具有協同作用的藥物組合物及其製備方法與用途的製作方法

2023-07-25 11:24:56 2

專利名稱：具有協同作用的藥物組合物及其製備方法與用途的製作方法
技術領域：
本發明屬於一種中藥提取物與植物提取物組成的具有協同作用的組合物及其製備方法，以及在製備保健品或藥品中的應用。
背景技術：
剌五加又稱五加參，是中藥五加皮的一種，具有扶正固本、益智安神、補腎健脾等功效。現代化學成分及藥理研究證明刺五加中主要活性成分總甙及多糖對中樞神經系統、免疫系統及內分泌代謝等有促進及調節作用。沙棘含有豐富的生物活性物質，對心血管系統、免疫系統、抗炎、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射損傷等方面具有顯著的藥理效應。
國內對刺五加或沙棘油的藥效、藥理的研究報導很多，由刺五加與沙棘油各自或者分別與其它成份配伍組方製成的藥品或醫藥保健品也有很多。

發明內容
本發明要解決的技術問題是研製一種中藥提取物與植物提取物組成的具有協同作用的組合物及其製備方法，以及在製備保健品或藥品中的應用。具體為以中藥提取物與植物提取物為主藥，添加或不添加適當輔料，製備各類保健組合物或藥用組合物，用於提高免疫、增加人體對有毒物質或不利於人體環境的抵禦能力，如解毒能力等。
為解決上述問題，本發明提供如下技術方案。
一種具有免疫調節、抗應激、抗衰老、解毒作用的組合物，其特徵在於基本上由沙棘油與刺五加的乙醇和/或水提取物的浸膏粉組成。沙棘油與刺五加浸膏粉的重量比為1.5～3∶1份。沙棘油與刺五加浸膏粉的較好的重量比為2∶1份。
一種具有免疫調節、抗應激、抗衰老、解毒作用的組合物，是基本上由沙棘油與刺五加浸膏粉以及食品添加劑或藥學上可接受的輔料組成的口服製劑。如基本上由沙棘油與刺五加浸膏粉以及助懸劑與乳化劑組成的常規軟膠囊。
所述組合物，其特徵在於軟膠囊內含沙棘油、刺五加浸膏粉、助懸劑、乳化劑的重量比為1.5～3∶1∶0.15～0.3∶0.01～0.03份；軟膠囊膠皮基本由明膠、增塑劑、水、遮光劑按重量比1∶0.3～0.6∶1～1.5∶0.00045～0.0009份組成。軟膠囊內含沙棘油、刺五加浸膏粉、助懸劑、乳化劑的較好的重量比為2～2.5∶1∶0.17～0.25∶0.015～0.02份；軟膠囊膠皮基本由明膠、增塑劑、水、遮光劑按較好的重量比1∶0.4～0.5∶1.2～1.4∶0.00025～0.0005份組成。
前述組合物的特徵在於助懸劑是蜂蠟、阿拉伯膠和/或西黃耆膠；乳化劑是司盤類和/或卵磷脂；增塑劑是甘油和/或山梨醇；遮光劑是可食用或藥用色素。
所述組合物的製備方法是按配方量，取沙棘油與助懸劑混合，加熱熔融，冷卻，加入乳化劑，混勻，加入研細的刺五加浸膏粉，製成混懸藥液；取明膠、增塑劑、水、遮光劑配成明膠液；用軟膠囊壓製機將混懸藥液與明膠液製成軟膠囊。
較好的製備方法為按重量比，取沙棘油1.5～3份與蜂蠟0.15～0.3份混合，加熱熔融，冷卻至60℃～30℃，加入卵磷脂0.01～0.03份，混勻，加入研細的刺五加浸膏粉1份，製成混懸藥液；取明膠、甘油、水、遮光劑按重量比1∶0.3～0.6∶1～1.5∶0.00045～0.0009份配成明膠液；用軟膠囊壓製機將混懸藥液與明膠液製成軟膠囊。
沙棘系胡頹子科植物沙棘Hippophae rhamnades L.的乾燥成熟果實。秋、冬二季果實成熟或凍硬時採收，除去雜質，乾燥或蒸後乾燥備用。沙棘的主要成分為不飽和醛類，維生素類，五環三萜類，甾醇類等。可取沙棘乾燥果實，採用超臨界二氧化碳萃取技術，以二氧化碳為工作介質，以較低的加工溫度(＜58℃和加工工藝過程全部受二氧化碳氣體保護的獨立工藝特點，最大限度防止有效生物活性物質的受熱分解和氧化破壞作用，提出純天然沙棘籽油，不含任何有機溶劑及其它化學合成物質。沙棘油亦可市購，生產商有北京星龍萃取工程有限公司。
刺五加本品系五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus(Rupr.et Maxim.)Harms的乾燥，根及根莖或莖，春秋二季採收，洗淨，乾燥備用。刺五加主要成分為刺五加苷、甾醇、三萜皂苷、多糖等。可取刺五加1000g，粉碎成粗粉，加7倍量的75％乙醇連續回流提取12小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮，乾燥成浸膏粉50g。刺五加浸膏粉亦可市購(生產商有黑龍江省沙河子農場)。
本發明將沙棘油與刺五加浸膏粉組配，製備的組合物產生協同的藥理作用。與單獨使用沙棘油或刺五加浸膏粉相比，本發明保健組合物或藥物組合物的毒性顯著減小，增強免疫功能及抗應激的有效劑量顯著減小，且可降低血漿LPO含量，增強老年鼠SOD活性，具有相對廣泛的解毒譜，解毒作用增強，解毒範圍擴大。具體數據如下1.急性毒性試驗本發明組合物的最大給藥量為62.0g/kg(其中含沙棘油41.3g/kg，刺五加20.6g/kg)，為臨床人日用量的2000倍。
而沙棘油最大給藥量為25g/kg，LD50＞45.0g/kg，刺五加流浸膏LD50為14.5g/kg。說明合用後毒性減小。
2.藥效試驗表明2.1對免疫功能的影響沙棘油與刺五加合用0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg(其中每個劑量含刺五加1份，沙棘油2份)劑量，即可增強免疫功能的作用。
而文獻報導刺五加醇提取物25g/kg和50g/kg，沙棘油50％混懸液具有增強免疫功能的作用，參見黑龍江省中國醫藥研究所《中草藥》1980，11(7)313；許維楨等，《中草藥》1987，18(10)22；鍾飛等，《中國藥理學通報》1989，5(5)307；《山西醫藥》1989，18(1)9。說明本發明組合物對免疫功能具有協同作用，劑量減少。
2.2抗應激試驗沙棘油與刺五加合用0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg具有抗應激作用。而刺五加20g/kg，3g/kg具有抗應激作用，說明本發明組合物對抗應激具有協同作用。
2.3抗衰老作用沙棘油與刺五加合用0.31g/kg，0.62g/kg和1.24g/kg能增強老年鼠SOD活力，使血漿LPO含量降低。
據江蘇省科技查新諮詢中心的查新報告及文獻未見刺五加和沙棘油有類似的報導。
2.4解毒作用沙棘油和刺五加合用可延長二甲苯、甲醛、敵百蟲，偏二甲肼致小鼠的存活時間，減少死亡數，具有解毒作用。
而文獻報導刺五加多糖可提高機體對磷酸二甲酚酯，士的寧和吉他林的解毒能力，延長存活時間，未見有報導對二甲苯、甲醛、敵百蟲的解毒作用。說明本發明組合物解毒作用增強，解毒譜更廣。
具體實施例方式
沙棘油購於北京星龍萃取工程有限公司，批號]000316。
刺五加成浸膏粉購於黑龍江省沙河子農場，批號000503。
實施例1內容物處方刺五加 110g沙棘油 228g蜂蠟 16.5g卵磷脂 1.1g製成軟膠囊 1000粒膠皮配方明膠1000份、甘油300份、水1350份、亮藍0.45份1.取蜂蠟1份與沙棘油12.8份加熱熔融，冷卻至60度以下，加入卵磷脂，研磨使混勻，備用。
2.取刺五加浸膏粉6.1份研細，過180目篩，加入1中，研磨製成混懸液，密閉備用。
3.取明膠1000份、甘油300份、水1350份、亮藍0.45份適量配製明膠溶液。藥液與明膠液用軟膠囊壓製機製成膠丸。
實施例2內容物處方刺五加110g沙棘油236g蜂蠟 20g卵磷脂2.3g製成軟膠囊1000粒膠皮配方明膠1000份、甘油500份、水1500份、蘋果綠0.50份製法同上。
實施例3內容物處方刺五加110g沙棘油250g蜂蠟 22g卵磷脂1.5g製成軟膠囊1000粒膠皮配方明膠1000份、甘油250份、山梨醇150份、水1000份、亮藍0.55份製法同上。
實施例4內容物處方刺五加110g沙棘油286g蜂蠟 24g卵磷脂1.9g製成軟膠囊1000粒膠皮配方明膠1000份、甘油200份、山梨醇120份、水1200份、亮藍0.48份製法同上。
實施例5前述實施例中製備的本發明組合物的軟膠囊製劑經質量檢測，質量符合2000版藥典規定項目下的各項規定。外觀整潔，無破損、滲漏、粘結、變形等現象。含量測定採用高效液相色譜法和分光光度法測定，有效部位含量穩定。穩定性試驗表明本發明軟膠囊常溫下放樣3個月後考察，質量符合2000版藥典規定項目下的各項規定，性質穩定可靠，無崩解遲緩現象發生。
實施例6本發明組合物與沙棘籽油和刺五加浸膏的對比實驗一、急性毒性試驗比較1.沙棘籽油最大給藥為25g/kg，48h未見死亡及異常，LD50＞45.0g/kg。參見程娟等，沙棘果油的急性毒性及其對實驗性肝損傷的保護作用《中國中藥雜誌》1990，15(1)452.刺五加流浸膏灌胃的LD50為14.5g/kg。參見黃正良，刺五加的藥理研究，《陝西新醫藥》1982，11(10)52；王本祥主編，《現代中藥藥理學》天津科學技術出版社，1997，11月，第11版3.本發明組合物未能測出LD50，最大給藥量為62.0g/kg，其中刺五加20.6g/kg，沙棘油41.3g/kg。(既每個劑量含刺五加1份，沙棘油2份)該劑量為臨床人日用量2000倍，等效量181倍。
方法取昆明種小鼠40隻，體重18.0-22.0g，按體重分層隨機分為2組，(1)本發明組合物組；(2)空白對照組，試驗前禁食(不禁水)12h，用1.55g/ml(最大濃度)灌胃給藥，灌胃容量0.4ml/10g鼠重，24小時內灌藥1次，空白對照組給予等量生理鹽水，連續觀察1周，記錄受試小鼠活動，行為，攝食量，體重，及死亡情況，未死小鼠1周後處死進行屍檢。
結果按62.0g/kg劑量經口服給予本發明組合物的20隻小鼠，當日及以後見小鼠活動行為無異常，攝食量、體重等與空白對照組無明顯差異，1周內無死亡及其它異常發生，2組同時處死進行屍檢，各主要臟器(心、肝、脾、肺、腎)經肉眼觀察無異常改變，與空白對照組無明顯差異。
毒性評價本發明組合物小鼠經口給藥未能測出LD50，小鼠經口最大給藥量試驗結果表明，20隻小鼠給藥後無明顯毒性反應，1周內無死亡，因此本發明組合物經口給藥的小鼠最大給藥量為62.0g/kg.如按臨床1日口服1.86g/60kg計算，則該藥的小鼠1日灌胃藥量為臨床1日口服量的2000倍，即等效劑量的181.8倍。
二、對免疫功能的影響1、刺五加醇提取物25g/kg和50g/kg，給小鼠灌胃14d，可明顯增強小鼠網狀內皮系統吞噬碳粒的功能。刺五加醇提取物20g/kg，給小鼠灌胃7d，用SRBC免疫小鼠，可增強免疫功能。
2、沙棘籽油50％混懸液0.4ml/只，連續給藥7d，對小鼠血清溶血素，腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數均有顯著提高。參見許維楨等，沙棘籽油對但胺氧化酶及免疫功能的影響《中草藥》1987，18(10)22鍾飛等，沙棘總黃酮對動物非特異性免疫功能的影響《山西醫藥》1989，18(1)9。
3、本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg，3.10g/kg(既每個劑量含刺五加1份，沙棘油2份)能促進所致免疫功能低下小鼠溶血素抗體生成，促進網狀細胞吞噬功能，促進DTH反應，增加小鼠外周血中T淋巴細胞數量。
方法對環磷醯胺(Cy)所致免疫功能低下小鼠免疫器官的影響取KM小鼠60隻，體重18--20g，雌雄各半，隨機分6組(1)空白對照組等量NS，(2)模型對照組等量NS，(3)左旋咪唑組0.1g/kg(4)本發明組合物低劑量組0.78g/kg(5)本發明組合物中劑量組1.55g/kg，(6)本發明組合物高劑量組3.10g/kg，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。除空白對照組外，其餘各組於給藥第4天和第8天分別iP50mg/kgCy，以造成免疫功能低下動物模型，並與末次給藥後2h處死，分離脾臟和胸腺稱重，比較各組間差異。
結果本發明組合物三個劑量組均可增加Cy所致免疫功能低下小鼠脾和胸腺的重量，具有對抗Cy的免疫抑制作用。
對Cy所致免疫功能低下小鼠溶血素抗體(IgM)生成的影響取KM小鼠60隻，體重17-21g，隨機分6組，雌雄各半，每組10隻，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。於給藥第四天，每鼠腹腔注射20％SRBC懸液進行免疫，除空白對照組，其餘各組於免疫第二天iP 60mg/kgCy，一次造成免疫功能低下動物模型，末次給藥後1h，眼球取血，分離血清，取50ul，加至2mlSA液中混勻。取1ml，加10％SRBC，0.5ml，10％豚鼠血清1ml，另取不加血清的對照管，置37℃恆溫水浴箱30min後，立即置冰浴中終止反應，2000rpm離心10min，取上清液1ml加入都氏液2ml，搖勻後放置10min，於540nm處測OD值，SRBC半數溶血值為10％SRBC 0.25ml加都氏試劑4ml，於540nm處測定OD值。
結果本發明組合物三個劑量組均可促進Cy致免疫功能低下小鼠溶血素抗體的生成，具有增強體液免疫的作用。
對Cy致免疫功能低下小鼠單核細胞吞噬功能的影響取KM小鼠60隻，體重18--22g，雌雄各半，隨機分6組，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。除空白對照組外，其餘各組於給藥第4天和第8天分別iP60mg/kgCy，並與末次給藥後30min處死，尾靜脈注入墨汁(0.1ml/10g鼠重)，於注射後2min、12min分別從眼眶後靜脈從取血20ul，立即置2ml 0.1％Na2CO3溶液中，搖勻後，於680nm處測OD值，並處死小鼠，取肝脾稱重，計算廓清指數K和廓清係數a，比較各組間差異。
結果本發明組合物1.55g/kg和3.10g/kg劑量組可明顯增強小鼠碳粒廓清指數K值和廓清係數a值，0.78g/kg劑量組可增強碳粒廓清指數K值，提示本發明組合物具有促進血液中異物的廓清速度，能對抗Cy的所致免疫功能低下小鼠單核細胞吞噬功能減退的作用，並隨劑量增加作用增強。
本發明組合物對Cy致免疫功能低下小鼠DNCB致DTH反應取KM小鼠60隻，體重18--22g，雌雄各半，隨機分6組，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。於給藥5天後，用8％Na2S脫去小鼠腹部皮膚毛，面積約1cm2，並均勻塗布1％DNCB溶液50ul，致敏，次日同法加強一次，並於致敏當日iP50mg/kg Cy，次日加強一次，並於末次給藥30min後，於各組小鼠右耳兩面均勻塗布1％DNCB溶液20ul，攻擊，20h後脫頸椎處死小鼠，用8mm打孔器取下同部位左右兩耳片，稱重，以兩耳稱重差異表示DTH反應的強弱。
結果本發明組合物三個劑量組均可增強DNCB致DTH反應，1.55g/kg 3.10g/kg劑量組可增加胸腺重量，提示本發明組合物能使Cy誘導小鼠DTH過低模型調節至正常水平，具有調節細胞免疫的作用。
本發明組合物對免疫功能低下小鼠外周血中T淋巴細胞脂酶的作用取KM小鼠60隻，體重18--22g，雌雄各半，隨機分6組，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。除空白對照組外，其餘各組於給藥第4天和第8天分別iP60mg/kgCy造成免疫功能低下動物模型，並與末次給藥後1h小鼠尾梢取血推片，浸入孵育液37℃，1％孔雀綠染色，油鏡檢查，計數100個淋巴細胞，計算T淋巴細胞％。(ANAE陽性細胞)。
結果本發明組合物三個劑量組可明顯增強外周血中T淋巴細胞數量，對抗Cy的免疫抑制作用。
三、抗應激試驗1、刺五加醇浸膏按3g/kg灌服，能增強小鼠對高溫(45-48℃)和低溫(0-10℃)的耐受力，刺五加浸膏20g/kg(生藥)，給小鼠灌胃，具有抗疲勞作用。參見吳秉純等，刺五加扶正固本藥理作用的研究I《黑龍江中醫藥》1981，(4)37；吳秉純等，刺五加藥理作用研究《中醫藥學報》1985，(2)29；周楚，李文寧，師海波等，刺五加藥理研究進展《中藥藥理與臨床》1992，8(6)36。
2、本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg，3.10g/kg能明顯延長小鼠耐常壓缺氧時間，延長小鼠遊泳時間，延長斷頭小鼠喘氣時間，提高高溫和寒冷條件下小鼠的存活率。
方法對小鼠耐常壓缺氧時間的影響取ICR小鼠50隻，體重15--17g，雌雄各半，隨機分5組(1)空白對照組等量NS，(2)生脈液組10ml/kg，(3)本發明組合物低劑量組0.78g/kg(4)本發明組合物中劑量組1.55g/kg，(5)本發明組合物高劑量組3.10g/kg，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。末次給藥後45min，將小鼠放入盛有15g鈉石灰的的廣口瓶內，每次每組各取1隻小鼠放入瓶內，用凡士林抹瓶口蓋嚴，立即記錄密封瓶口至呼吸停止的時間。
結本發明組合物三個劑量組均可使小鼠耐常壓缺氧時間延長，提示本發明組合物具有耐缺氧作用。
對小鼠遊泳時間的影響取ICR小鼠50隻，體重15--18g，雌雄各半，隨機分5組，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。末次給藥後30min，將小鼠置玻璃缸內(水深20cm，水溫20±0.5℃)小鼠負重10％。遊泳，記錄小鼠自投入水中至頭部不浮出水面的時間為遊泳時間。
結果本發明組合物三個劑量組均可明顯延長小鼠遊泳時間，提示本發明組合物具有抗疲勞作用，並隨劑量增加效應增強。
對小鼠斷頭後張口喘氣時間的影響取ICR小鼠50隻，體重15--18g，雌雄各半，隨機分5組，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。末次給藥後1h，將小鼠逐只斷頭，立即按秒表記錄小鼠斷頭後至張口喘氣停止時間。
結果本發明組合物三個劑量組均能明顯延長小鼠斷頭張口喘氣時間，提示本發明組合物具有對腦缺血的保護作用。
對小鼠耐高溫試驗的影響取ICR小鼠80隻，體重15--17g，雌雄各半，隨機分5組，每組16隻，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。末次給藥後1h，各組取8隻小鼠，每隻小鼠放入單籠後置45±1℃恆溫箱內，90min後取出，統計各組小鼠存活數，計算存活百分率。
結果本發明組合物三個劑量組均可明顯提高小鼠在高溫條件下的存活數，存活率分別為81.3％，87.5％，87.5％。提示本發明組合物具有改善機體器官生理功能，增強機體耐高溫的能力。
對小鼠耐寒試驗的影響取ICR小鼠80隻，體重15--17g，雌雄各半，隨機分5組，每組16隻，分組同上，以上各組小鼠均灌胃給藥，灌胃容量20ml/kg，1次/天，連續10天。末次給藥後1h，各組取8隻小鼠，每隻小鼠放入單籠後置-15±1℃冰箱內，90min後取出，統計各組小鼠存活數，計算存活百分率。
結果本發明組合物三個劑量組均可明顯提高小鼠在寒冷環境中的存活數，存活率分別為81.3％，87.5％，93.8％，提示本發明組合物具有增強機體氧化分解產熱過程，提高機體對寒冷刺激的反應。
四、抗衰老試驗本發明組合物0.31g/kg，0.62g/kg和1.24g/kg能顯著提高老年大鼠血清SOD活力，使血漿LPO含量降低。
方法本發明組合物對老年大鼠SOD和LPO的影響取老年SD大鼠，11月齡，雌雄各半，體重250-350g，隨機分5組，每組10隻。(1)空白對照組，等量NS(2)生脈液組10ml/kg(3)低劑量組0.31g/kg(4)中劑量組0.62g/kg(5)高劑量組1.24g/kg 以上各組大鼠均灌胃給藥，灌胃容量10ml/kg，1次/天×90天，給藥期間，每隔10天記錄各組動物進食量和體重，並觀察動物活動及健康情況。末次給藥後禁食(不禁水)12小時。次日晨腹腔注入2％戊巴比妥鈉0.1ml/100g鼠重，麻醉後，固定分離頸動脈，取血，測RBC值和Hb含量，分離血清，測定SOD活力和LPO含量，比較各組間差異。
結果本發明組合物的三個劑量組均可顯著提高老年大鼠血清SOD活力，使血漿LPO含量顯著降低，與生理鹽水組比較(P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)。同時能明顯升高RBC值和Hb含量，與生理鹽水組比較(P＜0.01，p＜0.001)，提示本發明組合物具有加速清除體內自由基及脂質過氧化產物，減少細胞損傷，抗衰老和促進骨髓造血功能的作用。
五、解毒試驗1、刺五加可減少青蛙因注入洋地黃毒甙引起的死亡率，提高機體對磷酸二甲酚酯，士的寧和吉他林的解毒能力，刺五加高糖對硫代乙醯胺所致小鼠肝中毒有明顯改善。刺五加能使每日給予絕對致死量的硝苯硫磷脂醯胺(40mg/kg)的動物平均壽命從對照組的3.6日延長到5.7日。
2、本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg能明顯延長二甲苯致小鼠死亡時間，減少死亡率，保護率分別為68.4％，63.2％和63.2％。可使甲醛致小鼠死亡率降低，保護率分別為75％、80％和90％。並可延長存活時間。明顯降低敵百蟲致小鼠死亡數，保護率分別為63.16％，63.16％和84.21％，並可延長存活時間，可明顯降低偏二甲肼致小鼠死亡數，保護率分別為75.0％和81.2％。
方法本發明組合物對二甲苯致小鼠死亡的保護作用取ICR小鼠76隻，♀♂兼用，體重18～22，隨機分4組，每組19隻。(1)空白對照組等量NS，(2)生脈液組10ml/kg，(3)本發明組合物低劑量組0.78g/kg(4)本發明組合物中劑量組1.55g/kg，(5)本發明組合物高劑量組3.10g/kg，以上各組動物均灌胃給藥，給藥容量20ml/kg，1次/d×15d，末次給藥45min後，取各組動物置4×4L的有機玻璃箱內，將二甲苯用超聲波霧化器霧化後緩緩噴入，連續15min，觀察各組小鼠死亡時間和死亡數，比較各組間差異。
結果本發明組合物0.78g/kg、1.55g/kg和3.10g/kg劑量組能明顯延長二甲苯致小鼠死亡的時間，減少死亡數，存活率分別為68.42％、63.16％和63.16％，與生理鹽水組比較具有非常顯著性差異，提示本發明組合物對二甲苯致小鼠死亡具有明顯保護作用。
本發明組合物對甲醛致小鼠死亡的保護作用取ICR小鼠80隻，♀♂兼用，體重18～22，隨機分4組，每組20隻。分組同上，以上各組動物均灌胃給藥，給藥容量20ml/kg，1次/d×15d，末次給藥45min後，取各組動物置4×4L的有機玻璃箱內，將甲醛霧化後緩緩噴入，連續10min，觀察各組小鼠死亡時間和死亡數，比較各組間差異。
結果本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可使甲醛致小鼠死亡率降低，保護率分別為75％、80％和90％。並可延長存活時間，與生理鹽水組比較具有非常顯著性差異，提示本發明組合物對甲醛致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
本發明組合物對敵百蟲致小鼠死亡的保護作用取ICR小鼠76隻，♀♂兼用，體重18～22，隨機分4組，每組19隻。分組同上，以上各組動物均灌胃給藥，給藥容量20ml/kg，1次/d×15d，末次給藥45min後，取敵百蟲適量，配成0.1038g/ml濃度，灌胃給予敵百蟲，灌胃容量0.2ml/10g，立即觀察動物活動、行為及死亡情況，觀察時間為72小時。比較各組間差異。
結果本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可明顯降低敵百蟲致小鼠死亡數，保護率分別為63.16％，63.16％和84.21％，並可延長存活時間，與生理鹽水組比較具有顯著性差異，提示本發明組合物對敵百蟲致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
本發明組合物對偏二甲肼致小鼠死亡的影響取ICR小鼠64隻，♀♂兼用，體重18～22，隨機分4組，每組16隻。分組同上，以上各組動物均灌胃給藥，給藥容量20ml/kg，1次/d×15d，末次給藥45min後，取偏二甲肼適量，配成10.43×10-3g/ml濃度，灌胃給予偏二甲肼，灌胃容量0.2ml/10g，立即觀察動物活動、行為及死亡情況，觀察時間為72小時。給予偏二甲肼後，小鼠行為興奮，死亡時呈驚厥狀態，可見翹尾，奔跑現象。
結果本發明組合物1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可明顯降低偏二甲肼致小鼠死亡數，保護率分別為75.0％和81.2％，與生理鹽水組比較具有顯著性差異，提示本發明組合物對偏二甲肼致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
試驗結果表明1、對免疫功能的影響試驗結果表明(1)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能增加環磷醯胺(Cy)所致免疫功能低下小鼠免疫器官脾和胸腺的重量，與模型對照組比較，P＜0.05、P＜0.01較，提示本發明組合物具有對抗Cy的免疫抑制作用。
(2)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能促進Cy所致免疫功能低下小鼠溶血素抗體(IgM)的生成。HC50與模型對照組比較P＜0.01、P＜0.001，提示本發明組合物具有增強體液免疫的作用。
(3)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能促進Cy所致免疫功能低下小鼠單核細胞吞噬功能的作用。廓清指數K值和廓清係數a值與模型對照組比較P＜0.05、P＜0.01。提示本發明組合物具有對抗Cy所致免疫功能低下小鼠單核細胞吞噬功能減退的作用。並隨劑量增加，作用增強。
(4)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能增加Cy所致免疫功能低下小鼠DNCB所致DTH反應具有明顯的調節作用，胸腺係數和兩耳重量差異與模型對照組比較，P＜0.01和P＜0.05。提示本發明組合物能將Cy誘導小鼠DTH過低模型調節到正常水平，具有調節細胞免疫的作用。
(5)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能增加Cy所致免疫功能低下小鼠外周血中T淋巴細胞數量，ANAE陽性細胞數分別為29.9±6.39，30.1±6.39，34.0±7.14。提示本發明組合物具有對抗Cy的免疫抑制作用，增強免疫功能的作用。
2、抗應激試驗結果表明(1)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能明顯延長小鼠耐常壓缺氧時間，與生理鹽水組比較P＜0.05、P＜0.01。提示本發明組合物具有明顯增強小鼠耐缺氧能力。
(2)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能明顯延長小鼠遊泳時間，與生理鹽水組比較P＜0.05、P＜0.01和P＜0.001。提示本發明組合物具有抗疲勞作用。
(3)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組能明顯延長小鼠喘氣時間，與生理鹽水組比較P＜0.01。提示本發明組合物具有降低腦耗氧的作用。
(4)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組可明顯提高小鼠在高溫條件下的存活率，與生理鹽水組比較P＜0.05、P＜0.01，提示本發明組合物具有改善機體器官生理功能，增強機體耐高溫的能力。
(5)本發明組合物0.78g/kg，、1.55g/kg和3.10kg劑量組可明顯提高小鼠在寒冷環境中的存活率，與生理鹽水組比較P＜0.001，提示本發明組合物具有增強機體氧化分解產熱過程，提高機體耐對寒冷刺激的反應。
3.本發明組合物0.31g/kg，0.62g/kg和1.24g/kg劑量組可顯著提高老年大鼠血清SOD活力，使血漿LPO含量顯著降低，與生理鹽水組比較P＜0.05，P＜0.01和P＜.001)，同時能明顯升高RBC值和HB含量(P＜0.01和P＜0.001)提示本發明組合物具有加速清除體內自由基及脂質過氧化產物，減少細胞損傷，抗衰老和促進骨髓造血功能的作用。
4、本發明軟膠囊抵禦有毒物質對哺乳動物侵害(1)本發明組合物0.78g/kg、1.55g/kg和3.10g/kg劑量組能明顯延長二甲苯致小鼠死亡的時間，減少死亡數，存活率分別為68.42％、63.16％和63.16％，與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，提示本發明組合物對二甲苯致小鼠死亡具有明顯保護作用。
(2)本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可使甲醛致小鼠死亡率降低，保護率分別為75％、80％和90％。並可延長存活時間，與生理鹽水組比較具有非常顯著性差異(P＜0.01)，提示本發明組合物對甲醛致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
(3)本發明組合物0.78g/kg，1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可明顯降低敵百蟲致小鼠死亡數，保護率分別為63.16％，63.16％和84.21％，並可延長存活時間，與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，提示本發明組合物對敵百蟲致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
(4)本發明組合物1.55g/kg和3.10g/kg劑量組均可明顯降低偏二甲肼致小鼠死亡數，保護率分別為75.0％和81.2％，與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，提示本發明組合物對偏二甲肼致小鼠死亡具有明顯的保護作用。
綜上所述本發明組合物具有免疫調節，抗應激，抗衰老和促進骨髓造血功能的作用，且對受二甲苯、甲醛、敵百蟲、偏二甲肼有毒物質影響的哺乳動物具有明顯的保護作用
權利要求
1.一種具有免疫調節、抗應激、抗衰老、解毒作用的組合物，其特徵在於基本上由沙棘油與刺五加的乙醇和/或水提取物的浸膏粉組成。
2.根據權利要求1所述組合物，其特徵在於沙棘油與刺五加浸膏粉的重量比為1.5～3∶1份。
3.根據權利要求2所述組合物，其特徵在於沙棘油與刺五加浸膏粉的重量比為2∶1份。
4.一種具有免疫調節、抗應激、抗衰老、解毒作用的組合物，其特徵在於基本上由沙棘油與刺五加浸膏粉以及食品添加劑或藥學上可接受的輔料組成的口服製劑。
5.根據權利要求4所述的組合物，其特徵在於基本上由沙棘油與刺五加浸膏粉以及助懸劑與乳化劑組成的常規軟膠囊。
6.根據權利要求5所述組合物，其特徵在於軟膠囊內含沙棘油、刺五加浸膏粉、助懸劑、乳化劑的重量比為1.5～3∶1∶0.15～0.3∶0.01～0.03份；軟膠囊膠皮基本由明膠、增塑劑、水、遮光劑按重量比1∶0.3～0.6∶1～1.5∶0.00045～0.0009份組成。
7.根據權利要求6所述組合物，其特徵在於軟膠囊內含沙棘油、刺五加浸膏粉、助懸劑、乳化劑的重量比為2～2.5∶1∶0.17～0.25∶0.015～0.02份；軟膠囊膠皮基本由明膠、增塑劑、水、遮光劑按重量比1∶0.4～0.5∶1.2～1.4∶0.00025～0.0005份組成。
8.根據權利要求4～8之一所述組合物，其特徵在於助懸劑是蜂蠟、阿拉伯膠和/或西黃耆膠；乳化劑是司盤類和/或卵磷脂；增塑劑是甘油和/或山梨醇；遮光劑是可食用或藥用色素。
9.根據權利要求4～8之一所述組合物的製備方法，其特徵在於取沙棘油與助懸劑混合，加熱熔融，冷卻，加入乳化劑，混勻，加入研細的刺五加浸膏粉，製成混懸藥液；取明膠、增塑劑、水、遮光劑配成明膠液；用軟膠囊壓製機將混懸藥液與明膠液製成軟膠囊。
10.根據權利要求9所述組合物的製備方法，其特徵在於按重量比，取沙棘油1.5～3份與蜂蠟0.15～0.3份混合，加熱熔融，冷卻至60℃～30℃，加入卵磷脂0.01～0.03份，混勻，加入研細的刺五加浸膏粉1份，製成混懸藥液；取明膠、甘油、水、遮光劑按重量比1∶0.3～0.6∶1～1.5∶0.00045～0.0009份配成明膠液；用軟膠囊壓製機將混懸藥液與明膠液製成軟膠囊。
全文摘要
一種具有免疫調節、抗應激、抗衰老、解毒作用的組合物，由沙棘油與刺五加提取物為主藥，添加或不添加適當輔料，製備各類保健組合物或藥用組合物，如軟膠囊劑，發明還包括其製備方法。
文檔編號A61P29/00GK1449792SQ03113410
公開日2003年10月22日 申請日期2003年5月8日 優先權日2003年5月8日
發明者芮國嚴, 王廣基, 劉建平, 朱萱萱, 趙陸華 申請人:王廣基, 芮國嚴