使用α‑羥基羰基化合物作為還原劑的製作方法

2023-07-26 13:55:46 2

本申請為申請號為201310241391.1(母案申請號為200680053566.4)，申請日為2006年12月29日，發明名稱為「使用α-羥基羰基化合物作為還原劑」的分案申請。本發明涉及某些化合物作為還原劑的應用。特別是，本發明涉及該化合物在還原還原活化的(reduction-activated)前藥中的應用，所述前藥生成用於抑制疾病的活性物質。所述活性物質特別是dna交聯劑，其可用於抑制不良細胞的生長或增生。
背景技術：
：：在本說明書中已發表文獻的清單和討論不應當將其確認為本
技術領域：
：狀況的一部分或共知常識。α-羥基羰基化合物(儘管其分子能夠被氧化)在低鹼性(ph<11)環境下並非有效的還原劑。在us5,831,097和ep0364752中說明的某些α-羥基羰基化合物(偶姻)在染料工業中是有效的還原劑。然而，ep0364752中說明的條件要求ph最小為13以實現還原效果。同樣地，us4,950,306公開某些化合物(包括α-羥基羰基化合物)能夠在染料工藝中作為有效的還原劑，但條件是需要向反應介質加入足量的鹼使ph至少為11。而且，儘管其它文件(例如us3,208,999和textil-praxis20(11),916-20(1965))提及某些α-羥基羰基化合物(例如單羥基丙酮和二羥基丙酮)有效作為某些化合物(氰乙化澱粉(cyanoethylatedstarches)和甕染料(vatdye))的還原劑的使用，這些文件提及反應條件是高鹼性的(即需要使用大量的氫氧化銨或氫氧化鈉的濃溶液，從而使反應的ph值超過13)。另外，上述文件沒有公開(涉及使用α-羥基羰基化合物的還原作用)含有超過10wt％有機溶劑的溶劑體系的使用。技術實現要素：本發明人意外地發現某些α-羥基羰基化合物在低ph值下具有有效的還原能力，因此能夠在溫和環境(和/或在大量非水性(有機)溶劑的存在下)下使用，以還原各種結構(包括多種有機化合物)。因此，本發明的第一方面是提供式i的化合物作為用於還原有機化合物中可還原基團的試劑的應用，所述有機化合物含有一個或多個可還原基團，其中式i的化合物具有如下結構其中r1表示h、芳基、het或c1-12烷基，所述c1-12烷基任選被一個或多個取代基取代，所述取代基選自oh、滷素和c1-3烷氧基，r2表示h或c1-6烷基，所述c1-6烷基任選被一個或多個oh基取代，芳基表示c6-10碳環芳基，所述c6-10碳環芳基可被一個或多個選自滷素、c1-6烷基和c1-6烷氧基的取代基取代，het表示4元至14元雜環基，其含有一個或多個選自氧、氮和/或硫的雜原子，所述雜環基可含有一個、兩個或三個環，其可以被一個或多個選自滷素、c1-6烷基和c1-6烷氧基的取代基取代，所述式i的化合物的特徵在於其能夠形成下述式ia的環二聚體：其中r1和r2如上述所定義。除非另有說明，本文定義的烷基和烷氧基可以是直鏈，或當具有足夠數目(即至少為3)的碳原子，可以是支鏈和/或環狀的。而且，當具有足夠數目(即至少為4)的碳原子，該烷基和烷氧基也可以是部分環化的/無環的(partcyclic/acyclic)。所述烷基和烷氧基還可以是飽和的或不飽和的和/或當具有足夠數目(即至少為2)的碳原子時，其中間插入一個或多個氧和/或硫原子。除非另有說明，烷基和烷氧基還可以被一個或多個滷素尤其是氟原子取代。芳基的實例包括苯基和萘基等。雜環(het)可以是完全飽和的，部分不飽和的，完全芳香的或部分芳香的。雜環(het)基的實例包括1-氮雜雙環[2.2.2]辛基、苯並咪唑基、苯並[c]異噁唑烷基、苯並異噁唑基、苯並二噁烷基、苯並二氧雜環庚烷基、苯並二氧雜環戊烷基、苯並呋喃基、苯並呋咱基、苯並嗎啉基、2,1,3-苯並噁唑二唑基、苯並噁唑烷基、苯並噁唑基、苯並吡唑基、苯並[e]嘧啶、2,1,3-苯並噻二唑基、苯並噻唑基、苯並噻吩基、苯並三唑基、苯並二氫吡喃基、苯並吡喃基、噌啉基、2,3-二氫苯並咪唑基、2,3-二氫苯並[b]呋喃基、1,3-二氫苯並-[c]呋喃基、1,3-二氫-2,1-苯並異噁唑基、2,3-二氫吡咯[2,3-b]吡啶基、二噁基、呋喃基、六氫嘧啶基、乙內醯脲基、咪唑基、咪唑[1,2-a]吡啶基、咪唑[2,3-b]噻唑基、吲哚基、異喹啉基、異噁唑啉基、異噁唑基、馬來醯亞胺基、嗎啉基、萘並[1,2-b]呋喃基、噁二唑基、1,2-噁嗪基或1,3-噁嗪基、噁唑基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷酮基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯並[2,3-b]吡啶基、吡咯並[5,1-b]吡啶基、吡咯並[2,3-c]吡啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、環丁碸基、3-環丁烯碸基、4,5,6,7-四氫苯並咪唑基、4,5,6,7-四氫苯並吡唑基、5,6,7,8-四氫苯並[e]嘧啶、四氫呋喃、四氫吡喃基、3,4,5,6-四氫吡啶基、1,2,3,4-四氫嘧啶基、3,4,5,6-四氫嘧啶基、噻二唑基、噻唑烷基、噻唑基、噻吩基、噻吩並[5,1-c]吡啶基、硫代苯並二氫吡喃基、三唑基、1,3,4-三唑並[2,3-b]嘧啶基和噸基(xanthenyl)等。雜環(het)基上的取代基可以是(視乎情況)位於包括雜原子的環系統中的任何原子上。雜環(het)基的連接點可以是包括(視乎情況)雜原子的環系統中的任何原子或作為環系統一部分的任何稠碳環上的原子。本文所用的術語「滷素」包括氟、氯、溴和碘。式i的化合物可以(對於本發明的所有方面)包括下述化合物，其中：(1)r1不是h；(2)r1表示h或特別是被一個或多個oh基取代的c1-2烷基(例如ch2oh)；(3)r2表示被一個或多個oh基取代的c1-4烷基(例如ch2oh或ch(oh)ch2oh)或特別是h。而且，具體的式i的化合物(對於本發明的所有方面)包括二羥基丙酮(dha，另稱作1,3-二羥基-2-丙酮)、乙醇醛、甘油醛、赤蘚糖、木酮糖和它們的二聚體。其它具體的式i的化合物包括赤蘚酮糖和3-羥基-2-丁酮。在本發明的一個具體實施方式中(其所有方面)，式i的化合物是dha或其二聚體。因為式i的化合物可以二聚體形式或單體形式存在，為了免除疑惑，本文參照的式i化合物包括上述兩種形式(除非本文另有所指)。而且，式i化合物以式ia的環二聚體形式存在的能力是這些化合物的結構內在的性質。因此，本文中一般或具體定義的式i化合物(全部為能夠形成式ia的環狀二聚體的化合物)包括(一般或具體定義的)上述化合物本身(即其沒有上述涉及形成環二聚體的特徵表現)。式i的化合物是否能夠形成ia的環二聚體例如可以通過研究分離的化合物形成所述二聚體的固體形式或溶液形式(例如水性溶液或有機溶液)的傾向而決定。本發明的另一方面提供上述定義的式i的化合物作為還原可還原無機化合物的試劑的應用。在本發明這方面的一個實施方式中，無機化合物不是碘或不含有銅(ii)離子或鐵氰化物。無機化合物，在具體的實施方式中，可包含鑭系元素(如鈰)或特別是過渡金屬(即族iiia到族iib的金屬)。無機化合物可包括所述鑭系元素或過渡金屬的配位絡合物。具體的過渡金屬包括在鈷和鎳族中的過渡金屬(即在中性狀態下具有d9或d10電子構型的過渡金屬)，例如鈷或鉑。金屬(配位絡合物等中)可以在高於該金屬穩定的氧化態的氧化態。例如，對於鈷，iii氧化態可以被還原成ii氧化態；對於鉑，iv氧化態可以被還原成ii氧化態。在本發明這方面的某些實施方式中，過渡金屬是鐵或銅以外的過渡金屬。在本發明的第一方面的一個具體實施方式中，式i的化合物作為用於還原有機基團中的可還原基團的試劑的應用包括該化合物作為酶以外的化合物的還原劑使用。在本發明的第一方面的另一具體實施方式中，可還原化合物在非水性的溶劑體系中進行還原。應用於本文時，術語「非水性的溶劑體系」包括氯化烴(如二氯甲烷)、烴(如己烷)、芳香烴(如甲苯或二甲苯)、偶極非質子溶劑(如n,n-二甲基甲醯胺、n,n-二甲基乙醯胺、二甲基亞碸或n-甲基吡咯烷酮)、乙腈、酯(如乙酸乙酯)或特別是低級(c1-4)烷基醇(如異丙醇、乙醇或甲醇)。術語「非水性的溶劑體系」還包括這些溶劑的混合物。發現添加鹼可促使式i的化合物的還原。因此，本發明的第一方面的一個具體實施方式涉及上述定義的式i的化合物和鹼用於還原有機化合物中的可還原基團的應用，所述有機化合物包括一個或多個可還原基團。在該實施方式中，鹼可以是有機的或無機的。例如，鹼可以是胺(伯胺、仲胺、或特別是叔胺，如三乙胺、三甲胺或二乙基異丙胺)、氮基雜環(如n-甲基嗎啉或吡啶)、醇鹽(如鹼金屬醇鹽，如乙醇鈉)、氫氧化物鹽(如氫氧化銨或鹼金屬氫氧化物，如氫氧化鈉或氫氧化鉀)或特別是碳酸鹽或碳酸氫鹽(如鹼土金屬碳酸鹽或特別是鹼土金屬碳酸氫鹽)。鹼的使用量可根據以下因素變化，例如，具體選用的式i化合物、待還原的化合物的性質、所需的反應速度等。然而，在本發明的第一方面的某些具體實施方式中，鹼的使用量例如可以是式i化合物的四個當量或以下(如三個、二個或一個)，例如催化量(如0.1當量或以下)的鹼。n,n-二甲基甲醯胺。另選地，鹼可以為反應混合物提供一定的ph。因此，在本發明的第一方面的其它實施方式中，用作還原劑的式i的化合物在ph7～11(如ph7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))(如水性溶液)下引發還原。本文使用的術語「水性溶液」意指物質的溶液，其中溶劑體系包含水，和進一步任選包含一種或多種溶劑，如與水混溶的有機溶劑(如低級(如c1-4)烷基醇，如乙醇、異丙醇或特別是甲醇)。而且，本文所指的ph意指例如在室溫(如25℃)下通過本領域技術人員已知的方法(如通過電位測量使用工作電極和參比電極)確定的ph值。式i的化合物也可以在還原可還原化合物的方法中使用。因此，根據本發明的第二方面，提供了還原有機化合物中的可還原基團的方法，所述方法包括將所述化合物與上述定義的式i的化合物接觸。在本發明的第二方面的一個具體實施方式中，所述方法用於還原酶以外的化合物。在本發明的第二方面的另一實施方式中，所述方法包括在上述定義的非水性的溶劑體系的存在下將可還原化合物與式i的化合物接觸。在一個具體實施方式中，還原在所述非水性的溶劑體系中進行。在本發明的第二方面的另一具體實施方式中，所述方法在鹼(如在本發明的第一方正中定義的鹼)的存在下進行。鹼的使用量例如可以是式i的化合物的一個當量或以下，例如催化量(如0.1當量或以下)的鹼。在本發明的第二方面的另一具體實施方式中，所述方法包括在溶液(如水性溶液)或懸浮液的存在下將可還原化合物與上述定義的式i的化合物接觸，所述溶液(如水性溶液)或懸浮液的ph為7～11(如7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))。另選地，所述方法包括在溶液(如水性溶液)或懸浮液(在一定體積的基本為非水性的溶劑體系中)的存在下將可還原化合物與上述定義的式i的化合物接觸，所述溶液(如水性溶液)或懸浮液含有一定量的鹼，該鹼溶解或懸浮在當量體積的水中，使生成7～11(如7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))的ph值。在本發明的第一和第二方面中，被還原的基團例如可以是硝基、氧代(如酮，諸如醌、羰基)、亞氨基、偶氮基、n-氧化物或吡啶鹽基團(pyridiniumgroup)。特別是，例如硝基或吡啶鹽基團。如上所述，意外地發現可以在足量的(或全部為)非水性的(有機)溶劑的存在下使用α-羥基羰基化合物進行還原。因此，本發明的另一方面涉及使用上述定義的式i的化合物作為還原劑在基本為非水性的溶劑體系中的應用。本文使用的術語「基本為非水性的溶劑體系」包括含有至多為80wt％(如70wt％、60wt％、50wt％、40wt％、30wt％、20wt％、10wt％、5wt％、1wt％或0.1wt％)的水的溶劑體系。在這些溶劑體系中，其餘的溶劑(即至少為20wt％)是有機溶劑。有機溶劑可以是包括上述與術語「非水性的溶劑體系」有關的溶劑。術語「基本為非水性的溶劑體系」還包括完全的非水性的溶劑體系(如全部為有機溶劑的溶劑體系)。同上，本發明這一方面的一個具體實施方式涉及上述定義的式i的化合物和鹼作為還原劑在基本為非水性的溶劑體系中的應用。在本發明的這方面中，式i的化合物可用於還原有機化合物或無機化合物(如下述的有機化合物)。本發明進一步提供相應的還原方法，所述方法使用式i的化合物和基本為非水性的溶劑體系。因此，本發明進一步涉及還原可還原化合物的方法，所述方法包括將所述的可還原化合物與上述定義的式i的化合物和基本為非水性的溶劑體系接觸。在本發明的這方面的一個具體的實施方式中，所述方法包括將所述的可還原化合物與上述定義的式i的化合物和鹼接觸。而且，在本發明的這方面中，所述的可還原化合物可以是有機化合物或無機化合物(如下述的有機化合物)。在本發明的這方面中，當可還原的化合物為無機化合物時，無機化合物在具體的實施方式中可以：(i)不是碘或不含有銅(ii)離子或鐵氰化物；(ii)包含鑭系元素(如鈰)或特別是過渡金屬(即iiia族到iib族的金屬)；和/或(iii)包含所述的鑭系元素(如鈰)或過渡金屬的配位絡合物。具體的過渡金屬可以包括在鈷和鎳族中的過渡金屬(即在中性狀態下具有d9或d10電子構型的過渡金屬)，例如鈷或鉑。金屬(配位絡合物等中)可以在高於該金屬穩定的氧化態的氧化態。例如，對於鈷，iii氧化態可以被還原成ii氧化態；對於鉑，iv氧化態可以被還原成ii氧化態。在本發明這方面的某些實施方式中，過渡金屬是鐵或銅以外的過渡金屬。還原的產物可以是生物學活性物質。因此，本發明的第三和第四方面分別提供：(i)上述定義的式i的化合物作為活化劑用於將還原活化前藥轉化成相應的活性物質；和(i)還原活化前藥的還原方法，所述方法包括將還原活化藥物前與上述定義的式i的化合物接觸。本發明的第三方面的一個具體的實施方式涉及作為活化劑用於將還原活化的前藥轉化成相應的上述定義的式i的化合物的活性物質和鹼的應用。所使用的鹼的性質和量以及式i的化合物誘發前藥的活化(通過還原)的ph可以如本發明的第一方面所述的應用中所定義的。相對地，在本發明的第四方面的一個具體的實施方式中，所述方法在鹼(如本發明的第一方面中定義的鹼)的存在下進行。所用的鹼的性質和量可以是如本發明的第一方面所述的應用中定義的鹼。而且，在本發明的第四方面的另一具體實施方式中，所述方法包括在溶液(如水性溶液)或懸浮液的存在下將還原活化前藥與上述定義的式i的化合物接觸，所述溶液(如水性溶液)或懸浮液的ph為7～11(如7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))。另選地，所述方法包括在溶液(如水性溶液)或懸浮液(在一定體積上述定義的基本為非水性的溶劑體系中)的存在下將還原活化前藥與上述定義的式i的化合物接觸，所述溶液(如水性溶液)或懸浮液含有一定量的鹼，該鹼溶解或懸浮在當量體積的水中，使生成的7～11(如7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))的ph值。術語「前藥」是本領域技術人員熟知的。然而，為了免除疑惑，本文所用的術語「還原活化前藥」包括具有藥理學活性的化合物或不具有藥理學活性但能夠通過涉及還原步驟的工藝轉化成具有藥理學活性(即「相應的活性物質」)，或至少稍微大於「前藥」部分的藥理學活性的物質的化合物。本文使用的術語「活化劑」包括通過還原工序將前藥轉化成相應的生物學活性物質或引發其轉化的式i的化合物這方面(以及本發明所有相關的方面)的還原活化前藥包括：(a)甲硝唑(2-甲基-5-硝基-1h-咪唑-1-乙醇)；(b)氯黴素(2,2-二氯-n-[(αr,βr)-β-羥基-α-羥甲基-4-硝基苯乙基]乙醯胺)；(c)呋喃西林(2-[(5-硝基-2-呋喃基)亞甲基]肼甲醯胺)；甲硝唑、氯黴素和呋喃西林在活化後對哺乳動物細胞是細胞毒性的(bailey等人(1996))；(d)e09(3-[5-氮丙啶基-4,7-二氧代-3-羥甲基-1-甲基-1h-吲哚-2-基]-丙-β-烯-α-醇)；(e)sr-4233(「替拉扎明(tirapazamine)」，3-氨基-1,2,4-苯並三嗪-1,4-二氧化物)；(f)rsu-1069(1-(1-氮丙啶基)-3-(2-硝基-1-咪唑基)-2-丙醇)；(g)rb-6145(1-[3-(2-溴乙基氨基)-2-羥丙基]-2-硝基咪唑)；(h)aq4n(1,4-二([2-(二甲基氨基-n-氧化物)乙基]氨基)5,8-二羥基-蒽-9,10-二酮)；(i)rb90003x(j)絲裂黴素c；(k)mitosene；(l)cyclopropamitosene；(m)dynemycina；(n)下式化合物其中每個ra獨立地表示氯、溴、碘或-os(o)2rc，rc表示c1-8烷基(任選被一個或多個氟原子取代)或苯基(任選被一個或多個選自滷素、硝基、c1-4烷基和c1-4烷氧基的取代基取代)，rb1～rb4獨立地表示h、cn、c(o)n(rd)re、c(s)n(rd)re、c(o)oh、s(o)2nhrf，或rb1還可以表示no2，rd和re獨立地表示h或c1-4烷基(其任選被一個或多個選自oh、n(h)-c1-2烷基、n(c1-2烷基)2、4-嗎啉基和c(o)oh的取代基取代)，或rd和re與連接的n-原子一起表示4-嗎啉基，和rf表示h或s(o)2ch3，當rb1不是h，rb2是h，例如在1992和1995年anlezark等人公開的上式化合物中的任何一個sn23163,sn23849,sn23777,sn23428,sn23759,sn24927,sn24928,sn24926,sn25402,sn25079,sn24939,sn24935,sn25923,sn25313,sn23856,sn25066,sn23816,sn25015,sn24971,sn25260,sn25261,sn25263,sn25084,sn25188,sn25507或特別是sn23862(5-{n,n-二[2-氯乙基]胺}-2,4-二硝基苯甲醯胺)；(o)下式化合物其中ra如上述所定義(如cl)，和x1表示nh2，x2和x3兩者均表示h，或-x1-x2-表示-nh-ch2ch2-，x3表示h或-x1-x3-表示-nh-，x2表示h；(p)下式化合物其中y表示1-氮丙啶基(任選在2-位被甲基取代)，甲氧基(由此形成米索硝唑化合物)或n(h)ch2ch2br(由此形成rb6145化合物)；(q)下式的自殺性前藥其中r表示-o-r』或-nh-r』，r』表示其中波浪線表示為片段連接的位置，ra如上述所定義(如cl)，和r」表示以下的肽內酯其中波浪線表示為片段連接的位置，例如，在上式的化合物中，r表示：-nh-r』，或其中r表示-o-r』和r』表示其中ra如上述所定義(如cl)；hu等人(2003)；li等人(2003)和manger等人(1994)說明的自殺性前藥。(r)下式的硝基二氫吲哚化合物(s)吖啶-cb1954(t)採他子卡(tretazicar，5-(氮丙啶-1-基)-2,4-二硝基苯甲醯胺)；(u)抗癌化學療法或疾病治療中使用的苯醌、萘醌或蒽醌，其效用依賴於醌基的還原，例如；下式的2,5-二(1-氮丙啶基)-1,4-苯醌其中每個r獨立地表示h或nr』c(o)or」，其中r』表示h或c1-4烷基和r」表示c1-4烷基(如每個r表示nhc(o)oc2h5，由此形成亞胺醌(「azq」)，或每個r表示h，由此形成2,5-二(1-氮丙啶基)-1,4-苯醌(「dzq」))，苯醌芥(benzoquinonemustard)(2-(n,n-二[2-氯乙基]氨基)-1,4-苯醌)，阿黴素或絲裂黴素；(v)含有醌型殘基的共軛前藥(conjugateprodrugs)在還原活化(reductiveactivation)(如在wo99/61409中說明的，在此通過引用的方式將該文件的全部內容併入本文)中釋放細胞毒性劑(cytotoxicagent)，例如下式的化合物，其中ra1表示甲基、n(c1-2烷基)2或與ra2一起表示吡咯稠環或呋喃稠環(該環任選被一個或多個選自甲基和羥甲基的取代基取代)，ra2表示甲基或與ra1一起表示吡咯稠環或呋喃稠環(該環任選被一個或多個選自甲基和羥甲基的取代基取代)，ra3表示下次的結構片段其中波浪線表示為片段連接的位置，rb1表示h或甲基，rb2表示n(ch2ch2cl)2(如在3-或4-位)和rb3表示甲基(如在4-位)或orc1(如在3-位，其中rc1表示c1-6烷基(如n-丁基)或c3-6環烷基甲基(如環丙基甲基或環丁基甲基)；(w)可還原的苯醌、萘醌、蒽醌或吲哚醌作為共軛前藥的非細胞毒性平臺，其中所述醌用作釋放藥物的引發組分(triggercomponent)(如wo97/23456或wo98/35701中公開的，在此通過引用的方式併入上述文件)，諸如下式的化合物其中rd1表示c1-4烷氧基、氮丙啶-1-基(任選被一個或兩個甲基取代)，-n(h)ch2c(ch3)2oh或下式的結構片段其中波浪線表示為片段連接的位置，rd5表示h或甲基和rd表示藥物部分(drugmoiety)，rd2表示甲基、-c(o)o(c1-4烷基)或-och2ore1，re1表示藥物部分、h、re2-c(o)ore3或-c(o)nh2，re2和re3獨立地表示苯基、苄基或環己基，所述的三個基團任選被一個或多個選自滷素、硝基、醯氧基和-sh的取代基取代，rd3表示c1-3烷基，其任選被oh(如甲基、異丙基或2-羥基乙基)或c3-6環烷基(如環丙基或環己基)取代，rd4表示h、c1-4烷基、n(re4)re5或n(re6)c(o)ore7，re4～re6獨立地表示h或c1-4烷基和re7表示c1-4烷基，或下式的化合物其中rf1和rf2獨立地表示h、c1-4烷基或與rf1和rf2一起表示苯稠環(該環任選被一個或多個選自甲基和甲氧基的取代基取代)，和rd1和rd4如上述定義；和(w)硝基芳香化合物或硝基雜環化合物，通過藥物釋放體系中還原活化後的「自烷基化」作為前藥引發平臺(如在wo00/10611中說明的，在此通過引用的方式併入上述文件的公開內容)，如下式的化合物其中ar表示芳香環(如苯基、萘基或蒽基)或雜芳環(如吡咯基、咪唑基、(苯並)呋喃基、(苯並)噻吩基、(苯並)噁唑基、(苯並)噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基或(異)喹啉基)，所述的環任選被一個或多個選自c1-4烷基、c1-4烷氧基、oh、滷素、n(re4)re5和c(o)ore6(其中re4～re6如上述定義)的取代基取代，rg表示下式的結構片段其中波浪線表示為片段連接的位置，且每個rd5和rd如上定義且各自獨立出現，或者是藥學可接受的鹽和/或其溶劑化物(如上述(a)～(t)中定義的化合物)。在本發明的這方面中，實施方式可以包括通過硝基的還原作用將還原活化前藥轉化成相應的活性物質。事實上，在一個具體的實施方式中，式i化合物用於活化前藥採他子卡(5-(氮丙啶-1-基)-2,4-二硝基苯甲醯胺；也稱作cb1954；圖1見其結構)。採他子卡是能夠抑制增生疾病的試劑的一個實例。有很多疾病是可以預防的或減少當中的細胞生長或增生。其中的一些疾病如癌症會對生命造成威脅等，即便不對生命造成威脅也會使變得虛弱(如牛皮癬)或起刺激作用和令人感到不舒適(如疣)。抑制這些疾病(尤其是癌症)的一個策略是利用化學試劑，其能夠誘發dna的交聯，以及預防或減少細胞生長或增生。採他子卡只有在被還原(於硝基)成相應的羥基胺(其然後進一步如下所述被活化)後實現所述交聯。採他子卡受大眾關注超過35年。採他子卡在1960s末首度在一系列有潛力的抗癌化合物的合成中作為當中的一部分被合成，這些抗癌化合物自1950s早期開始一直被研究。合成和測試後，採他子卡似乎代表了癌症化學療法的焦點，其為一種毒性副作用低的能夠治療腫瘤的細小的低分子化合物。作為抗癌藥物，其代表真正表現抗腫瘤選擇性的化合物的少數實例中的一種。不幸的是，對於人類癌症的治療，此抗腫瘤選擇性只出現在某些大鼠腫瘤中。採他子卡的抗腫瘤選擇性的原理在於其為前藥，其在酶促活化後生成的雙功能試劑，能夠形成dna-dna鏈間交聯。大鼠細胞中的採他子卡的生物活化涉及通過酶nqo1(dt-硫辛醯胺脫氫酶)從4-硝基轉化成4-羥基胺的需氧還原作用(圖2)。人類形式的nqo1代謝採他子卡的效率比大鼠的nqo1低。因此，人類細胞和腫瘤對採他子卡不敏感。其它內生的人類腫瘤細胞中的採他子卡還原酶及其活性遠大於nqo1所導致的(knox等人，2000)(wu等人，1997)。然而，此活性是潛在的且只有在二氫菸鹼核糖甙(nrh)而不是在nadh或nadph的存在下是可檢測的(knox等人，2000)。與此活性相關的酶是人類nad(p)h醌氧化還原酶2(nqo2)(knox等人，2000)(wu等人，1997)。在nrh的存在下，nqo2能夠催化醌的二電子還原和採他子卡的四原子硝基還原(wu等人，1997)。nqo2可視作為人類的nrh-依賴型硝基還原酶。5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的細胞毒性高，即便對耐受採他子卡的細胞亦然，且能夠在它們的dna中形成鏈間交聯。細胞活化採他子卡時細胞的選擇性歸因於化合物的形成。與生物活化採他子卡的能力無關，所有細胞類型對於還原的4-羥基氨基衍生物的選擇性幾乎相同(boland等人，1991)。儘管5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺能夠在細胞中產生dna-dna鏈間交聯，其不能在裸dna中造成損害(knox等人，1991a)。還有從5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺轉化成最接近的dna交聯的細胞毒物質的活化步驟。提出了類似於通過4-硝基喹啉-n-氧化物和n-乙醯氨基芴的代謝作用所形成的羥基胺的酶促酯化和活化(knox等人，1991a)。事實上，5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺能夠通過乙醯基-輔酶a和其它硫酯直接的化學反應非酶促地活化成能夠與裸dna反應生成鏈間交聯的形式，(knox等人，1991a)(圖2)。最終的dna-反應性採他子卡衍生物可能是4-(n-乙酸基)-5-(氮丙啶-1-基)-2-硝基苯甲醯胺。採他子卡的生物活化導致其細胞毒性激增，且最終的劑量改變(dosemodification)可高達100,000倍。甚至比從單官能試劑轉化成雙官能試劑預測的還要大。在提供雙官能試劑的單官能同源物的情況中(例如具有半芥子和單官能鉑化合物)，當量毒性(equitoxicity)的劑量改變似乎僅為大約50-200倍(knox等人，1991b；knox等人，1987)。然而，觀察到的dna鏈間交聯的形成及特性解釋了為什麼採他子卡細胞毒性在其活化後會有如此大的增加。(i)採他子卡誘發的鏈間交聯以高頻率形成，且構成了總損害(totallesions)中的70％(friedlos等人，1992)。此頻率遠遠高於其它試劑所報導的。例如，鏈間交聯佔順鉑(cisplatin)或卡鉑(carboplatin)的總dna反應的2％或以下(knox等人，1986)。在摩爾效用方面，與單鏈雙加成物和單官能損害相比，鏈間交聯是本質上毒性更大的損害。預料生成交聯比例更高的試劑比僅由低頻率生成的試劑具有更大的毒性。(ii)所述交聯難以被修補，這樣使它們與通過雙官能試劑誘發的試劑相比，本質上具有更大的細胞毒性(friedlos等人，1992)。(iii)由於採他子卡的生物活化，與不能還原採他子卡的細胞相比，walker細胞中dna-結合藥物的量增加了10-倍(friedlos等人，1992)。採他子卡誘發的鏈間交聯這種不正常的特性顯示其與由其它試劑形成的鏈間交聯不一樣。未仍能全面識別由採他子卡誘發的鏈間交聯損害。然而，4-羥基胺(如上所述在活化後)主要與脫氧鳥苷的8-位進行反應。在dna中，這樣會使氮丙啶基團隨時準備在反鏈上反應並形成觀察到的交聯。分子模擬研究顯示此第二臂反應(secondarmreaction)將優選在dna的反鏈上的脫氧鳥苷的o6位置進行反應(knox等人，2003；knox等人，1991a)。該c8-o6dna鏈間交聯將會是唯一的，因為其不會由其它烷化型或鉑酸鹽(platination)型試劑生成，並可說明採他子卡的獨特的特性。此特性與生物活化步驟中的選擇性一起解釋了何故採他子卡在大鼠中作為抗腫瘤試劑異常地有效，並提供了其在g(v)dept中作用的基本原理，以及在人類中通過nqo2的活化(knox等人，2003)(burke&knox,1998)。採他子卡還能夠在轉基因動物中用於選擇性細胞消融。在活性轉基因動物中特異的細胞群體的條件性目標消融是用於確定活體內的細胞功能的一個非常有效的方法。目標消融是通過以下工序進行的：併入細菌性硝基還原酶(其能夠需氧地活化採他子卡(ntr))(anlezark等人,1992；knox等人,1992)和合適的組織特異性啟動子構成的轉基因，以及將其注入研究中的動物(一般為小鼠)的受精卵中。出生後，確定轉基因的染色體整合，以及首建轉基因鼠品種(foundermicebred)以建立轉基因系。在動物發展過程中的不同階段用採他子卡進行處理，以評估研究中的細胞群體的特異消融的效果。細胞消融進行得非常快，最早於施用前藥後7小時開始，並似乎不依賴官能團p53(cui等人,1999)。此體系的應用的實例包括轉基因小鼠的乳腺的內管腔細胞。對ntr表達動物的處理，結果為快速地和選擇性地殺滅這些細胞群體，然而與其密相關的肌上皮細胞則不受影響。在脂肪細胞(felmer等人,2002)、星形膠質細胞(cui等人,2001)和神經細胞(isles等人,2001；ma等人,2002)中也觀察到使用此體系的選擇性消融的其它實例。明顯沒有對鄰近的細胞群體造成影響。已知羥基能夠在短距離移位，因此預計其會對鄰近的細胞群體造成影響(bridgewater等人，1997；friedlos等人，1998)。在以上實驗中，基本分別在於目標細胞群體是分裂的，然而，鄰近的組織大概並非如此的。採他子卡的活化已知有效對抗非分裂(非周期)細胞(bridgewater等人，1995)。然而，此影響只能通過使細胞進入分裂而測量。這樣，出現的似乎是由採他子卡誘發的dna損害(即dna鏈間交聯)在分裂和非分裂細胞群體中都誘發，當細胞試圖在其dna受損的情況下進行分裂，dna受損的結果只導致對細胞的細胞毒性。相反，s-期特異性試劑，如抗葉酸只對試劑存在下進行分裂的細胞造成影響。在消融實驗中，待消融的組織進行分裂，然而鄰接的組織則大概不會，即結果很清楚。dna損害不是永久性的，且其會慢慢修復(friedlos等人，1992)。結果是一個窗口(window)，其中非分裂組能夠修復損害，但進入分裂的任何細胞將會死亡。此窗口的長度將依賴於誘發的初始dna損害量。在細胞系中，採他子卡誘發的交聯用約55小時的半衰期得到修復(friedlos等人，1992)。該半衰期遠長於其它dna交聯劑的半衰期(friedlos等人，1992)，且將其延伸到體內的情況中，給出約3周的窗口(10x半衰期)。在癌症治療中，存在一種類似的情況，非增生組織應該對活化的採他子卡有耐受性，除非其在窗口內進入細胞分裂。類似的論點適於其它雙官能烷化劑和鉑酸鹽化劑。然而，它們是全身施用的，結果對正常的快速分裂的宿主組織(如骨髓、腸黏膜和淋巴系統)具有毒性。由於採他子卡是前藥，其可避開活性酶(nqo2)的良好分布或病毒(g(v)dept)的施用途徑。活性4-羥基胺衍生物具有非常短的半衰期，且位移不能離活性位點很遠，因此不會出現儲庫效應。而且，歸因於採他子卡誘發的交聯的修復較差，多數人類實體癌症沒有高比例的在任何時間下增生的細胞和較寬的殺滅窗口可能是一個優點。較早前，已經完成了對採他子卡的i期和藥代動力學進行的研究。(chung-faye等人，2001)，其中其得到的結論是能夠對人類安全地施用高達24mg/m2的採他子卡，也不具有任何毒性(mtd為37.5mg/m2)。人類中施用採他子卡受g(v)dept技術的實用性或nqo2的分布限制。然而，如果採他子卡能夠在近距離被活化，其對治療其它癌症(或其它不良的細胞生長或增生)是有藥學益處的。因此，活化例如子宮頸、膀胱、腦、胸腔或局部位置中的採他子卡的體系會將體循環和活化體系分隔，並使其發生。理論上，能夠通過使用酶和輔酶實現，儘管會遇到困難。然而，也有另選的方法還原硝基。電解還原不能在體內實現，但能夠化學還原硝基。報導了在丙酮中使用鋅粉和碳酸銨將採他子卡化學還原成5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)，產率為13％(knox等人，1988)，或使用四氫呋喃中的肼水合物/pd-c，產率為28％(knox等人，1993)。但這些合成途徑都不能在體內應用。考慮了其它還原活化的前藥。本發明人意外地發現一種新穎的化學還原體系，其使還原活化的前藥能夠例如在水溶液和乳液中還原成相應的活性物質。此發明使獲得新的治療，其中優選直接向患者施用活性劑(例如用於治療某些癌症、癌前疾病(如惡性小痣或特別是光化性角化病)和皮膚病如牛皮癬(其基本為過度生殖的皮膚細胞)。如實施例中詳細說明的，本發明人發現式i化合物如dha能夠用於將還原活化的前藥(如採他子卡)轉化成活性物質(如採他子卡的情況，5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)。因此，本發明的第五方面是提供一種組合物，其包括：(a)如上定義的還原活化的前藥；和(b)如上定義的式i化合物。當前藥是採他子卡時，例如所述組合物在下述合適的條件下會隨時間生成5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺，其能夠誘發上述的細胞中的dna的交聯。理應明白，上述包括還原活化的前藥和式i化合物的組合物常規地通過混合包括還原活化前藥的組合物和包括式i化合物的組合物而製得。因此，本發明的第六方面是提供試劑盒(kitofparts)，其包括含有如上定義的還原活化的前藥的第一部分，和含有如上定義的式i化合物的第二部分。一般而言，試劑盒的兩部分是相互兼容的組合物(如它們均具有相同的物理形式如乳液、水性溶液和凝膠)，且混合時在合適的條件下通過還原活化的前藥和式i化合物(如dha)的反應能夠生成相應的活性試劑(如採他子卡的情況，為5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)。上述試劑盒也可是一種治療體系，其能夠如下所述用於抑制不良的細胞生長或增生。便利地，試劑盒或治療體系包含還原活化前藥和式i化合物的使用說明，特別是，它們包含混合含有還原活化前藥和式i化合物的部分的說明，包括將所得的含有還原活化前藥和式i化合物的組合物用於治療(如用於抑制不良的細胞生長和增生)前將含有它們的部分混合的時間點。一般而言，本發明的第五方面包含還原活化的前藥和式i化合物的組合物，以及本發明的第六方面試劑盒中的各部分的組合物是藥物組合物，其中還原活化的前藥和式i化合物的組合，以及試劑盒中單獨的還原活化的前藥和式i化合物都與藥學可接受載體混合。同樣地，本發明還包括含有上述定義的式i化合物和藥學可接受載體的藥物組合物，以及含有5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受載體的藥物組合物。藥物組合物的特性取決於其用於治療患者的形式，特別是取決於向患者給藥的途徑。一般而言，為了治療皮膚的或指狀突可及膜(membranesaccessiblebydigitations)(如口腔膜、陰道膜、子宮頸膜、肛門膜和直腸膜)的疾病，本發明的第五方面的組合物或藥物組合物，或本發明的第六方面的試劑盒或治療體系適於外用給藥(topicaladministration)。該藥物組合物包括乳液、藥膏、洗液、噴霧和凝膠。一般而言，治療體內(特別是體腔中)疾病時，所述藥物組合物是無菌的，無熱原水溶液或懸浮液。一般而言，式i化合物可以是溶液形式。一般而言，還原活化前藥可製成懸浮液。製造如乳液、藥膏、洗液、噴霧和凝膠等藥物組合物以及無菌的，無熱原水性溶液或懸浮液的方法是本領域已知的。例如，可通過將組合物的組分，試劑盒或治療體系懸浮或溶解在例如含有以下的一種或多種組分的混合物中製得藥膏：礦物油、液體石油、白色凡士林、丙二醇、聚氧乙烯尿氧丙烯化合物、乳化蠟和水。而且，可通過將組合物的組分，試劑盒或治療體系懸浮或溶解在例如含有以下的一種或多種組分的混合物中製得乳液或洗液：礦物油、山梨醇酐單硬脂酸酯、聚乙二醇、羊毛脂、液體石蠟、白色軟石蠟、聚山梨醇酯60、鯨臘酯蠟、十六硬脂酸酯、2-辛基十二醇、苄醇和水。在本發明中，優選本發明的第五方面的組合物或藥物組合物是弱鹼性的。對於包含採他子卡和式i的化合物的組合的組合物，特別優選組合物是弱鹼性的，這是由於弱鹼性有利於從採他子卡和式i的化合物生成5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺，且採他子卡和式i的化合物的組合在中性或酸性ph下是非反應性的。對於表示本發明的第六方面的試劑盒或治療體系的組分的組合物或藥物組合物(即單獨含有還原活化前藥和式i的化合物的組合物)，特別優選當混合它們時，所得組合物是弱鹼性的。優選式i的化合物的單獨的組分是略酸性的。優選還原活化前藥組分是弱鹼性的(特別是如採他子卡的化合物，其在酸性ph下是不穩定的)。優選組合產品是弱鹼性的。「弱鹼性」意指組合物的ph為8～10.5，更優選9～10。理應明白，當藥物組合物是水性溶液時，其鹼性(ph)可例如通過使用ph值試紙或溶液，或使用ph電極直接進行測量。對於對其它組合物如乳液的鹼性(ph)的評估，可將組合物與水混合或用水萃取，可測量通過混合或萃取所得的水性溶液的ph。例如，對於乳液，通過將0.2mg乳液與1ml水旋渦10秒鐘可容易地測得乳液的ph。通過離心分離，懸浮液變清，測得水的ph。組合物的鹼性可通過使用本領域已知的緩衝液得到控制。生理學可接受以及允許在藥物中使用的緩衝液也是本領域已知的。優選的緩衝液體系是碳酸氫鈉(nahco3)和碳酸鈉(na2co3)的組合。此緩衝液特別適用於乳液。本發明人發現通過改變初始緩衝液濃度，還原活化前藥(如採他子卡)和式i的化合物(如dha)之間的反應時間和程度可得到控制。ph對特定時間內的反應率以及反應程度有影響。緩衝液的強度可控制反應的時間質子似乎是在反應中形成的，其會消耗掉緩衝液。當緩衝液被消耗掉時，ph會下降且反應會停止。通過改變緩衝液的強度(濃度)，可改變其發生的時間。優選選擇緩衝液體系，從而使混合還原活化前藥和式i的化合物時，於60分鐘內完成反應的50％。優選本發明的第五方面中包含還原活化前藥和式i的化合物的組合物所含有的式i的化合物與還原活化的前藥相比摩爾數過量。同樣地，優選在試劑盒或治療體系中各部分組合時，式i的化合物與還原活化前藥相比摩爾數過量。優選地，式i的化合物相對於還原活化前藥的摩爾數過量>4:1，如>5:1(式i的化合物:還原活化前藥，如dha:採他子卡)，更優選>10:1。在本發明的第五方面的組合物或藥物組合物，或本發明的第六方面的試劑盒或治療體系中，優選：(a)還原活化前藥(如採他子卡)在含有所述組分的組合物中的濃度為0.5～5％w/w(如0.5～1％w/w)組合物(如每克組合物5～10mg)；且(b)式i的化合物(如dha)在含有所述組分的組合物中的濃度為2.5～10％w/w(如5～10％w/w)組合物(如每克組合物50～100)。在本發明發明人發現之前，沒有人提出在外用給藥(例如乳液或洗液或藥膏)中使用採他子卡。因此，本發明的進一步的方面是提供外用給藥用的含有採他子卡的組合物；優選為藥物組合物。組合物可以是乳液或洗液或藥膏形式。藥物治療(微生物感染的治療或殺滅癌症細胞)中一些式i的化合物(dha和甘油醛)的使用在wo2006/003492,naturwissenschaften51,217-218(1964)andcancerchemother.rep.(part1)52(7),687-696(1968)有說明。然而，在本發明發現前，沒有人提出dha和甘油醛以外的式i的化合物可在藥物中使用。因此，本發明的進一步的目的是提供上述定義的式i的化合物在藥物中的應用，條件是該化合物不是dha或甘油醛。式i的化合物被封裝並用於藥物中。本發明還包括含有上述定義的式i的化合物和藥學可接受的載體的藥物組合物，條件是該化合物不是dha或甘油醛。在一個實施方式中，所述藥物組合物不是乳液或洗液或藥膏或噴霧。優選含有上述定義的式i的化合物的藥物組合物是注射用的無菌的，無熱原水性溶液。儘管5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺已知是採他子卡的硝基還原產品，在本發明人發現之前，沒有人提出組合物(如上述的藥物組合物)可在含有該化合物的藥物中的使用。因此，本發明的進一步的方面是提供5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺在藥物中的應用。如上所述，本發明的第四方面涉及還原活化前藥的還原方法，所述方法包括將還原活化前藥與上述定義的式i的化合物接觸。一般而言，還原活化前藥和式i的化合物在合適的水性溶液中接觸。優選如上所述溶液是弱鹼性的。本發明人發現當使用採他子卡和dha進行此方法時，在ph9下進行反應的反應速度比ph10下進行反應快，且主要得到高產率的優選的4-羥基胺產品(與2-羥基胺產品相比)。而且，此方法優選式i的化合物的相對於還原活化前藥摩爾過量，且摩爾過量的範圍和優選的摩爾過量如上所述。當式i的化合物應用於採他子卡的反應時，所述方法還可包含進一步的步驟：例如通過使用任何合適的分離方法如hplc從反應混合物中純化5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺。明顯地，化合物(如採他子卡的化合物)中的硝基僅還原至羥基胺基團(且沒有還原至其它基團如亞硝基或胺基)。因此，本發明的進一步方面是提供上述定義的式i的化合物將有機硝基化合物轉化成相應的羥基胺的選擇性還原中的應用。在本發明的這方面的一個實施方式中，所述應用是式i的化合物和鹼的應用。所使用的鹼的性質和量以及式i的化合物誘發硝基化合物的還原的ph可以如本發明的第一方面所述的應用中定義的。同樣地，本發明還提供將有機硝基化合物選擇性還原至相應的羥基胺的方法，所述方法包括將所述有機硝基化合物與上述定義的式i的化合物接觸。在一個特別的實施方式中，所述方法包括將有機硝基化合物與式i的化合物和鹼接觸。所使用的鹼的性質和量可以如本發明的第一方面所述的應用中定義的。而且，在另一特別的實施方式中，所述方法包括在ph7～11(如ph7.1(如7.2、7.3、7.4或7.5)～10.9(如10.8、10.7、10.6、10.5、10.4、10.3、10.2、10.1或10.0))的溶液(如水性溶液)或懸浮液中將有機硝基化合物與上述定義的式i的化合物接觸。有機硝基化合物可以例如是任何上述的硝基化合物。然而，特別是有機硝基化合物是芳香族硝基化合物或雜芳族硝基化合物。本文使用的「芳香族硝基化合物」包括包含c6-14碳環芳香族基團(如苯基、萘基、蒽基或菲基)的化合物，芳香族基團具有一個硝基取代基。除了具有一個硝基取代基，芳香族基團任選進一步被一個或多個選自以下基團的取代基取代：c1-6烷基、c1-6烷氧基(上述兩個基團任選被一個或多個選自滷素、oh、c1-4烷氧基、het和芳基的取代基取代)、oh、滷素(如氟、氯、溴或碘)、氰基、硝基、co2ra、c(o)nrbrc、s(o)1-2rd、s(o)2nrbrc、n(rb)rc、het、氮丙啶基和芳基，其中ra～rd獨立地表示c1-6烷基(任選被一個或多個選自滷素、oh、c1-4烷氧基、het和芳基的取代基取代)、het或芳基，或ra～rc可另選地(和獨立地)表示h，其中het和芳基如上述定義。在一個具體實施方式中，碳環芳香基還具有至少一個吸電子取代基，如一個或多個(如一個或兩個)選自滷素(如氟、氯、溴或碘)、氰基、硝基、co2ra、c(o)nrbrc、s(o)1-2rd和s(o)2nrbrc的取代基，其中ra～rd如上述定義。如本領域技術人員理解的，碳環芳香基的取代模式會影響與該基團連接的硝基的還原電位。一般，向該基團加入吸電子取代基會增加(即使其負電性降低)還原電位(e2或e0，如通過極譜法測得的)。在一個更具體的實施方式中，碳環芳香基還具有至少一個硝基取代基。本文所用的術語「雜芳香族硝基化合物」包括含有5元～14元雜芳香族基團的化合物，所述雜芳香族基團含有一個或多個選自氧、氮和/或硫的雜原子，其中雜芳香族基團可包含一個、兩個或三個環，且雜芳香族基團具有硝基取代基。雜芳香族基團任選具有一個或多個選自c1-6烷基、c1-6烷氧基(上述兩種基團任選被一個或多個選自滷素、oh、c1-4烷氧基、het和芳基)、oh、氧代、滷素(如氟、氯、溴或碘)、氰基、硝基、co2ra、c(o)nrbrc、s(o)1-2rd和s(o)2nrbrc、n(rb)rc、het、氮丙啶基和芳基的取代基取代，其中ra～rd如上述定義。為了免除疑惑，術語「雜芳香族硝基化合物」包括部分-芳香族雜環基，其包含兩個或三個環，其中至少一個環(但非所有環)是芳香族的。在這些環體系中，優選硝基與芳香環連接。「雜芳香族硝基化合物」的具體的雜芳香環體系包括苯並咪唑基、苯並[c]異噁唑烷基、苯並異噁唑基、苯並呋喃基、苯並呋咱基、2,1,3-苯並噁唑二唑基、苯並噁唑基、苯並吡唑基、苯並[e]嘧啶、2,1,3-苯並噻二唑基、苯並噻唑基、苯並噻吩基、苯並三唑基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、咪唑並[1,2-a]吡啶基、咪唑並[2,3-b]噻唑基、吲哚基、異喹啉基、異噁唑基、萘並[1,2-b]呋喃基、噁二唑基、噁唑基、酞嗪基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯並[2,3-b]吡啶基、吡咯並[5,1-b]吡啶基、吡咯並[2,3-c]吡啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、噻唑烷基、噻唑基、噻吩基、噻吩並[5,1-c]吡啶基、三唑基、1,3,4-三唑並[2,3-b]嘧啶基、噸基、苯並二噁烷基、苯並二氧雜環庚烷基、苯並二氧雜環戊烷基、苯並嗎啉基、苯並噁唑烷基、苯並二氫吡喃基、苯並吡喃基、2,3-二氫苯並咪唑基、2,3-二氫苯並[b]呋喃基、1,3-二氫苯並-[c]呋喃基、1,3-二氫-2,1-苯並異噁唑基、2,3-二氫吡咯[2,3-b]吡啶基、4,5,6,7-四氫苯並咪唑基、4,5,6,7-四氫苯並吡唑基、5,6,7,8-四氫苯並[e]嘧啶和硫代苯並二氫吡喃基等。本發明人意外地發現通過向可還原化合物(例如可還原的有機化合物，如有機硝基化合物或還原活化的前藥)和鹼的預形成混合物(例如溶液或懸浮液)加入式i的化合物，可利用上述定義的式i的化合物有效地對可還原化合物進行還原。因此，本發明的進一步方面提供了可還原化合物的還原方法，所述方法包括向所述可還原的化合物和鹼的混合物加入上述定義的式i的化合物，其中所述鹼如本發明第一方面中所定義的。可還原的化合物可以是可還原的有機化合物，如有機硝基化合物或如上述定義的還原活化前藥(如採化子卡)。在本發明的這方面中，式i的化合物可以特別是dha。可還原化合物和鹼的混合物可以例如是水性或特別是有機溶劑體系的溶液或懸浮液。具體的溶劑體系包括低級(c1-4)烷基醇(如異丙醇、乙醇或甲醇)、氯化烴(如二氯甲烷)、水及混合物(單相或二相混合物)。具體的鹼包括鹼金屬(如鈉或鉀)碳酸氫鹽或特別是鹼金屬碳酸鹽(例如碳酸鉀，如無水碳酸鉀)。例如可在室溫或更高溫度進行還原。在本發明具體的實施方式中，反應在高溫(如25℃以上)，如30～100℃(如40～70℃，如約60℃)下進行。還原也可以在基本不含氧化劑(如大氣氧氣)下進行。因此，在本發明的具體實施方式中，反應在惰性氣氛(如氮氣氣氛或氬氣氣氛)下和/或通過使用去氧(或去氣)溶劑和/或試劑進行。在本發明的一個更具體的實施方式中，可還原化合物維持在化學計量過量(相對於計算所得實現還原所需的式i的化合物的摩爾數)。在這方面中(不受理論限制)，認為式i的化合物在每摩爾式ia的二聚體中提供1摩爾氫化物當量(即每2摩爾式i的化合物提供1摩爾氫化物當量)。因此，例如將硝基還原至羥基胺(二電子還原需要提供兩個氫化物當量)，實現所需還原的式i化合物的摩爾數是每1摩爾硝基化合物需要4摩爾的式i化合物。式i的化合物可以任何速度加入到可還原化合物和鹼的混合物中。然而，在本發明的一些實施方式中，式i的化合物慢慢地加入到混合物中，如每分鐘至多2摩爾當量(相對於可還原化合物)(如每分鐘至多1.75、1.5、1.25、1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3或特別是每分鐘0.2或0.15摩爾當量)。如上所述，可還原化合物可以是採他子卡。因此，本發明的這方面的一個具體的實施方式涉及製備5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺(或5-(氮丙啶-1-基)-2-羥基氨基-4-硝基苯甲醯胺的方法，所述方法包括：(a)提供採他子卡和鹼的混合物；和(b)加入至多四摩爾當量式i的化合物(或另選地，加入至多兩摩爾當量的式i的化合物的二聚體(即式ia的化合物)。式i的化合物在具體的實施方式中可以是dha。此反應可以在上述涉及可還化合物的還原方法中所述的條件(以及使用鹼和/或溶劑)下進行。本發明這方面的進一步的實施方式包括方法中進一步包括從副產品5-(氮丙啶-1-基)-2-羥基氨基-4-硝基苯甲醯胺(如果有的話)分離產品5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的步驟。可通過本領域技術人員已知的技術(如分步結晶、重結晶、層析法、溶劑萃取、真空升華等)實現分離。本發明的進一方面是提供抑制個體某部位(siteintheindividual)細胞的不良生長或增生的方法，所述方法包括向個體中的該部位提供抗增生試劑的還原活化前藥(如採他子卡)和上述定義的式i的化合物。本文中使用的術語「抗增生試劑的還原活化前藥」包括特別是上述的還原活化前藥，如絲裂黴素c、e09、rsu-1069、rb-6145和尤其是採他子卡。還原活化前藥和式i化合物可以在向個體給藥之前進行組合或它們可以依次進行給藥。例如，對於外用給藥，含有還原活化前藥的組合物和含有式i的化合物的組合物(兩者中的組合物是適於外用給藥的)在向個體給藥前組合是便利的。在下面的實施例2和3(外用給藥的組合物為乳液)中將詳細說明(參考採他子卡和dha的組合)此實施方式。同樣地，對於體腔內給藥，含有還原活化前藥的組合物和含有式i的化合物的組合物(兩者中的組合物是適於體腔內給藥的)在給藥前混合是便利的。然而，也可以在體腔內進行混合(例如，單獨的無菌的，無熱原的還原活化前藥和式i的化合物的溶液或懸浮液可以在體腔內施藥，還原活化前藥和式i的化合物的初次接觸可以在體腔內進行。在一個實施方式中，還原活化前藥和式i的化合物例如可以在中性條件下共同施用，而施用的另一試劑(如緩衝液)使體腔內環境弱鹼性。一般而言，然而，還原活化前藥(或其與式i的化合物的組合)可以在鹼性介質中存在。理應明白，當還原活化前藥和式i的化合物在向個體施藥前在合適的條件下進行混合，會生成相應的活性物質(如採他子卡的情況，為5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)，其然後施用於個體。因此，本發明的進一步的方面提供抑制細胞在個體中位點處的不良生長或增生的方法，所述方法包括向個體中的位點施用或提供含有5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的組合物。本發明的進一步方面提供：(i)上述定義的抗增生試劑的還原活化前藥和上述定義的式i的化合物的組合在製備用於抑制個體細胞不良生長或增生中的使用；以及(ii)5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺在製備用於抑制個體細胞不良生長或增生中的使用。涉及治療細胞不良生長或增生的方法的相應的方面，所述方法包括向需要該治療的患者施用：(i)含有抗增生試劑的還原活化前藥或其藥學可接受鹽和/或溶劑化物，和式i的化合物的組合產品；或(ii)有效量的5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺。組合產品可以是試劑盒或組合製劑。因此，本發明的這方面包括向患者施用：(a)組合物，其包括(i)抗增生試劑的還原活化前藥或其藥學可接受鹽和/或溶劑化物，(ii)上述定義的式i的化合物，以及，任選(iii)藥學可接受的佐劑、稀釋劑或載體；或(b)試劑盒，其包括(i)第一部分，其含有抗增生試劑的還原活化前藥或其藥學可接受鹽和/或溶劑化物，和(ii)第二部分，其含有上述定義的式i的化合物。本發明的另一方面涉及組合產品(即組合物或試劑盒)其本身。在本發明的這些方面中，抗增生試劑的還原活化前藥如上述定義。一般而言，試劑盒的兩個部分是相互兼容的組合物(如它們具有相同的物理形式，如乳液、水性溶液和凝膠)，且混合時能夠在合適的條件下通過還原活化前藥與式i的化合物(如dha)的反應生成相應的活性試劑(例如，在採他子卡的情況下，為5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)。所述試劑盒可以是治療體系，其可用於抑制不良的細胞生長或增生。便利地，試劑盒或治療體系包含抗增生試劑的還原活化前藥和式i的化合物的使用說明，特別是，它們包含混合含有抗增生試劑的還原活化前藥和式i的化合物的部分的說明，包括將所得的含有還原活化前藥和式i的化合物的組合物用於治療(如用於抑制不良的細胞生長和增生)前將所述部分混合的時間點。一般而言，包含抗增生試劑的還原活化前藥和式i的化合物的組合物，以及試劑盒中的各部分的組合物是藥物組合物，其中抗增生試劑的還原活化前藥和式i的化合物的組合，以及試劑盒的部分中的單獨的抗增生試劑的還原活化前藥和式i的化合物與藥學可接受載體混合。在治療不良的細胞生長或增生中，組合產品(組合物的組合或試劑盒的組合)或5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺可以作為單獨的治療體系或試劑施用，或可另選地與一種或多種另外的活性試劑(如已知用於治療某些討論中的疾病的活性試劑)一起施用(同時或依次地)。待抑制的不良的細胞生長或增生可以是任何不良的生長或增生，特別是對於容易出現dna交聯的細胞。不良的細胞生長或增生可以是良性的，如一般的疣或牛皮癬或其它涉及不良的細胞生長或增生的皮膚疾病，或其可以是贅生物(neoplastic)，如腫瘤(tumor)或其轉移。因此，本發明的方法和藥物治療(即包括抗增生試劑的還原活化前藥、5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺，或其兩者之一的應用)可用於治療疣和其它其皮膚疾病，如牛皮癬。其它良性生長、癌前疾病和癌症，包括子宮頸癌、膀胱癌、腦癌、胸腔癌和子宮癌。所述方法和藥物治療特別優選以外用的方式(topically)抑制疾病。所述方法和藥物治療還特別優選通過向體腔內(膀胱或腹膜或胸腔)施藥抑制疾病。對於採他子卡，其活性4-羥基胺衍生物施用或遞送後的半衰期非常短，且位移不能離活性位點很遠，因此不會出現儲庫效應，且活性藥物不會進入循環產生全身效應(systemiceffects)。本發明的具體的實施方式可包括：(a)外用組合物(如乳液、洗液或藥膏)，其包括抗增生試劑的還原活化前藥(如rsu-1069、絲裂黴素c或特別是採他子卡或e09)、式i的化合物(如dha)和外用可接受的佐劑、稀釋劑或載體(如洗液、乳液或藥膏基質(ointmentbase))；(b)小丸藥或類似的固體遞送媒介(deliveryvehicle)，其包括抗增生試劑的還原活化前藥(如rsu-1069、絲裂黴素c或特別是採他子卡或e09)、式i的化合物(如dha)，和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；和(c)含有抗增生試劑的還原活化前藥(如rsu-1069、絲裂黴素c或特別是採他子卡e09)、式i的化合物(如dha)和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體(如無菌的溶劑體系，如無菌的水性溶劑體系)的溶液或懸浮液。對於上述(a)和(b)，具體的組合物還可以包括鹼(如上述本發明的第一方面所定義的鹼)和/或ph緩衝液體系，所述ph緩衝液體系於施用組合物時在施藥位點提供局部ph7～11)(例如：對於含有採化子卡的製劑，提供ph7.5、8.0、8.5或9.0和10.5或特別是10；或形成ph7.1～8.0(如約ph7.5)的含有e09的製劑)。可以使用上述(a)所述的外用組合物(或乳液、洗液或藥膏)例如治療皮膚癌、皮膚上的非黑素瘤、前列腺癌、癌前疾病(如惡性小痣或特別是光化性角化病)、疣或牛皮癬。這樣的組合物還可作為直腸藥膏用於治療諸如腸癌等疾病。當其包含e09時，上述(b)的固體傳遞媒介可特別適用於前列腺癌的治療。這是由於前列腺已知對高ph特別敏感，且本發明人發現在較低ph(如約ph7.5)下與諸如採他子卡的化合物相比，e09的還原更迅速。可通過注射、導管插入法(transcatheterisation)或其它灌輸方法將上述(c)的溶液或懸浮液，導入體腔內或出現不良的細胞生長或增生的空間。例如，可將溶液引入膀胱以治療諸如膀胱癌等疾病、使與子宮頸接觸以治療子宮頸癌、注射至腹膜以治療例如卵巢癌，或注射至腦部以治療腦癌。在一個特別的實施方式中，含有式i的化合物(如dha)和抗增生試劑的還原活化前藥(如採化子卡或e09)可通過膀胱內導尿管灌輸(intravesicalurinarycatheterinfusion)進行給藥以治療膀胱癌。因此，本發明的進一步方面涉及治療膀胱癌的方法，其包括通過膀胱內導尿管灌輸施用有效量的含有式i的化合物(如dha)和抗增生試劑(如採他子卡或e09)的還原活化前藥的溶液或懸浮液。上述包含5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的組合物也可以是特別的藥物形式，如：(i)外用組合物(如乳液、洗液或藥膏)，其包括5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和外用可接受的佐劑、稀釋劑或載體(如洗液、乳液或藥膏基質)；(ii)含有5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體(如無菌的溶劑體系，如無菌的水性溶劑體系)的溶液或懸浮液。上述組合物(i)和(ii)可分別具有與上述組合物(a)和(c)相同的最終應用。另選地，上述(ii)的溶液或懸浮液(以及上述(c)的溶液或懸浮液)可以通過噴霧對口、鼻腔、喉嚨(throat)、咽(pharynx)、喉(larynx)、氣管或肺施藥以治療上述位置中不良的細胞增生(如癌症)。因此，本發明的進一步方面涉及可噴射溶液或懸浮液，其包括：(a)抗增生的還原活化前藥、上述定義的式i的化合物和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；或(b)5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體。通過噴霧直接對口、鼻腔、喉嚨、咽、喉、氣管或肺施用5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺(或提供該化合物的混合物)，包括5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺通過血清蛋白的失活。而且，相同的失活機理將確保5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺不具有全身效應。因此，本發明的進一步方面涉及治療口癌、鼻腔癌、喉嚨癌、咽癌、喉癌、氣管癌或肺癌的方法，所述方法包括通過噴霧、溶液或懸浮液進行給藥：(a)抗增生的還原活化前藥、上述定義的式i的化合物和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；或(b)5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體。適於傳遞噴霧形式的溶液或懸浮液的裝置是本領域技術人員已知的。合適的裝置(包括：機械式噴霧器，其從儲存器抽吸溶液或懸浮液；和霧化裝置(aerosoldevices)，其利用推進劑氣體(propellantgases)通過噴嘴生成噴霧)包括在例如wo2006/005845中說明的。因此，本發明的另一方面涉及：(a)機械式噴霧器，其具有負載溶液或懸浮液的貯器，所述溶液或懸浮液包括以下物質：抗增生的還原活化前藥、上述定義的式i的化合物和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；或5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；和(b)霧化裝置，其包括含有一種或多種推進劑氣體的溶液或懸浮液，和抗增生的還原活化前藥、上述定義的式i的化合物和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體；或5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺和藥學可接受佐劑、稀釋劑或載體。上述(b)的裝置在一個實施方式中可以是計量式(metereddose)吸入裝置。作為液體噴霧的另一選擇，乾粉可以被霧化，從而使藥物能夠傳遞至位點(如肺)。因此，根據本發明的進一步方面，提供了乾粉氣溶膠組合物(aerosolcomposition)，其包含5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺。術語「乾粉氣溶膠組合物」包括乾粉製劑，其能夠通過吸入裝置傳遞至口、鼻腔、喉嚨、咽、喉、氣管或肺。同樣地，術語包括平均粒徑為100μm(如50或10μm)或以下的乾粉。在此方面中，粒徑可以通過本領域技術人已知的方法(如通過雷射散射技術，例如使用粒徑分析儀(如mastersizertm)的技術)測定。遞送乾粉氣溶膠(如乾粉未吸入器)是本領域技術人員已知的，在例如wo2004/110536中有說明。因此，本發明的進一步方面提供一種治療體系，其包括：(i)乾粉吸入裝置，其任選包含一種推進劑氣體源；和(ii)所述乾粉氣溶膠組合物的一個或多個單獨劑量(discretedoses)，所述乾粉氣溶膠組合物含有5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺。所述治療體系可包括作為物理單獨個體(physicallyseparateentities)(即有效作為試劑盒)的裝置和組合物劑型。另選地，吸入裝置可以預先上載有一個或多個組合物劑型。在治療不良的細胞生長或增生中，上述組合物(包括外用組合物、固體傳遞介質、溶液或懸浮液、乾粉未氣溶膠等)可單獨用於治療某一疾病(不良的細胞生長或增生，如膀胱癌、子宮頸癌、腹膜癌、或腦癌、或口癌、鼻腔癌、喉嚨癌、咽癌、喉癌、氣管癌或肺癌)，即作為主要的治療體系或試劑給藥。另選地，然而，組合物可以與一種或多種另一活性試劑(如已知用於治療某些討論中的疾病的活性試劑)一起施用(即同時或依次地施用)。在這方面，已知的用於治療膀胱癌的活性試劑包括順鉑、阿黴素和絲裂黴素c。合適的人類使用的還原活化前藥(如採他子卡)包括10～30mg/m2，一般為15～25mg/m2，例如24mg/m2。本發明的方法和藥物治療能夠用於治療動物(如非人類哺乳動物，特別是馬、牛和羊等，貓和狗)和人類。優選他們用於治療人類。本發明的進一步方面提供在細胞中交聯dna的方法，其包括向細胞施用還原活化前藥和dna交聯劑(如採他子卡)的組合和上述定義的式i的化合物(如dha)，或提供的方法包括向細胞施用包括5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的組合物。一般而言，細胞是培養細胞，方法是體內方法。本文使用的術語「dna交聯劑的還原活化前藥」包括特別是以下化合物，或其藥學可接受的鹽和/或溶劑化物：(1)e09(3-[5-氮丙啶基-4,7-二氧代-3-羥甲基-1-甲基-1h-吲哚-2-基]-丙-β-烯-α-醇)；(2)rsu-1069(1-(1-氮丙啶基)-3-(2-硝基-1-咪唑基)-2-丙醇)；(3)rb-6145(1-[3-(2-溴乙基氨基)-2-羥丙基]-2-硝基咪唑)；(4)絲裂黴素c；(5)下式化合物其中每個ra獨立地表示氯、溴、碘或-os(o)2rc，rc表示c1-8烷基(任選被一個或多個氟原子取代)或苯基(任選被一個或多個選自滷素、硝基、c1-4烷基和c1-4烷氧基的取代基取代)，rb1～rb4獨立地表示h、cn、c(o)n(rd)re、c(s)n(rd)re、c(o)oh、s(o)2nhrf，或rb1還可以表示no2，rd和re獨立地表示h或c1-4烷基(其任選被一個或多個選自oh、n(h)-c1-2烷基、n(c1-2烷基)2、4-嗎啉基和c(o)oh的取代基取代)，或rd和re與連接的n-原子一起表示4-嗎啉基，和rf表示h或s(o)2ch3，條件是：當rb1不是h時，rb2是h，例如在1992和1995年anlezark等人公開的上式化合物中的任何一個sn23163,sn23849,sn23777,sn23428,sn23759,sn24927,sn24928,sn24926,sn25402,sn25079,sn24939,sn24935,sn25923,sn25313,sn23856,sn25066,sn23816,sn25015,sn24971,sn25260,sn25261,sn25263,sn25084,sn25188,sn25507或特別是sn23862(5-{n,n-二[2-氯乙基]胺}-2,4-二硝基苯甲醯胺)；(6)下式化合物其中ra如上述所定義(如cl)，和x1表示nh2，x2和x3兩者均表示h，或-x1-x2-表示-nh-ch2ch2-，x3表示h或-x1-x3-表示-nh-，x2表示h；(7)下式化合物其中y表示1-氮丙啶基(任選在2-位被甲基取代)，甲氧基或n(h)ch2ch2br；(8)下式的自殺性前藥其中r表示-o-r』或-nh-r』，r』表示其中波浪線表示為片段連接的位置，ra如上述所定義(如cl)，和(9)吖啶-cb1954(10)採他子卡(5-(氮丙啶-1-基)-2,4-二硝基苯甲醯胺)。事實上，術語「dna交聯劑的還原活化前藥」包括特別是諸如e09、rsu-1069、rb-6145、絲裂黴素c和特別是採他子卡的化合物。附圖說明以下將參照附圖和實施例詳細地說明本發明，其中圖1示出採他子卡(5-(氮丙啶-1-基)-2,4-二硝基苯甲醯胺)的結構。圖2示出採他子卡的生物活化。圖3示出二羥基丙酮(dha；casno:62147-49-3,beil.8,266,merckindex13,3166)的結構。正常的形式是二聚體，但在溶液中迅速轉化成單體。圖4示出採他子卡通過dha進行的還原。圖5示出採他子卡在e45基乳液中通過dha進行的還原(如下面實施例2中說明的)。在圖5的a、b和c的每一個中，兩條線中上面的一條是在325nm下測量的，而下面的一條是在260nm下測量的。圖6示出圖5中保留時間為5分鐘所見的光譜匹配，其來自合成標準物5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺。連續線是標準物，虛線是樣品。光譜260nm下的吸收率被標準化。圖7示出在ph7.5和溫度37℃的含有140mmnacl和以下物質的10mm磷酸鹽緩衝液中2小時後中國倉鼠v79細胞的存活百分比：a:對照(即沒有其它物質)；b:10mmdha；c:10μme09；b+c:10mmdha和10μme09的組合；d:100μme09；和b+d:10mmdha和100μme09的組合。使用下述方法測定v79細胞的存活：在37℃下培養含有140mmnacl的10mm磷酸鹽緩衝液(ph7.5)中的v79細胞(體積為1ml，2x105細胞/ml)，然後加入試劑(對照實驗除外)(如上所述，在規定的濃度下)。培養2小時後，通過離心分離收穫細胞，進行連續稀釋(4x10倍)，將細胞置於生長介質中，在溼度5％為的co2氣氛為生長1星期後，評價它們形成的群居的能加。圖7的圖表顯示，e09的細胞毒性效果通過加入dha而大大提高，其有助於形成e09的活性形式。對於下面的實施例，採他子卡是市售的，其從購自morvustechnologylimited和sigma化學公司作為研究之用。實施例1:採他子卡的化學活化從採他子卡製造活性4-羥基氨基衍生物報導的化學方法在有機溶劑中使用苛刻的還原條件獲得低於30％的產率(knox等人，1993；knox等人，1988)。發明人發現二羥基丙酮(dha)能夠在弱鹼性條件下的水溶液中將採他子卡還原至所需的羥基胺。在ph9下，產率>85％，且採他子卡還原所測得的唯一的其它產物是5-(氮丙啶-1-基)-2-羥基氨基-4-硝基苯甲醯胺。二羥基丙酮(dha；1,3-二羥基-2-丙酮；casno:62147-49-3,beil.8,266,merckindex13,3166；圖3)是防曬或美黑乳(self-tanninglution)中的活性成分，並獲得fda的準許。dha是無色的糖，其通過染色(staining)加深皮膚的顏色。其與表皮中死去的表面細胞作用產生顏色的轉變。一般在施用後5～7天內，隨著死去的皮膚細胞自然脫落，顏色逐漸變淡。防曬美黑產品含有的二羥基丙酮濃度至多5％。濃度越高，曬後顏色越黑。作為美黑劑，其在ph4～6下穩定。太鹼或太酸都會形成棕色化合物，減少溶液作為美黑劑的效用。赤蘚酮糖(1,3,4-三羥基-2-丁酮)的作用類似於dha，但其不能很快地產生深黑色。dha通過甘油的發酵產生，其為簡單的三碳糖，天然無毒的白色粉末。正常形式為二聚體(c6h12o6)，但其在溶液中迅速轉化成單體。dha獲fda準許可外用，並建議用者應該採取保護措施以避免接觸眼睛、鼻子和黏膜。報導的唯一副作用是過敏性接觸性皮炎。但這種副作用很少出現，且美黑乳中導致過敏性大多數歸因於其它成分如製劑中的防腐劑。見美國聯邦法規，第376頁：題目21--食品和藥品(title21--foodanddrugs)第i章--食品和藥品管理，衛生與社會服務部(chapteri--foodanddrugadministration,departmentofhealthandhumanservices)第73部分--免證書的著色添加劑列表--目錄(part73--listingofcoloradditivesexemptfromcertification--tableofcontents)亞部分c--化妝品(subpartc--cosmetics)第73.2150節二羥基丙酮(sec.73.2150dihydroxyacetone)。從未曾報導dha作為還原劑。還原糖是已知的，但其為醛醣，在其中的一個末端具有醛。醛為還原劑，且在溫和的氧化劑(如cu2+或fe3+)的存在下，醛會氧化成羧酸。作為酮醇，與dha的當量反應是不可能的。然而，顯示二羥基丙酮在鐵(iii)螯合物的存在下促進羥基團的形成(malisza&hasinoff,1995)。這種反應可能涉及其反還原能力及其鹼不穩定性，使導致形成棕色化合物。在鹼性條件下，使用過量的dha，採他子卡隨時間以線性速度減少(圖4)。向採他子卡(100μm)和0.1m碳酸氫鈉緩衝液(ph9或ph10)的混合物加入100μl的100mmdha水溶液獲得最終體積1ml開始進行分析。在37℃下培養所述混合物，每6分鐘取試樣(10μl)一次，隨即通過hplc[partisil10scx(4.2×150mm)(whatman,maidstone,kent,u.k.]進行分析，按1.5ml/min的速度以0.13m磷酸鈉(ph5)等度洗脫。通過對應的外標物的峰面積(通過325nm下的吸收率定量)測定每個樣品中的採他子卡濃度。通過曲線擬合計算初始率(figp,biosoft,cambridge,u.k.)。通過相對於可信的標準物的保留時間鑑別還原產品。只觀察到採他子卡還原的兩個產物，2-羥基氨基衍生物和4-羥基氨基衍生物。採他子卡的還原率和羥基胺產品的比例依賴於ph。ph10下的還原(0.69nmol/min)比ph9下的還原(0.92nmol/min)慢。30min後，ph10下4-羥基胺對2-羥基胺的比例為2.7:1，ph9下則為9.7:1。因此，ph9下的還原較快，並且主要得到高產率的優選的4-羥基胺產品(圖4)。通過上述的hplc方法沒有測得來自反應的dha或dha-相關的產品。實施例2:外用給藥的乳液中的採他子卡的活化製得指定為a和b的二種乳液。使用時，將它們等量混合。乳液a由e45基質(白色軟石蠟bp14.5％w/w、輕液體石蠟pheur12.6％w/w、低過敏性無水羊毛脂(medilan)1.0％w/w、crookeshealthcareltd,諾丁漢,uk)組成)，每克含有10mg採他子卡、10mgnahco3和90mgna2co3。乳液b含有e45，每克含有100mgdha二聚體。混合組分a和b，製得淡黃色乳液。數小時後轉為棕色，24小時內持續加深。200μg乳液在1ml水中的懸浮液在猛烈攪拌下生成如ph試紙顯示的約ph10的溶液。含有10％上述量的緩衝鹽的乳液的初步實驗給出初始ph相同的溶液。然而，4小時後，如上製備的溶液變中性，且乳液不再加深。這暗示通過改變初始緩衝液濃度，反應的時間和程度能夠得到控制。混合後，在不同時間，提取200μg乳液至1ml的dmso中。然後用50mm碳酸氫銨緩衝液(ph10)將提取物稀釋至1/100，用反相hplc進行分析。開始時，325nm下提取物的分析顯示只有一個主要峰，其為採他子卡(與可信的標準物具有相同的保留時間和uv吸收光譜的光譜匹配)。4小時後，260nm和325nm線下提取物分析觀察到更多的峰(圖5)。將每克含有10mg採他子卡、10mgnahco3和90mgna2co3的乳液a(由e45基質(白色軟石蠟bp14.5％w/w、輕液體石蠟pheur12.6％w/w、低過敏性無水羊毛脂(medilan)1.0％w/w、crookeshealthcareltd,諾丁漢,uk組成)與乳液b(含有e45，每克含有100mgdha二聚體)混合，在不同時間，用1ml的dmso提取200μg乳液，並猛烈攪拌。通過離心分離將提取物變澄清，然後用50mm碳酸氫銨緩衝液(ph10)將提取物稀釋至1/100，用hplc進行分析。將樣品(10μl)注入waterssymmetryshieldrp18柱(150x3.9mm)中，用乙腈的10mm甲酸銨(ph4.5)溶液線性梯度洗脫(1-40％於30分鐘內)。利用tspuv3000掃描檢測器持續監測洗脫液在230～400nm的uv吸收率。a.)混合乳液後立即製備的提取物。b.)混合後4小時來自乳液的提取物。c.)5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺的合成標準物。藍線(在每對線中下面的線)是在260nm下獲得的線，紅線(在每對線中上面的線)是在325nm下獲得的線。約13分鐘獲得的峰是cb1954，約19分鐘獲得的大峰(260nm)來自e45。無法測量提取方法的效率。仍然可以檢測到採他子卡，在保留時間約5.0分鐘下的峰鑑別為採他子卡的4-羥基胺(與可信的標準物具有相同的保留時間且與其uv吸收光譜相匹配)(圖6)。其它峰不對應已知的採他子卡的還原產物，其可能來自dha的氧化，或還原的採他子卡產物與乳液或dha的反應。採他子卡(5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺)的活性形式在e45基乳液中形成。實施例3:採他子卡乳液的外用混合上述製得的乳液，將約0.1g塗覆在健康的人類志願者手指上的疣(成長中，坡面高1.5mm)，用膏藥(plaster)覆蓋。記錄塗覆乳液的初始溫度(warmth)。約4小時後，移去膏藥，觀察到疣已脫落，留下～1mm深的坑。周圍的組織變黃。數天後逐漸轉白，6星期後沒有觀察到疣的再生。也沒有明顯的副作用的報告。將每克含有10mg採他子卡、10mgnahco3和90mgna2co3的乳液a(由e45基質(白色軟石蠟bp14.5％w/w、輕液體石蠟pheur12.6％w/w、低過敏性無水羊毛脂(medilan)1.0％w/w、crookeshealthcareltd,諾丁漢,uk組成)與乳液b(含有e45，每克含有100mgdha二聚體)混合，並塗覆(100μg)至健康的人類志願者手指上的疣(成長中，坡面高1.5mm)，用膏藥(plaster)覆蓋。約4小時後，移去膏藥，觀察到疣已脫落，留下～1mm深的坑。周圍的組織變黃。數天後逐漸轉白，6星期後沒有觀察到疣的再生。也沒有明顯的副作用的報告。1星期後拍攝照片。外用中，採他子卡的活化對疣有明顯的影響，但對周圍的正常組織只有最小的影響。實施例4:膀胱癌的治療膀胱灌注化療或膀胱內化療是通過對患有淺表膀胱癌的患者的膀胱填充藥物以對抗癌細胞。儘管淺表膀胱癌是癌症的早期形式，許多情況下早期移除可將其治癒。然而，直接將藥物與膀胱壁接觸的治療，可有效預防復發或延緩復發。膀胱內化療是一個簡易程序。導管經過尿道插入膀胱。含採他子卡的碳酸氫鹽緩衝液(ph9)慢慢地灌輸2～3分鐘，隨後進行2～3分鐘dha水溶液灌輸。移去導管，2小時後通過排尿排去藥物。實施例5:接近中性ph下前藥的還原分析：hplc分析混合物含有在最終反應體積為1ml的磷酸鈉緩衝液(所需ph)中的測試化合物(100μm)和dha(10mm)。加入dha開始反應，混合物在37℃下培養。每20min抽取試樣(10μl)，隨即通過hplc使用partisphere5c18(4.2x150mm)柱(whatman,maidstone,kent,u.k.]進行分析，以每分鐘2.0ml乙腈水溶液進行梯度洗脫(1-95％，10分鐘內)。使用光電二極體陣列uv-vis檢測器持續監測洗脫液的吸收率。通過外標物的相應的峰面積以及pda掃描確定的合適的波長下的吸收率的定量測定每個樣品中的藥物濃度。通過曲線擬合計算初始率(figp軟體)。注a使用1mm的dha(代替10mm的dha)實施例6:不同的ph值下硝基化合物和前藥的dha還原樣品如實施例5所述進行分析。注a使用1mm的dha(代替10mm的dha)實施例7:nadp+通過α-羥基羰基化合物的還原將10μl測試化合物的試樣(水中濃度為100mm)加入到200μmnadp+水溶液(約990μl)中，緩衝至ph10(1mmnahco3緩衝液)。分析溶液中的測試化合物的最終濃度為1mm。然後，通過光譜光度計測量350nm下吸收率的增加(在2分鐘內)監測nadp+的還原。隨著每分鐘a350的變化記錄初始率。注1.應該在溶液中形成單體。2.使用工業級(>90％)。350nm下觀察到吸收率的任何增加都滯後約60s。3.計算的單體濃度。4.立體異構體的混合。向反應混合物加入1mmedta後沒有觀察到對率造成的影響。5.僅～50％純。350nm下觀察到吸收率的任何增加都滯後約90s。不受理論限制，相信在上述分析中具有還原活性的化合物為α-羥基羰基化合物，其能夠形成式ia所示類型的環二聚體。相反，上述分析中率測得低於0.001(即沒有檢測到還原活性)的化合物包括：丙三醇；乙二醛；d-葡萄糖；二甘醇酸酐；(±)-四氫糠基醇；1,4-二噁烷-2,3-二醇；和2-(羥甲基)四氫吡喃。實施例8:採他子卡通過α-羥基羰基化合物的還原向採他子卡(100μm)和0.1m碳酸氫鈉緩衝液(ph9或ph10)的混合物加入100μl的100mm測試化合物的水溶液獲得最終體積1ml，開始進行分析。在37℃下溫育所述混合物，每6分鐘取試樣(10μl)一次，隨即通過hplc[partisil10scx(4.2×150mm)(whatman,maidstone,kent,u.k.]進行分析，按1.5ml/min的速度以0.13m磷酸鈉(ph5)等度洗脫。通過對應的外標物的峰面積(通過325nm下的吸收率定量)測定每個樣品中的採他子卡濃度。通過曲線擬合計算初始率(figp,biosoft,cambridge,u.k.)。通過相對於可信標準物的保留時間鑑別還原產品。相反，上述分析中測得的初始率低於0.001(即沒有檢測到還原活性)的化合物包括：丙三醇；乙二醛；d-葡萄糖；二甘醇酸酐；(±)-四氫糠基醇；2-(羥甲基)四氫吡喃；4-羥基-2-丁酮；二氯丙酮；1,4-二噁烷-2,3-二醇；和二氯乙醯氯。實施例9:採他子卡大規模還原至相應的羥基胺5-(氮丙啶-1-基)-2,4-二硝基苯甲醯胺(「cb1954」,1.00g,3.97mmol)的甲醇(『analar』-級別，40ml)溶液用過量的無水k2co3粉末(10.0g,72mmol；aprox.18equiv.)處理，攪拌下將混合物加熱至60℃。60℃下n2流氣氛中攪拌懸浮液。然後，在快速攪拌下於15min內將1,3-二羥基丙酮(1.50g作為dha二聚體，8.33mmol；2.1molequiv)的甲醇(『analar』-級別，40ml)溶液(預先充入n2氣除氣)加入到反應混合物中，期間保持60℃的溫度。觀察到快反應，顏色從淡黃橙色轉為棕色。薄層層析法(tlc；鋁板上mercksilicagel60gf254，9:1v/vch2cl2:meoh)顯示定量除去cb1954原料(rf0.73)，形成兩個極性產品(分別在rf0.53和rf0.47)。該兩個產品分別表現出與可信的樣品5-(氮丙啶-1-基)-2-羥基氨基-4-硝基苯甲醯胺和5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺相同的tlc行為，所述可信的樣品由公開的方法[knox,r.j.,friedlos,f.,jarman,m.,roberts,j.j.biochemicalpharmacology37,4661–4669(1988)；knox,r.j.,friedlos,f.,biggs,p.j.,flitter,w.d.gaskell,m.,goddard,p.,davies,l.,jarman,m.biochemicalpharmacology46,797–803(1993)]製得。將反應混合物熱過濾，用低溫甲醇(10ml)洗滌不溶物。冷卻合併的濾液，旋轉蒸發(30℃，高真空)獲得粘稠的黃棕色油(1.02g,>100％)。tlc檢查確定兩個主要產品的存在。在鹼性條件下進行o2氧化所得的2-亞硝基氧化產品和4-亞硝基氧化產品所對應的較小的點(總計<1–2％，rf0.62、0.66)，在操作過程中和處理時都明顯可見。(注意:應儘量向所有裝置充n2氣以減小與空氣的接觸，避免羥胺氧化至亞硝基產品和無謂的帶色的副產品)。判斷2-羥基胺(rf0.53)和4-羥基胺(rf0.47)反應產物形成比例為～40:60。由於異構體洗脫特性相當接近，使用目前的溶劑體系難以對它們進行層析分離。然而，粗混合物樣品(100mg)的快速色譜分離(merck矽膠，60-200目，9:1v/vch2cl2–meoh)在除去餾分中的溶劑後得到5-(氮丙啶-1-基)-2-羥基氨基-4-硝基苯甲醯胺(31mg)和5-(氮丙啶-1-基)-4-羥基氨基-2-硝基苯甲醯胺(49mg)。兩個產品具有與報導的羥基胺的同質異構體的特性一致的nmr圖譜，且tlc行為與可信的化合物無法區分[knox,r.j.,friedlos,f.,jarman,m.,roberts,j.j.biochemicalpharmacology37,4661–4669(1988)]。註：(1)優選的反應溶劑為甲醇。1,3-二羥基丙酮(dha)二聚體在許多普通溶劑(包括丙酮和高級醇)中的溶解性有限度。.(2)60℃下反應幾乎是即時的，但在較低溫度下較慢。使用較高溫度體系對於相對產率有不良的影響。在鹼的存在下，產物羥基胺對空氣氧化表現較敏感，因此建議儘快從反應混合物除去k2co3試劑。含有2-羥基胺產物和4-羥基胺產物的混合物的層析分離要求在處理過程中儘可能減少溶解的物質與o2(空氣)接觸。參考文獻anlezark,g.m.,melton,r.g.,sherwood,r.f.,coles,b.,friedlos,f.&knox,r.j.(1992).thebioactivationof5-(aziridin-1-yl)-2,4-dinitrobenzamide(cb1954)-i.purificationandpropertiesofanitroreductaseenzymefromescherichiacoli-apotentialenzymeforantibody-directedenzymeprodrugtherapy(adept).biochempharmacol,44,2289-95.anlezark,g.m.,melton,r.g.,sherwood,r.f.,wilson,w.r.,denny,w.a.,palmer,b.d.,knox,r.j.,friedlos,f.&williams,a.(1995).bioactivationofdinitrobenzamidemustardsbyane.colibnitroreductase.biochempharmacol,50,609-18.bailey,s.m.,knox,r.j.,hobbs,s.m.,jenkins,t.c.,mauger,a.b.,melton,r.g.,burke,p.j.,connors,t.a.&hart,i.r.(1996).investigationofalternativeprodrugsforusewithe.colinitroreductasein'suicidegene'approachestocancertherapy.genether,3,1143-50.boland,m.p.,knox,r.j.&roberts,j.j.(1991).thedifferencesinkineticsofratandhumandtdiaphoraseresultinadifferentialsensitivityofderivedcelllinestocb1954(5-(aziridin-1-yl)-2,4-dinitrobenzamide).biochempharmacol,41,867-75.bridgewater,j.a.,knox,r.j.,pitts,j.d.,collins,m.k.&springer,c.j.(1997).thebystandereffectofthenitroreductase/cb1954enzyme/prodrugsystemisduetoacell-permeablemetabolite.humgenether,8,709-17.bridgewater,j.a.,springer,c.j.,knox,r.j.,minton,n.p.,michael,n.p.&collins,m.k.(1995).expressionofthebacterialnitroreductaseenzymeinmammaliancellsrendersthemselectivelysensitivetokillingbytheprodrugcb1954.eurjcancer,31a,2362-70.burke,p.j.&knox,r.j.(1998).therapeuticsystemspct/gb98/01731)；wo98/57662.chung-faye,g.,palmer,d.,anderson,d.,clark,j.,downes,m.,baddeley,j.,hussain,s.,murray,p.i.,searle,p.,seymour,l.,harris,p.a.,ferry,d.&kerr,d.j.(2001).virus-directed,enzymeprodrugtherapywithnitroimidazolereductase:aphaseiandpharmacokineticstudyofitsprodrug,cb1954.clincancerres,7,2662-8.cobb,l.m.(1970).toxicityoftheselectiveantitumoragent5-aziridino-2,4-dinitrobenzamideintherat.toxicolapplpharmacol,17,231-238.connors,t.a.&melzack,d.h.(1971).studiesonthemechanismofactionof5-aziridinyl-2,4-dinitrobenzamide(cb1954),aselectiveinhibitorofthewalkertumour.intjcancer,7,86-92.cui,w.,allen,n.d.,skynner,m.,gusterson,b.&clark,a.j.(2001).inducibleablationofastrocytesshowsthatthesecellsarerequiredforneuronalsurvivalintheadultbrain.glia,34,272-82.cui,w.,gusterson,b.&clark,a.j.(1999).nitroreductase-mediatedcellablationisveryrapidandmediatedbyap53-independentapoptoticpathway.genether,6,764-70.felmer,r.,cui,w.&clark,a.j.(2002).inducibleablationofadipocytesinadulttransgenicmiceexpressingthee.colinitroreductasegene.jendocrinol,175,487-98.friedlos,f.,court,s.,ford,m.,denny,w.a.&springer,c.(1998).gene-directedenzymeprodrugtherapy-quantitativebystandercytotoxicityanddnadamageinducedbycb1954incellsexpressingbacterialnitroreductase.genetherapy,5,105-112.friedlos,f.,quinn,j.,knox,r.j.&roberts,j.j.(1992).thepropertiesoftotaladductsandinterstrandcrosslinksinthednaofcellstreatedwithcb1954.exceptionalfrequencyandstabilityofthecrosslink.biochempharmacol,43,1249-54.hu,l.,yu,c.,jiang,y.,han,j.,li,z.,browne,p.,race,p.r.,knox,r.j.,searle,p.f.&hyde,e.i.(2003).nitroarylphosphoramidesasnovelprodrugsfore.colinitroreductaseactivationinenzymeprodrugtherapy.jmedchem,46,4818-21.isles,a.r.,ma,d.,milsom,c.,skynner,m.j.,cui,w.,clark,j.,keverne,e.b.&allen,n.d.(2001).conditionalablationofneuronesintransgenicmice.jneurobiol,47,183-93.knox,r.j.,burke,p.j.,chen,s.&kerr,d.j.(2003).cb1954:fromthewalkertumortonqo2andvdept.currpharmdes,9,2091-104.knox,r.j.,friedlos,f.,biggs,p.j.,flitter,w.d.,gaskell,m.,goddard,p.,davies,l.&jarman,m.(1993).identification,synthesisandpropertiesof5-(aziridin-1-yl)-2-nitro-4-nitrosobenzamide,anoveldnacrosslinkingagentderivedfromcb1954.biochempharmacol,46,797-803.knox,r.j.,friedlos,f.,jarman,m.&roberts,j.j.(1988).anewcytotoxic,dnainterstrandcrosslinkingagent,5-(aziridin-1-yl)-4-hydroxylamino-2-nitrobenzamide,isformedfrom5-(aziridin-1-yl)-2,4-dinitrobenzamide(cb1954)byanitroreductaseenzymeinwalkercarcinomacells.biochempharmacol,37,4661-9.knox,r.j.,friedlos,f.,lydall,d.a.&roberts,j.j.(1986).mechanismofcytotoxicityofanticancerplatinumdrugs:evidencethatcis-diamminedichloroplatinum(ii)andcis-diammine-(1,1-cyclobutanedicarboxylato)platinum(ii)differonlyinthekineticsoftheirinteractionwithdna.cancerres,46,1972-9.knox,r.j.,friedlos,f.,marchbank,t.&roberts,j.j.(1991a).bioactivationofcb1954:reactionoftheactive4-hydroxylaminoderivativewiththioesterstoformtheultimatedna-dnainterstrandcrosslinkingspecies.biochempharmacol,42,1691-7.knox,r.j.,friedlos,f.,sherwood,r.f.,melton,r.g.&anlezark,g.m.(1992).thebioactivationof5-(aziridin-1-yl)-2,4-dinitrobenzamide(cb1954)-ii.acomparisonofanescherichiacolinitroreductaseandwalkerdtdiaphorase.biochempharmacol,44,2297-301.knox,r.j.,jenkins,t.c.,hobbs,s.m.,chen,s.,melton,r.g.&burke,p.j.(2000).bioactivationof5-(aziridin-1-yl)-2,4-dinitrobenzamide(cb1954)byhumannad(p)hquinoneoxidoreductase2:anovelco-substrate-mediatedantitumorprodrugtherapy.cancerres,60,4179-86.knox,r.j.,lydall,d.a.,friedlos,f.,basham,c.,rawlings,c.j.&roberts,j.j.(1991b).thewalker256carcinoma:acelltypeinherentlysensitiveonlytothosedifunctionalagentsthatcanformdnainterstrandcrosslinks.mutatres,255,227-40.knox,r.j.,lydall,d.a.,friedlos,f.,basham,c.&roberts,j.j.(1987).theeffectofmonofunctionalordifunctionalplatinumadductsandofvariousotherassociateddnadamageontheexpressionoftransfecteddnainmammaliancelllinessensitiveorresistanttodifunctionalagents.biochimbiophysacta,908,214-23.li,z.,han,j.,jiang,y.,browne,p.,knox,r.j.&hu,l.(2003).nitrobenzocyclophosphamidesaspotentialprodrugsforbioreductiveactivation:synthesis,stability,enzymaticreduction,andantiproliferativeactivityincellculture.bioorgmedchem,11,4171-8.ma,d.,allen,n.d.,vanbergen,y.c.,jones,c.m.,baum,m.j.,keverne,e.b.&brennan,p.a.(2002).selectiveablationofolfactoryreceptorneuronswithoutfunctionalimpairmentofvomeronasalreceptorneuronsinomp-ntrtransgenicmice.eurjneurosci,16,2317-23.malisza,k.l.&hasinoff,b.b.(1995).doxorubicinreducestheiron(iii)complexesofthehydrolysisproductsoftheantioxidantcardioprotectiveagentdexrazoxane(icrf-187)andproduceshydroxylradicals.archbiochembiophys,316,680-8.mauger,a.b.,burke,p.j.,somani,h.h.,friedlos,f.&knox,r.j.(1994).self-immolativeprodrugs:candidatesforantibody-directedenzymeprodrugtherapyinconjunctionwithanitroreductaseenzyme.jmedchem,37,3452-8.sheard,c.e.,double,j.a.&berenbaum,m.c.(1971).thesensitivitytochemopherapeuticagentsofarattumourgrowninimmunosuppressedmice.brjcancer,25,838-844.workman,p.,morgan,j.e.,talbot,k.,wright,k.a.,donaldson,j.&twentyman,p.r.(1986a).cb1954revisited.ii.toxicityandantitumouractivity.cancerchemotherpharmacol,16,9-14.workman,p.,white,r.a.&talbot,k.(1986b).cb1954revisited.i.dispositionkineticsandmetabolism.cancerchemotherpharmacol,16,1-8.wu,k.,knox,r.,sun,x.z.,joseph,p.,jaiswal,a.k.,zhang,d.,deng,p.s.&chen,s.(1997).catalyticpropertiesofnad(p)h:quinoneoxidoreductase-2(nqo2),adihydronicotinamideribosidedependentoxidoreductase.archbiochembiophys,347,221-8.通過參考的方式併入本文中提及的所有文獻的全部內容。當前第1頁12當前第1頁12