苯中。在氮氣環境、0℃下，將0.663g(0.79mmol，0.73當量)7，10-雙-(三氯乙醯基)-10-脫乙醯基漿果赤黴素III[7，10-雙-(TCA)-10-DAB III]懸浮在以上得到的溶液中。最後，依次加入二環己基碳二亞胺(DCC，0.224g，1.09mmol，1.0當量)、4-二甲基氨基吡啶(DMAP，0.088g，0.72mmol，0.66當量)和對甲苯磺酸(p-TSA，0.19g，0.11mmol，0.1當量)。反應在70℃、磁力攪拌和氮氣流下於多相中進行。通過TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)監測反應的進程。第一個點的Rf值為0.28，對應於7，10-雙-(TCA)-10-DAB III環氧酯，第二個點的Rf值為0.15，對應於7，10-雙-(TCA)-10-DAB III。3小時後，將混合物冷卻並過濾出懸浮的固體。用二氯甲烷洗滌深黃色的沉澱，剩餘的白色固體為DCU。將合併的有機部分濃縮，所得到的固體經快速色譜法(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)處理得到0.63g(2』R，3』R)-7，10-雙-三氯乙醯基-10-脫乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)。
1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.12(s，3H，Me)，1.14(s，3H，Me)，1.76-1.60(m，2H，C6-H+OH)，1.81(s，3H，Me)，1.88(s，3H，Me)，2.04-1.98(m，2H，C14-H)，2.41(s，3H，Me)，2.69(ddd，1H，J1＝14.5 Hz，J2＝9.3 Hz，J3＝7.3 Hz，C6-H)，3.89(d，1H，J＝7.2 Hz，C3-H)，3.98(d，1H，J＝4.0 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.0 Hz，C20-H)，4.32(d，1H，J＝8.0 Hz，C20-H)，4.34(d，1H，J＝4.0 Hz，C3′-H)，4.97(d，1H，J＝7.6 Hz，C5-H)，5.70-5.62(m，2H，C7-H+C2-H)，6.05(dt，1H，J1＝8.4 Hz，J2＝1.0 Hz，C13-H)，7.52-7.30(m，7H，ArH)，6.39(s，1H，C10-H)，7.45(m，1H，ArH)，7.99(m，2H，ArH)；13CNMR(100 MHz，CDCl3)δppm＝10.9，15.1，20.8，22.6，26.3，32.5，35.6，43.1，46.7，55.9，56.5，58.0，70.8，74.2，76.4，78.6，78.9，80.5，83.5，89.5，89.6，126.8，128.8，129.0，129.1，129.4，130.2，131.5，132.5，134.2，143.3，160.6，161.1，166.3，167.0，170.3，199.5。
實施例7(2』R，3』R)-10-脫乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)的合成在25ml的圓底燒瓶中，將0.174g(0.18mmol，1.0當量)(2』R，3』R)-7，10-雙(TCA)-10-DAB III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)懸浮於3ml甲醇中。將形成的懸浮液冷卻至0℃，在強烈的磁力攪拌下向其中滴加0.24ml(0.36mmol，2.0當量)1.57M的氨水溶液。使反應於0℃下進行15分鐘，期間懸浮液變為黃綠色。此後，將混合物的溫度升至室溫，進一步反應5分鐘以使沉澱完全溶解，得到澄清的黃綠色溶液。通過TLC(SiO2，正己烷/乙酸乙酯3∶2)監測發現原料化合物完全消失，在基線處有一個單點。用水稀釋反應混合物，得到乳白色溶液，用乙酸乙酯從中萃取(萃取三次)有機相(加入有機溶劑後形成乳狀液，通過將NaCl溶解於其中破乳)。將合併的有機相用MgSO4乾燥、過濾並蒸除溶劑。得到0.194g(2』R，3』R)-10-脫乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)的白色粉末。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.05(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.71(s，3H，Me)，1.72(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.83(m，1H，C6-H)，1.95(2H，d，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.34(s，3H，Me)，2.58(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.9 Hz，J3＝6.9 Hz，C6-H)，3.85(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，3.95(d，1H，J＝4.4 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.22(dd，1H，J1＝11.3 Hz，J2＝6.6Hz，C7-H)，4.27(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，4.95(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.16(s，1H，C10-H)，5.59(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，5.99(dt，1H，(d，1H，J1＝8.8 Hz，J2＝1.2 Hz，C7-H)，7.30-7.50(m，7H，芳族)，7.60-7.70(m，1H，芳族)，7.90-8.00(m，2H，芳族)。
實施例8(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)的合成將7.3mg CeCl3.7H2O和0.073ml乙酸酐加入到(2』R，3』R)-10-脫乙醯基-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)(138mg)的3ml無水四氫呋喃溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌5小時，期間反應混合物成為均相。加入1.0g冰，持續攪拌1小時。在真空下蒸除有機溶劑，將殘餘物用5ml水稀釋。將生成的沉澱過濾並在真空下乾燥18小時。得到的產物(白色粉末，130mg)具有以下特徵1H NMR(400 MHz，CDCl3)δppm＝1.05(s，3H，Me)，1.09(s，3H，Me)，1.71(s，3H，Me)，1.72(d，3H，J＝1.2 Hz，Me)，1.83(m，1H，C6-H)，1.95(2H，d，J＝8.8 Hz，C14-H2)，2.34(s，3H，Me)，2.58(ddd，1H，J1＝14.6 Hz，J2＝9.9 Hz，J3＝6.9 Hz，C6-H)，3.85(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，3.95(d，1H，J＝4.4 Hz，C2′-H)，4.14(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.22(dd，1H，J1＝11.3 Hz，J2＝6.6Hz，C7-H)，4.27(d，1H，J＝8.4 Hz，C20-H)，4.31(d，1H，J＝4.4 Hz，C3′-H)，4.95(d，1H，J＝8.8 Hz，C5-H)，5.59(d，1H，J＝7.3 Hz，C3-H)，5.65(dd，1H，J1＝10.7 Hz，J2＝7.33 Hz，C7-H)，6.34(s，1H，C10-H)，7.30-7.50(m，7H，芳族)，7.60-7.70(m，1H，芳族)，7.90-8.00(m，2H，芳族)。
實施例9(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-疊氮基-2』-羥基-3』-苯基-丙酸酯)的合成在裝備有磁力攪拌器的25ml單口圓底燒瓶中，將0.17g(0.45mmol，1當量)(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-苯基-2』，3』-環氧丙酸酯)於25℃下懸浮於5ml甲醇中。依次加入0.63ml水、0.23ml甲酸甲酯和0.36g(5.5mmol，12.5當量)疊氮化鈉。將混合物加熱至50℃，通過TLC(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12.0∶2.0∶0.3)監測反應的進程。46小時後反應混合物呈黃褐色，並且在其中有白色沉澱(未反應的疊氮化鈉)。加入水(10ml)，過濾出沉澱的乳白色固體，依次用水和乙酸乙酯洗滌。將兩相分離，水相用乙酸乙酯萃取三次，將合併的有機相濃縮並用MgSO4乾燥，過濾並蒸除溶劑，得到0.20g黃白色粉末。通過快速色譜法(SiO2，氯仿/乙酸乙酯/甲醇12∶2∶0.3)將得到的粗品純化，得到0.140g(2』R，3』R)-漿果赤黴素III-13-(3』-疊氮基-2』-羥基-3』-苯基-丙酸酯)。
得到的化合物具有與實施例3中的化合物相同的光譜特徵。
權利要求
1.製備紫杉醇的方法，其包括以下步驟a)保護10-脫乙醯基漿果赤黴素III(10-DAB III)的7位和10位羥基， 其中R＝R』＝三氯乙醯基，或者R』＝乙醯基並且R選自叔丁氧基羰基和三氯乙醯基，b)用3-苯基-2-環氧丙酸將13位的羥基酯化， c)如果7位和10位的保護基都是三氯乙醯基，則(1)除去7位和10位的保護基團，(2)隨後在10位進行選擇性的乙醯化，(3)用疊氮化鈉使環氧化物開環； 或者，c』)如果R』＝乙醯基並且R＝三氯乙醯基，則用疊氮化鈉使環氧化物開環，同時使7位脫保護， d)將疊氮基還原為氨基， c)進行苯甲醯化得到終產物。
2.權利要求1的方法，其中，10-DAB III通過在三乙胺和催化量的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下與三氯乙醯氯在二氯甲烷中反應而使其7位和10位被三氯乙醯基保護。
3.權利要求1的方法，其中，通過將10-DAB III在鈰、鈧或鐿鹽的存在下與乙酸酐反應首先使10位乙醯化，隨後將7位的羥基用叔丁氧基羰基或三氯乙醯基保護。
4.權利要求1的方法，其中，在二環己基碳二亞胺(DCC)、DMAP和對甲苯磺酸的存在下，用苯基-2-環氧丙酸的銨鹽在甲苯中將13位的羥基酯化。
5.權利要求1的方法，其中，用氫氧化銨除去保護基R＝R』＝三氯乙醯基。
6.權利要求1的方法，其中，在甲酸甲酯的存在下，用疊氮化鈉在含水甲醇中使環氧化物開環。
7.權利要求1的方法，其中，用催化氫化或用PPh3將疊氮化物還原為胺。
8.權利要求1的方法，其中，最後一步的苯甲醯化是用苯甲酸酐與還原反應同時進行的，或在還原反應之後在碳酸鉀的存在下用苯甲醯氯對分離出的還原產物進行苯甲醯化。
9.作為反應中間體的以下化合物 其中R和R』如權利要求1中所定義或者為氫。
全文摘要
本發明公開了從10－脫乙醯基漿果赤黴素III製備紫杉醇的方法。
文檔編號C07D407/12GK1509277SQ01820074
公開日2004年6月30日 申請日期2001年12月3日 優先權日2000年12月6日
發明者A·巴塔利亞, P·丹布羅索, A·圭裡尼, E·邦巴爾代利, A·蓬迪羅利, A 巴塔利亞, 下蘩, 悸匏, 投, 錟 申請人:因德納有限公司