一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠及其製備方法與流程

2023-07-04 23:17:46 1

本發明涉及一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠及其製備方法，屬於醫藥
技術領域：
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背景技術：
：硝酸咪康唑為1-苯乙基咪唑衍生物，其活性成分為咪康唑，屬抗真菌藥，芽生菌屬、組織漿胞菌屬、隱球菌屬、念珠菌屬、球孢子菌屬等對本品敏感，可用於婦科念珠菌等引起的陰道感染和革蘭氏陽性細菌引起的重複感染。硝酸咪康唑可幹擾真菌細胞色素p450的活性，抑制真菌細胞膜麥角固醇的生物合成，改變膜的通透性，導致細胞內物質外漏；也可抑制真菌的三醯甘油和磷脂的生物合成乙基氧化酶和過氧化酶的活性，引起細胞內過氧化氧積聚，導致細胞亞微結構變性和細胞壞死。申請號為200810243197.6，發明名稱為一種硝酸咪康唑膜劑及其製備方法和在製藥中的應用，披露了一種用於治療婦女生殖道真菌感染的硝酸咪康唑膜劑，其原料包括硝酸咪康唑、成膜材料、增塑劑、膜材溶解劑和防腐劑，通過藥效實驗證明，硝酸咪康唑膜劑對念珠菌性陰道炎有較好的治療作用，與達克寧栓在症狀的改善及真菌清除率上有相同的療效，而同時，在對小鼠給藥時，將膜揉成團塞入小鼠陰道深處，其與栓劑的使用方式基本相同。硝酸咪康唑口服製劑藥物很難大量匯集於生殖道黏膜，必須大劑量使用，才能產生療效，因此造成較大的毒副作用，搽劑、霜劑，以及現有的凝膠，使用以後持效期短，很難達到較好的效果，而栓劑載藥量大，長期使用易產生抗藥性。殼聚糖是甲殼素脫乙醯產物，是我國產量最大的海洋資源之一，具有無毒、無刺激，具有可降解、生物相容性好等特點。技術實現要素：本發明的目的在於一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠及其製備方法，本發明以殼聚糖、聚卡波菲為混合基質製成陰道用緩釋凝膠，可以持續12h緩慢釋放，達到減少給藥次數的目的。本發明的技術方案如下：一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠，由以下組分組成：硝酸咪康唑、殼聚糖、聚卡波菲、甘油、山嵛酸甘油酯、苯甲酸鈉、三乙醇胺、質量分數為2％的醋酸溶液和注射用水。進一步的，緩釋凝膠由以下按重量份數計的組分組成：硝酸咪康唑1-3份、殼聚糖0.3-0.8份、聚卡波菲0.5-1.5份、甘油4-7份、山嵛酸甘油酯1-3份、苯甲酸鈉0.2-0.5份、三乙醇胺0.1-0.3份、質量分數為2％的醋酸溶液12-18份，加注射用水至100份。更進一步，緩釋凝膠由以下按重量份數計的組分組成：硝酸咪康唑2份、殼聚糖0.5份、聚卡波菲1份、甘油5份、山嵛酸甘油酯2份、苯甲酸鈉0.3份、三乙醇胺0.2份、質量分數為2％的醋酸溶液15份，加注射用水至100份。製備硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠的方法，具體步驟如下：(1)製備殼聚糖醋酸溶液：稱取殼聚糖，加入盛有質量份數為2％的醋酸溶液的燒杯中，攪拌至溶解；(2)製備聚合物相：將聚卡波菲加適量注射用水浸泡過夜，充分攪拌直至完全溶脹成均勻的類凝膠聚合物，高速攪拌下緩慢加入步驟(1)製備的殼聚糖醋酸溶液；(3)製備油相：加熱甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分攪拌得到均勻的油相；(4)製備水相：將苯甲酸鈉、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩餘的注射用水中混合，加熱至65℃；(5)將油相加至熱的水相中，攪拌使兩相充分混合，得到均勻的混濁液，在60℃條件下，將聚合物相迅速加至混濁液中攪拌混勻，攪拌的同時，調節ph，使得ph在3.5-5.5之間。進一步的，選用氫氧化鈉調節ph；優選的，選用10mg/ml氫氧化鈉水溶液進行調節ph。更進一步的，調節ph在4.5-5之間；優選的，調節ph為4.8。本發明與現有技術相比具有以下優點：本發明以殼聚糖、聚卡波菲為基質製成的陰道凝膠劑，與栓劑相比較，本發明更能與陰道黏膜皺褶充分接觸，不但增大了接觸面積，還使藥物滯留時間延長，本發明既保證了療效又減少了給藥次數，且無油膩感，使用舒適。附圖說明圖1為紫外吸收圖譜，其中，1為硝酸咪康唑溶液；2為輔料溶液；圖2為本發明緩釋凝膠累積釋放度曲線圖。具體實施方式下面結合具體實施例來進一步描述本發明，本發明的優點和特點將會隨著描述而更為清楚。但實施例僅是範例性的，並不對本發明的範圍構成任何限制。本領域技術人員應該理解的是，在不偏離本發明的精神和範圍下可以對本發明技術方案的細節和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發明的保護範圍內。實施例1一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠緩釋凝膠由以下按重量份數計的組分組成：硝酸咪康唑2份、殼聚糖0.5份、聚卡波菲1份、甘油5份、山嵛酸甘油酯2份、苯甲酸鈉0.3份、三乙醇胺0.2份、質量分數為2％的醋酸溶液15份，加注射用水至100份。製備硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠的方法，具體步驟如下：(1)製備殼聚糖醋酸溶液：稱取殼聚糖，加入盛有質量份數為2％的醋酸溶液的燒杯中，攪拌至溶解；(2)製備聚合物相：將聚卡波菲加適量注射用水浸泡過夜，充分攪拌直至完全溶脹成均勻的類凝膠聚合物，高速攪拌下緩慢加入步驟(1)製備的殼聚糖醋酸溶液；(3)製備油相：加熱甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分攪拌得到均勻的油相；(4)製備水相：將苯甲酸鈉、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩餘的注射用水中混合，加熱至65℃；(5)將油相加至熱的水相中，攪拌使兩相充分混合，得到均勻的混濁液，在60℃條件下，將聚合物相迅速加至混濁液中攪拌混勻，攪拌的同時，選用10mg/ml氫氧化鈉水溶液調節ph為4.8。實施例2一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠緩釋凝膠由以下按重量份數計的組分組成：硝酸咪康唑1.2份、殼聚糖0.3份、聚卡波菲0.7份、甘油4.5份、山嵛酸甘油酯1.3份、苯甲酸鈉0.3份、三乙醇胺0.15份、質量分數為2％的醋酸溶液13份，加注射用水至100份。製備硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠的方法，具體步驟如下：(1)製備殼聚糖醋酸溶液：稱取殼聚糖，加入盛有質量份數為2％的醋酸溶液的燒杯中，攪拌至溶解；(2)製備聚合物相：將聚卡波菲加適量注射用水浸泡過夜，充分攪拌直至完全溶脹成均勻的類凝膠聚合物，高速攪拌下緩慢加入步驟(1)製備的殼聚糖醋酸溶液；(3)製備油相：加熱甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分攪拌得到均勻的油相；(4)製備水相：將苯甲酸鈉、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩餘的注射用水中混合，加熱至65℃；(5)將油相加至熱的水相中，攪拌使兩相充分混合，得到均勻的混濁液，在60℃條件下，將聚合物相迅速加至混濁液中攪拌混勻，攪拌的同時，選用10mg/ml氫氧化鈉水溶液調節ph為3.5。實施例3一種硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠緩釋凝膠由以下按重量份數計的組分組成：硝酸咪康唑3份、殼聚糖0.7份、聚卡波菲1.5份、甘油6.5份、山嵛酸甘油酯2.8份、苯甲酸鈉0.5份、三乙醇胺0.3份、質量分數為2％的醋酸溶液16份，加注射用水至100份。製備硝酸咪康唑殼聚糖陰道緩釋凝膠的方法，具體步驟如下：(1)製備殼聚糖醋酸溶液：稱取殼聚糖，加入盛有質量份數為2％的醋酸溶液的燒杯中，攪拌至溶解；(2)製備聚合物相：將聚卡波菲加適量注射用水浸泡過夜，充分攪拌直至完全溶脹成均勻的類凝膠聚合物，高速攪拌下緩慢加入步驟(1)製備的殼聚糖醋酸溶液；(3)製備油相：加熱甘油、山嵛酸甘油酯使熔化，充分攪拌得到均勻的油相；(4)製備水相：將苯甲酸鈉、三乙醇胺及硝酸咪康唑在剩餘的注射用水中混合，加熱至65℃；(5)將油相加至熱的水相中，攪拌使兩相充分混合，得到均勻的混濁液，在60℃條件下，將聚合物相迅速加至混濁液中攪拌混勻，攪拌的同時，選用10mg/ml氫氧化鈉水溶液調節ph為5.5。試驗例1本發明中硝酸咪康唑含量的測定1、測定波長的確定取硝酸咪康唑加甲醇溶解並使成為質量濃度為0.25mg/ml的溶液。按處方例另取殼聚糖、聚卡波菲及其它輔料用甲醇溶解，分別將上述兩種溶液在250-300nm波長範圍內掃描吸收圖譜，紫外吸收圖譜如圖1所示，結果表明硝酸咪康唑在272nm處有最大吸收，而基質及其它輔料在此波長處幾乎無吸收，故選擇272nm作為測定波長。2、標準曲線的製備精密稱取於105℃乾燥至恆重的硝酸咪康唑對照品0.25g，置於50ml量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密量取貯備液0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0ml置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。以甲醇為空白，在272nm波長處測定吸收度a，以濃度c對吸收度a進行線性回歸，結果硝酸咪康唑在0.050-0.80mg/ml範圍內，吸收度與濃度的線性關係良好，求得的回歸方程為a＝1.4213c+0.046，r＝0.9994。3、樣品含量測定共取3批次製備的緩釋凝膠樣品。從中取1批次製備的緩釋凝膠樣品，精密稱取約3.0g，置於50ml容量瓶內，放水浴中使樣品熔融，加入適量甲醇使其完全溶解，定容至刻度。精密量取5ml，置50ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻。以甲醇為空白，在272nm處測定樣品溶液中硝酸咪康唑的吸收度，代入回歸方程，計算出濃度，從而計算出該批次緩釋凝膠樣品的含量。同上法，測定出另外2批次樣品的含量。4、加樣回收率試驗按處方主藥量的80％、100％、120％，分別精密稱取105℃乾燥至恆重的硝酸咪康唑，並按緩釋凝膠處方中各組分的比例，精密稱取基質及其它處方材料，用甲醇溶解各組分適量，依樣品含量測定的方法測定硝酸咪康唑含量。每個試樣測定3次，算出平均值，計算出加樣回收率，結果見表1。表1加樣回收率試驗結果(n＝3)試驗例2精密度試驗按試驗例1中標準曲線的製備項下方法，配製硝酸咪康唑0.20、0.40、0.60mg/ml的溶液，分別在日內的不同時間(0，2，4，6，8，10h)和日間(1，2，3，4d)測定吸收度，計算出日內和日間精密度，結果見表2。表2精密度試驗結果試驗例3本發明穩定性試驗離心試驗取緩釋凝膠5g左右，裝入帶刻度的離心管中，以2500r/min轉速離心30min，觀察其外觀性狀，結果凝膠未出現分層現象。留樣觀察將包裝好的樣品於室溫下放置3，6個月，以前述的質量控制標準進行檢測，結果各項指標均未發現明顯變化。試驗例4本發明釋放度測定模擬陰道液準確稱取nacl3.51g、koh1.4g、ca(oh)20.222g、牛血清白蛋白0.018g、乳酸2.00g、乙酸1.00g、甘油0.16g、尿素0.4g及葡萄糖5.0g，加入到1000ml水中，用hcl將ph調節為4.2。測定方法取本發明約3.0g置於溶出樣品池儲庫中，用尼龍膜將樣品封閉，蓋上池蓋，緊密旋上。將樣品池放入溶出杯中，儲庫朝上，用定位球調整漿高度，用模擬陰道液900ml作為釋放介質，漿的轉速為60r/min，溫度為(37±0.5)℃，在0.1、0.3、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12h分別取溶液5ml，同時立即補充溶出介質5ml，測定累積釋放度。得到本發明的累積釋放度曲線，如圖2所示，結果表明，製得的緩釋凝膠1h釋放35.54％，2h釋放56.02％，12h釋放達93.92％，從釋放曲線可以看出，藥物在溶出介質中先迅速釋放至有效濃度，然後緩慢釋放，從而達到速效緩釋效果。試驗例5臨床試驗1、納入病歷標準：25-46歲，符合婦科陰道念珠菌感染診斷的已婚婦女。2、病例納入標準:(1)症狀：明顯外陰瘙癢、白帶增多略帶臭味、陰道燒灼感，可伴有尿急、尿痛和性交痛等症狀；(2)體徵檢查：陰道黏膜紅腫，外陰水腫、潮紅，可能會有外陰表皮脫落；(3)鏡檢：陰道分泌物在顯微鏡下能夠找到芽胞和假茵絲；(4)病例排除:妊娠和哺乳期婦女；對硝酸咪康唑過敏；有嚴重臟器疾病，如心、肝、腎等疾病以及妊娠期患者；入選前1個月內使用過治療該疾病的類似藥物；不願意配合調查的患者；(5)退出標準：由於不良反應需終止試驗者；病人用藥依從性不好，不能連續用藥7d者；病人不按時複診而失訪者；期間同時使用了治療該疾病的類似藥物者；合併其他生殖器感染需治療者。3、治療方法：(1)治療組：月經乾淨3d後，睡前用溫水清洗陰道，然後用塗藥器將本發明緩釋凝膠約3克擠入陰道深處，每晚一次，連續用藥7天，治療期間禁止性生活。(2)對照組1：睡前用溫水清洗陰道後，將硝酸咪康唑陰道栓塞入陰道深處，每晚一粒，連續用藥7天；(3)對照組2：睡前用溫水清洗陰道後，將硝酸咪康唑霜塗抹在陰道患處，每晚一次，連用7天為一療程。4、治療後觀察項目：(1)症狀：是否好轉或消失；(2)體徵檢查：包括外陰、陰道、宮頸及陰道分泌物檢查；(3)鏡檢：對陰道分泌物進行鏡檢。(4)用藥依從性：通過詢問患者以及收回未用完的藥物和藥盒來了解研究對象的服藥依從性。5、療效評價標準(1)治癒：症狀、體徵消失，鏡檢(-)；(2)顯效：床症狀、體徵改善,鏡檢(-)；(3)有效：症狀、體徵緩解，鏡檢(+)；(4)無效：症狀、體徵均未改善甚至加重，鏡檢(+)。總有效率＝(治癒人數+顯效人數+有效人數)/總人數×100％6、結果(1)一般資料：本試驗共篩選入組病例134例，不按時複診而失訪者14例，連續用藥不到7d者5例，期間同時使用了治療該疾病的類似藥物(潔爾陰洗液)者1例；合併其他生殖器感染需治療者退出試驗者1例；所以實際完成試驗的病例數為113例。(2)療效統計結果，如表3所示：表3三組治療念珠菌性陰道炎的治療效果比較組別病例數治癒顯效有效無效有效率(％)治療組483574295.83對照組1321964390.62對照組2332062584.85當前第1頁12