2-烴基取代4,6-二氨基-1,3,5-三嗪類衍生物的用途的製作方法

2023-05-26 21:50:26

專利名稱：：2-烴基取代4,6-二氨基-1,3,5-三嗪類衍生物的用途的製作方法
技術領域：
：本發明屬化合物的醫藥用途，主要涉及三嗪類衍生物對多種腫瘤癌細胞株的抑制增殖作用，及其在製備抗腫瘤藥物中的應用。技術背景隨著環境汙染等多種因素的影響，腫瘤的發病率持續上升,患者死亡率日益增加。因此，各國政府、研究機構及製藥公司長期以來一直對腫瘤研究和抗腫瘤藥物予以高度重視。目前，治療腫瘤的方法是以化學治療為主，但眾多的抗腫瘤藥物存在選擇性差、效率低、免疫抑制、耐藥性等缺點，治療效果不甚理想。因此，新型的具有抗腫瘤潛力的化合物已成為藥物化學研發的熱點與重點。三嗪類衍生物因具有廣範圍的生物活性如抗菌活性、抗錐蟲活性、整聯蛋白極遲抗原-4(VLA-4)拮抗性、山梨糖醇脫氫酶的抑制作用、抗逆轉錄病毒活性、雌激素受體調節作用、細胞毒活性和血管新生抑制活性等而備受關注，特別是抗癌活性引起學者們廣泛研究。六甲基三聚氰胺是一種有效的抗乳腺癌、肺癌和卵巢癌藥物，但其嚴重的副作用如噁心、嘔吐、腹部絞痛和厭食症等限制了在臨床上的應用[CancerTreat.Rev.,1986，13，197-217]。在日本用於抗胃潰瘍的藥物伊索拉定[2,4-二氨基-6-(2，5-二氯苯基)-l，3，5-三嗪]因具有血管新生抑制作用，所以在表皮瘤和神經膠質瘤的異種嫁接小鼠模型中都呈現較強的抗腫瘤活性，且可抑制乳腺癌再生長和肺轉移瘤[BreastCancerRes.Treat.2004,83,195-199]。近年來學者們對三嗪骨架的衍生物用於抗腫瘤活性的評價展開了更多的研究。發現化合物2-環己基氨基-4-(4-甲氧苄基氨基)-6-(3,4-二甲氧苄基氨基)-l，3,5-三嗪可作為一種微管解聚的化學實體，對U937細胞具有強效的生長抑制作用(GIso-lnM)[J.Am.Chem.Soc.，2002,124,11608];化合物2-苯基氨基-4-(4-甲氧苯基氨基)-6-嗎啉基-l,3,5-三嗪對結腸直腸癌(CRC)細胞株HCT-116具有顯著的抑制活性(IC5=0.76pM)，體內抗腫瘤及代謝動力學研究表明該化合物極有希望成為進一步開發抗腫瘤藥物新的化學實體[Bioorg.Med.Chem.,2007,15,1815-1827]。化合物4-(苯並噻唑-6-氨基)-6-(苄基異丙基氨基)-l,3,5-三嗪-2-醇是一類新的血管內皮生長因子受體2(VEGF-R2)酪氨酸激酶的強效抑制劑，在體外酶抑制濃度達到納摩爾級(IC5。=18nM)[J.Med.Chem.，2005,48,1717-1720]。化合物4-(3-氯苯基氨基)-2-[4-(2-羥丙氨基吡啶基)]-l,3，5-三嗪是一類新的廣譜周期依賴性蛋白激酶(CDK)的強效抑制劑，對CDK1、CDK2和CDK5的抑制作用較強(1(:5分別為21、7和3nM)，對CDK4、CDK6和CDK7的半數抑制濃度也都小於lnM。體外實驗表明，該化合物對多種腫瘤細胞株包括HeLa、HCT-116、U937和A375都表現出強效的抑制增殖活性[J.Med.Chem.，2005,48,4535-4546]。因此，三嗪骨架類的衍生物在抗腫瘤活性中具有可觀的應用前景，並有望篩選出新的抗腫瘤藥物化學實體。
發明內容本發明的目的是提供三嗪類化合物2-烴基取代4,6-二氨基-1，3,5-三嗪類衍生物在製備抗腫瘤藥物中的應用。2-烴基取代4,6-二氨基-l,3,5-三嗪類衍生物具有以下結構通式formulaseeoriginaldocumentpage5其中R為C廣do的鏈烷基、C3-C7的環垸基、C2-do不飽和烴基、Crd。芳香基或雜芳香基。R2為氫、C廣d。的鏈垸基、CrC7的環烷基、C2-C1Q不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。R3為氫、CrC1的鏈垸基、C3-C7的環垸基、C2-C1不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。R4為氫、crc1的鏈烷基、c3-c7的環烷基、c2-c1不飽和烴基、c5-c10芳香基或雜芳香基。經研究證實2-烴基取代4,6-二氨基-1，3,5-三嗪類衍生物對多種癌細胞株具有抑制增殖作用，特別對人肺癌A549細胞、人白血病K562細胞、人前列腺癌PC-3細胞、人卵巢癌HO8910細胞和人乳腺癌MCF-7細胞等多種腫瘤細胞株的抑制作用顯著，抗瘤譜較廣。具體實施方式本發明結合實施例做進一步的說明。實施例2-烴基取代4，6-二氨基-1,3，5-三嗪類衍生物對不同腫瘤細胞的體外抑制作用(1)實驗材料細胞株人肺癌A549細胞、人白血病K562細胞、人前列腺癌PC-3細胞、、人卵巢癌HO8910細胞和人乳腺癌MCF-7細胞。培養基RPMI1640培養基，含10%小牛血清。藥物及配製藥物為上述所合成的2-烴基取代4,6-二氨基-1，3,5-三嗪類衍生物溶於二甲基亞碸(DMSO)。化合物結構見表l。陽性對照藥物為阿黴素。(2)實驗方法將上述處於對數生長期的腫瘤細胞，以5x103/孔的密度接種於96孔板中，每孔加細胞懸液200^1，在培養24h後，分別加入5種濃度的2-烴基取代4，6-二氨基-l，3，5-三嗪類衍生物(0.01、0.1、1、10、100pmol/L共5個濃度梯度)，每個濃度設3個復孔，阿黴素作陽性對照。細胞在37'C，5Q/。C02培養箱中孵育72小時後，加入濃度為5mg/ml的MTT溶液20nl，繼續培養4小時。吸去上清液，加入150plDMSO，輕微振蕩板使甲瓚完全溶解，用酶聯免疫檢測儀於570nm處測定每孔吸光度(OD值)，取3復孔OD值求平均值，計算細胞抑制率抑制率(IR°/。)=(1-TOD/COD)xl00%TOD:給藥組OD均值COD:溶劑對照組OD均值重複3次實驗。(3)統計學處理IC5o採用藥物抑制濃度計算軟體(LOGIT法，1.0.0版本。)實驗數據均以"5表示。(4)實驗結果2-烴基取代4，6-二氨基-1，3,5-三嗪類衍生物作用72小時後，分別測定IC50值。結果表明，多數化合物對5種腫瘤細胞均有不同程度的體外抑制作用，其中ICso值小於10拜ol/L有化合物I、IV、XII、XIII、XIV、XVIII、XXI對人白血病K562細胞；化合物XV對人乳腺癌MCF-7細胞；化合物I、VII對人卵巢癌HO8910細胞。它們對癌細胞的體外抑制作用結果見表2。綜合測試此類化合物對不同腫瘤細胞的體外抑制作用，化合物I、IV、XIII和XVIII對4種腫瘤細胞株的抑制作用較顯著，抗瘤譜較廣。表1.2-烴基取代4，6-二氨基-1，3，5-三嗪類單個化合物結構與編號tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage8表2.2-烴基取代4,6-二氨基-1，3，5-三嗪類衍生物作用72小時對腫瘤細胞的體外抑制作用tableseeoriginaldocumentpage8XVI>50>50>50>50>50XVII>5017.13±5.08>50>50>50XVIII21.77±13.002.06±2.71>5014.80±2.7623.50±0.93XIX>50〉50>50>50>50XX>5040.49±8.32>50>50>50XXI17.08±3.946.77±6.04>50>50>50權利要求1.2-烴基取代4，6-二氨基-1，3，5-三嗪類衍生物在製備抗腫瘤藥物中的應用，所述衍生物具有以下結構通式其中R2、R3和R4相同或不同，R1為C1-C10的鏈烷基、C3-C7的環烷基、C2-C10不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。R2為氫、C1-C10的鏈烷基、C3-C7的環烷基、C2-C10不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。R3為氫、C1-C10的鏈烷基、C3-C7的環烷基、C2-C10不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。R4為氫、C1-C10的鏈烷基、C3-C7的環烷基、C2-C10不飽和烴基、C5-C10芳香基或雜芳香基。2.根據權利要求1所述的2-烴基取代4,6-二氨基-l，3,5-三嗪類衍生物在製備抗腫瘤藥物中的應用，其特徵是所述衍生物涉及其光學活性體或消旋體、非對映異構體混合物，或其藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。3.根據權利要求1所述的2-烴基取代4,6-二氨基-l,3，5-三嗪類衍生物在製備抑制人肺癌A549細胞活性藥物中的應用。4.根據權利要求1所述的2-烴基取代4,6-二氨基-1,3,5-三嗪類衍生物在製備抑制人白血病K562細胞活性藥物中的應用。5.根據權利要求1所述的2-烴基取代4，6-二氨基-1，3,5-三嗪類衍生物在製備抑制人前列腺癌PC-3細胞活性藥物中的應用。6.根據權利要求1所述的2-烴基取代4,6-二氨基-l,3,5-三嗪類衍生物在製備抑制人卵巢癌HO8910細胞活性藥物中的應用。7.根據權利要求1所述的2-烴基取代4,6-二氨基-l，3,5-三嗪類衍生物在製備抑制人乳腺癌MCF-7細胞活性藥物中的應用。8.根據權利要求1所述的2-烴基取代4，6-二氨基-l,3，5-三嗪類衍生物的用途，其特徵是所製備的藥物還含有製劑允許的藥物賦形劑或載體。9.根據權利要求1或2所述的2-烴基取代4,6-二氨基-1，3，5-三嗪類衍生物的用途，其特徵是所述藥物的製劑形式包括液體製劑、顆粒劑、片劑或膠丸。10.根據權利要求9所述的2-烴基取代4,6-二氨基-1,3，5-三嗪類衍生物的用途，其特徵是所述藥物的給藥方式包括口服給藥或注射給藥。全文摘要本發明提供2-烴基取代4，6-二氨基-1，3，5-三嗪類衍生物在製備抗腫瘤藥物中的應用。經研究證實，2-烴基取代4，6-二氨基-1，3，5-三嗪類衍生物對多種癌細胞株具有抑制增殖作用，特別對人肺癌A549細胞、人白血病K562細胞、人前列腺癌PC-3細胞、人卵巢癌HO8910細胞和人乳腺癌MCF-7細胞等多種腫瘤細胞株的抑制作用顯著，抗瘤譜較廣。文檔編號A61P35/00GK101305999SQ20081006305公開日2008年11月19日申請日期2008年7月8日優先權日2008年7月8日發明者俞永平,葉子奇,樓宜嘉,羊紅玉,章胡,哲陳申請人:浙江大學