Dmmt純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法
2023-07-26 16:42:21
專利名稱：Dmmt純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法
技術領域：
本發明屬於醫藥中間體的質量分析檢測領域，特別是一種DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法。
背景技術：
頭孢替安鹽酸鹽是由日本武田公司研發於1981年首次在日本上市的第二代半合成頭孢菌素。對革蘭陽性菌的作用與頭孢唑啉接近，對革蘭陰性菌，如嗜血桿菌、大腸埃希菌、克雷伯桿菌、奇異變形桿菌等作用較優。用於治療敏感菌所致的感染以及手術和外傷所致的感染和敗血症等。·
頭孢替安鹽酸鹽是一種新藥，目前藥典中沒有此藥的檢測方法，文獻中曾報導過Grand電位滴定法和HPLC法。這幾類檢測方法僅針對頭孢替安鹽酸鹽成品含量，沒有對頭孢替安鹽酸鹽中間體DMMT (N, N- 二甲基氨基乙基-5-巰基-四氮唑)的檢測做出描述。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法，以克服現有檢測方法上的缺陷，滿足企業對生產過程和成品質量控制方面的要求。本發明所述的DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法，以色譜乙腈和磷酸鹽緩衝液為流動相，利用高效液相色譜法檢測，純度以面積歸一法計算，含量以外標法按峰面積計算。包括如下步驟(I)流動相的配製色譜乙腈和磷酸鹽緩衝液按體積比1:8、充分混合，用稀磷酸調節PH值至6. (Γ6. 5，用O. 45 μ m有機過濾膜抽濾；(2)洗脫方式高效液相色譜法採用恆流速等梯度洗脫；(3)設定色譜條件色譜柱使用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，柱長15 25cm，檢測波長254 260nm，柱溫15 35°C，流速I 1. 2mL/min ；(4)檢測進樣量10 20μ L ;(5)頭孢替安對照品配製濃度為O. 2^0. 3mg/mL ；(6)中間體DMMT樣品的配製濃度是O. 5 lmg/mL ；(7)頭孢替安鹽酸鹽樣品的配製濃度是O. 2^0. 3mg/mL。其中步驟(I)中磷酸鹽緩衝液的pH為6. 0-8. 0，配製為取磷酸二氫鉀溶液250ml，加O. 2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至IOOOmL,搖勻，即得。步驟(5)中頭孢替安對照品為中國藥品生物製品檢定所提供。儀器配置使用高效液相色譜儀，島津LC-20A，LCsolution工作站。中間體DMMT溶液的配製精密稱取DMMT樣品12. 5mg^25mg於25ml容量瓶中，力口流動相稀釋至刻度。製備出的頭孢替安鹽酸鹽樣品溶液的配製精密稱取頭孢替安鹽酸鹽樣品20mg^30mg於IOOml容量瓶中，加適量流動相超聲溶解，然後稀釋至刻度。洗脫方式恆流速等梯度洗脫。與現有技術相比，本發明具有以下優點實現了頭孢替安鹽酸鹽中間體和成品使用同一條件檢測，且溶液穩定，準確度高(相對誤差彡O. 3%)，精密度好(同一個樣品每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差彡O. 8% ；每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差<1. 5%)。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明做進一步說明。實施例1量取IOOmL色譜乙腈，加入900mL磷酸鹽緩衝液(pH7. 0，磷酸鹽緩衝液的配製為取磷酸二氫鉀溶液250ml，加O. 2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至IOOOmL,搖勻，即得。)混勻，抽濾。設定檢測波長254nm,流速1. OmL/min,柱溫30°C,使用15cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品O. 0165g於25mL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< O. 3%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差彡O. 8%。測得的此批樣品純度值為98. 9%，精密稱取由此DMMT生產出的頭孢替安鹽酸鹽樣品O. 0223g於IOOmL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< O. 5%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差彡1. 0%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為85. 9%，收率為146%。實施例2量取IOOmL色譜乙腈，加入800mL磷酸鹽緩衝液(pH6. O)混勻，抽濾。設定檢測波長254nm，流速1. 2mL/min,柱溫15°C，使用25cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品O. 0181g於25mL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< O. 4%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差< O. 7%。測得的此批樣品純度值為99. 1%，精密稱取由此DMMT生產出的頭孢替安鹽酸鹽樣品O. 0241g於IOOmL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< O. 3%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差<1. 1%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為86. 3%，收率為150%。實施例3量取IOOmL色譜乙腈，加入850mL磷酸鹽緩衝液(pH8. O)混勻，抽濾。設定檢測波長260nm，流速1. OmL/min,柱溫35°C，使用15cm C18色譜柱。精密稱取DMMT樣品0. 0205g於25mL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< 0. 6%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差<1. 3%。測得的此批樣品純度值為98. 8%，精密稱取由此DMMT生產出的頭孢替安鹽酸鹽樣品0. 0218g於IOOmL容量瓶中，加入適量流動相超聲溶解，並稀釋至刻度，進樣20 μ L，每隔I小時連續進樣5次，相對標準偏差< 0. 7%，每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差<1. 2%。此批頭孢替安鹽酸鹽含量為85. 8%，收率為145%。
權利要求
1.一種DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法，其特徵在於以色譜乙腈和磷酸鹽緩衝液為流動相，利用高效液相色譜法檢測，純度以面積歸一法計算，含量以外標法按峰面積計算。
2.根據權利要求1所述的DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法，其特徵在於包括如下步驟(1)流動相的配製色譜乙腈和磷酸鹽緩衝液按體積比1:8、充分混合，用稀磷酸調節 pH值至6. 0 6· 5，用O. 45 μ m有機過濾膜抽濾；(2)洗脫方式高效液相色譜法採用恆流速等梯度洗脫；(3)設定色譜條件色譜柱使用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，柱長15 25cm，檢測波長254 260nm，柱溫15 35°C，流速I 1. 2mL/min ；(4)檢測進樣量10 20yL;(5)頭孢替安對照品配製濃度為O.2^0. 3mg/mL ；(6)中間體DMMT樣品的配製濃度是O.5 lmg/mL ；(7)頭孢替安鹽酸鹽樣品的配製濃度是O.2^0. 3mg/mL。
3.根據權利要求2所述的DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法，其特徵在於步驟(I)中磷酸鹽緩衝液的pH為6. 0-8. O。
全文摘要
本發明屬於醫藥中間體的質量分析檢測領域，特別是一種DMMT純度及製備出的頭孢替安鹽酸鹽含量的檢測方法。以色譜乙腈和磷酸鹽緩衝液為流動相，利用高效液相色譜法檢測，中間體以面積歸一法計算，含量以外標法按峰面積計算。流動相為色譜乙腈和pH為7.0的磷酸鹽緩衝液按體積比1:8~9充分混合，用稀磷酸調節pH值至6.0~6.5，用0.45μm有機過濾膜抽濾。實現了頭孢替安鹽酸鹽中間體和成品使用同一條件檢測，且溶液穩定，準確度高(相對誤差≤0.3%)，精密度好(同一個樣品每隔1小時連續進樣5次，相對標準偏差≤0.8%；每隔2小時連續進樣5次，相對標準偏差≤1.5%)。
文檔編號G01N30/88GK103018386SQ20121051445
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月4日 優先權日2012年12月4日
發明者王永豔, 徐繼英, 董年亮, 宋琳琳 申請人:山東鑫泉醫藥有限公司