胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物中的應用的製作方法

2023-07-08 18:27:56 2

專利名稱：胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於中藥新藥研發領域，具體而言，涉及胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物中的應用。
背景技術：
糖尿病是一種常見的代謝性疾病，主要表現為多飲、多食、多尿和消瘦。祖國醫學將糖尿病歸為「消渴」範疇。中醫認為消渴病為熱盛陰傷之病，由於燥熱偏盛，陰津虧耗，燥熱可以傷陰，陰傷又可加重燥熱，兩者惡化後導致消渴病的發生。病程發展的特點是，初期陰虛熱盛，中期氣陰兩虛，後期為陰陽兩虛。中醫治則滋陰清熱，益氣養陰。
目前西醫治療糖尿病的主要方法為胰島素治療和口服磺脲類、雙胍類等降血糖藥物，但胰島素治療價格昂貴，而其它類型藥物或療效有限、或毒副作用明顯。
近年來，大量研究表明，中藥在治療糖尿病的臨床治療中顯示出很大優勢，但現有中成藥大多有效成分不清楚，作用機理不明確，劑型落後，急待開發出有效成分和作用機理清楚、質量穩定可控、劑型先進、服用攜帶方便的中藥劑型。
胡黃連，異名割孤露澤、胡連，為玄參科植物胡黃連的乾燥根莖。性寒，味苦。歸肝、胃、大腸經。具有退虛熱，除疳熱，清溼熱的功效。有文獻報導胡黃連甲醇提取物能明顯降低正常禁食大鼠血糖值，能提高正常禁食大鼠的糖耐量，能降低四氧嘧啶誘導糖尿病大鼠的血糖水平。但對本發明所用乙醇提取、大孔樹脂純化方法製得的胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物中的應用尚未有文獻報導。

發明內容
本發明的目的在於提供胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物的新應用，其中胡黃連提取物的主要成分是胡黃連環烯醚萜總苷。
本發明另一個目的在於提供了含有胡黃連提取物的用於治療糖尿病的藥物組合物。
本發明進一步提供了以所述胡黃連提取物為活性成分，用於治療糖尿病的純中藥藥物製劑和相應的藥物劑型。
本發明所用的胡黃連提取物可採用下述方法製備，但並不局限於下述製備方法。
取胡黃連藥材，乙醇滲漉提取，所得滲漉液減壓濃縮後用蒸餾水溶解，離心，上清液過大孔吸附樹脂柱，蒸餾水洗脫除雜後永乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，真空乾燥，粉碎，得胡黃連提取物。
所述胡黃連提取物中主要有效部位為胡黃連環烯醚萜總苷，主要有效成分為胡黃連苷II(C23H28O13)。其中胡黃連環烯醚萜總苷以胡黃連苷II(C23H28O13)計，不得少於55.0％，胡黃連苷II(C23H28O13)不得少於35.0％。
本發明提供了以胡黃連提取物為活性成分，用於治療糖尿病的純中藥藥物製劑和相應的藥物劑型。該中藥藥物製劑是以上述胡黃連提取物為有效活性成分，並包括了藥劑學上可接受的其他輔料組分。本發明的藥物製劑包括口服劑和針劑，其中口服劑包括膠囊劑、口服液、片劑、滴丸、顆粒劑等，注射劑型包括注射液劑型及注射用凍乾粉針劑型等。在製備口服製劑時可選用的輔型劑可以是澱粉、糊精或環糊精、蔗糖、硬脂酸鹽等常規充填劑，要求胡黃連提取物中的胡黃連環烯醚萜總苷的含量在55％以上，胡黃連苷II含量在35％以上。在製備注射劑型時，要求所述胡黃連提取物中的胡黃連環烯醚萜總苷的含量在80％以上。凍乾粉針劑可以通過無菌噴霧乾燥、低溫真空乾燥、冷凍乾燥等方法製備。各製劑的後期製備工藝及設備均屬製藥領域的常規技術，本發明對此不作限定，故在此不予詳述。
本發明的創造性在於通過系列實驗證明胡黃連提取物具有明顯的治療糖尿病的作用。為便於理解本發明組合物在治療糖尿病方面的藥用價值，發明人使用上所述方法製得的胡黃連提取物及相應的藥物劑型，採用了不同的動物模型，全面觀察了胡黃連提取物對糖尿病狀態下、正常生理狀態下的血糖、糖耐量以及血脂代謝的影響。實驗證明胡黃連提取物有明顯的治療糖尿病的效果，可明顯降低糖尿病動物的血糖值，改善糖耐量的異常，改善脂質代謝異常；對正常動物口服葡萄糖後的血糖升高也具有抑制作用，動物實驗療效肯定。胡黃連提取物對正常動物血糖無明顯影響，說明其誘發低血糖的可能性較小，用藥相對安全。故本發明所述的有效部位胡黃連提取物具有明顯的治療糖尿病作用。
為確定胡黃連提取物的藥用安全性，我們用上所述方法製得的胡黃連提取物及相應的藥物劑型完成了一般藥理及毒理學研究。
我們採用藥效學劑量的2～8倍，進行了胡黃連提取物的一般藥理學研究。結果表明胡黃連提取物對麻醉貓的心血管系統和呼吸系統沒有明顯的影響；催眠作用實驗(觀察藥物對戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的影響)、行為學實驗(觀察藥物對共濟協調運動的影響)和鎮靜實驗(觀察藥物對自發活動的影響)的研究結果也表明胡黃連提取物對小鼠中樞神經系統沒有明顯的影響。
中藥相對於化學藥品而言毒性較低，但其無毒、低毒是相對的，因而嚴格合理的毒理學研究至關重要。胡黃連提取物的急毒實驗表明，小鼠灌胃給藥的最大給藥量為50.4g/kg，毒性較低。靜脈注射給藥小鼠LD50值為2.253g/kg。胡黃連提取物大鼠和犬的長毒實驗表明，大劑量的胡黃連提取物(大鼠800mg/kg，犬400mg/kg)對動物的體重增長有抑制作用。停藥後，體重增長快，與對照組相比，均無顯著性差異。
上述一般藥理和毒性結果表明胡黃連提取物的毒性較小，藥用安全性較高。
具體實施例用以下的實施例對本發明作進一步闡述，但本發明並不限於下列實施例包含的內容。
本發明優選劑型膠囊劑的製備方法[處方]胡黃連提取物100克，共製成1000粒。[製法]取胡黃連提取物100克(過80目篩)，加入60克微晶纖維素，過80目篩三遍，混合均勻，噴入95％乙醇溶液，制軟材，過40目篩制粒，60℃乾燥半小時，分裝於3#膠囊中，鋁塑複合包裝，即得。本品每粒含胡黃連苷-II(C23H28O13)不得少於35.0mg。[功能與主治]清溼熱，健脾胃，用於II型糖尿病溼熱困脾證，臨床症見胸脘腹脹，或食後飽滿，頭身困重，四肢倦怠，小便黃赤，大便不爽。舌紅苔黃膩，脈滑而數。[用法與用量]口服，一次1粒，一日3次。[規格]100g/粒。[貯藏]置陰涼乾燥處。
本發明優選劑型片劑的製備方法取胡黃連提取物粉末，加入物料量5～20％的幹澱粉及1～5％的硬脂酸鎂等，經混合，制粒，乾燥，壓片，即製得片劑。
本發明優選劑型口服液的製備方法取胡黃連提取物粉末，加入蔗糖水及常規量的防腐劑，穩定劑等輔料。過濾、滅菌，分裝入10mL瓶中，製成口服液。
本發明優選劑型注射液的製備方法取胡黃連提取物，加入注射用水溶解，加入2.0‰活性炭，攪拌，過濾，繼以用0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，補充注射用水，分裝於西林瓶中，冷凍乾燥，回充高純度氮氣，加塞，壓蓋，包裝，即得。
胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發小鼠高血糖的治療作用為觀察胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發的高血糖小鼠血糖值的影響，選用健康ICR小鼠，尾靜脈注射四氧嘧啶(60mg/kg)造成化學性糖尿病小鼠模型，分別用胡黃連提取物14mg/kg、28mg/kg、56mg/kg三個劑量灌胃，以降糖靈為陽性對照，每天1次，連續14天，於第7天、第14天取血，以空腹血糖值為指標研究胡黃連提取物的降糖作用。結果見下表表1胡黃連提取物給藥後7天、14天各組動物的空腹血糖值(x±s)

注與正常對照組比較△△△P＜0.001；與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
上述實驗結果表明給藥7天後，胡黃連提取物大劑量組血糖值與模型對照組比較明顯降低，經統計學處理差異有顯著性；給藥14天時，胡黃連提取物中、大劑量組與模型對照組比血糖值明顯降低，經統計學處理差異有顯著性。結論胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發高血糖小鼠有明顯的降糖作用。
胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發大鼠高血糖的治療作用觀察胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發的高血糖大鼠血糖值的影響。Wistar大鼠尾靜脈注射四氧嘧啶(50mg/kg)造成高血糖模型，分別用胡黃連提取物10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg三個劑量組灌胃，每天1次，連續14天，於第7天、第14天測其血糖值。結果如下表表2胡黃連提取物給藥第7天、第14天各組動物的血糖值(x±s)

注與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；與正常組比較△△△P＜0.001；
上述實驗結果表明給藥第14天，胡黃連提取物小、中和大劑量組與模型組比較血糖值明顯降低，經統計學處理，差異具有顯著性。結論胡黃連提取物對四氧嘧啶誘發高血糖大鼠有明顯的治療作用。
胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發小鼠高血糖的治療作用觀察胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發的高血糖小鼠血糖值的影響。隨機選出10隻小鼠為正常對照組，並尾靜脈注射檸檬酸溶液0.1ml/10g，其它小鼠均按照同體積尾靜脈注射2％的鏈脲佐菌素溶液，72小時後測空腹血糖值，選擇血糖值高於11.1mmol/L的小鼠，分5組，即模型組、陽性組、胡黃連提取物小(14mg/kg)、中(28mg/kg)、大(56mg/kg)劑量組，按0.2ml/10g灌胃給藥，分別在給藥第7天、第14天眶後取血，測定血糖值。結果見下表表3 胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發高血糖小鼠的空腹血糖值影響(x±s)

注與正常對照組比較△△△P＜0.001；與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
上述實驗結果表明藥後7天血糖值與模型組比較胡黃連提取物中、大劑量組血糖值明顯降低；藥後14天血糖值與模型組比較胡黃連提取物小、中、大劑量組血糖值均明顯降低。結論胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發小鼠高血糖有明顯的降糖作用。
胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發高血糖大鼠的治療作用觀察胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發的高血糖大鼠血糖值的影響。Wistar大鼠腹腔注射60mg/kg鏈脲佐菌素造成高血糖模型，分別用胡黃連提取物10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg三個劑量組灌胃，每天1次，連續21天，於第7天、第14天測其血糖值，第21天測血糖值、糖耐量。結果見下表表4胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發的高血糖大鼠給藥第7天、第14天血糖值的影響(x±s)

注與正常組比較△△△P＜0.001；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
表5胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發的高血糖大鼠給藥第21天血糖值、糖耐量曲線下面積的影響(x±s)

注與正常對照組比較△△△P＜0.001；與模型對照組比較*P＜0.05，***P＜0.001。
上述實驗結果說明給藥第7天，胡黃連提取物中、大劑量組與模型組比較血糖值明顯降低；給藥第14天，胡黃連提取物中、大劑量組與模型組比較，血糖值明顯降低；給藥第21天，胡黃連提取物中、大劑量組與模型組比較血糖值明顯降低。從糖耐量結果來看，胡黃連提取物各劑量組與模型組比較，糖耐量曲線下面積均明顯降低。結論胡黃連提取物對鏈脲佐菌素誘發的大鼠高血糖有明顯的治療作用。
胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠的治療作用觀察胡黃連提取物對非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)大鼠糖、脂代謝的影響。構建II型糖尿病動物模型，隨機選取10隻大鼠作為正常對照，給予普通飼料，其餘大鼠尾靜脈快速注射STZ(30mg/kg)，輔以高熱量飼料餵養，自由飲水，5周後眶後採血進行葡萄糖耐量試驗，挑選空腹血糖超過11.1mmol/l且糖耐量異常大鼠作為II型糖尿病動物模型，並分為模型對照組、陽性藥對照組(降糖靈100mg/kg)、胡黃連提取物10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg三個劑量組，灌胃給藥，每天1次，連續6周，同時設立正常對照組。於給藥6周後進行空腹血糖、空腹胰島素含量、糖耐量、血清總膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的檢測，計算糖耐量曲線下面積及胰島素敏感指數，並稱重肝、腎，計算臟器係數。結果見下表表6胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠藥後6周體重及糖耐量的影響(x±s)

注與正常對照組比較，△△△P＜0.001；與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01***P＜0.001。
表7胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠藥後6周空腹血糖值、空腹胰島素含量及胰島素敏感指數的影響(x±s)

注與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，**P＜0.01；與正常對照組比較，△△△P＜0.001表8胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠藥後6周血清CHO、TG含量的影響(x±s)


注與正常對照組比較，△△△P＜0.001；與模型對照組比較，*P＜0.05**P＜0.01。
表9胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠藥後6周血清LDL、HDL含量的影(x±s)

注與正常對照組比較，△P＜0.05；與模型對照組比較，*P＜0.05。
表10胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠藥後6周肝、腎係數的影響(x±s)


注與正常對照組比較，△＜0.05；與模型對照組比較，*P＜0.05。
上述實驗結果表明給藥後第6周，胡黃連提取物中劑量組糖耐量曲線下面積明顯低於模型對照組，胰島素敏感指數高於模型對照組；胡黃連提取物大劑量組的糖耐量曲線下面積、血清CHO、LDL值明顯低於模型對照組，HDL值、胰島素敏感指數明顯高於模型對照組，肝臟係數明顯降低，腎臟係數無明顯變化。結論胡黃連提取物對II型糖尿病大鼠具有明顯的治療作用。
胡黃連提取物灌胃給藥對正常小鼠血糖值及糖耐量的影響觀察胡黃連提取物灌胃給藥對正常小鼠血糖值及葡萄糖耐量的影響。60隻小鼠，隨機分為5組空白對照組、陽性對照組(達美康)、胡黃連提取物小、中、大劑量組(14mg/kg、28mg/kg、56mg/kg)，連續灌胃給藥7天後，以不同時間點的血糖值為觀測指標，採用穩捷基礎型血糖儀及OneTouch試紙測定口服葡萄糖耐量和給藥1h後的血糖值，組間比較採用t檢驗，研究藥物對正常小鼠血糖值及葡萄糖耐量的影響。結果見下表表11胡黃連提取物對正常小鼠給藥1h後血糖值的影響(x±s)


注各組與空白對照組比較，**P＜0.01。
表12胡黃連提取物對正常小鼠口服葡萄糖糖耐量的影響(x±s)

注與空白對照組比較，**P＜0.01，***P＜0.01上述實驗結果表明各給藥組同正常組比較，給藥後1h血糖值變化不明顯，經統計學處理，差異沒有顯著性。達美康組同正常組比較，糖耐量曲線下面積值降低明顯，經統計學處理，差異具有極顯著性；胡黃連提取物小、中、大劑量組同正常組比較，糖耐量曲線下面積值均降低明顯，經統計學處理，差異具有極顯著性。結論胡黃連提取物對正常小鼠的血糖無明顯降低作用；對口服葡萄糖後引起的血糖升高有明顯的降低作用。
權利要求
1.胡黃連提取物的醫療用途，其特徵是在製備治療糖尿病藥物中的應用。
2.根據權利要求1所述的醫療用途，其特徵是在製備治療II型糖尿病藥物中的應用。
3.根據權利要求1所述的藥物，其特徵是含有胡黃連提取物的藥物組合物。
4.根據權利要求1所述的胡黃連提取物，其特徵是其中的有效部位是胡黃連環烯醚萜總苷。
5.根據權利要求4所述的胡黃連提取物，其特徵是其中胡黃連環烯醚萜總苷的含量大於55％，胡黃連苷II含量大於35％。
6.根據權利要求1至3中任一權利要求所述的藥物，其特徵是該藥物可以以口服劑和注射劑等藥物劑型形式存在。
7.根據權利要求6所述的藥物劑型，其劑型為口服劑，包括膠囊劑、口服液、片劑、顆粒劑、滴丸等。
8.根據權利要求7所述的藥物劑型，其劑型為膠囊劑，所述胡黃連提取物中胡黃連環烯醚萜總苷含量大於55％，胡黃連苷II含量大於35％。
9.根據權利要求6所述的藥物劑型，其劑型為注射劑，包括注射液劑型及注射用凍乾粉針劑型等。
10.根據權利要求9所述的藥物劑型，其劑型為注射用凍乾粉針劑，所述的胡黃連提取物中胡黃連環烯醚萜總苷含量大於80％。
全文摘要
本發明屬於中藥新藥研發領域，具體而言，涉及胡黃連提取物在製備治療糖尿病藥物中的應用，且所述的胡黃連提取物中有效部位是胡黃連環烯醚萜總苷。實驗證明胡黃連提取物能明顯降低糖尿病動物的血糖值，改善糖耐量的異常，改善脂質代謝異常，並對正常動物口服葡萄糖後的血糖升高也具有抑制作用，對正常動物血糖無明顯影響。胡黃連提取物在製備治療糖尿病的藥物中用藥相對安全，降糖療效肯定。本發明還提供了胡黃連提取物治療糖尿病的藥物製劑及其相應的藥物劑型。
文檔編號A61K125/00GK1788765SQ20041009864
公開日2006年6月21日 申請日期2004年12月15日 優先權日2004年12月15日
發明者周亞偉 申請人:周亞偉