透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用的製作方法

2023-07-04 21:38:46 2

專利名稱：透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，特別是將透明質酸作為一種用於提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀組合物中的主要功效成份的應用。
背景技術：
透明質酸是人和動物體內不可缺少的一種高分子生物粘多糖物質，主要構成為葡萄糖醛酸和乙醯氨基葡萄糖。透明質酸廣泛存在於人和動物體內的各種組織和細胞外基質及細胞信息傳遞蛋白聚糖鏈中，從結締組織、皮膚、血清、眼玻璃體中都無處不在。透明質酸由美國學者Meyer和Palmer於1934年首先從牛眼中分離出來，經幾代學者的研究，真正形成規模化生產則是在90年代由Hatanaku等發明了用生物發酵法製取透明質酸的方法以後。已有對透明質酸的應用，大多側重於眼科、外科創傷、護膚，以及肝功能檢測等疾病的臨床診斷。我國對透明質酸的開發利用主要局限於眼科和保溼護膚等外用方面。本發明人經過多年潛心研究實驗，首次發現了透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的顯著功效，並將其應用於保健食品，並在應用中取得了良好的成效。

發明內容
本發明的目的是提供一種透明質酸的新用途，即透明質酸在提高人體免疫力，改善免疫力缺乏症狀方面的應用，特別是以透明質酸為功效成份的組合物，該組合物可用於許多領域，例如藥品、保健品、食品等，且這些產品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
本發明的創造性在於首次發現了透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的顯著功效，並提供了實現這種功效的方法。本發明的透明質酸可採用口服的方法，例如口服液，也可以是其他劑型，例如片劑，膠囊等形式。本發明提供的組合劑，除含有一定量的透明質酸作為主要功效成份，也可含有藥學或食物學中可接受的載體，如果是片劑等可加賦形劑，方法為混合，造粒，壓片等。本發明提供的透明質酸製劑中的其它組份可以是甜味劑，調味劑，填充劑和其它輔助功效成份。本發明中的透明質酸也可以作為食品添加劑加到食品中使用，例如用作各種飲料的營養添加劑，或固體食品的營養添加劑。
本發明中透明質酸的應用方法主要包括給免疫力下降或已經具有免疫力缺乏症狀的人服用一定量的透明質酸，其用量為成人每人每天1克～0.001克。優選為每人每天0.2克-0.01克。更優選為每人每天0.1克-0.03克。
本發明中，由透明質酸作為主要功效成份製得的口服液和其它劑型，經國家有關衛生防病中心和有關研究機構作了多項免疫調節作用實驗和毒性實驗，該檢驗系依據「保健食品功能學評價程序和檢驗方法」進行，具體實驗如下一、免疫調節作用實驗1、透明質酸製劑對小鼠細胞免疫功能的影響表1透明質酸製劑對小鼠遲髮型變態反應(足趾增厚法)的影響(均值±標準差)

由表1可見，低、中劑量組小鼠攻擊前後足趾厚度差值與對照組比較差異均有顯著性(p＜0.05)表2透明質酸製劑對小鼠遲髮型變態反應(耳腫脹法)的影響(均值±標準差)

由表2可見，各劑量組小鼠左右耳重量差值與對照組比較差異無顯著性(p＜0.05)2、透明質酸製劑對體液免疫的影響表3透明質酸製劑對小鼠半數溶血值(HC50)的影響(均值±標準差)

由表3可見，各劑量組小鼠半數溶血與對照組比較差異無顯著性(p＜0.05)表4透明質酸製劑對小鼠抗體生成細胞的影響(均值±標準差)


由表4可見，各劑量組小鼠抗體生成細胞數與對照組相比，明顯增加，差異均有顯著性(p＜0.05)表5透明質酸製劑對小鼠碳廓清試驗的影響(均值±標準差)

由表5可見，各劑量組小鼠吞噬指數與對照組比較，差異無顯著性(p＞0.05)3、小結經口給予不同劑量的透明質酸製劑20天後，遲髮型變態反應足趾增厚法中，低、中兩個劑量組與對照組相比，攻擊前後足趾厚度差值明顯增加，差異有顯著性(p＜0.05)。抗體生成細胞試驗中，低、中、高三個劑量組與對照組相比抗體生成細胞明顯增加，差異有顯著性(p＜0.05)。其它各劑量組試驗均未見免疫抑制現象。檢驗結果表明，本樣品具有免疫調節作用。
二、動物毒性實驗1、透明質酸製劑對大鼠體重、總食物利用率的影響由表1、表2可見，以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明質酸製劑摻入飼料中餵飼大鼠30天，動物未出現拒食現象，各劑量組動物體重及食物利用率與對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。
表1、透明質酸製劑對大鼠體重影響

表2、透明質酸製劑對大鼠總食物利用率的影響劑量 動物數 體重增重 進食量 食物利用率性別(g/kg.bw) (只)(g) (g)(％)0 10134.60±20.49 525.80±30.1825.60±3.580.075 10133.90±16.20 533.90±33.1325.06±2.42雄0.1510135.00±28.44 523.60±56.2125.62±3.490.3 10132.50±23.29 529.40±55.3424.97±3.320 1095.90±31.68471.80±54.8620.17±5.330.075 1097.60±13.15467.80±67.1821.04±2.85雌0.151097.20±28.93477.90±59.9020.00±3.540.3 1096.60±22.12480.30±35.7520.17±4.542、透明質酸製劑對大鼠血液學指標和WBC的影響由表3、表4可見各組動物的血紅蛋白、紅細胞總數、白細胞計數及其分類和WBC均在正常值範圍之內。
表3、透明質酸製劑30天餵養試驗血液學檢查結果劑量 動物數 血紅蛋白 紅細胞計數 白細胞計數性別(g/kg.bw) (只) g/L ×1012/L ×109/L0 10104.13±33.44 5.04±1.71 7.61±4.760.075 10124.00±22.21 5.90±0.72 9.80±2.96雄0.15 10121.88±22.24 6.17±1.23 10.10±4.000.310116.00±24.67 6.01±1.31 8.91±3.520 10121.10±14.34 5.94±0.54 9.40±1.290.075 10121.25±30.12 6.57±0.20 10.95±4.67雌0.15 10132.22±16.87 6.81±0.70 11.72±2.580.310107.00±30.80 5.06±1.58 6.74±4.30表4、透明質酸製劑對大鼠WBC的影響劑量 動物數性別中性％淋巴％ 單核％(g/kg.bw)(只)0 10 4.67±3.1587.97±4.799.14±3.370.075 10 6.90±2.1783.45±3.459.65±1.85雄0.15 10 5.89±1.8485.56±2.678.55±1.460.310 4.56±2.3887.45±3.587.99±2.03
0 106.32±2.2584.52±1.769.15±1.850.075 106.84±2.7983.71±4.279.45±2.07雌0.15105.40±1.9086.01±2.108.59±1.720.3 103.40±1.9789.81±4.106.79±2.343、透明質酸製劑對大鼠生物指標的影響由表5可見各組動物的轉氨酶、尿素氮、膽固醇、血糖、總蛋白及白蛋白均在正常值範圍內。
表5、透明質酸製劑30天餵養試驗末期生化檢驗結果性別劑量動物數 轉氨酶尿素氮 膽固醇 血糖總蛋白 白蛋白(g/kg.b) (只) (U/L) (mmol/L)(mmol/L)(mmol/L) (g/L) (g/L)010101.88±13.93 9.25±0.79 2.29±0.37 2.50±1.08 71.79±6.48 39.03±3.250.0751076.00±14.94 8.58±0.89 2.58±0.58 2.06±0.41 68.01±3.98 38.27±2.16雄0.15 1074.40±9.777.55±1.06 2.56±0.61 2.27±0.48 64.81±2.80 36.51±1.700.3 1076.25±13.83 7.80±1.46 2.52±0.28 2.75±0.54 65.29±3.29 37.20±1.8401076.33±19.26 10.15±1.92 2.35±0.43 2.60±0.75 71.04±2.81 38.98±2.410.0751061.90±16.52 10.47±1.37 2.24±0.40 2.68±1.31 69.53±1.90 38.49±1.22雌0.15 1070.38±19.13 10.67±1.50 2.40±0.63 2.77±0.39 70.20±3.63 39.31±0.790.3 1064.00±8.909.51±1.63 2.13±0.34 3.26±0.45 65.42±3.21 37.37±1.744、對大鼠髒體系數的影響由表6可見，大體及組織學檢查未發現異常，解剖時亦未發現膀胱、肝總管結石。將對照組和高劑量組動物的肝、腎、胃、脾及十二指腸做病理學檢查，未見有意義的病理改變。髒體比值亦在正常值範圍內。
表6、透明質酸製劑對大鼠髒體系數的影響劑量動物數肝/體 腎/體 脾/體性別(g/kg.bw) (只) (％) (％) (％)0 10 3.37±0.360.68±0.060.31±0.070.075 10 3.32±0.210.72±0.070.28±0.06雄0.15 10 3.15±0.220.70±0.080.28±0.080.3 10 3.14±0.370.72±0.050.34±0.070 10 3.58±0.310.77±0.070.31±0.070.075 10 3.39±0.790.74±0.080.29±0.03雌0.15 10 3.42±0.190.75±0.060.31±0.060.3 10 3.40±0.610.82±0.150.32±0.105、透明質酸製劑對小鼠臟器/體重比值的影響由表7可見，各劑量組小鼠脾臟、胸腺/體重比值與對照組比較，差異無顯著性。
表7透明質酸製劑對小鼠臟器/體重比值的影響(均值±標準差)組別 動物數胸腺/體重比值脾臟/體重比值P值(ml/kg.bw)(只)(mg/g) (mg/g)對照 154.27±0.72 5.75±0.941.67 153.92±0.94 6.06±1.15＞0.055.00 154.03±0.83 5.57±0.74＞0.0515.00 153.82±0.51 5.56±0.72＞0.056、30天餵養試驗小結以0.075、0.15、0.30g/kg.bw的透明質酸製劑摻入飼料中餵飼大鼠30天。在試驗期間，各組動物長發育良好，體重、增重及食物利用率與對照組相比，差異均無顯著性(P＞0.05)；血液學、生化指標及髒體比值均在正常值範圍之內；大體解剖及病理組織學檢查均未見異常。表明本品未見明顯的亞慢性毒性作用。
7、急性毒性試驗和三項遺傳毒性試驗小結經透明質酸製劑對兩種性別大、小鼠經口急性毒性試驗，LD50均大於15g/kg.bw。根據急性毒性分級，透明質酸製劑屬無毒物；經三項遺傳毒性試驗(Ames試驗，小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠睪丸染色體試驗)，結果均為陰性。
三、人體研究實驗透明質酸口服液製劑，經500餘人平均3個月以上的連續服用，普遍反應效果良好，特別是在增強人體免疫功能，改善人體免疫力缺乏症狀方面效果顯著，同時未有一人反映出現毒副作用。
透明質酸口服液使用效果評價表

參加本評價試驗的服用者共38人，年齡為35-85歲，每人每天服用1-2支透明質酸口服液，每支容量10ml，每支透明質酸含量為0.05克，連續服用一個月。
具體實施例方式
。
實施例1軟膠囊在食用油(橄欖油)90g中加入超精細透明質酸粉5g，攪拌後製成懸浮液，灌入軟膠囊成型，每粒軟膠囊淨重為0.5g或1g，其中含透明質酸0.025g或0.05g，用量日服1--2次，每次1--2粒。
實施例2片劑將透明質酸5g，營養成份如蘆薈粉或人參粉5g，與低聚糖90g混合均勻後壓製成型，每片淨重0.2g--0.5g，其中含透明質酸0.01g--0.025g，用量為日服1--2次，每次1--3片。
實施例3口服液將透明質酸5g與純水870g混合，攪拌均勻，將上述物料與蘆薈粉等20g、蜂蜜或糖100g，檸檬酸5g(用於調PH值4---4.5)，混合攪拌，然後滅菌，灌裝，製得口服液產品，每瓶10ml或20ml，其中含透明質酸0.05g或0.1g，每日服1---2次，每次一瓶。
本發明的優點本發明提供一種透明質酸的新用途，即透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，它包括給免疫力下降或已經具有免疫力缺乏症狀的人服用透明質酸，或者是服用以透明質酸為功效成份的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。該組合物可加工成藥品、保健品、食品等，產品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
權利要求
1.一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用。
2.一種用於提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的方法，包括給免疫力下降或已經具有免疫力缺乏症狀的人服用一定量的透明質酸。
3根據權利要求1所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於它是以透明質酸為功效成份的組合物。
4.據權利要求3所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於給免疫力下降或已經具有免疫缺乏症狀的人服用一定量的含有透明質酸的組合物。
5.根據權利要求2或4所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於給免疫力下降或已經具有免疫缺乏症狀的人服用一定量的含有透明質酸的組合物，其中透明質酸的用量以成人計為1克～0.001克/天/人。
6.根據權利要求5所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於給免疫力下降或已經具有免疫缺乏症狀的人服用一定量的含有透明質酸的組合物，其中透明質酸的用量以成人計為0.2克～0.01克/天/人。
7.根據權利要求6所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於給免疫力下降或已經具有免疫缺乏症狀的人服用一定量的含有透明質酸的組合物，其中透明質酸的用量以成人計為0.1克～0.03克/天/人。
8.根據權利要求3所述的一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用，其特徵在於所述的以透明質酸為功效成份的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。
全文摘要
本發明提供了一種透明質酸在提高人體免疫力、改善免疫力缺乏症狀方面的應用。它包括給免疫力下降或已經具有免疫力缺乏症狀的人服用透明質酸，或者是服用以透明質酸為功效成分的組合物，其劑型可以是口服液、片劑、泡騰片、膠囊。該組合物可加工成藥品、保健品、食品等，產品無毒副作用，提高人體免疫力效果明顯。
文檔編號A61K31/728GK1498626SQ02146200
公開日2004年5月26日 申請日期2002年11月4日 優先權日2002年11月4日
發明者張曉崧 申請人:張曉崧