從植物原料中提取熊果酸的方法

2023-07-14 01:34:26

專利名稱：：從植物原料中提取熊果酸的方法從植物原料中提取熊果酸的方法
技術領域：
本發明涉及提取熊果酸的方法，特別是一種從植物原料中提取熊果酸的方法。
背景技術：
：熊果酸是廣泛存在於天然植物中的五環三萜類化合物，又名烏索酸，具有廣泛的生物活性，毒性小，副作用少，在醫學上有明顯的安定與降溫作用，對肝癌細胞培養具有非常顯著的抑制率，實驗證明熊果酸具有降低轉氨酶的作用，因而被用作藥品生產的原料，熊果酸在植物中分布雖然廣泛，但其含量低，理論上一般含量在1克/公斤左右，提取分離難度大，而且每一種植物原料中分離提取熊果酸的工藝條件亦不盡相同，如中國專利號為ZL03108037.5《一種從植物中提取分離熊果酸的方法》其是以泡桐葉為原料，以甲醇，丙酮類溶劑為提取劑進行萃取，最後用甲醇_乙醇混合溶劑作重結晶劑，提取熊果酸；中國專利申請號為200710113984.4《從山楂中提取熊果酸的方法》是將山楂以乙醇作溶劑進行提取熊果酸，這兩種提取熊果酸的方法，其原料不同，提取工藝和使用提取溶劑亦不同，同時在提取時原料中有機類雜質難以除去，其提取熊果酸得率低，提取成本高，不同原料要使用不同的提取溶劑和提取工藝，工藝複雜，產量小，溶劑消耗大，產品安全性差，因而難以工業化批量生產。
發明內容本發明的目的就是要提供一種從植物原料中提取熊果酸的方法，採用單一溶劑作萃取劑，對不同原料採用相同提取工藝，工藝簡單，提取得率高，產量大，易於實現工業化和批量生產，並且產品的安全性好。本發明的技術方案從植物原料中提取熊果酸的方法，按如下工藝步驟進行1)將植物原料進行預發酵處理；製得提取物；2)提取物用乙醇作溶劑進行提取，過濾得提取液，回收乙醇溶劑，得浸膏；3)浸膏用水沉降洗滌處理後加除雜劑進行除雜處理；過濾，然後再用乙醇溶解後加入脫色劑進行脫色處理，得提取物粗品；4)將提取物粗品在酸性條件下經凝析、純化、烘乾處理製得熊果酸。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，優選按如下工藝步驟進行1)在植物原料中加入佔植物原料重量1-10%的複合酶製劑，於室溫下預發酵處理24-72小時，過濾去除酶解液得提取物；2)將提取物乾燥後，用提取物重量7-10倍濃度為50-98%的乙醇進行提取，過濾得提取液，再減壓回收溶劑乙醇得浸膏；3)將浸膏用水沉降洗滌後，加入濃度為1-10%—價或二價的金屬氫氧化物和/或它們的混合溶液，作除雜劑進行除雜處理；將除雜處理後的溶液過濾沉澱；沉澱物再用乙醇溶解形成溶解液，調整溶解液的PH為9-12，然後加入脫色劑活性炭或白陶土或硅藻土進行脫色處理，時間20-120分鐘，在除雜和脫色處理過程中控制溶液溫度在室溫至沸騰下進行，最後過濾，得濾液提取物粗品；4)將濾液提取物粗品的PH調至1-2之間後進行結晶，凝析分離，純化，精製，烘乾製得熊果酸。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，步驟1)所述的複合酶製劑為固體或液體纖維素酶或與其它酶的混合，其用量為所述植物原料重量的2-8%。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，步驟3)所述除雜劑為濃度為2-8%的氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣和/或它們混合溶液。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，所述脫色劑為粉末或顆粒狀的活性炭或白陶土或硅藻土；其用量為每升脫色溶液用1-10克脫色劑；時間30-100分鐘。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，步驟2)所述提取物用濃度為95%的乙醇作溶劑在加熱狀態下進行回流提取2-3次，每次1-2小時。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，步驟3)浸膏用水沉降洗滌2-3次後，力口除雜劑除雜處理2-3次。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，所用植物原料先經乾燥粉碎後，再用溫水溼潤處理後進行提取。本發明從植物原料中提取熊果酸的方法，所述的植物原料為枇杷葉，毛葉泡桐葉，女貞葉，丁香葉，柿葉，鴨腳樹葉，迷迭香葉，山楂葉，夏枯草任意一種或幾種。所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，所用乙醇溶劑為工業用或食品級。本發明生產工藝是將植物原料先進行乾燥並粉碎後用溫水溼潤後加複合酶製劑在室溫下(5-25°C)發酵預處理24小時以上，也可不加入酶製劑進行發酵，過濾去除酶解液，乾燥後加倍量乙醇在加熱或不加熱的情況下進行提取，過濾除渣得提取液，將提取液減壓回收乙醇得浸膏，浸膏經水洗沉降洗滌後，加除雜劑除雜處理2-3次；過濾用乙醇進行溶解，調整PH值，脫色處理過濾得熊果酸粗品，凝析分離，純化即製得熊果酸精品。本發明以植物原料採用醇提凝析法提取熊果酸，先對原料樹葉材進行發酵預處理，加入複合酶製劑作發酵預處理劑，這樣一方面使熊果酸與植物細胞壁脫離，從而加速熊果酸從原料中充分釋放出來，又能使熊果酸苷轉化為苷元；另一方面能將一些脂類，類脂類等雜質水解轉化為小分子水溶性物質，以利除去；經酶解處理後的原料用乙醇提取後，再加一價或二價金屬氫氧化物作除雜劑，進一步除去脂類，類脂類，黃酮類葉綠素等雜質，利於熊果酸的富集和純化，大大提高了熊果酸得率，降低了生產成本，簡化了操作程序，實現多種原料均能使用本發明工藝方法進行提取。將上述植物原料採用本發明方法提取出的產品為無色針狀結晶，不溶於水和石油醚，易溶於甲醇，乙醇，丙酮，乙酸乙酯，乙醚等有機溶劑。經檢測其分子式為C3tlH48O3，分子量456.8與熊果酸對照品混合熔點不下降。其各項技術指標經國家標準樣品核心實驗室、中國海洋大學等多家單位進行紫外光譜(UV)、紅外光譜(IR)、質譜(MS)、核磁共振譜(NMR)等定性檢測說明本發明的產品純度高、得率高(見表1)。具體實施例方式實施例1將乾燥的泡桐葉10公斤粉碎，裝入提取容器中，加溫水溼潤後，進行發酵預處理72小時，加泡桐葉重量7倍量濃度55%工業乙醇加熱提取2次，每次2小時，過濾得提取液。將提取液減壓回收乙醇得浸膏，經水沉降洗滌3次後，加除雜劑3%氫氧化鈉溶液在室溫20°C下處理2-3次，過濾，沉澱，沉澱物用工業乙醇溶解，調整溶液的PH值至9-10，每升需脫色溶液加8克固體粉末狀活性炭煮沸脫色60分鐘以上，過濾，得濾液提取物粗品再調整其溶液PH值至1-2，經凝析分離、純化精製、烘乾得純度99.82%熊果酸13.6克。實施例2將乾燥的枇杷葉10公斤粉碎裝入提取容器中，用溫水溼潤後，加入0.2公斤的酶製劑液體纖維酶，在室溫20°C酶解處理48小時後，濾去酶解液得提取物，將提取物乾燥後，加枇杷葉重量10倍量(100KG)濃度95%乙醇不加熱提取3次，每次2小時，過濾得提取液。將提取液減壓回收乙醇得浸膏，浸膏經水沉降洗滌2次後，加8%氫氧化鈣溶液加熱至沸騰，進行除雜處理2-3次，過濾，沉澱；沉澱物用乙醇溶解，調PH值至10-12，每升脫色溶液加2克顆粒狀活性炭煮沸即溫度80°C左右，脫色60分鐘，過濾，得濾液提取物粗品再調溶液PH值至1-2，經結晶、凝析分離、純化精製、烘乾得純度99.8%的熊果酸12.8克。實施例3將乾燥的迷迭香葉10公斤粉碎，裝入提取容器中，加溫水溼潤後，加入0.5公斤的酶製劑固體纖維酶和其它酶，在室溫5°C酶解進行發酵處理60小時，濾去酶解液得提取物；將提取物乾燥後，加迷迭香葉重量8倍量的濃度80%乙醇加熱提取3次，每次1小時，過濾得提取液。將提取液減壓回收乙醇得浸膏，浸膏經水沉降洗滌2次後，加除雜劑5%氫氧化鉀和氫氧化鈉混合溶液加熱至沸騰除雜處理2-3次，過濾，沉澱；沉澱物用乙醇溶解，調整溶液的PH值至9-10，每升需脫色溶液加5克固體顆粒狀硅藻土煮沸脫色30分鐘；過濾，得濾液提取物粗品再調整其溶液PH值至1-2，經凝析分離、純化精製、烘乾得熊果酸15.5克。實施例4將乾燥的山楂葉10公斤粉碎裝入提取容器中，用溫水溼潤後，加入1公斤的酶製劑液體纖維酶和植物提取酶，在室溫20°C酶解處理70小時後，濾去酶解液得提取物；將提取物乾燥後，加山楂葉重量10倍量濃度95%食用乙醇加熱沸騰，提取2次每次1小時，過濾得提取液。將提取液減壓回收乙醇得浸膏，經水沉降洗滌3次後，加8%氫氧化鈉溶液加熱至沸騰除雜2-3次，過濾，沉澱；沉澱物用乙醇溶解，調PH值至10-12，每升需脫色溶液加10克顆粒狀白陶土煮沸即溫度80°C以下，脫色60分鐘，過濾，得濾液提取物粗品再調整其溶液PH值至1-2，經凝析分離、純化精製、烘乾得純度99.0%的熊果酸13.2克。表1本發明所得產品有關技術指標參數tableseeoriginaldocumentpage5tableseeoriginaldocumentpage6權利要求一種從植物原料中提取熊果酸的方法，按如下工藝步驟進行1)將植物原料進行預發酵處理，製得提取物；2)提取物用乙醇作溶劑進行提取，過濾得提取液，回收乙醇溶劑，得浸膏；3)浸膏用水沉降洗滌處理後加除雜劑進行除雜處理；過濾，然後再用乙醇溶解後加入脫色劑進行脫色處理，得提取物粗品；4)將提取物粗品在酸性條件下經凝析、結晶、純化、烘乾處理製得熊果酸。2.依據權利要求1所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是按如下工藝步驟進行1)在植物原料中加入佔植物原料重量1-10%的複合酶製劑，於室溫下預發酵處理24-72小時，過濾去除酶解液得提取物；2)將提取物乾燥後，用提取物重量7-10倍濃度為50-98%的乙醇進行提取，過濾得提取液，再減壓回收溶劑乙醇得浸膏；3)將浸膏用水沉降洗滌後，加入濃度為1-10%—價或二價的金屬氫氧化物和/或它們的混合溶液，作除雜劑進行除雜處理，經除雜處理後的溶液過濾，沉澱；沉澱物再用乙醇溶解形成溶解液調整溶解液的PH為9-12，然後加入脫色劑活性炭或白陶土或硅藻土進行脫色處理，時間20-120分；在除雜和脫色處理過程中控制溶液溫度在室溫至沸騰下進行，最後過濾，得濾液提取物粗品；4)將濾液提取物粗品的PH調至1-2之間後進行結晶，凝析分離，純化，精製，烘乾製得熊果酸。3.依據權利要求2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是步驟1)所述的複合酶製劑為固體或液體纖維素酶或與其它酶的混合，其用量為所述植物原料重量的2-8%。4.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是步驟3)所述除雜劑為濃度2-8%的氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣和/或它們的混合溶液。5.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是所述脫色劑為粉末或顆粒狀的活性炭或白陶土或硅藻土；其用量為每升脫色溶液1-10克脫色劑；時間30-100分鐘。6.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是步驟2)所述提取物用濃度為95%的乙醇作溶劑在加熱狀態下進行回流提取2-3次，每次1-2小時。7.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是步驟3)浸膏用水沉降洗滌2-3次後，加除雜劑除雜處理2-3次。8.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是所用植物原料先經乾燥粉碎，再用溫水溼潤處理後進行提取。9.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是所述的植物原料為枇杷葉，泡桐葉，女貞葉，丁香葉，柿葉，鴨腳樹葉，迷迭香葉，山楂葉，夏枯草中任意一種或幾種。10.依據權利要求1或2所述的從植物原料中提取熊果酸的方法，其特徵是所述的乙醇溶劑為工業用或食品級。全文摘要本發明一種從植物原料中提取熊果酸的方法，按如下工藝步驟進行1)將植物原料進行預發酵處理，製得提取物；2)提取物用乙醇作溶劑進行提取，過濾得提取液，回收乙醇溶劑，得浸膏；3)浸膏用水沉降洗滌處理後加除雜劑進行除雜處理；過濾，然後再用乙醇溶解後加入脫色劑進行脫色處理，得提取物粗品；從植物原料中提取熊果酸的方法，採用單一溶劑作萃取劑，對不同原料採用相同提取工藝，工藝簡單，提取得率高，產量大，易於實現工業化和批量生產，並且產品的安全性好。文檔編號C12P33/00GK101818187SQ20101016789公開日2010年9月1日申請日期2010年5月6日優先權日2010年5月6日發明者葉文峰,李開泉,鄒盛勤申請人:李開泉;鄒盛勤;葉文峰