一種抗癌注射液及其應用
2023-07-20 14:21:46 1
一種抗癌注射液及其應用
【技術領域】
[0001 ]本發明涉及一種抗癌注射液及其應用，該抗癌注射液具有抑制癌細胞生長、增殖 的作用，屬於醫藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 目前，治療癌症的方法主要有四種：其一是手術治療，適用於早中期癌症，且沒有 發生局部和遠處轉移的癌症，該種治療方法具有一定的風險，並且術後可能影響患者的生 活自理能力。其二是放療，主要針對實體腫瘤，如鼻咽癌等;該種治療方法的毒副作用非常 明顯，比如胸部放療可能會出現放射性肺改變。其三是化療，主要針對乳腺癌、淋巴瘤、白血 病等;化學藥品進入人體後分布到全身各處，不光對實體瘤具有殺滅作用，對微小不可見轉 移灶也同樣具有很強的殺滅作用;化療的毒副作用極其明顯，比如血象降低、噁心、嘔吐、肝 功受損等。其四是中醫治療，中醫治療對人體的傷害比較小，但是中醫的療效比較緩慢，療 程非常長，無形中加大了患者的經濟負擔。此外，也有手術、放療、化療和中醫治療相結合的 治療方法。
[0003] 雖然治療癌症的手段多種多樣，但是手術、化療和放療，對病患身體的傷害比較 大，不但對正常細胞具有一定的損傷，並且很容易復發和轉移，而中醫治療的療程又比較漫 長，因此繼續一種療程短、療效快、無毒副作用、不復發的新型藥品問世。
【發明內容】
[0004] 本發明所要解決的技術問題是針對現有技術中存在的不足，而提供一種抗癌注射 液，無需手術、化療和放療，僅僅注射本發明抗癌注射液就可以達到抗癌的目的，療程短、可 徹底殺死癌細胞、無復發;對於正常的細胞不具有任何危害，對人的身體不構成任何毒副作 用。
[0005] 本發明的目的之二是提供上述抗癌注射液的應用。
[0006] 為了實現上述目的，本發明採用如下技術方案：
[0007] 一種抗癌注射液，由以下重量份的原料製成:47.96份氯化鈉(NaCl)、42.30份氯化 鎂(MgCl 2 · 6H20)和1000份水，將所述比例的氯化鈉和氯化鎂溶解於水中，攪拌直至氯化鈉、 氯化鎂完全溶解且混合均勻，製備的溶液即為所述的抗癌注射液。
[0008] 上述技術方案中，所述的氯化鈉和氯化鎂，均為化學領域常見的分析純化學品，所 述的水為蒸餾水或雙蒸水。
[0009] 上述技術方案中，所述的抗癌注射液，按照常規工藝方法裝入常規的注射針管中 製成針劑。
[0010] 上述技術方案中，所述的針劑，規格為lml、2ml、2.5ml、3ml、5mMP10ml。
[0011] 本發明所述抗癌注射液的使用方法為，3天內注射2次(靜脈注射、動脈注射或者肌 肉注射均可以），每次l-l〇ml(醫生根據患者病情的嚴重酌情處理）。最後一次注射完畢後， 21天後去醫院複查癌細胞，癌細胞絕大部分被殺死。
[0012] 本發明還提供一種上述抗癌注射液作為抑制癌細胞生長、增殖藥物的應用，所述 的癌細胞為皮膚癌細胞、乳腺癌細胞、黑色素瘤細胞、結腸癌細胞、肝癌細胞、淋巴癌細胞、 食道癌細胞、胃癌細胞、甲狀腺癌細胞以及其他人類癌症的癌細胞。該抗癌注射液具有抑制 癌細胞生長、增殖的作用。
[0013] 本發明所述的抗癌注射液，無需手術、化療和放療，僅僅注射本發明的抗癌注射液 就可以達到抗癌的目的，對人的身體不構成任何毒副作用。本發明所述的抗癌注射液具有 抑制癌細胞生長、增殖和殺滅癌細胞的功效，對於人類正常的、無病變的細胞不具有任何危 害。本發明所述的抗癌注射液，具有療程短、療效快、無毒副作用、治療後癌細胞不復發的優 點。
【具體實施方式】
[0014] 以下對本發明技術方案的【具體實施方式】詳細描述，但本發明並不限於以下描述內 容：
[0015] 實施例1:
[0016] 將47.96g氯化鈉(NaCl)和42.30g氯化鎂(MgCl2 · 6H20)溶解於IL(1000 g)蒸餾水 中，攪拌直至氯化鈉、氯化鎂完全溶解且混合均勻後，製備的溶液即為所述的抗癌注射液。 將製備的抗癌注射液分別裝入Iml、2ml、2.5ml、3ml、5ml和IOml針管，即可製成不同規格的 針劑。
[0017] 申請人將本發明實施例1得到的抗癌注射液進行了體外抗癌活性檢測，如下所示：
[0018] 檢測試驗一:抗癌注射液對人肝癌細胞的抗腫瘤活性測試
[0019] 檢測單位:大連理工大學製藥學院
[0020] -、試驗材料：
[0021] 1.1細胞株:人肝癌細胞HepG2(大連醫科大學贈與，實驗室常規傳代凍存）
[0022] 1.2試劑：
[0023] DMEM培養基、胎牛血清FBS、青黴素 G、鏈黴素均購自Hyclone公司，胰蛋白酶、MTT、 二甲基亞碸DMSO均購自Sigma公司，新生小牛血清購自GIBCO公司，色譜純二甲基亞碸購自 天津市光復精細化工研究所。
[0024] 1 · 3主要儀器：TH4-200 (OLYMPUS)、Ce 11 二氧化碳培養箱（Thhermo)、H1MF9酶標儀 (GENE)、BV-30/70超淨工作檯（TELSTAR)、96孔細胞培養板(JET)。
[0025] 1.4細胞培養:HepG2細胞為20-50代，細胞的培養液為DMEM培養基中含有10%新生 小牛血清、l〇〇IU/ml青黴素和100μg/ml鏈黴素。
[0026]二、試驗方法
[0027] 將HepG2細胞製成單細胞懸浮液，濃度為5 X IO4個/ml，100μΙ接種於96孔細胞培養 板中，周邊孔加入IOOylPBS緩衝液，培養24h過夜後加樣。實驗組每孔加入培養基100μ1 (含 有不同濃度實施例1製備抗癌注射液，如表1)，對照組加入等體積的藥物溶解介質，空白組 為培養液不含有細胞。各組設3個復孔。加藥後將培養板放入37 °C、5 %C02細胞培養箱中培 養24h後加入20μ1/孔MTT溶液（5mg/ml)，再將培養板放入37 °C、5 %⑶2細胞培養箱中培養 4h。處後取出培養板，吸走上清液，加入IOOylDMSO，酶標儀在492nm波長下測定每孔的光密 度(0D值），並用空白組調零，計算藥物對HepG2細胞的體外增殖抑制率。
[0028] 三、試驗結果：
[0029] 抑制率的公式如下
[0030]
[0031 ] 其中，對照組OD值為對照組OD值減去空白組OD值，實驗組OD值為實驗組OD值減去 空白組OD值。以上每個實驗重複3次，求出3次實驗的平均值為最終結果，結果如表1所示：
[0032]表1:不同濃度的抗癌注射液對人肝癌細胞的抑制作用
[0034] 由表1可知，本發明所述的抗癌注射液對人肝癌細胞的生長和增殖具有顯著的抑 製作用。
[0035] 檢測試驗二:抗癌注射液對人結腸癌細胞的抗腫瘤活性測試
[0036] 檢測單位:瀋陽藥科大學細胞實驗室 [0037] 一、試驗材料：
[0038] 1 · 1細胞株：人結腸癌細胞HCT116(購買於American Type Culture Collection (八丁0：，1^1^116,0，1^))，接種在含有10%胎牛血清、2%穀氨醯胺的1?^1-1640培養液 中，在37°C、5%C02細胞培養箱中培養。
[0039] 1.2藥品及試劑:各樣品用無菌微孔濾膜過濾後，用RPMI-1640培養液稀釋至所需 濃度。
[0040]胎牛血清(北京元亨聖馬生物技術研究所）、胰蛋白酶、穀氨醯胺、青黴素、鏈黴素、 二甲基亞碸DMSO、四甲基偶氮唑Μ?Τ購於美國Sigma公司。
[0041 ] 1 · 3儀器:二氧化碳培養箱（Sanyo ,Japan)、酶聯反應分析儀(Tecan ,Austria)、96 孔細胞培養板(Corning,USA)、倒置顯微鏡(Motic,China)
[0042] 二、試驗方法
[0043] 選用對數生長期的貼壁腫瘤細胞，用胰蛋白酶消化後，用含10%胎牛血清的RPMI-1640 培養液配成 5 X IO4 個/ml 的細胞懸浮液 ，接種在 96 孔細胞培養板中 ，每孔 100μΙ ，37°C 、 5%C02細胞培養箱中培養24h。實驗組更換新的含不同濃度被測抗癌注射液(本發明實施例 1產品）的培養液，對照組更換等體積溶劑的培養液，每組設3個平行孔，37°C、5%C0 2細胞培 養箱中培養48h.棄去上清液，用PBS洗2次，每孔加入100μ1新鮮配製的含0.5mg/ml MTT的培 養基，37°C繼續培養4h。棄去上清，並加入150ylDMS0,用微型振蕩器混勻IOmin後用酶標儀 在492nm處測定光密度值。
[0044]三、試驗結果：
[0045] 抑制率的公式如下
[0046]
[0047] 如表2所示：
[0048]表2:不同濃度的抗癌注射液對人結腸癌細胞的抑制作用
[0050] 由表2可知，本發明抗癌注射液對人結腸癌細胞的生長和增殖具有顯著的抑制作 用。
[0051] 檢測試驗三:抗癌注射液對人永生化皮膚細胞、人乳腺癌細胞和人黑色素瘤細胞 的抗腫瘤活性測試
[0052] 檢測單位:遼寧師範大學遼寧省生物技術與分子藥物研發重點實驗室
[0053] 一、試驗材料：
[0054] 1.1細胞株:人永生化皮膚細胞Hacat、人乳腺癌細胞MCF-7、人黑色素瘤細胞A375， 購買於凱基生物。細胞接種在含有10%胎牛血清的RPMI-1640培養液中，在37°C、5%⑶2細 胞培養箱中培養。
[0055] 1.2藥品及試劑：各樣品用無菌微孔濾膜過濾後，用0.1 % TFA溶液稀釋至所需濃 度。
[0056] 胎牛血清、胰蛋白酶均購自Gibco公司，MTT (Sigma公司），PBS緩衝液，DMSO(瀋陽聯 邦試劑公司），其他分析純試劑(深圳市佳德宇化工有限公司）。
[0057] 1.3儀器：311C02培養箱(Thermo Scientific)，BCN-1360型超級潔淨工作檯（哈爾 冰東聯儀器有限公司）、YX〇-LS-30SII蒸汽滅菌鍋(上海博迅有限公司醫療設備廠）、FA2004 電子分析天平(上海方瑞儀器有限公司）、IVIultiskan Ascent microplate reader酶標儀 (Thermo Labsystems)、-8CTC超低溫冰箱（Thermo Scientific)。
[0058] 二、試驗方法
[0059] 細胞培養待對數期，經胰蛋白酶消化後加入培養液製成細胞懸浮液，按5 X IO4個/ ml接種在96孔細胞培養板中。過夜培養且細胞貼壁後加入本發明實施例1製備的抗癌注射 液，濃度選擇7個濃度梯度稀釋，作用時間為Ih。待作用時間後每孔加入MTT，繼續37 °C培養 4h，棄上清，加入DMSO後振蕩3min，待沉澱完全溶解，於492nm下用酶標儀測定OD值。
[0060] 三、試驗結果：
[0061] 抑制率的公式如下
[0062]
[0063]從中求出樣品的半數抑制濃度(I C5q )，如表3所示：
[0064]表3:不同濃度的抗癌注射液對癌細胞的抑制作用
[0066]由表3可知，本發明抗癌注射液對腺癌細胞和黑色素瘤細胞的生長和增殖具有顯 著抑制作用，對人體正常細胞的抑制作用比較弱，即選擇合適的濃度，在發揮抑制癌細胞生 長的同時對正常細胞無毒副作用。
[0067] 應用例：
[0068] 本發明實施例1製備的抗癌注射液，研發至今治療200多名患者，治療後均無復發， 下面列舉其中一些個案：
[0069] 張某某，女，54歲，2005年患乳腺癌（早期），3天內注射本發明實施例1製備而成的 抗癌注射液2次，每次注射2.5ml，最後一次注射後間隔21天，去醫院檢查後發現，體內癌細 胞全部被殺死，治療至今癌症無復發。
[0070] 蔣某，男，52歲，2009年患肝癌（晚期），3天內注射本發明實施例1製備而成的抗癌 注射液2次，每次注射IOml，最後一次注射後間隔21天，去醫院檢查後發現，體內癌細胞全部 被殺死，治療至今癌症無復發。
[0071] 殷某，女，45歲，2011年患結腸癌（中期），3天內注射本發明實施例1製備而成的抗 癌注射液2次，每次注射3ml，最後一次注射後間隔21天，去醫院檢查後發現，體內癌細胞全 部被殺死，治療至今癌症無復發。
[0072] 馮某，女，44歲，2012年患鼻咽癌（早期），3天內注射本發明實施例1製備而成的抗 癌注射液2次，每次注射5ml，最後一次注射後間隔21天，去醫院檢查後發現，體內癌細胞全 部被殺死，治療至今癌症無復發。
[0073]單某某，男，68歲，2011年患淋巴癌（中期），3天內注射本發明實施例1製備而成的 抗癌注射液2次，每次注射5ml，最後一次注射後間隔21天，去醫院檢查後發現，體內癌細胞 全部被殺死，治療至今癌症無復發。
[0074]上述實例只是為說明本發明的技術構思以及技術特點，並不能以此限制本發明的 保護範圍。凡根據本發明的實質所做的等效變換或修飾，都應該涵蓋在本發明的保護範圍 之內。
【主權項】
1. 一種抗癌注射液，由以下重量份的原料製成:47.96份氯化鈉、42.30份氯化鎂和1000 份水，將所述比例的氯化鈉和氯化鎂溶解於水中，攪拌直至氯化鈉、氯化鎂完全溶解且混合 均勻，製備的溶液即為所述的抗癌注射液。2. -種權利要求1所述抗癌注射液作為抑制癌細胞生長、增殖藥物的應用。
【專利摘要】本發明公開了一種抗癌注射液及其應用，該抗癌注射液包括47.96份氯化鈉、42.30份氯化鎂和1000份水，將氯化鈉和氯化鎂溶解於水中，攪拌直至氯化鈉、氯化鎂完全溶解且混合均勻，製備的溶液即為所述的抗癌注射液。所述的抗癌注射液具有抑制癌細胞生長、增殖的作用，可作為抑制癌細胞生長、增殖藥物使用。本發明所述的抗癌注射液，無需手術、化療和放療，僅僅注射本發明的抗癌注射液就可以達到抗癌的目的，對人的身體不構成任何毒副作用。不但具有抑制癌細胞生長、增殖和殺滅癌細胞的功效；還可以殺滅人體內異常的細胞，但是對於人類正常的、無病變的細胞不具有任何危害。
【IPC分類】A61K33/06, A61K33/14, A61P35/00, A61K9/08
【公開號】CN105708854
【申請號】CN201610203379
【發明人】李雪平
【申請人】李雪平