一種從茄子皮中分離製備高純度醯化的飛燕草素衍生物的方法
2023-07-15 03:31:51
專利名稱：一種從茄子皮中分離製備高純度醯化的飛燕草素衍生物的方法
技術領域：
本發明涉及一種飛燕草素衍生物的製備方法，具體涉及一種從茄子皮中分離製備高純度3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基- (I — 2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素的方法。
背景技術：
花色苷(Anthocyanidin)是一種天然的水溶性色素,在自然界中廣泛存在,屬於 類黃酮化合物。花色苷是由花色苷苷元與糖通過糖苷鍵結合而成的多酚類物質，而且在糖苷基或是羥基上還可以與有機酸通過酯鍵形成醯基化的花色苷。研究表明花色苷具有多種對人體有益的生理活性，如抗氧化活性、抗炎和預防心血管等慢性疾病。因此可以作為天然色素、天然抗氧化劑及功能食品添加因子應用。茄子是一種常見的蔬菜，主要用作食用。在茄子中，其紫色或是黑色種皮中富含豐富的花色苷。目前報導的不同茄子品種中花色苷的種類主要有非醯化及醯化的3-[L-鼠李糖基-(I — 2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素。其中醯化的花色苷，即3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基-(I — 2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素相對
較穩定，而且在爺子皮中含量豐富，其分子結構如下所不。
權利要求
1.一種從茄子皮中分離製備3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基-(I — 2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素的方法，包括以下步驟 (1)原料預處理將新鮮茄子進行洗淨、剝皮，並將茄子皮切碎； (2)茄子皮花色苷粗提濃縮液將得到的茄子皮，按照料液比Ig 2mL的比例加入0.01% (v/v)鹽酸的甲醇溶液中，常溫下，浸提，過濾，反覆三次，然後合併濾液，在40-45°C下真空旋轉蒸發除去甲醇得到花色苷粗提液，按所述粗提液乙酸乙酯的體積比為I : 2的比例加入乙酸乙酯萃取，靜置分層，萃取三次，收集合併水相，在40-50°C下真空旋轉充分蒸發除去乙酸乙酯，得到花色苷浸膏；將浸膏用少量的0.01% (v/v)鹽酸的水溶液溶解，得到花色苷上樣液； (3)大孔樹脂吸附將大孔吸附樹脂裝入層析柱中，用0.01%(v/v)鹽酸的水溶液衝洗；將所述花色苷上樣液以0. 5BV/h的流速注入大孔樹脂柱中，先用含0. 01%的鹽酸(v/v)的去離子水以lBV/h衝洗樹脂，再用0. 01% (v/v)的鹽酸的甲醇溶液以lBV/h的流速將花色苷成分從樹脂上解析下來，將得到的解析液在40-45°C下真空旋轉蒸發除去甲醇，得到花色昔粗品； (4)凝膠純化將從大孔樹脂純化得到的花色苷粗品注入凝膠柱，用50%的甲醇水(v/v)洗脫，按照每15分鐘接取一次，收集洗脫液，將收集到的洗脫液在40-45°C下真空旋轉蒸發除去甲醇，得到初步純化的花色苷提取物； (5)單體製備利用半製備色譜分離所述花色苷提取物，流動相分別為A相0.5% (v/v)甲酸的純水，B相0. 5% (v/v)甲酸的甲醇，色譜純，；採用梯度洗脫條件，採用常規的C18製備色譜柱，柱溫20-40°C ；DAD檢測器檢測波長為520nm ;根據出峰時間，收集到的花色苷單體吸收峰組分，進一步濃縮，在40-45°C下,真空旋轉蒸發濃縮,得到所述3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基- (I — 2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素； 所述鹽酸的濃度為12M，所述甲醇、所述乙酸乙酯和所述甲酸均為色譜純。
2.如權利要求I所述的方法，其中，所述大孔吸附樹脂為XAD-7HP，比表面積為500m2/g，平均孔徑為450A，平均粒徑為560iim，偶極距為I. 8，均一係數D90/D40為I. 7。
3.如權利要求I所述的方法，其中，所述層析柱的直徑為50mm，長度為600mm。
4.如權利要求I所述的方法，其中，所述凝膠柱為SephadexLH-20，所述凝膠柱直徑為15mm,長度為 300mm。
5.如權利要求I所述的方法，其中，所述梯度洗脫條件為0-3min:40% (v/v)B相；3-10min AO % -50% (v/v) B 相；10_12min :50 %-70 % (v/v)B 相；12_15min :70 % (v/v) B 相;15_17min 70% -30% (v/v)B 相；流速 3mL/min。
全文摘要
本發明涉及一種從茄子皮中分離製備3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基-(1→2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素的方法，所述方法以茄子為原料，通過將其削皮，浸提濃縮、除雜、大孔樹脂純化、凝膠純化、結合半製備色譜的步驟，得到3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基-(1→2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素；所述方法操作簡單，能有效從茄子皮中分離得到高純度的花色苷單體，得到的3-[4-p-香豆醯-L-鼠李糖基-(1→2)-D-吡喃葡萄糖苷]-5-D-吡喃葡糖苷飛燕草素的純度為99.79％以上，並且可實現大規模製備。
文檔編號C07H17/065GK102796154SQ20121027924
公開日2012年11月28日 申請日期2012年8月7日 優先權日2012年8月7日
發明者敬璞, 董英, 趙淑娟, 孫向軍, 沈珊齊 申請人:上海交通大學