一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法

2023-07-09 22:02:01 1

專利名稱：一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法
技術領域：
本發明涉及一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，屬於化工提取技術領域。
背景技術：
苦參為豆科苦參屬的植物。分布於俄羅斯、日本、印度、朝鮮以及中國大陸的南北各省區等地，大多生長於海拔1，500米的地區，尤其是山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近，目前尚未由人工引種栽培。已知，苦參隨產地的不同而含有不同含量的贗靛葉鹼(一般為0.01%。 1%。，極少數品種能達到1%。)，而苦參中的贗靛葉鹼具有以下功能:清熱燥溼，殺蟲，利尿。用於熱痢，便血，黃疸尿閉，赤白帶下，陰腫陰癢，溼疹，溼瘡，皮膚瘙癢，疥癬麻風；還可以外治滴蟲性陰道炎。因此，提供從苦參中高效提取贗靛葉鹼的方法將具有重要的經濟和環境效益。

發明內容
為解決現有技術的不足，本發明的目的在於提供一種高效的從苦參中提取贗靛葉鹼的方法。為達到上述目的，本發明是通過以下的技術方案來實現的:
一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，包括以下步驟:
(1)製備苦參粗提物流體:將原料苦參浸入醇水溶液中在常溫下進行提取，並將提取液真空減壓濃縮後，得到苦參粗提物流體，其中，Ikg苦參用10-15L醇水溶液浸提；
(2)製備苦參浸膏:將步驟(I)製備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂處理，並對脫脂後的苦參粗提物進行真空減壓並`回收溶劑後，真空乾燥得到苦參浸膏；
(3)製備贗靛葉鹼粗品:將步驟(2)製備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解，得到酸水溶液，然後向酸水溶液中加入萃取劑進行萃取，萃取2-10次，水層用氨水鹼化至PH=IO後，繼續用萃取劑進行萃取，萃取2-10次，然後，合併所有的萃取液，並經過減壓蒸餾回收溶劑後，得到贗靛葉鹼粗品；
(4)製備贗靛葉鹼半成品:將步驟(3)中製備的贗靛葉鹼粗品利用乙醇-水溶液完全溶解，製成混濁度低於0.5°的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl分離柱，溼法上樣以後，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉鹼含量大於40%的洗脫液，然後經過濃縮、乾燥後得到贗靛葉鹼半成品；
(5)製備贗靛葉鹼:將步驟(4)製備的贗靛葉鹼半成品利用乙醇-水溶液完全溶解，製成混濁度低於0.5°的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl分離柱，溼法上樣以後，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉鹼質量百分含量大於等於95%的洗脫液，並合併洗脫液，然後經過濃縮、乾燥後得到贗靛葉鹼。進一步,步驟(I)所述的原料苦參為乾燥的苦參粉末，所述的苦參粉末的粒徑為80 100目。步驟(I)所述的醇水溶液中的醇為用於植物提取的甲醇或乙醇，優選乙醇。而所述的醇水溶液中醇的體積含量為65% 75%。且，步驟(2)所述的真空乾燥的溫度為25°C 30°C。而，步驟(3)中所述的苦參浸膏與鹽酸水溶液的用量比:lg:20mlο且，步驟(3)中所述的萃取劑為二氯甲烷，且每次進行萃取時，萃取劑的加入體積為待萃取溶液體積的2倍。步驟(4)和步驟(5)中靜置的時間為0.5-lh。而在進行等度分段洗脫時，以10%的濃度差為一個間隔段，每間隔段的洗脫體積為2 3個柱體積，洗脫液流速為Γ2個柱體積/小時。本發明的有益效果是:本發明製備方法簡單、易於操作，且成本低廉，適合大規模生產，提取的贗靛葉鹼的純度高，具有廣泛的應用潛力。


圖1為本發明實施例1製備的贗靛葉鹼的HPLC譜圖。
具體實施例方式以下結合附圖和具體實施方式
對本發明進行具體的介紹。以下實施例中贗靛葉鹼的含量測定方法均採用液質聯用。儀器:島津LCMS-2010高效液相色譜一質譜聯用儀。包括2臺LC-lOADvp泵，FCV-lOALvp四元低壓梯度流路閥，D⑶-14AM線真空脫氣機，CTO-lOAvp柱溫箱，7725i進樣閥(Rheodyne，USA), SPD-MlOAvp 二極體陣列檢測器，質譜為LCMS-2010單級四極杆，電噴霧電離(ESI)離子源，數據採集和處理由LCMS solution 2.02軟體完成。色譜柱為ThermoHypersil-Keystone (Bellefonte, PA, USA) C18 (5 Mm, 150 X 2.1 mm),柱溫 40 °C。流動相使用前經0.22 Mm濾膜過濾並超聲脫氣，流速為0.2 mL min_l。電噴霧電離(ESI)，離子極性:positive ion (+);全離子掃描(SCAN),掃描範圍:50-1000 (m/z);探針(probe)溫度:250 V (ESI);曲型脫溶劑裝置(CDL)溫度:250 V (ESI +);加熱塊(block)溫度200 °C;曲型脫溶劑裝置(CDL)電壓:-45 V (ESI+);探針(probe)電壓:4.5 kV (ESI+);檢測電壓 1.5 kV ；Q-array 電壓:DC 0V, RF 150V ;霧化氣體流速 2.5 L min-l(ESI)。紫外光譜掃描範圍為200到300 nm。
實施例1
一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，包括以下步驟:
(O製備苦參粗提物流體:將原料苦參(江蘇，贗靛葉鹼含量0.5%。)陰涼處晾乾(水分含量10%)，稱取粉碎過篩(80目)後的粉末500kg，70%乙醇-水溶液室溫浸提3次(4000LXl、2500LX2、12hrX3，每2hr溶液循環/攪拌lOmin)，合併3次乙醇提取液，55 0C真空減壓濃縮至100L流體；
(2)製備苦參浸膏:將步驟(I)製備的100L流體通過石油醚脫脂處理，並對脫脂後的苦參粗提物進行真空減壓並回收溶劑後，得到流體狀物質，並在30°C下真空乾燥，得到固體粉末18.7 kg，測其贗靛葉鹼含量為1.1%。(3)製備贗靛葉鹼粗品:將步驟(2)製備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解Qg浸膏用20ml的酸水溶 解)，得到酸水溶液,然後向酸水溶液中加入2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取，萃取4次，水層繼續用氨水鹼化至PH=IO,繼續用2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取4次，然後，合併二氯甲烷萃取液，減壓回收溶劑，得到贗靛葉鹼粗品4.7kg，測其贗靛葉鹼含量為4.2% ；
(4)製備贗靛葉鹼半成品:將步驟(3)所得的贗靛葉鹼粗品的固體粉末4.7kg加350C的30%乙醇水溶液，製成澄清或略混濁(混濁度低於0.5° )的上樣溶液，採用大孔樹月旨DlOl為分離介質，溼法上樣以後，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，收集贗靛葉鹼質量分數大於40%的洗脫液，合併，濃縮，乾燥，得350g粉末狀的贗靛葉鹼半成品；
(5)製備贗靛葉鹼:對步驟(4)得到的贗靛葉鹼半成品，加350C的30%乙醇水溶液，製成澄清或略混濁(混濁度低於0.5° )的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl為分離介質，溼法上樣以後，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，收集贗靛葉鹼質量分數大於等於95%的洗脫液，並合併合併，濃縮，真空乾燥72小時，得贗靛葉鹼晶體191克。圖1為本發明實施例1製備的贗靛葉鹼的HPLC譜圖。如圖1所示:經HPLC檢測(出峰圖參見圖1)，贗靛葉鹼含量為96%。
實施例2
一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，包括以下步驟:
(O製備苦參粗提物流體:將原料苦參(江蘇，贗靛葉鹼含量0.5%。)陰涼處晾乾(水分含量10%)，稱取粉碎過篩(80目)後的粉末500kg，70%乙醇-水溶液室溫浸提3次(40001^1、25001^2、121^\3，每2111'溶液循環/攪拌lOmin)，合併3次乙醇提取液，550C真空減壓濃縮至IOOL流體；
(2)製備苦參浸膏:將步驟(I)製備的IOOL流體通過石油醚脫脂處理，並對脫脂後的苦參粗提物進行真空減壓並回收溶劑後，得到流體狀物質，並在30°C下真空乾燥，得到固體粉末18.7 kg，測其贗靛葉鹼含量為1.1%。(3)製備贗靛葉鹼粗品:將步驟(2)製備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解Qg浸膏用20ml的酸水溶解)，得到酸水溶液,然後向酸水溶液中加入2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取，萃取4次，水層繼續用氨水鹼化至PH=IO,繼續用2倍體積的二氯甲烷萃取劑萃取4次，然後，合併二氯甲烷萃取液，減壓回收溶劑，得到贗靛葉鹼粗品4.7kg，測其贗靛葉鹼含量為4.2% ；
(4)製備贗靛葉鹼半成品:將步驟(3)所得的贗靛葉鹼粗品的固體粉末4.7kg加350C的30%乙醇水溶液，製成澄清或略混濁(混濁度低於0.5° )的上樣溶液，採用大孔樹月旨DlOl為分離介質，溼法上樣以後，放置一段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，洗脫採用的是等度分段洗脫，以10%的濃度差為一個間隔段，每段的洗脫體積為2個柱體積，洗脫液流速為I個柱體積/小時，收集贗靛葉鹼質量分數大於40%的洗脫液，合併，濃縮，乾燥，得贗靛葉鹼半成品；
(5)製備贗靛葉鹼:對步驟(4)得到的贗靛葉鹼半成品，加350C的30%乙醇水溶液，製成澄清或略混濁(混濁度低於0.5° )的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl為分離介質，溼法上樣以後，放置一 段時間(約0.5 1小時)，以使樹脂對化學成分達到吸附平衡；以乙醇-水溶液為洗脫液，洗脫採用的是等度分段洗脫，以10%的濃度差為一個間隔段，每段的洗脫體積為2個柱體積，洗脫液流速為I個柱體積/小時,收集贗靛葉鹼質量分數大於等於95%的洗脫液，並合併洗脫液，濃縮，真空乾燥後得贗靛葉鹼晶體208克。經HPLC檢測，贗靛葉鹼含量為96%。以上所有實施例中，萃取次數可在2-20的範圍內合理控制。本發明製備方法簡單、易於操作，且成本低廉，適合大規模生產，提取的贗靛葉鹼的純度高，具有廣泛的應用潛力。

本發明按照上述實施例進行了說明，應當理解，上述實施例不以任何形式限定本發明，凡採用等同替換或等效變換方式所獲得的技術方案，均落在本發明的保護範圍之內。
權利要求
1.一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，包括以下步驟: (1)製備苦參粗提物流體:將原料苦參浸入醇水溶液中在常溫下進行提取，並將提取液真空減壓濃縮後，得到苦參粗提物流體，其中，Ikg苦參用10-15L醇水溶液浸提； (2)製備苦參浸膏:將步驟(I)製備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂處理，並對脫脂後的苦參粗提物進行真空減壓並回收溶劑後，真空乾燥得到苦參浸膏； (3)製備贗靛葉鹼粗品:將步驟(2)製備的苦參浸膏加入到pH=2的鹽酸水溶液中溶解，得到酸水溶液，然後向酸水溶液中加入萃取劑進行萃取，萃取2-10次，水層用氨水鹼化至PH=IO後，繼續用萃取劑進行萃取，萃取2-10次，然後，合併所有的萃取液，並經過減壓蒸餾回收溶劑後，得到贗靛葉鹼粗品； (4)製備贗靛葉鹼半成品:將步驟(3)中製備的贗靛葉鹼粗品利用乙醇-水溶液完全溶解，製成混濁度低於0.5°的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl分離柱，溼法上樣以後，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉鹼含量大於40%的洗脫液，然後經過濃縮、乾燥後得到贗靛葉鹼半成品； (5)製備贗靛葉鹼:將步驟(4)製備的贗靛葉鹼半成品利用乙醇-水溶液完全溶解，製成混濁度低於0.5°的上樣溶液，採用大孔樹脂DlOl分離柱，溼法上樣以後，靜置至樹脂達到吸附平衡，以乙醇-水溶液為洗脫液，進行梯度洗脫或等度分段洗脫，收集贗靛葉鹼質量百分含量大於等於95% 的洗脫液，並合併洗脫液，然後經過濃縮、乾燥後得到贗靛葉鹼。
2.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(I)所述的原料苦參為乾燥的苦參粉末，所述的苦參粉末的粒徑為8(Tl00目。
3.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(I)所述的醇水溶液中的醇為用於植物提取的甲醇或乙醇。
4.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(I)所述的醇水溶液中醇的體積含量為65% 75%。
5.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(2)所述的真空乾燥的溫度為25°C 30°C。
6.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(3)中所述的苦參浸膏與鹽酸水溶液的用量比:lg:20ml ο
7.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(3)中所述的萃取劑為二氯甲烷，且每次進行萃取時，萃取劑的加入體積為待萃取溶液體積的2倍。
8.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(4)和步驟(5)中靜置的時間為0.5-lh。
9.根據權利要求1所述的一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，步驟(4)和步驟(5)中，進行等度分段洗脫時，以10%的濃度差為一個間隔段，每間隔段的洗脫體積為2^3個柱體積，洗脫液流速為1 2個柱體積/小時。
全文摘要
本發明涉及一種從苦參中提取贗靛葉鹼的方法，其特徵在於，包括以下步驟(1)利用醇水溶液浸提原料苦參製備苦參粗提物流體；(2)將步驟(1)製備的苦參粗提物流體通過石油醚進行脫脂、真空減壓、乾燥後得到苦參浸膏；(3)經過對苦參浸膏進行萃取、減壓蒸餾製備贗靛葉鹼粗品；(4)將贗靛葉鹼半成品採用大孔樹脂D101分離柱洗脫、濃縮、乾燥後得到贗靛葉鹼半成品；(5)重複步驟(4)製備贗靛葉鹼。本發明製備方法簡單、易於操作，且成本低廉，適合大規模生產，提取的贗靛葉鹼的純度高，具有廣泛的應用潛力。
文檔編號C07D471/22GK103159767SQ20131006276
公開日2013年6月19日 申請日期2013年2月28日 優先權日2013年2月28日
發明者餘雁, 司文會, 黃超群, 胡舒洋 申請人:蘇州農業職業技術學院