一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法
2023-08-10 16:02:46
專利名稱：一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法
技術領域：
本發明涉及一種液態奶中小分子有毒有害物質的檢測方法，尤其是涉及一種液態奶中超微量小分子有毒有害物質(如獸藥、環境激素、生物毒素、農藥類、非法添加物等，分子量小於1500)的新型快速通用檢測方法。
背景技術：
液態奶((如生鮮牛奶、鮮牛奶、酸奶)是人們日常攝取營養的一種重要食品，然而液態奶中含有的小分子有毒有害物質如獸藥、環境激素、生物毒素、農藥殺蟲劑、非法添加物等已經對其安全構成了不同程度的安全隱患，這些物質種類數量相當龐大，理化性質差異較大，加上牛奶中含有較高含量的蛋白、脂肪和乳糖等基質幹擾成分，對超微含量的小分子有毒有害物質的檢測構成難度。隨著質譜尤其是LC-MS/MS的問世和不斷發展，已經陸續有多類別多殘留檢測方法報導，2006年Yamada發表第一篇同時篩選牛肉、豬肉和雞肉中130種獸藥的LC-MS/MS 方法(文獻 1 Yamada R, Kozono M, Ohmori T, Morimatsu F, Kitayama M (2006) Biosci Biotechnol Biochem 70 :54_65)，由於用到正己烷分層去脂，不適合弱極性化合物檢測，通用性並不強；Ortelli等採用乙腈提取，上清液進行超濾後UPLC-MS檢測牛奶中150種獸藥(文獻 2 =Ortelli D.，Cognard E.，Jan P. and Edder P.，J. Chrom. B，2009，877 (23) 2363-2374.)，大環內酯類低於10%，喹諾酮類回收率範圍98-807%，四環素類141-258%， 部分苯逼咪唑類高於436%，回收率不理想；HanM2008)提出來通用型提取方法(Generic Extraction Method)概念，採用UPLC-MS/MS同時分析飼料、牛奶、蜂蜜、肉類等基質中 172種種農藥、生物毒素、植物毒素和獸藥，被認為是最早的通用型檢測方法(文獻3 :Mol HG，Plaza-Bolanos P，Zomer P，de Rijk TC, Stolker AA, Mulder PP. Toward a generic extraction method for simultaneous determination of pesticides mycotoxins， plant toxins, and veterinary drugs in feed and food matrixes. Anal. Chem. 2008, 8(K24)，9450-9459.)，但是該方法中樣品基本上沒有經過淨化處理，檢測限不能滿足所有受試的目標物，也容易汙染儀器。Stolker等分析了牛奶中101種獸藥，樣品採用乙腈提取，Strata-X 小柱淨化(文獻 4 :Stolker Α. Α. Μ. , Rutgers P. , Oosterink Ε. , Lasaroms J. J. P.，Peters R. J. B.，van Rhijn J. Α.，Nielen Μ. W. F.，Anal. Bioanal. Chem.，2008， 391 (6) :2309-2322.)，通過固相萃取等淨化方式，部分化合物可能在該過程中損失，同時前處理時間又較長。上述文獻報導多類多殘留檢測方法，在通用性和淨化效果方面都存在問題。目前，在我國針對奶製品中這些有毒有害物現行的國家標準和行業標準檢測方法數量雖然較多，但這些方法分為多個樣品製備方法，操作步驟過多，檢測人員精力分散，不但費時費力，檢測效率低下，可操作性不強，而且項目覆蓋面尚不全面，容易帶來漏檢的風險，周期長，實驗成本高昂。因此，目前尚未出現真正針對小分子有毒有害物的通用型檢測方法。究其原因，無外乎這些方法的前處理和儀器分析過程針對不同理化性質的化合物難以兼容，缺乏通用性，因此很難在常規方法上顯著提高監測效率。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，該方法的前處理和儀器分析過程針對不同理化性質的化合物兼容性強，檢測效率高，可操作性強，檢測限能滿足所有受試的目標物並且降低了檢測成本。本發明解決上述技術問題所採用的技術方案為一種液態奶中小分子有毒有害物質的快速通用檢測方法，具體包括以下步驟(1)樣品前處理及提取淨化將液體牛奶加入試管中，並在試管中加入保護劑和乙腈-乙醇混合液，混勻後離心得到第一上清液，將第一上清液加入離心管中，並在離心管中加入乙腈-乙醇混合液，充分混勻後離心得到第二上清液，將第二上清液轉移至雞心瓶中於40°C旋轉蒸發至幹，然後用乙腈-乙醇-水混合液定容得到樣品液，將樣品液搖勻後，通過0. 22 μ m微孔濾膜過濾得到上樣液；(2)混合標準溶液組成和基質標準曲線製備A.混合標準溶液組成氯黴素和β2-激動劑類分別為20ng/mL，三聚氰胺、雙聚氰胺、納他黴素分別為 2000ng/mL，阻斷劑、甲狀腺抑制劑、喹惡啉類、四環素類、喹諾酮類、磺胺類、β -內醯胺、咪唑類、噠唑類、咖啡因、抗寄生蟲藥類、阿維菌素類、性激素類、皮質激素、喹惡啉類、真菌毒素類、大環內酯類、非留類消炎藥、β -內醯胺、鎮定劑、農藥殺蟲劑、染料類、雌激素、皮質激素、環境激素和農藥類(除草劑)均為200ng/mL，_18°C冷藏；B.基質標準曲線定量在4. Oml空白牛奶樣品中加入混合標準溶液0 μ L，20 μ L，40 μ L，80 μ L，160 μ L， 320yL，按步驟(1)所述的樣品前處理及提取淨化方法進行處理，以濃度為橫坐標，儀器響應值(響應值=標準品峰面積/標準品質量)為縱坐標，做基質加標標準曲線，作為試樣處理液中待測物濃度定量的依據；(3)超高效液相色譜-三重四極杆串聯質譜聯用測定A.高效液相分離液相條件為a)色譜柱 Acquity Waters HSS-T3, 2. ImmX 100mm, 1. 8 μ m ；b)色譜柱溫度40°C ；c)如果質譜採用Riml正離子模式進行測定，進樣量為將步驟(1)得到的上樣液稀釋4倍後取IOuL ；如果質譜採用Rim2正離子模式和Rim3負離子模式進行測定，進樣量為步驟(1) 得到的上樣液IOuL;d)流速0. 4mL/mine)如果質譜採用Rim3負離子模式進行測定，那麼選擇流動相A1 :2. 5mmol/L乙酸銨水溶液，流動相B1 :甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記)為=OIminJS-O1^A1 ； 6-10min,0% A1 ；10-10. 5min,0-98% A1 ；10. 5-12min,98% A1 ；各洗脫時間段中均以流動相B1補足餘下的％數；如果質譜採用Runl正離子模式和Run2正離子模式進行測定，那麼選擇流動相 A2 0. 甲酸水溶液，流動相4 含0. 甲酸的甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記) 為0-2. 3min,98-80 % A2 ；2. 3-8min，80_0 % A2 ；8_10min，0 % A2 ；10-10. 5min，0_98 % A2 ； 10. 5-12min,98% A2 ；各洗脫時間段中均以流動相化補足餘下的％數；f)流路切換0 0. 55min切換閥打開，色譜柱流出液進入廢液，0. 56min後開始質譜採集；B.質譜檢測質譜條件為a)採用電噴霧離子化電離源，毛細管電壓正離子、負離子電壓分別為3.5kV和
3.OkV ；b)多通道監測方式MRM ；c)離子源溫度150°C，去溶劑氣溫度450°C ；d)錐孔反吹氣流速50L/h ；去溶劑流速700L/he)碰撞氣體氬氣3. 3X IO"3 mba(毫巴)；g)分組方案極性較強的藥物選擇Riml正離子模式下進行測定，Runl正離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為88 6 6的比例混合；極性偏弱藥物選擇Rim2正離子模式下進行測定，Run2正離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為10 :5:5 的比例混合；極性和非極性的藥物選擇Run3負離子模式下進行測定，Rim3負離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為10 5 5的比例混合；(4)濃度計算方法樣品中待測物的含量根據如下計算公式(1)得到
Γ η ^ Cx 廠 xlOOO⑴X =........................................ (1)
wxlOOO式中X-試樣中待測物含量，單位為微克每公斤(μ g/L)；C-試樣處理液中待測物濃度，根據基質標準曲線計算得到，單位為納克每毫升 (ng/mL)；V-定容體積，單位為毫升(mL)；m-液體牛奶試樣體積，單位為毫升(mL)。所述的液體牛奶、所述的保護劑和所述的乙腈-乙醇混合液的混合比為
4.OmL 150mg 5mL ；所述的第一上清液與乙腈-乙醇混合液的混合體積比為9 62 ；採用不同有機溶劑含量的溶劑體系，分兩步分別沉澱除去脂類、蛋白、糖類、鹽分等幹擾成分， 快速簡便通用，無須固相萃取等手段；所述的乙腈-乙醇混合液中乙腈與乙醇的混合體積比為9 1，可以防止乙腈與水分層；所述的定容液乙腈-乙醇-水混合液中乙腈、乙醇與水的混合體積比為1:1:2。所述的保護劑為固體EDTA-Nii2,防止四環素類和大環內酯類等藥物和樣品中的重金屬離子結合，保障回收率。稱取4. OmL牛奶於15mL試管中，加入150mg EDTA-Na2混勻，再加入5mL乙腈-乙醇混合液混勻30s，0°C冷凍離心IOmin得到第一上清液，取4. 5mL第一上清液於50mL離心管中，加入31mL乙腈-乙醇混合液，充分混勻，0°C冷凍離心IOmin得到第二上清液，將第二上清液轉移至IOOmL雞心瓶，40°C旋轉蒸發至幹，用乙腈-乙醇-水混合液定容至1. OmL得到樣品液，搖勻後樣液通過0. 22 μ m微孔濾膜過濾得到上樣液。所述的0. 22 μ m微孔濾膜固定在多通道針式過濾裝置上，該多通道針式過濾裝置方便過濾，大大提高過濾效率。步驟(1)中所述的離心條件為溫度-1 1°C，轉速4500轉/min，時間lOmin。與現有技術相比，本發明的優點在於1、提取技術和淨化技術具有通用性，檢測對象覆蓋範圍寬，降低漏檢風險，小分子有毒有害的有機物僅通過一個前處理方法進行處理，加上前處理簡便快速，與以往多個方法的檢測方法相比，檢測效率得到了根本性的提升，縮短了檢測周期，與背景技術中文獻1 相比本方法沒有用到液液分層淨化，保障通用性強的特點。2、不需要固相萃取等淨化方式，與採用固相萃取小柱相比，不但保證極性強和極性弱的待測物的回收率，而且降低了樣品處理的昂貴成本消耗。3、流路切換設置避免樣液中的鹽分和糖分進入質譜儀(噴霧室)，彌補了不採用固相萃取小柱的缺陷。4、檢測分組方案根據流動相與定容溶劑的選擇，Runl正離子模式適合極性較強的藥物，定容溶劑為7jC 乙醇乙腈(88 6 6，(v/v/v))，獲得窄的峰寬，改善線性， Run2適合正離子模式下的極性偏弱藥物，定容溶劑為7jC 乙醇乙腈(10 5 5，(ν/ν/ ν))，線性良好，Run3負離子模式下適合極性和非極性的藥物，定容溶劑為水乙醇乙腈(10 5 5，(v/v/v))，上述方案確保充分駐留時間和良好離子化程度，能保證滿足最少採集的數據點要求，改善定量的線性，可靠性強，靈敏度高。5、本方法經過283種具體藥物的驗證試驗，檢測限範圍在0. 01 5 μ g/L之間，除了棒麴黴毒素、水楊酸、三聚氰胺、雙聚氰胺、雌二醇為5 μ g/L外，其餘檢測限均低於1 μ g/ L ；回收率範圍在60 130%，其中95%以上藥物均在70 110%，相對標準偏差RSD均小於25%，其中95 %以上種類RSD均< 10 %，精密度良好，均能滿足目前國內和歐盟限量要求。具體見實施例中表2-4。本方法與背景技術中文獻2的方法相比，本方法回收率理想， 精密度良好；與文獻3的方法比較，本方法不僅包含通用型提取方法，同時還具備通用性淨化方法，檢測限能達到0. 01 5μ g/L ；與文獻4的方法相比，快速簡捷，回收率高，精密度良好。綜上所述，本發明從小分子化合物一般共性出發，充分考慮到各種物質的溶解性、 熱穩定性、酸鹼穩定性、極性強弱、共存穩定性等，開發出通用型快速前處理技術(Generic & Rapid sample pr印aration)和UPLC-MS/MS電噴霧儀器測定技術，在滿足檢測限量要求的前提下，能給生產過程控制和食品檢測工作帶來顯著的提高效率和降低檢測成本的效果。通過在牛奶中添加283種化合物(項目分布各大類，具有充分的廣泛性)進行了方法驗證，檢測限、回收率和精密度均滿足分析要求。
圖1為本發明液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法流程圖。
具體實施例方式以下結合附圖實施例對本發明作進一步詳細描述。下面用實施例對本發明作進一步說明，但本發明的保護範圍並不限於此，保護範圍以權力要求為準。1、材料1. 1主要試劑和材料標準物質購自:Dr. Ehrenstorfer, Sigma, Witega 以及 EU pharmacopoeia ；先將單標配製濃度為0. 5mg/mL。混合標準溶液中氯黴素和β 2_激動劑類分別為 20ng/mL，三聚氰胺、納他黴素和甲狀腺抑制劑類分別為2000ng/mL，阻斷劑、甲狀腺抑制劑、 喹惡啉類、四環素類、喹諾酮類、磺胺類、β -內醯胺、咪唑類、噠唑類、咖啡因、抗寄生蟲藥類、阿維菌素類、性激素類、皮質激素、喹惡啉類、真菌毒素類、大環內酯類、非留類消炎藥、 β -內醯胺、鎮定劑、農藥殺蟲劑、染料類、雌激素、皮質激素、環境激素和農藥類(除草劑) 均為200ng/mL，_18°C冷藏；乙腈、甲醇、乙醇、乙酸銨均為色譜純購自迪馬公司，其他試劑為分析純，水為二級水。牛奶樣品採自市售鮮牛奶。1. 2主要儀器超高效液相色譜儀型號Acquity，美國waters公司三重四極杆串聯質譜聯用儀型號XEV0，美國waters公司純水儀Milli-Q，法國Millipore 公司電子天平(感量分別為0. lmg，德國Sartorius)。冷凍離心機，3-1 ，德國sigma真空旋轉濃縮儀R_215，瑞士 Buchi多通道針式過濾裝置Superb20-40，寧波賽恩斯2、液態奶中小分子有毒有害物質的檢測方法(如圖1所示)2. 1通用型快速前處理(提取與淨化)稱取4. OmL牛奶於15mL試管中，加入150mg EDTA-Na2混勻，再加入5mL乙腈-乙醇(90 10(V/V))混勻30s，0°C冷凍離心IOmin得到第一上清液，取4. 5mL第一上清液於 50mL離心管中，加入3ImL乙腈-乙醇(90 10 (V/V))，充分混勻，0°C冷凍離心IOmin得到第二上清液，將第二上清液轉移至IOOmL雞心瓶，40°C旋轉蒸發至近幹，用水乙醇乙腈 (10 5 5，(ν/ν/ν))組成的混合液定容至LOmL得到樣品液，搖勻後樣液通過固定在多通道針式過濾裝置的0.22 μ m微孔濾膜過濾得到上樣液。其中，離心條件為溫度-1 1°C 轉速4500轉/min，時間lOmin，保護劑EDTA-Na2用於防止四環素類和大環內酯類等藥物和樣品中的重金屬離子結合，保障回收率，乙醇的加入防止有機相與水相分層，並增加沉澱效^ ο 2. 2混合標準溶液組成和標準曲線A.混合標準溶液組成氯黴素和β 2-激動劑類20ng/mL，三聚氰胺、納他黴素、甲狀腺抑制劑類2000ng/ mL，阻斷劑、甲狀腺抑制劑、喹惡啉類、四環素類、喹諾酮類、磺胺類、內醯胺、咪唑類、噠唑類、咖啡因、抗寄生蟲藥類、阿維菌素類、性激素類、皮質激素、喹惡啉類、真菌毒素類、大環內酯類、非留類消炎藥、β -內醯胺、鎮定劑、農藥殺蟲劑、染料類、雌激素、皮質激素、環境激素和農藥類(除草劑)均為200ng/mL，_18°C冷藏。B.基質標準曲線定量在4. Oml空白牛奶樣品中加入混合標準溶液0 μ L，20 μ L，40 μ L，80 μ L，160 μ L，
320 μ L，按上述前處理方法進行樣品提取和淨化後，以濃度為橫坐標，儀器響應值(響應值 =標準品峰面積/標準品質量)為縱坐標，做基質加標標準曲線，作為試樣處理液中待測物濃度定量的依據。2. 3超高效液相色譜-三重四極杆串聯質譜聯用測定(UPLC-MS/MS)A.超高效液相分離液相條件為a)色譜柱 Acquity Waters HSS-T3, 2. ImmX 100mm, L 8 μ m ；b)色譜柱溫度40°C ；c)如果質譜採用Riml正離子模式測定，進樣量為將步驟(1)得到的上樣液稀釋4 倍後的10 μ L ；如果質譜採用Rim2正離子模式和Rim3負離子模式測定，進樣量為步驟(1) 得到的上樣液IOyL;d)流速0. 4mL/mine)如果質譜採用Riml正離子模式和Rim2正離子模式測定，那麼選擇流動相A2 ο. 甲酸水溶液，流動相化含0.甲酸的甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記) 為0-2. 3min,98-80 % A2 ；2. 3-8min，80_0 % A2 ；8_10min，0 % A2 ；10-10. 5min，0_98 % A2 ； 10. 5-12min,98% A2 ；各洗脫時間段中均以流動相化補足餘下的％數；如果質譜採用Rim3負離子模式測定，那麼選擇流動相A1 :2. 5mmol/L乙酸銨水溶液，流動相B1 甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記)為:0-6min,98-0%A1 ；6-10min,0% A1 ；10-10. 5min,0-98% A1 ；10. 5-12min,98% A1 ；各洗脫時間段中均以流動相B1補足餘下的％數(如表1所示)；表1.目標物的UPLC-MS/MS參數設置
權利要求
1. 一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於具體包括以下步驟(1)樣品前處理及提取淨化將液體牛奶加入試管中，並在試管中加入保護劑和乙腈-乙醇混合液，混勻後離心得到第一上清液，將第一上清液加入離心管中，並在離心管中加入乙腈-乙醇混合液，充分混勻後離心得到第二上清液，將第二上清液轉移至雞心瓶中於40°C旋轉蒸發至幹，然後用乙腈-乙醇-水混合液定容得到樣品液，將樣品液搖勻後，通過0. 22 μ m微孔濾膜過濾得到上樣液；(2)混合標準溶液組成和基質標準曲線製備A.混合標準溶液組成氯黴素和β2-激動劑類分別為20ng/mL，三聚氰胺、雙聚氰胺、納他黴素分別為 2000ng/mL，阻斷劑、甲狀腺抑制劑、喹惡啉類、四環素類、喹諾酮類、磺胺類、β-內醯胺、咪唑類、噠唑類、咖啡因、抗寄生蟲藥類、阿維菌素類、性激素類、皮質激素、喹惡啉類、真菌毒素類、大環內酯類、非留類消炎藥、β -內醯胺、鎮定劑、農藥殺蟲劑、染料類、雌激素、皮質激素、環境激素和農藥類(除草劑)均為200ng/mL，_18°C冷藏；B.基質標準曲線定量在4. Oml空白牛奶樣品中加入混合標準溶液0 μ L，20 μ L，40 μ L，80 μ L，160 μ L， 320yL，按步驟(1)所述的樣品前處理及提取淨化方法進行處理，以濃度為橫坐標，儀器響應值為縱坐標，做基質加標標準曲線，作為試樣處理液中待測物濃度定量的依據，其中，響應值=標準品峰面積/標準品質量；(3)超高效液相色譜-三重四極杆串聯質譜聯用測定A.高效液相分離液相條件為a)色譜柱Acquity Waters HSS-T3, 2. ImmX 100mm, 1· 8 μ m ；b)色譜柱溫度40°C；c)如果質譜採用Riml正離子模式進行測定，進樣量為將步驟(1)得到的上樣液稀釋4 倍後取IOyL ；如果質譜採用Run2正離子模式和Rim3負離子模式進行測定，進樣量為步驟(1)得到的上樣液IOyL;d)流速0.4mL/mine)如果質譜採用Rim3負離子模式進行測定，那麼選擇流動相A1:2. 5mmol/L乙酸銨水溶液，流動相B1 甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記)為:0-6min,98-0% A1 ；6-10min, 0% A1 ；10-10. 5min,0-98% A1 ；10. 5-12min,98% A1 ；各洗脫時間段中均以流動相B1補足餘下的％數；如果質譜採用Runl正離子模式和Rim2正離子模式進行測定，那麼選擇流動相A2 0. 甲酸水溶液，流動相化含0. 甲酸的甲醇；梯度洗脫程序(以體積百分比記) 為0-2. 3min,98-80 % A2 ；2. 3-8min，80_0 % A2 ；8_10min，0 % A2 ；10-10. 5min，0_98 % A2 ； 10. 5-12min,98% A2 ；各洗脫時間段中均以流動相化補足餘下的％數；f)流路切換0 0.55min切換閥打開，色譜柱流出液進入廢液，0. 56min後開始質譜採集；B.質譜檢測質譜條件為a)採用電噴霧離子化電離源，毛細管電壓正離子、負離子電壓分別為3.5kV和`3.OkV ；b)多通道監測方式MRMc)離子源溫度150°C，去溶劑氣溫度450°C；d)錐孔反吹氣流速50L/h；去溶劑流速700L/he)碰撞氣體氬氣3.3X 10_3毫巴g)分組方案極性較強的藥物選擇Riml正離子模式下進行測定，Riml正離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為88 6 6的比例混合；極性偏弱藥物選擇Rim2正離子模式下進行測定，Run2正離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為10 5 5的比例混合；極性和非極性的藥物選擇Run3負離子模式下進行測定，Rim3負離子模式定容溶劑為水、乙醇和乙腈按體積比為10 5 5的比例混合； (4)濃度計算方法樣品中待測物的含量根據如下計算公式(1)得到 v CxVxIOOO
2.根據權利要求1所述的一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於所述的液體牛奶、所述的保護劑和所述的乙腈-乙醇混合液的混合比為4.OmL 150mg 5mL ；所述的第一上清液與乙腈-乙醇混合液的混合體積比為9 62 ；所述的乙腈-乙醇混合液中乙腈與乙醇的混合體積比為9 1 ；所述的乙腈-乙醇-水混合液中乙腈、乙醇與水的混合體積比為1 1 2。
3.根據權利要求2所述的一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於所述的保護劑為固體EDTA-Na2。
4.根據權利要求3所述的一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於稱取4. OmL牛奶於15mL試管中，加入150mg EDTA-Nei2混勻，再加入5mL乙腈-乙醇混合液混勻30s，0°C冷凍離心IOmin得到第一上清液，取4. 5mL第一上清液於50mL離心管中，加入31mL乙腈-乙醇混合液，充分混勻，0°C冷凍離心IOmin得到第二上清液，將第二上清液轉移至IOOmL雞心瓶，40°C旋轉蒸發至幹，用乙腈-乙醇-水混合液定容至1. OmL得到樣品液，搖勻後樣液通過0. 22 μ m微孔濾膜過濾得到上樣液。
5.根據權利要求4所述的一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於所述的0. 22 μ m微孔濾膜固定在多通道針式過濾裝置上。
6.根據權利要求1所述的一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，其特徵在於步驟(1)中所述的離心條件為溫度-1 1°C，轉速4500轉/min，時間lOmin。
全文摘要
本發明公開了一種液態奶中小分子有毒有害物質的通用快速檢測方法，特點是具體包括以下步驟將液體牛奶樣品進行簡便通用的提取和淨化，得到上樣液的步驟；配置混合標準溶液和製作基質添加標準曲線的步驟，然後通過超高效液相色譜-三重四極杆串聯質譜聯用測定液態奶中小分子有毒有害物質，最後進行濃度計算，優點是從小分子化合物一般共性出發，充分考慮到各種物質的溶解性、熱穩定性、酸鹼穩定性、極性強弱、共存穩定性等，開發出通用型快速前處理技術和UPLC-MS/MS電噴霧儀器測定技術，在滿足檢測限量要求的前提下，能給生產過程控制和食品檢測工作帶來顯著的提高效率和降低檢測成本的效果。
文檔編號G01N30/06GK102419354SQ20111026651
公開日2012年4月18日 申請日期2011年9月8日 優先權日2011年9月8日
發明者馮睿, 彭錦鋒, 曹蘇仙, 湛嘉, 王群威, 鍾鶯鶯, 陳杰 申請人:寧波檢驗檢疫科學技術研究院