蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法

2023-08-05 15:04:36 3

專利名稱：：蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法
技術領域：
：本發明屬於藥物製劑的質量控制
技術領域：
，特別涉及一種蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法。
背景技術：
：蒼耳子鼻炎膠囊收載於衛生部藥品標準中藥成方製劑第十四冊中，具有疏風、清肺熱、通鼻竅、止頭痛的功效；用於風熱型鼻疾，包括急、慢性鼻炎，鼻竇炎，過敏性鼻炎等。蒼耳子鼻炎膠囊是以蒼耳子浸膏粉180g、石膏浸膏粉l.76g、白芷浸膏粉62.lg、冰片30g、辛夷花揮髮油4ml、薄荷腦15g、辛夷花浸膏粉72.2g、黃芩浸膏粉25.3g為原料製得的膠囊製劑，其製備方法為除辛夷花揮髮油外，冰片、薄荷腦與適量澱粉混合，研成細粉，與上述各浸膏粉混合，噴入辛夷花揮髮油，充分混勻，過篩，裝入膠囊，製成1000粒，即得。原質量控制方法中，除應符合膠囊劑項下有關的各項規定外，只對黃芩、白芷、辛夷花、蒼耳子、冰片等五味進行了薄層色譜定性鑑別，卻沒有任何含量測定指標。由於藥品質量問題與人類健康緊密相關，如今對藥品質量控制的要求也越來越高，安全和療效同等重要；很顯然，原僅限於薄層色譜定性鑑別的質量控制方法對於蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制是不夠準確可靠的，不符合現代醫藥發展的需要，有待於進一步提高。
發明內容本發明的主要目的是提供一種蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法，在原薄層色譜定性鑑別的基礎上，增加含量測定方法及相應的含量指標，使蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制更為準確有效，從而更有利於確保其臨床療效的發揮。本發明解決其技術問題所採用的技術方案是蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法，在傳統質量控制方法中的檢査項目及對黃芩、白芷、辛夷花、蒼耳子、冰片等五味進行薄層色譜定性鑑別基礎上，增加採用高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VID)對黃芩苷((]211118012)進行含量測定及相應的含量指標，相關條件及操作方法如下色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；體積比為20:80的乙腈-O.3%磷酸溶液(0.3。/。磷酸溶液是指100ml溶液中含有0.3ml磷酸)為流動相，流速lml/min;檢測波長為275276nm;柱溫35°C。理論板數按黃芩苷峰計算應不低於3000。對照品溶液的製備精密稱取5065'C減壓乾燥46小時的黃芩苷對照品適量，加甲醇(無水甲醇)製成每lml含黃芩苷約0.0550.065mg的溶液，即得。供試品溶液的製備取蒼耳子鼻炎膠囊內容物，研細，取0.0950.105g，精密稱定，置50ml量瓶中，加6080%甲醇(指甲醇水溶液，體積百分比，下同)3040ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)3060分鐘，放冷，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液10ul與供試品溶液510ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，根據測定結果進行計算，即得蒼耳子鼻炎膠囊內容物中黃芩苷的含量。蒼耳子鼻炎膠囊內容物中，含黃芩苷(0211118012)重量百分比為1.7%6.3%。蒼耳子鼻炎膠囊的各原料藥中蒼耳子含蒼耳苷(strumaroside，即e谷甾醇葡萄糖苷)等萜類和苷類；白芷含歐前胡素、異歐前胡素、佛手柑內酯等香豆素類；辛夷花含枸緣醛、丁香油酚、桂皮酚等；黃芩含黃芩苷、黃芩素等黃酮類化合物；石膏主要成分為硫酸鈣；冰片主要成分是龍腦；薄荷腦主要成分即為薄荷腦。通過逐一分析比較及探索性的試驗研究，本發明初步篩選出擬對黃芩提取物中的主要有效成分黃芩苷進行含量測定。再通過大量文獻分析及試驗研究，進一步從薄層層析-紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法、超臨界流體層析法、膠束動電層析法等黃芩苷的含量測定方法中進行篩選，最終確定了以高效液相色譜法對黃芩提取物中主要有效成分黃芩苷進行含量測定。為了儘可能準確的測定出黃芩苷在蒼耳子鼻炎膠囊中的含量，從而更精確的控制藥物質量，保證藥物的臨床療效，發明人對藥物的前處理方法及色譜條件等進行了大量的試驗研究及對比分析，現將一些主要的研究情況略舉如下在該研究過程中，所用的儀器及試劑等包括Waters2690液相色譜儀，PDA996檢測器，Millennium色譜工作站；AE240電子天平(感量O.lmg;0.Olmg載動00g;40g)。對照品黃芩苷，中國藥品生物製品檢定所提供(下述試驗過程中對照品溶液的製備精密稱取6(TC減壓乾燥4小時的黃芩苷對照品適量，加甲醇製成每lml含O.06mg的溶液，即得蒼耳子鼻炎膠囊樣品均由四川禾邦陽光製藥股份有限公司提供，批號為030101和030301。乙腈為色譜純(FisherChemicals),重蒸餾水，其餘試劑為分析純。取黃芩苷對照品溶液及供試品溶液在PDA996二極體陣列檢測器上對黃芩苷峰進行紫外掃描(200600nm)，所記錄光譜圖結果表明，對照品黃芩苷峰在275.7nm波長處有最大吸收，供試品黃芩苷峰在275.7nm波長處有最大吸收，故選擇275276nm作為檢測波長；下述試驗中選擇275nm作為檢測波長。二、色譜條件的選擇1.流動相的選擇發明人曾以乙腈-0.3%磷酸溶液(20:80)、甲醇-O.3%磷酸溶液(45:55)為流動相，流速lml/min，以Shim-packCLC-ODS(4.6X150mm，5y)柱為分析柱，柱溫35。C，進行試驗研究，結果前者黃芩苷峰與相鄰峰分離度大於2，後者黃芩苷峰與相鄰峰分離度為1.8。經過對比，最終選用乙腈-O.3%磷酸溶液(20:80)為流動相，流速lml/min，柱溫35°C。2.分析柱的選擇發明人曾用DiamonsilTM(鑽石)C18柱(4.6X150mm，5y)與Shim-packCLC—ODS(4.6X150mm，5y)柱，以乙腈-O.3%磷酸溶液(20:80)為流動相，二者均達到滿意的分離效果，黃芩苷峰與相鄰峰分離度大於2，理論塔板數以黃芩苷峰計算均大於4000。下述試驗中選用Shim-packCLC-ODS(4.6X150mm，5y)色譜柱。3.樣品前處理方法的選擇(供試品溶液的製備)3.1提取溶劑的選擇試驗以甲醇、70%甲醇、70%乙醇、50%甲醇、水作為提取溶劑進行了考察。取批號為030101批樣品內容物0.lg，五份，精密稱定，分別置50ml量瓶中，分別加甲醇、70%甲醇、70%乙醇、50%甲醇、水40ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)45分鐘，放冷，分別用相應溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，按前述確定的色譜條件測定，計算，結果見下述表l。表l提取溶劑考察結果提取溶劑甲醇70%甲醇70%乙醇50%甲醇水黃芩苷含量(mg/g)50.854.652.853.449.4由表l可見70%甲醇作為提取溶劑黃芩苷的含量高於其它提取溶劑，因此可選用70%甲醇作為提取溶劑。此外，發明人採用同樣的方法，以5090%甲醇作為提取溶劑進行考察，結果證實選擇6080%甲醇時提取效率相關不大，故最終選擇6080%甲醇作為提取溶劑。3.2提取方法的考察試驗對超聲處理、回流提取進行了對比。取030101批樣品內容物0.lg，2份，精密稱定。一份置50ml量瓶中，加70。/。甲醇40ml超聲處理(250W，50KHz)45分鐘，放冷，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻；另一份置具塞錐型瓶中，精密加70。/。甲醇50.0ml，置水浴中加熱回流45分鐘；放冷，用70%甲醇分別補足減失的重量，搖勻；分別濾過，取續濾液離心(10000轉/分鐘)，按前述色譜條件測定，計算含量，結果見下述表2。表2提取方法考察結果tableseeoriginaldocumentpage6由表2可見超聲處理黃芩苷的含量高於加熱回流提取方法，故選用超聲處理作為提取方法。3.3提取時間的考察取030101批內容物0.lg，4份，精密稱定，分別置50ml量瓶中，力口70。/。甲醇40ml，分別超聲處理(250W，50腿z)15、30、45、60分鐘，放冷，用70%甲醇分別稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心(10000轉/分鐘)，按前述色譜條件測定，計算含量，結果見下述表3。表3提取時間考察結果(n=2)tableseeoriginaldocumentpage6由表3可見超聲處理30分鐘後含量幾無變化，試驗選擇提取時間為3060分鐘。綜上所述，選擇下述供試品溶液製備方法取蒼耳子鼻炎膠囊內容物，研細，取0.0950.105g，精密稱定，置50ml量瓶中，力卩6080。/。甲醇3040ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)3060分鐘，放冷，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，即得。下述試驗中採用的供試品溶液製備方法為取蒼耳子鼻炎膠囊內容物，研細，取O.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加70。/。甲醇40ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)45分鐘，放冷，用70甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，即得。缺黃芩提取物陰性溶液的製備採用上述同樣的方法。3.4精密度試驗精密吸取對照品溶液(0.05675mg/ml)10y1及030101批供試品溶液各5y1，注入液相色譜儀，按前述色譜條件進行分析，測定5次，測定峰面積，結果見下述表4。表4精密度試驗結果12345平均值RSD(%)對照品1946461195158119510331951687194736619496260.13供試品2084930212241521357132110555209492921097080.97由表4可見，對照品峰面積平均值為1949626，RSD為O.13%;供試品峰面積平均值為2109708，RSD為O.97%，表明精密度良好。3.5穩定性試驗取批號為030101樣品與黃芩苷對照品適量，按前述方法分別製備樣品供試品溶液與對照品溶液，室溫下保存，於製備完成後放置不同時間分別精密吸取對照品溶液10ul、供試品溶液5ul，注入液相色譜儀，按前述色譜條件進行測定，記錄色譜圖，考察其穩定性，結果見下述表5。如表所示，供試品溶液及對照品溶液在配製後16小時內測定，結果穩定。表5黃芩苷含量測定穩定性考察結果放置時間(H)0124816RSD(%)對照品溶液峰面積1946461195168719459941946850194646119494590.12供試品溶液峰面積2084930213571320949292126776210841121104460.903.6重現性試驗取批號為030101內容物0.lg，共5份，按前述方法分別製備供試品溶液，按前述色譜條件進行測定，結果見下述表6。如表所示，含量平均值為49.0212，RSD^.90。/。，重現性良好。表6黃芩苷含量測定重現性試驗結果(n=2)1^1^^^^取樣量(g)0.100990.103460.096980.099430.10980含量(mg/g)48.190249.733349.843649.488647.8502平均值(mg/g)49.0212RSD(%)1.90^與現有技術相比，本發明的有益效果是本發明在蒼耳子鼻炎膠囊原質量標準薄層色譜定性鑑別的基礎上，增加了黃芩苷的含量測定方法及相應的含量指標，使蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制更為準確有效，從而更有利於確保其臨床療效的發揮；並且該含量測定方法操作簡單，結果準確，精密度、穩定性、重現性等良好。具體實施例方式下面結合具體實施方式對本發明作進一步的詳細描述。但不應將此理解為本發明上述主題的範圍僅限於下述實施例。實施例本實施例為採用本發明方法對10批蒼耳子鼻炎膠囊(批號020801、020901、021001、021201、030101、030201、030301、030302、030303、030401，均由四川禾邦陽光製藥股份有限公司提供)進行黃芩苷含量測定，具體方法如下色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-O.3%磷酸溶液(20:80)(體積比)為流動相，流速lml/min;檢測波長為275nm;柱溫35°C。理論板數按黃芩苷峰計算不低於3000。對照品溶液的製備精密稱取6(TC減壓乾燥4小時的黃芩苷對照品適量，加甲醇製成每lml含O.06mg的溶液，即得。供試品溶液的製備取蒼耳子鼻炎膠囊內容物，研細，取O.lg，精密稱定，置50ml量瓶中，加70。/。甲醇40ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)45分鐘，放冷，用70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液10ul與供試品溶液10ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，即得。根據測定結果進行計算，即得蒼耳子鼻炎膠囊內容物中黃芩苷0:211118012)的含量，結果見下述表7。表7樣品中黃芩苷含量測定結果表樣品批號測定結果(mg/1、)2平均值(mg/g)重量百分含量(%)02080117.18817.53317.361.702090136.91937.54037.233.702100138.31038.84638.583.902120152.61552.95552.785.303030136.65936.95236.813.703020141.33539.96840.654.103010148.19049.84449.034.903030242.63042.47542.554.303030346.93245.53946.244.603040145.75445.56045.664.權利要求權利要求1蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法，包括對黃芩、白芷、辛夷花、蒼耳子、冰片五味進行薄層色譜定性鑑別，其特徵在於還採用高效液相色譜法對黃芩苷進行含量測定，相關條件及操作方法如下色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；體積比為20∶80的乙腈-0.3％磷酸溶液為流動相，流速1ml/min；檢測波長為275～276nm；柱溫35℃；對照品溶液的製備精密稱取50～65℃減壓乾燥4～6小時的黃芩苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含黃芩苷約0.055～0.065mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取蒼耳子鼻炎膠囊內容物，研細，取0.095～0.105g，精密稱定，置50ml量瓶中，加60～80％甲醇30～40ml，超聲處理30～60分鐘，放冷，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，離心，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液10μl與供試品溶液5～10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，根據測定結果進行計算，即得蒼耳子鼻炎膠囊內容物中黃芩苷的含量。2.根據權利要求l所述的蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法，其特徵在於所述的蒼耳子鼻炎膠囊內容物中黃芩苷的含量為l.7%6.3%。全文摘要本發明公開了一種蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制方法，採用高效液相色譜法對黃芩苷進行含量測定，用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；體積比為20∶80的乙腈-0.3％磷酸溶液為流動相，流速1ml/min；檢測波長為275～276nm；柱溫35℃；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，根據測定結果進行計算，即得蒼耳子鼻炎膠囊內容物中黃芩苷的含量。該質量控制方法在原質量標準薄層色譜定性鑑別的基礎上，增加了黃芩苷的含量測定方法，使蒼耳子鼻炎膠囊的質量控制更為準確有效，從而更有利於確保其臨床療效的發揮；並且該含量測定方法操作簡單，結果準確，精密度、穩定性、重現性等良好。文檔編號A61K36/185GK101474255SQ20081030671公開日2009年7月8日申請日期2008年12月31日優先權日2008年12月31日發明者伍江蓉,劉文旭,波宋,悅張,華肖申請人:四川禾邦陽光製藥股份有限公司