一種藻藍蛋白的提取方法

2023-05-27 15:50:46

一種藻藍蛋白的提取方法
【專利摘要】本發明涉及一種藻藍蛋白的提取方法，屬於生物醫藥【技術領域】。為了解決現有的破壁周期長和對環境汙染大的問題，提供一種藻藍蛋白的提取方法，該方法包括將含有藻藍蛋白的鮮藻或經過預浸泡的藻粉加入-50℃～-10℃的冰粉中，將攪拌速度控制在1000r/min～3000r/min的條件下進行破壁處理，得到含有藻藍蛋白的破壁液；再將得到的含有藻藍蛋白的破壁液進行分離、純化和乾燥，得到成品藻藍蛋白。本發明的方法具有破壁周期短和長環境友好的優點，且得到的產品純度高。
【專利說明】一種藻藍蛋白的提取方法

【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種藻藍蛋白的提取方法，屬於生物醫藥【技術領域】。

【背景技術】
[0002] 藻藍蛋白是從含藻膽體的藻類細胞中提取，是藍藻中僅有的捕光色素蛋白，是非 常少見的天然藍色色素和營養素，具有獨特的藥用功效和螢光性質。其中以螺旋藻為代表 的藍藻中具有豐富的藻藍蛋白，並具有安全性和高消化吸收率，經中國衛生部和美國食品 藥品管理局認證螺旋藻完全無毒副作用，是安全的植物藥品及保健品。
[0003] 然而，現有的細胞破碎法有自然溶脹法、反覆凍融法、超聲波法和酶解法。自然溶 脹法一般需要10到20天，且破壁效率不高，容易導致微生物大量繁殖腐敗，生產過程難以 控制。反覆凍融法一般需要三次以上才能達到有效破壁，且每次凍融需要3到5天，整個 破壁流程需要9到15天以上，且能耗巨大。超聲波法需要在低濃度的藻細胞溶液中有效， 高濃度的藻液中超聲難以傳播，低濃度的藻溶液給後續的乾燥帶來困難，而且超聲波容易 導致蛋白質變性失活，產品收率低。酶解法使用的破壁酶價格昂貴，且市場不能持續穩定供 應，對體系的溫度和PH值要求嚴格。原有公布的純化方法有硫酸銨沉澱法，雙水相法，色譜 柱層析法等。硫酸銨沉澱和雙水相法，使用大量的化工原料硫酸鹽和聚乙二醇類，給環境造 成汙染。而且產品中硫酸銨的殘留難以全部清除。色譜層析法，需要消耗大量昂貴的填料 耗材，且設備難以放大，層析速度慢。如中國專利申請（CN103304068A)公開了一種藻藍蛋 白的製備方法，以鮮藻或螺旋藻粉為原料，加入去離子水，混勻，然後置於_20°C?-10°C冰 凍，凍結後，取出置35°C融溶，凍融3?4次，用120目紗布過濾，離心分離，得上清液，純度 為1. 0左右，再進行雙水相萃取、超濾分離純化，冷凍乾燥，得到藻藍蛋白。其採用反覆凍融 法存在生產周期長的問題，而採用雙水相法對環境的汙染較大。


【發明內容】

[0004] 本發明針對以上現有技術中存在的問題，提供一種藻藍蛋白的提取方法，具有提 取效率和破壁率高且對環境汙染少的效果。
[0005] 本發明的目的是通過以下技術方案得以實現的，一種藻藍蛋白的提取方法，該方 法包括以下步驟：
[0006] A、破壁：將含有藻藍蛋白的鮮藻或經過預浸泡的藻粉加入-50°c?-10°c的冰粉 中，將攪拌速度控制在l〇〇〇r/min?3000r/min的條件下進行破壁處理，得到含有藻藍蛋白 的破壁液；
[0007] B、將得到的含有藻藍蛋白的破壁液進行分離、純化和乾燥，得到成品藻藍蛋白。
[0008] 上述藻藍蛋白的提取方法中，所述的分離可以採用本領域常規的方法，如採用沉 澱法分離或離心分離方法等。作為優選，步驟B中所述分離具體為：
[0009] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述步驟A中得到的含有藻藍蛋白的破壁液 中使藻藍蛋白吸附在棉柱上，分離棉柱上的藍色部分，採用擠壓和水進行衝洗，得到含藻藍 蛋白的水溶液。採用本發明的分離方法不僅能夠提高產品的純度，且對環境友好，無需採用 硫酸銨等化學試劑。當然，採用本發明的分離方法，而採用本領域常規的破壁方法如反覆凍 融法、超聲波破壁法，同樣能夠實現提高產品純度的效果。
[0010] 上述藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟B中所述純化和乾燥具體為：
[0011] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液採用超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃 縮液；再將含藻藍蛋白的濃縮液進行乾燥，得到成品藻藍蛋白。
[0012] 本發明的藻藍蛋白的提取方法，通過在高速碾磨攪拌條件下，依靠冰粉和含有藻 藍蛋白的藻細胞之間產生的摩擦力和剪切力，使達到細胞破壁的作用，從而實現使藻藍蛋 白從細胞內流出的效果，而對於分離、純化和乾燥採用本領域常規的方法即可實現。但為 了更好的實現本發明，通過將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液 中，使棉柱高度的大部分在液面以上，而僅使棉柱高度的小部分插入液面以下，使能夠實現 更有效的分離。如使棉柱的高度的2/3?3/4保持在液面以上，而棉柱的高度和寬度可以根 據實際需要進行調整即可，最好使棉柱的高度大於棉柱的寬度。又由於藻藍蛋白具有高度 親水性，而水能夠不斷的被棉柱吸附到液面以上，隨著水在棉柱上不斷的擴散和蒸發，藻藍 蛋白也被不斷的提取到棉柱上，並且吸附在棉纖維（脫脂棉）上。當棉柱上的脫脂棉充分吸 水後，取走液面以上脫脂棉藍色的部分，並且可以填充新的脫脂棉，直至破壁液被吸乾。而 另一方面，由於破壁液中大量的不溶解的細胞碎片不能隨水分子擴散，被滯留在容器底部， 而葉綠素和胡蘿蔔素等色素是脂溶性的，也不能隨水分子擴散，被滯留在容器底部，藻多糖 和核糖核酸等細胞內物質由於親水性和水溶解度不如藻藍蛋白，則在棉纖維上的擴散相對 較慢，滯留在棉柱的下部。經檢測該提取液的純度能夠達到A620nm/A280nm>l. 0,遠遠超過 食品行業普遍使用的A620nm/A280nm>0. 7的要求。
[0013] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，所述含藻藍蛋白的藻粉可以是螺旋藻、魚腥藻 或水華藍藻等。作為優選，所述含藻藍蛋白的藻粉選自螺旋藻。由於螺旋藻的形態是螺旋 狀的結構，在高速攪拌的條件下，凍粉與螺旋藻之間具有更好的摩擦力和剪切力，從而實現 更好的破壁效果，破壁率能夠達到95%以上。
[0014] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，所述步驟A中所述的冰粉採用0. 5? 1. Omol/L的氯化鈉水溶液製成。通過在水中加入氯化鈉再製成相應的冰粉，能夠提高冰粉 的硬度，提高冰粉與含有藻藍蛋白的藻細胞之間的摩擦和剪切效果。
[0015] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，步驟A中所述破壁處理過程中最好使體系溫度 保溫在〇°C以下進行。通過控制體系的溫度在0°C以下，能夠使加入的冰粉不易於融化，更 有利於達到破壁效果。當然也可以在室溫條件下進行，但由於室溫下冰粉容易融化，所以， 在破壁處理過程中如果冰粉融化過多，則可以通過補加冰粉再攪拌來達到破壁效果。作為 優選，步驟A中所述破壁處理過程中體系溫度控制在-10°C以下，更優選，所述破壁處理過 程中體系溫度控制在〇°C?-20°C之間。
[0016] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟B中所述棉柱的高度的2/3保持 在液面以上。使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，能夠更有效的分離出藻藍蛋白，而使葉 綠素、藻多糖和核糖核酸等細胞內物質等親水性和水溶解度相對弱的雜質殘留在底部，進 一步的提高藻藍蛋白的純度。所述棉柱可以採用不鏽鋼濾網進行固定。
[0017] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，所述純化具體為：
[0018] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為50萬?150萬道爾頓的超濾膜進 行過濾，然後，再採用分子量為20萬?40萬道爾頓的超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍 蛋白的濃縮液。
[0019] 由於藻藍蛋白分子間通過氫鍵交聯結合，實際上其在水溶液中往往容易形成三聚 體、六聚體等多聚體大分子蛋白，其聚合物分子量可達到30萬道爾頓以上，因此，通過採用 分子量為50萬?150萬道爾頓的超濾膜過濾，目的是為了充分高效的實現藻藍蛋白和其他 生物大分子雜質以及細胞碎片的分離，並且獲得較大的藻藍蛋白回收率，同時，還能夠除 去細菌等微生物，實現無需採用高溫滅菌的優點。而採用分子量為20萬?40萬道爾頓的 超濾膜能夠更多的去除小分子雜質、重金屬、無機鹽等，同時達到濃縮的效果。
[0020] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟A中所述藻粉與冰粉的質量比 1 :10 ?20。
[0021] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟A中所述的冰粉的溫度 為-30°C?-20°C。
[0022] 在上述的藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟A中所述冰粉的平均粒徑為 20?60目。
[0023] 綜上所述，本發明與現有技術相比具有以下優點：
[0024] 1.本發明藻藍蛋白的提取方法，通過在高速攪拌的條件下，使冰粉與藻粉之間形 成摩擦力和剪切力，無需採用反覆冰融法，就能夠實現破壁效果，而且周期短，大大的提高 了生產效率。
[0025] 2.本發明的藻藍蛋白的提取方法，通過採用棉柱進行分離，能夠有效的分離出藻 藍蛋白，且具有純度高的效果，經過該步分離得到的藻藍蛋白的純度就能夠達到A620nm/ A280nm>l. 0的效果。省去了傳統的過濾除渣環節，實現了無需採用雙水相法萃取，具有對環 境友好的優點，且得到的產品無硫酸鹽和有機溶劑的殘留。
[0026] 3.本發明的藻藍蛋白的提取方法，通過先採用50萬?150萬道爾頓的超濾膜過 濾，實現脫除大分子生物雜質和實現除菌的效果。

【具體實施方式】
[0027] 下面通過具體實施例，對本發明的技術方案作進一步具體的說明，但是本發明並 不限於這些實施例。
[0028] 本發明的藻藍蛋白的提取方法，通過將含有藻藍蛋白的鮮藻或經過預浸泡的藻 粉加入-50°C?-10°C的冰粉中，優選為-30°C?-20°C，將攪拌速度控制在1000r/min? 3000r/min的條件下並控制體系溫度在0°C以下保溫進行破壁處理，破壁處理結束後，使體 系內的冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過檢測，藻細胞的破壁率達到95 %以 上；再將得到的含有藻藍蛋白的破壁液進行分離、純化和乾燥，得到成品藻藍蛋白。作為優 選，所述的冰粉是採用〇. 5?1. Omol/L的氯化鈉水溶液製成；作為優選，所述含藻藍蛋白的 藻粉可以是螺旋藻、魚腥藻或水華藍。通過在水中加入氯化鈉再製成相應的冰粉，能夠提高 冰粉的硬度，提高冰粉與含有藻藍蛋白的藻細胞之間的摩擦和剪切效果，更好的實現破壁 效果；所述冰冰粉的平均粒徑最好為20?60目。上述所述的分離、純化和乾燥採用本領域 常規的方法即可，如採用離心法進行分離得到上清液，再採用雙水相萃取法、硫酸銨沉澱法 純化和色譜純化法等，再進行冷凍乾燥後，得到相應的成品藻藍蛋白。
[0029] 作為另一種實施方式，採用本領域常規的方法（如反覆凍融法）將新鮮的含藻藍 蛋白的藻泥或藻粉（藻粉最好預先經過浸泡處理）進行破壁處理，得到相應的含有藻藍蛋 白的破壁液，然後，將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻 藍蛋白吸附在棉柱上，分離棉柱上的藍色部分，採用擠壓和水進行衝洗，得到含藻藍蛋白的 水溶液，經檢測該含藻藍蛋白的水溶液的純度能夠達到A620nm/A280nm>l. 0,將得到的含藻 藍蛋白的水溶液採用超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮液，再將含藻藍蛋白 的濃縮液進行乾燥，得到成品藻藍蛋白。
[0030] 實施例1
[0031] 取新鮮的螺旋藻藻泥，稱重，再按照藻泥與冰粉的重量比為1 :1〇的比例加 入-10°c的冰粉，冰粉的粒徑為40?20目，將上述的螺旋藻藻泥和冰粉一起加入攪拌罐 內，將攪拌速度控制在l〇〇〇r/min的條件下並控制體系溫度在0°C以下保溫進行破壁處理 80min，破壁處理結束後，使體系內的冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過檢 測，藻細胞的破壁率達到95%以上；
[0032] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸 附在棉柱上，所述醫用脫脂棉可以採用不鏽鋼濾網進行固定，棉柱的高度可以根據實際需 要進行調整，同時，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸乾，取出棉 柱的藍色部分的脫脂棉（吸附藻藍蛋白的部分），由於藻藍蛋白為藍色的物質，易於分離， 通過擠壓和採用水進行衝洗，直至藍色的脫脂棉被衝洗至白色為止，分離出棉柱上的藻藍 蛋白，得到含藻藍蛋白的水溶液；經檢測本步藻藍蛋白的純度A620nm/A280nm>l. 0 ;
[0033] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液採用超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃 縮液；
[0034] 將含藻藍蛋白的濃縮液進行冷凍乾燥，所述冷凍乾燥採用常規的方法即可，得到 成品藻藍蛋白，經檢測，產品純度A620nm/A280nm>2. 0,完全能夠達到醫用級別。
[0035] 實施例2
[0036] 取螺旋藻的藻粉，稱重，最好將上述藻粉與水按1 :3的重量比預浸泡處理。再按照 藻粉與冰粉的重量比為1 :20的比例加入_50°C的冰粉，冰粉的粒徑為40?20目，將上述 預浸泡好的螺旋藻的藻粉和冰粉一起加入攪拌罐內，將攪拌速度控制在3000r/min的條件 下並控制體系溫度在-l〇°C以下保溫進行破壁處理70分鐘，破壁處理結束後，使體系內的 冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過檢測，藻細胞的破壁率達到95%以上；
[0037] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸 附在棉柱上，所述醫用脫脂棉可以採用不鏽鋼濾網進行固定，棉柱的高度可以根據實際需 要進行調整，同時，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸乾，取出棉 柱的藍色部分的脫脂棉（吸附藻藍蛋白的部分），由於藻藍蛋白為藍色的物質，易於分離， 通過擠壓和採用水進行衝洗，直至藍色的脫脂棉被衝洗至白色為止，分離出棉柱上的藻藍 蛋白，得到含藻藍蛋白的水溶液；經檢測本步藻藍蛋白的純度A620nm/A280nm>l. 0 ;
[0038] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為50萬道爾頓的超濾膜進行過濾， 然後，再採用分子量為20萬道爾頓的超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮液；
[0039] 將含藻藍蛋白的濃縮液進行冷凍乾燥，所述冷凍乾燥採用常規的方法即可，得到 成品藻藍蛋白，經檢測，純度A620nm/A280nm>2. 0,完全能夠達到醫用級別。
[0040] 實施例3
[0041] 取水華藍藻的藻粉，最好將上述水華藍藻的藻粉與水按1 :3的重量比例預浸泡 處理。稱重，再按照藻粉與冰粉的重量比為1 :15的比例加入-30°c的冰粉，冰粉的粒徑為 40?20目，將上述的水華藍藻的藻粉和冰粉一起加入攪拌罐內，將攪拌速度控制在2000r/ min的條件下並控制體系溫度在0°C?_20°C之間保溫進行破壁處理90min，破壁處理結束 後，使體系內的冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過檢測，藻細胞的破壁率達 到95%以上；
[0042] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸 附在棉柱上，所述醫用脫脂棉可以採用不鏽鋼濾網進行固定，棉柱的高度可以根據實際需 要進行調整，同時，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸乾，取出棉 柱的藍色部分的脫脂棉（吸附藻藍蛋白的部分），由於藻藍蛋白為藍色的物質，易於分離， 通過擠壓和採用水進行衝洗，直至藍色的脫脂棉被衝洗至白色止，分離出棉柱上的藻藍蛋 白，得到含藻藍蛋白的水溶液；經檢測本步藻藍蛋白的純度A620nm/A280nm>l. 0 ;
[0043] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為100萬道爾頓的超濾膜進行過濾， 然後，再採用分子量為20萬萬道爾頓的超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮 液；
[0044] 將含藻藍蛋白的濃縮液進行冷凍乾燥，所述冷凍乾燥採用常規的方法即可，得到 成品藻藍蛋白，經檢測，純度A620nm/A280nm>2. 0,完全能夠達到醫用級別。
[0045] 實施例4
[0046] 取新鮮的魚腥藻的藻泥，稱重，再按照藻泥與冰粉的重量比為1 :20的比例加 入-40°C的冰粉，冰粉的粒徑為40?20目，所述的冰粉是採用0. 5?1. Omol/L的氯化鈉 水溶液製成，將上述的魚腥藻的藻泥和冰粉一起加入攪拌罐內，將攪拌速度控制在2500r/ min的條件下並控制體系溫度在-5°C以下保溫進行破壁處理80min，破壁處理結束後，使體 系內的冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過檢測，藻細胞的破壁率達到95 %以 上；當然也可以是室溫下進行破壁處理，破壁處理過程中如果冰粉融化過多，則可以通過補 加冰粉後再進行破壁處理來達到破壁效果。
[0047] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸 附在棉柱上，所述醫用脫脂棉可以採用不鏽鋼濾網進行固定，棉柱的高度可以根據實際需 要進行調整，同時，使棉柱高度的3/4保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸乾，取出棉柱 的藍色部分的脫脂棉（吸附藻藍蛋白的部分），由於藻藍蛋白為藍色的物質，易於分離，通 過擠壓和採用水進行衝洗，直至藍色的脫脂棉被衝洗至白色為止，分離出棉柱上的藻藍蛋 白，得到含藻藍蛋白的水溶液；經檢測本步藻藍蛋白的純度A620nm/A280nm>l. 0 ;
[0048] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為150萬道爾頓的超濾膜進行過濾， 然後，再採用分子量為40萬道爾頓的超濾膜進行過濾，得到含藻藍蛋白的過濾液和濃縮 液。
[0049] 將含藻藍蛋白的濃縮液進行冷凍乾燥，所述冷凍乾燥採用常規的方法即可，得到 成品藻藍蛋白，經檢測，純度A620nm/A280nm>2. 0,完全能夠達到醫用級別。
[0050] 實施例5
[0051] 取螺旋藻的藻粉，稱重，再按照藻粉與冰粉的重量比為1 :20的比例加入-50°c的 冰粉，冰粉的粒徑為40?20目，所述的冰粉是採用0. 5?1. Omol/L的氯化鈉水溶液制 成，最好將上述的藻粉預先經過浸泡處理，將上述的螺旋藻的藻粉和冰粉一起加入攪拌罐 內，將攪拌速度控制在3000r/min的條件下並控制體系溫度在-15°C以下保溫進行破壁處 理60min，破壁處理結束後，使體系內的冰粉自然融化，得到含有藻藍蛋白的破壁液，經過 檢測，藻細胞的破壁率達到95%以上；相比較與實施例2可以看了，本實施例中通過採用 0. 5?1. Omol/L的氯化鈉水溶液製成的冰粉，破壁處理速度更快，破壁效率得到較大的提 商；
[0052] 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸 附在棉柱上，所述醫用脫脂棉可以採用不鏽鋼濾網進行固定，棉柱的高度可以根據實際需 要進行調整，同時，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸乾，取出棉 柱的藍色部分的脫脂棉（吸附藻藍蛋白的部分），由於藻藍蛋白為藍色的物質，易於分離， 通過擠壓和採用水進行衝洗，直至藍色的脫脂棉被衝洗至白色為止，分離出棉柱上的藻藍 蛋白，得到含藻藍蛋白的水溶液；經檢測本步藻藍蛋白的純度A620nm/A280nm>l. 0 ;
[0053] 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為100萬道爾頓的超濾膜進行過濾， 然後，再採用分子量為30萬道爾頓的超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮液；
[0054] 將含藻藍蛋白的濃縮液進行冷凍乾燥，所述冷凍乾燥採用常規的方法即可，得到 成品藻藍蛋白，經檢測，純度A620nm/A280nm>2. 0,完全能夠達到醫用級別。
[0055] 本發明中所描述的具體實施例僅是對本發明精神作舉例說明。本發明所屬技術領 域的技術人員可以對所描述的具體實施例做各種各樣的修改或補充或採用類似的方式替 代，但並不會偏離本發明的精神或者超越所附權利要求書所定義的範圍。
[0056] 儘管對本發明已作出了詳細的說明並引證了一些具體實施
[0057] 例，但是對本領域熟練技術人員來說，只要不離開本發明的精神和範圍可作各種 變化或修正是顯然的。
【權利要求】
1. 一種藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，該方法包括以下步驟： A、 破壁：將含有藻藍蛋白的鮮藻或經過預浸泡的藻粉加入-50°C?-10°C的冰粉中，將 攪拌速度控制在l〇〇〇r/min?3000r/min的條件下進行破壁處理，得到含有藻藍蛋白的破 壁液； B、 將得到的含有藻藍蛋白的破壁液進行分離、純化和乾燥，得到成品藻藍蛋白。
2. 根據權利要求1所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟B中所述分離具體為： 將採用醫用脫脂棉製成的棉柱插入上述步驟A中得到的含有藻藍蛋白的破壁液中使 藻藍蛋白吸附在棉柱上，分離棉柱上的藍色部分，採用擠壓和水進行衝洗，得到含藻藍蛋白 的水溶液。
3. 根據權利要求2所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟B中所述純化和乾燥具 體為： 將得到的含藻藍蛋白的水溶液採用超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮 液；再將含藻藍蛋白的濃縮液進行乾燥，得到成品藻藍蛋白。
4. 根據權利要求1所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，所述含藻藍蛋白的藻粉選 自螺旋藻、魚腥藻或水華藍藻。
5. 根據權利要求1-4任意一項所述的藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟A中所述 的冰粉採用〇. 5?1. Omol/L的氯化鈉水溶液製成。
6. 根據權利要求2所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟B中所述棉柱的高度的 2/3保持在液面以上。
7. 根據權利要求1或2任意一項所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟B所述純 化具體為： 將得到的含藻藍蛋白的水溶液先採用分子量為50萬?150萬道爾頓的超濾膜進行過 濾，然後，再採用分子量為20萬?40萬道爾頓的超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白 的濃縮液。
8. 根據權利要求1-4任意一項所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟A中所述藻 粉與冰粉的質量比1 :10?20。
9. 根據權利要求1或2或6所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟A中所述冰粉 的溫度為-30°C?-20°C。
10. 根據權利要求1所述藻藍蛋白的提取方法，其特徵在於，步驟A中所述的冰粉顆粒 的大小為20目?60目。
【文檔編號】C07K1/34GK104151424SQ201410409170
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年8月19日 優先權日:2014年8月19日
【發明者】張兵權 申請人:台州賓美生物科技有限公司