一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法
2023-07-21 03:40:31
一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法，其特徵在於：包括如下步驟：1）分別配置若干梯度濃度的微囊藻毒素的標準使用液，對其分別進行色譜分析，獲得峰面積，並分別以所述梯度濃度和峰面積為橫縱坐標繪製成標準曲線；2）吸取設定體積的樣品溶液進行色譜分析，測定其峰面積，並通過步驟1）所述的標準曲線計算出樣品溶液的微囊藻毒素濃度。本發明的檢測方法準確方便、相對標準偏差小於2%，檢出限為0.01μg/kg，且無需有機溶劑、測試快速安全、選擇性好且靈敏度高，能集採樣、萃取、濃縮、進樣於一體，還能夠與液相色譜儀聯用，可手動和自動操作，使得樣品處理技術及分析操作簡單省時，非常適於水產品中微囊藻毒素含量的研究。
【專利說明】一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種毒素含量的檢測方法，具體涉及一種水產品中微囊藻毒素的檢測 方法。
【背景技術】
[0002] 微囊藻毒素（microcystins，MCs)是一類由藍藻產生的單環七肽結構的天然肝毒 素，是水體中最常見的一種藍綠藻毒素。目前已知存在的最普遍、含量相對較多，毒性較大 的MC主要是MC-LR。其他的如MC-YR、MC-RR、MC-LF、MC-LW也較為常見。MC在陽光照射 下非常穩定，但暴露在紫外線下可水解或發生化學異構、化學鍵合反應而喪失毒性，尤其當 紫外線波長接近其吸收峰最大吸收波長時，MC被迅速地降解。藻毒素很高的耐熱性，加熱 煮沸都不能將毒素破壞，也不能將其去除。
[0003] MC廣泛存在於作為飲水來源的富營養湖泊、池塘和河流等水體中。MC不僅能直接 導致一些水生生物如魚類、貝類及蛘類的患病及死亡，而且一些野生動植物及家畜、家禽飲 用了含有產毒藻種及藻毒素的水後，也會引起中毒甚至死亡，MC可通過食物鏈的生物富集 危害人類的健康。MC可通過多種途徑進入人體，如通過口、鼻、皮膚等途徑攝入；通過飲水 攝入；通過食用水產品或藻類食品攝入等，如魚類處於水生生態系統食物鏈的較高等級，通 過生物富集作用會在體內積累比環境水中含量更高的MC，從而給人群健康帶來直接的安全 隱患。因此，測定水產品中微囊藻的毒素含量是非常必要的。
[0004] 目前，微囊藻毒素檢測方法主要有生物測試法，氣相色譜法，酶聯分析法，蛋白磷 酸酶抑制分析法和細胞毒素研究技術等。生物測試法操作簡單快速，結果直觀，但是卻會 消耗較多的毒素，靈敏度和專一性不高，最小研究線要用半致死量和致死量來衡量；聯酶分 析法操作簡單，靈敏度高，能檢出毒素的不同同系物，但是對多種同系物的識別需要廣譜抗 體；蛋白磷酸酶抑制分析法的缺陷是不能區分特異性的同系物，而細胞毒素研究技術則是 生產工作量大，最小檢出限為l(T20mg/ml，準確度不高。
【發明內容】
[0005] 為了解決上述技術問題，本發明提供一種檢測方法，該檢測方法無需有機溶劑、測 試快速安全、選擇性好且靈敏度高，使得樣品處理技術及分析操作簡單省時。
[0006] 本發明所採用的技術方案是： 一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法，其特徵在於：包括如下步驟： 1) 分別配置若干梯度濃度的微囊藻毒素的標準液，對其分別進行色譜分析，獲得峰面 積，並分別以所述梯度濃度和峰面積為橫縱坐標繪製成標準曲線； 2) 吸取設定體積的樣品溶液進行色譜分析，測定其峰面積，並通過步驟1)所述的標準 曲線計算出樣品溶液的微囊藻毒素濃度。
[0007] 優選地，所述色譜分析條件如下： 色譜柱：C18, 250mmX 4. 6mm，粒徑 5 μ m ; 柱溫：35°C ; 流動相：乙臆+水+二氣乙酸=(36+64+0. 10); 流速：1. 〇ml/min ; 波長：240nm ; 進樣量：20 μ L。
[0008] 優選地，所述樣品經過前處理獲得，其步驟為：取出待檢測水產品中富含微囊藻毒 素的部分，然後醇取樣品並對醇取後的樣品進行乾燥和研磨。
[0009] 優選地，所述樣品溶液最後按以下公式計算樣品中微囊藻毒素的濃度：
【權利要求】
1. 一種水產品中微囊藻毒素含量的檢測方法，其特徵在於：包括如下步驟： 1) 分別配置若干梯度濃度的微囊藻毒素的標準液，對其分別進行色譜分析，獲得峰面 積，並分別以所述梯度濃度和峰面積為橫縱坐標繪製成標準曲線； 2) 吸取設定體積的樣品溶液進行色譜分析，測定其峰面積，並通過步驟1)所述的標準 曲線計算出樣品溶液的微囊藻毒素濃度。
2. 根據權利要求3所述的檢測方法，其特徵在於：所述色譜分析條件如下： 色譜柱：C18, 250mmX 4. 6mm，粒徑 5 μ m ; 柱溫：35°C ; 流動相：乙臆+水+二氣乙酸=(36+64+0. 10); 流速：1. 〇ml/min ; 波長：240nm ; 進樣量：20 μ L。
3. 根據權利要求1所述的檢測方法，其特徵在於：所述樣品經過前處理獲得，其步驟 為：取出待檢測水產品中富含微囊藻毒素的部分，然後醇取樣品並對醇取後的樣品進行幹 燥和研磨。
4. 根據權利要求1所述的檢測方法，其特徵在於：所述樣品溶液最後按以下公式計算 樣品中微囊藻毒素的濃度： 式中：
C#--樣品中微囊藻毒素的濃度，單位為μ g/g ; Cm--測試溶液中微囊藻毒素的濃度，單位為μ g/ml ; V--樣品溶液的體積，單位為ml ; m〇--水產品的取樣量，單位為g。
【文檔編號】G01N30/02GK104155372SQ201410321722
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年7月7日 優先權日:2014年7月7日
【發明者】葉文婷, 雷新慧, 徐婷, 張建, 母凌燕 申請人:深圳市格瑞斯特環保技術有限公司