喜樹鹼、10－羥基喜樹鹼的生產工藝方法
2023-08-09 09:03:26
專利名稱：喜樹鹼、10－羥基喜樹鹼的生產工藝方法
技術領域：
本發明涉及從天然物質中提取有效成分領域，尤其涉及一種以2～40天喜樹幼苗或喜樹果實為原料，生產喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法。
背景技術：
喜樹鹼(Camptothecin，CPT)，為淡黃色片狀結晶，分子式C20H16N2O4，分子量348.3。 喜樹鹼分子結構式10-羥基喜樹鹼(10-Hydroxycamptothecin，HCPT)，為黃色稜柱狀結晶，分子式C20H16N2O5，分子量364.3。 10-羥基喜樹鹼分子結構式喜樹鹼，是1966年由美國學者從我國特有樹種喜樹(Camptothecaacuminata)中提取得到的具有廣譜抗腫瘤活性的生物鹼，並由此而命名。10-羥基喜樹鹼是喜樹鹼的天然衍生物，是我國廣泛臨床用的抗腫瘤藥物。此外，喜樹鹼和10-羥基喜樹鹼是目前已獲美國食品及藥品管理局(FDA)批准臨床應用的喜樹鹼類抗腫瘤藥物CPT-11(Irinotecan，用於治療直腸/結腸癌)、TPT(Topotecan，用於治療卵巢癌)的半合成前體化合物。
目前，喜樹鹼一般從喜樹中提取得到，10-羥基喜樹鹼主要經由喜樹鹼生物合成製備。
國家知識產權局專利局於1996年5月8日公開了一種喜樹鹼的提取方法，該發明專利是以喜樹的果實或根皮為原料提取喜樹鹼。它採用磨粉→水煮→煮液濃縮→膏狀物→乙醇分離樹膠雜質→析出粗品→氯仿混合液多次重結晶得到產品的工藝路線。
1999年12月22日，國家知識產權局專利局公開了一種喜樹鹼的生產方法，該發明專利以喜樹葉為主要原料，果實為輔助原料生產喜樹鹼。它採用原料粉碎→乙醇滲漉→超臨界二氧化碳萃取剩餘物質→濃縮滲漉液和萃取液→大孔吸附樹脂柱層析→重結晶後得到產品的工藝路線。
2000年4月26日又公開了另外一種喜樹鹼的生產方法，該發明專利涉及一種以喜樹葉及果實為原料，生產喜樹鹼的工藝方法。它採用原料粉碎→乙醇及水滲漉→濃縮滲漉液→大孔吸附樹脂柱層析→重結晶後得到產品的工藝路線。
上述三種方法在以喜樹果實為原料生產喜樹鹼時，均未考慮到原料中尚含有10-羥基喜樹鹼(含量約為喜樹鹼的10％)，提取純化後所得產品可創造相當於喜樹鹼產品的產值(10-羥基喜樹鹼價格為喜樹鹼的10倍以上)，因而造成了10-羥基喜樹鹼資源的浪費。
技術內容本發明的目的在於提供一種以2～40天的喜樹幼苗或喜樹果實為原料，產品得率高、生產成本低的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法。
為了達到上述目的，本發明以2～40天的喜樹幼苗或喜樹果實為原料經粉碎→乙醇滲漉萃取→萃取液濃縮至濃水溶液→大孔吸附樹脂柱層析→不同溶劑解吸液濃縮分別得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼粗品→分別重結晶後得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的工藝路線。
本發明的優點是1、2～40天的喜樹幼苗中10-羥基喜樹鹼含量可與喜樹鹼含量相當。以2～40天的喜樹幼苗為原料生產喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼，產品得率高，生產成本低，經濟效益十分可觀。
2、以喜樹果實為原料生產喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼，可避免資源浪費。
3、本發明以2～40天喜樹幼苗為原料，喜樹鹼產品收率為0.4‰，10-羥基喜樹鹼產品收率為0.2‰；以喜樹果實為原料，喜樹鹼產品收率為0.3‰，10-羥基喜樹鹼產品收率為0.02‰。
4、本發明的喜樹鹼產品純度可超過97.5％，10-羥基喜樹鹼產品純度可達90％。
5、本發明在生產過程中不使用毒性高的氯仿和甲醇，環境汙染小，對生產人員的毒害小。
具體實施例方式本發明以2～40天的喜樹幼苗或喜樹果實為原料，經粉碎→乙醇滲漉萃取→萃取液濃縮至濃水溶液→大孔吸附樹脂柱層析→不同溶劑解吸液濃縮分別得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼粗品→分別重結晶後得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼產品的工藝路線。
所述的提取所用乙醇濃度為40～80％乙醇水溶液，重量為原料的6～10倍。
所述的乙醇滲漉液濃縮至原體積的1/3～1/4。
所述的大孔吸附樹脂採用惰性大孔吸附樹脂。
所述的大孔吸附樹脂柱層析所用喜樹鹼解吸劑，可為乙酸乙酯或丙酮。
所述的大孔吸附樹脂柱層析所用10-羥基喜樹鹼解吸劑，可為乙酸乙酯或丙酮與乙醇的混合溶液。
所述的乙酸乙酯或丙酮與乙醇的混合溶劑的體積比為1∶4～4∶1。
所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼重結晶所用溶劑為解吸10-羥基喜樹鹼所用解吸劑。
實施例1將發芽2～40天的喜樹幼苗去除果皮後60～80℃烘乾24小時，粉碎至20目。取10千克喜樹幼苗粉經7倍體積60％乙醇滲漉萃取後，將所得萃取液濃縮至原體積的1/4。濃縮液直接通過惰性大孔吸附樹脂柱進行吸附，吸附後用蒸餾水洗滌至基本無色，以20倍柱體積乙酸乙酯解吸後，再以20倍柱體積乙酸乙酯/乙醇(體積比1∶1)。分別收集合併乙酸乙酯解吸液及乙酸乙酯/乙醇解吸液，濃縮後分別析出喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼粗品，最後分別經乙酸乙酯/乙醇(體積比1∶1)重結晶得到喜樹鹼產品4克(得率為0.4‰)、10-羥基喜樹鹼產品2克(得率為0.2‰)。
實施例2將喜樹果實80℃烘乾24小時後，粉碎至20目。取10千克喜樹果粉經8倍體積50％乙醇滲漉萃取後，將所得萃取液濃縮至原體積的1/3。濃縮液直接通過惰性大孔吸附樹脂柱進行吸附，吸附後用蒸餾水洗滌至基本無色，以20倍柱體積丙酮解吸後，再以10倍柱體積丙酮/乙醇(體積比1∶1)。分別收集合併丙酮解吸液和丙酮/乙醇解吸液，濃縮後分別析出喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼粗品，最後分別經丙酮/乙醇(體積比1∶1)重結晶得到喜樹鹼產品3克(得率為0.4‰)、10-羥基喜樹鹼產品0.2克(得率為0.02‰)。
權利要求
1.喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於以2～40天的喜樹幼苗或喜樹果實為原料，經粉碎→乙醇滲漉萃取→萃取液濃縮至濃水溶液→大孔吸附樹脂柱層析→不同溶劑的解吸液濃縮分別得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼粗品→分別重結晶後得喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼產品的工藝路線。
2.按照權利要求1所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於乙醇滲漉採用40～80％乙醇水溶液，重量為原料的6～10倍。
3.按照權利要求1所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於萃取液濃縮至原體積的1/3～1/4。
4.按照權利要求1所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於大孔吸附樹脂採用惰性大孔吸附樹脂。
5.按照權利要求1或4所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於大孔吸附樹脂柱層析所用喜樹鹼解吸劑，可為乙酸乙酯或丙酮。
6.按照權利要求1或4所述的喜樹鹼及10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於大孔吸附樹脂柱層析所用10-羥基喜樹鹼解吸劑，可為乙酸乙酯或丙酮與乙醇的混合溶液。
7.按照權利要求1或4或6所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於乙酸乙酯或丙酮與乙醇的混合溶液的體積比為1∶4～4∶1。
8.按照權利要求1所述的喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼的生產工藝方法，其特徵在於喜樹鹼、10-羥基喜樹鹼重結晶所用溶劑為解吸10-羥基喜樹鹼所用解吸劑。
全文摘要
一種喜樹鹼、10－羥基喜樹鹼的生產工藝方法，它是以2～40天的喜樹幼苗或喜樹果實為原料，經粉碎→乙醇滲漉萃取→萃取液濃縮至濃水溶液→大孔吸附樹脂柱層析→不同溶劑解吸液濃縮分別得喜樹鹼和10－羥基喜樹鹼粗品→分別重結晶後得喜樹鹼和10－羥基喜樹鹼產品的工藝路線。本發明生產喜樹鹼及10－羥基喜樹鹼，生產成本低，生產過程中的環境汙染程度低，對生產人員的毒害小，產品收率高，純度高。
文檔編號C07D491/22GK1428343SQ0113894
公開日2003年7月9日 申請日期2001年12月25日 優先權日2001年12月25日
發明者閻秀峰, 王洋, 張玉紅, 于濤 申請人:東北林業大學, 閻秀峰, 王洋