在斷奶時的過敏反應的預防的製作方法

2023-06-09 17:47:46 1

專利名稱：：在斷奶時的過敏反應的預防的製作方法
技術領域：
：本發明涉及營養組合物及該組合物在降低斷奶過程中發生過敏反應和特應性疾病的風險中的應用。
背景技術：
：食物過敏反應(其中生命中首先發生的是牛奶過敏反應)在大多數情況下由對食物中蛋白的反應而引起。在生命早期，免疫系統仍在發育中，可能不能對食物性抗原產生耐受(這也可被描述為口服耐受的誘導不足)。其結果是嬰兒或兒童或幼小動物對食物蛋白產生過度的免疫應答並對其產生過敏反應。食物過敏反應不僅會影響人類還會影響其他哺乳動物如狗和貓。通常，食物超敏反應僅在易感的嬰兒、兒童或幼小動物初次遇到含有潛在變應原的新食物後產生。除其母乳之外，至少人類嬰兒一般最早遇到的食物蛋白是牛奶蛋白，並且如上所述，牛奶過敏反應是人類嬰兒中最常見的食物過敏反應。一般認為，有確立的牛奶過敏反應的嬰兒對其它食物蛋白如雞蛋和穀物蛋白產生過敏反應的風險增加。這些過敏反應臨床上會表現為特應性疾病如特應性皮炎、溼疹和哮喘。即使是那些對牛奶蛋白成功產生口服耐受的嬰兒，當斷奶時飲食中引入其它食物蛋白如雞蛋和穀物蛋白時，也可能隨後對其發生過敏反應。從飲食的觀點來看，治療確立的過敏反應只有兩種方法——必須全部避免含變應原的食物，或者必須處理食物例如通過廣泛水解以降低其變應原潛能。為後者目的生產了含有廣泛水解的牛奶蛋白(所含的肽由不多於5個胺基酸構成)的嬰兒配方。相似地，例如在美國專利US6403142中，已計劃為懷疑產生食物過敏反應的伴侶動物製備具有減低的變應原性的寵物食品。然而，由於在避免式飲食(avoidancediets)的情況下可用的食材非常有限，而在使用廣泛水解產物的情況下口味差，排除式飲食(exclusiondiets)具有順應性低的缺點。另外，總是存在仍然遇到完整變應原的危險。因此，特別是對被認為有過敏反應風險的兒童(即，具有至少一個患有過敏反應的近親的兒童)而言，設計了有助於降低產生最初過敏反應風險的產品。這種產品的實例之一是基於部分水解的乳清蛋白的嬰兒配方，所述乳清蛋白的商標是NANHAl和NANHA2。這些產品被證明能積極誘導對牛奶蛋白的口服耐受。Fritsch6等(J.AllergyClin.Immunol，第100卷，第2期，第266-273頁，1997)用動物模型顯示具有18%水解度的牛奶蛋白的酶水解物能夠誘導對完整牛奶蛋白的口服耐受，而具有28%水解度的水解物則不能。這些實驗的結果顯示，用這種適度水解的牛奶配方對大鼠進行的預防性給食抑制了特異性IgE和腸肥大細胞的介質釋放(均為直接型過敏反應的參數)，與標準配方相比上述配方的變應原性被降低超過100倍。這項工作證明，對牛奶蛋白而言，限定酶水解度由此保持肽類誘導口服耐受的能力同時顯著降低其變應原性是可能的。在人奶中發現的生物活性肽一轉化生長因子β，已被證實為特應性疾病的潛在調節劑。整合分析(metaanalysis)為人奶中TGF-β的總體過敏反應預防效果提供了證據(Gdalevich，2001)。根據Kalliomaki等(JAllergyClin.Immunol.1999年12月；104(6)1251-7)，初乳中的TGF-β能夠在僅母乳餵養期預防特應性疾病的發生並促進人類個體中特異性IgA產生。相似地，Oddy等報導了在相當長時期內母乳餵養並因此與較短時期母乳餵養的兒童相比接收到的TGF-β的總量高的兒童中，喘鳴(指示發生呼吸器官過敏反應)的發病率降低(Oddy等，JAllergyClinImmunol)。近來，在大鼠模型中顯示向牛奶配方WATGF-P降低了對牛奶的變應性致敏(Pentilla等，PediatrResearch2006)。幼小哺乳動物僅靠奶餵養的時期是相對短的範圍，例如，從對大鼠和小鼠而言幾周，到對人類嬰兒而言四至六個月。在這段時期後，其它含有不同食物蛋白的食材逐漸地被引入飲食中，在通常被稱為斷奶的階段，對用來提供所有生長發育必需營養素的奶的依賴被相應地降低。一般而言，幼小哺乳動物遇到的第二食物蛋白是穀物蛋白，其在斷奶開始即被引入，對人類嬰兒而言通常以嬰兒穀物的形式引入。即使奶蛋白已被成功地引入，穀物蛋白當最初被引入幼小哺乳動物飲食中時也可能引起過敏反應。此後，幼小哺乳動物將快速連續地遇到其它食物蛋白包括雞蛋、花生、魚和肉，每次都有導致過敏反應的風險。然而，與奶蛋白相比，對其它食物蛋白如穀物和雞蛋蛋白的過敏反應的初級預防或通過飲食幹預預防對其它抗原如花粉的過敏反應發生的可能性相對幾乎沒有引起關注。事實上，考慮到對牛奶蛋白的過敏反應通常在二至五歲間自發消失而對例如穀物和雞蛋蛋白的過敏反應一般較慢消失甚至可能持續終生，其可能是更值得關切的事。因此，特別是在有過敏反應發生風險的嬰兒中，有需要通過降低對除了奶蛋白的食物蛋白發生過敏反應的風險以促進所述蛋白在斷奶幼小哺乳動物飲食中的引入，以及有需要降低隨後的特應性疾病的發生，無論其是否由食物性抗原引起。發明概述本發明人驚奇地發現，當被引入在斷奶的幼小哺乳動物飲食中時，使用部分水解的奶蛋白和TGF-β的組合有助於誘導對其它食物蛋白如穀物和雞蛋蛋白的耐受，同時保持先前確立的對牛奶蛋白的耐受。因此，在第一方面，本發明提供了營養組合物，其包含水解度在15至25%的部分水解的奶蛋白和就每IOOml即用組合物而言的50至1000毫微克的TGF-β。本發明還涉及對在斷奶的幼小哺乳動物對新引入的食物蛋白的過敏反應的初級預防的方法，其包括對斷奶期幼小哺乳動物給食治療量的包含水解度15至25%的部分水解的奶蛋白和TGF-β的組合物。本發明進一步涉及在斷奶的幼小哺乳動物中特應性疾病的初級預防的方法，其包括對斷奶期幼小哺乳動物給食治療量的包含水解度15至25%的部分水解的奶蛋白和TGF-β的組合物。特應性疾病如特應性溼疹、過敏性鼻炎和哮喘可能是對食物蛋白的過敏反應或對其它類型抗原如空氣傳播型抗原的過敏反應的臨床表現。例如，哮喘的流行在近幾十年裡顯著增加，極可能是環境因素(如病原體、變應原、空氣汙染及飲食)改變的結果。已證明，空氣傳播型抗原能有效地通過奶由母親轉移給嬰兒，以及耐受誘導不需要免疫球蛋白的轉移。母乳餵養誘導的耐受依賴於哺乳期間TGF-β的存在，由CD4+T淋巴細胞介導並依賴於T細胞中的TGF-β信號傳導。總之，母乳介導的空氣傳播型抗原向嬰兒的轉移使口服耐受被誘導，導致抗原-特異性保護以免發生過敏性氣道疾病。不希望受理論的約束，發明人相信，對空氣傳播型抗原的耐受誘導不需要免疫球蛋白的轉移但是卻依賴於母乳中TGF-β的作用，這一令人驚奇的發現導致實現了通過基於部分水解的奶蛋白與TGF-β聯合的營養幹預以降低對食物蛋白的過敏反應和特應性疾病發生的風險的可能性。換句話說，在斷奶期間施用部分水解的奶蛋白和TGF-β的組合在當嬰兒初次遇到其它食物蛋白如雞蛋蛋白和穀物蛋白時有助於降低對新蛋白的致敏風險及隨之對這些蛋白發生的過敏反應，以及降低特應性疾病發生的風險。發明詳述在本說明書中，下列術語具有下列含義「特應性疾病」表示變應性致敏的臨床表現，並包括特應性皮炎、特應性溼疹、變應性鼻炎和哮喘；蛋白的「水解度」或「DH」表示完整蛋白在水解時被裂解的肽鍵數除以完整蛋白中的肽鍵數，以百分比表達；「嬰兒」表示年齡小於12個月的兒童；「成長配方(follow-onformula)」表示預期用於年齡在4個月以上的嬰兒、並在所述嬰兒逐漸變化的飲食中構成主要液體成分的組合物；「口服耐受」表示對經口服途徑遞送的抗原有免疫低反應性的活性狀態；「對食物蛋白過敏反應的初級預防」表示防止建立該過敏反應，並包括降低該過敏反應的風險；"TGF-β」或「轉化生長因子β」是指一組至少5種不同但密切相關的生物活性肽，其稱為TGF-β1、TGF-β2等，尤其在人奶中被發現(TGF-β1和TGF-β2)(Li等，免疫iSg^^mH因ill(TransformingGrowthFactor-βRegulationofImmuneResponses),Annu.Rev.Immunol.200624:99_146)；「斷奶」表示在幼小哺乳動物的飲食中引入食物而非其母乳或基於奶的替代品如嬰兒配方；「斷奶期」表示在幼小哺乳動物生命中的一個時期，以食物而非其母乳或基於奶的替代品的引入為開始，以停止母乳餵養或嬰兒配方或成長配方的施用為終止。除非另有說明，所有提及的百分比都是重量百分比。本發明提供了營養組合物，其包含水解度15至25%的部分水解的奶蛋白和就每IOOrnl即用組合物而言的50至1000毫微克的TGF-β。奶蛋白可以是乳清蛋白、酪蛋白或其混合物，但優選乳清蛋白。如果使用乳清蛋白，優選水解度在15至19%。優選地，部分水解的奶蛋白具有至少低於完整乳清蛋白100倍的殘留抗原性。部分水解的奶蛋白的殘留變應原性可通過由Fritsch6等(Int.Arch.AllerandApplImm,93，289-293，1990)描述的技術來測量。按照EU導則96/4/EC的規定，所述部分水解的奶蛋白及含有其的產品可以被描述為低變應原的。本發明的組合物可以被用於斷奶的幼小哺乳動物包括人類嬰兒、幼兒以及幼小的伴侶動物如狗和貓。優選地，本發明的營養組合物是嬰兒配方、更優選用於年齡在4個月以上嬰兒的成長配方。奶蛋白可以以本領域已知的任何適合方式水解。在乳清蛋白的情況下，合適的方法被描述於歐洲專利EP322，589，其內容在此引入作為參考。經發現，如果用作起始材料的乳清片段基本上無乳糖，則蛋白在水解和其後的加熱過程中受到較少的賴氨酸的阻礙。這使得賴氨酸阻礙的範圍從約15%重量的總賴氨酸降低到小於約10%重量的賴氨酸；例如約7%重量的賴氨酸阻礙，這極大地改善了蛋白源的營養質量。乳清蛋白的源可以是酸乳清、甜乳清、乳清蛋白分離物或其混合物。然而，優選地，蛋白源是基於乳清蛋白分離物或改良的甜乳清。甜乳清是乳酪生產中容易獲得的副產品並常用於生產基於牛奶的嬰兒配方。然而，甜乳清包含稱為酪蛋白糖巨肽(CGMP)的成分，其不期望地富含蘇氨酸而少含色氨酸。從甜乳清中去除CGMP以產生具有更接近於人奶蘇氨酸含量的蛋白片段。從甜乳清中去除CGMP的過程被描述於EP880902。如果用改良的甜乳清或乳清蛋白分離物作為蛋白源，優選用游離組氨酸以0.1至3%重量的蛋白的量加以補充。本發明的嬰兒配方可包含就每IOOml即用配方而言的1.0至2.0克部分水解的乳清蛋白，更優選1.5至1.9g/100ml。本發明的成長配方含有就每IOOml即用配方而言的50至1000毫微克的TGF-β，更優選50至500毫微克/100ml，最優選200至300毫微克/100ml。優選地，本發明的成長配方含有TGF-β1和TGF-i32，更優選以15至150的比例存在。TGF-β可以以富含生物活性肽如來自於ArmorProt6ines(法國)的TM0301或XP-828L的乳清蛋白片段的形式，或以例如如EP313515或W092/00994中所述的從奶中分離的多肽生長因子的形式加入配方中。或者，如果優選可以用重組TGF-β。本發明的成長配方可含有碳水化合物源。儘管優選的碳水化合物源是乳糖，可以使用任何常規存在於嬰兒配方中的碳水化合物源如乳糖、蔗糖、麥芽糖糊精、澱粉及其混合物。優選地，碳水化合物源貢獻配方總能量的35至65%。本發明的成長配方可含有脂類源。脂類源可以是任何適合用於嬰兒配方的脂質或脂肪。優選的脂肪源包括棕櫚三油酸甘油酯、高油酸葵花籽油和高油酸紅花油。也可加入必需脂肪酸亞油酸和α-亞麻酸，也可加入少量含有大量的預先形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，如魚油或微生物油。總之，脂肪含量優選地例如貢獻配方總能量的30至55%。優選地，脂肪源中η-6至η-3脂肪酸的比例是約51至約151；例如約81至約101。所述成長配方還可以以營養學上有意義的量含有所有被認為在日常飲食中必要的維生素和礦物質。對一些維生素和礦物質而言已建立最小需求量。礦物質、維生素和其它任選地存在於嬰兒配方中的營養素的實例包括維生素Α、維生素Bi、維生素Β2、維生素Β6、維生素Β12、維生素Ε、維生素K、維生素C、維生素D、葉酸、肌醇、煙酸、生物素、泛酸、膽鹼、鈣、磷、碘、鐵、鎂、銅、鋅、錳、氯化物、鉀、鈉、硒、鉻、鉬、牛磺酸和L-肉鹼。礦物質通常以鹽的形式加入。特定礦物質和其它維生素的存在及用量的變化取決於目標嬰兒群。如果有必要，配方可含有乳化劑和穩定劑如大豆卵磷脂、單和雙甘油酯的檸檬酸酯等。配方任選地含有可具有有益影響的其它物質如乳鐵蛋白、核苷酸、核苷等。最後，配方可含有不能消化的寡糖如半乳寡糖(galacto-oligosaccharides)，例如含量是0.3至7%。配方可以以任何合適的方式製備。例如，可通過以適當的比例混合部分水解的奶蛋白、碳水化合物源以及脂肪源而製備。如果使用乳化劑，則可在此時加入。TGF-β也可在此時加入。維生素和礦物質可在此時加入但通常稍後加入以避免熱降解。任何親脂性維生素、乳化劑等可在攪拌前溶解於脂肪源中。然後可將水、優選已進行反滲透的水加入混合以形成液體混合物。水的適宜溫度為約50°C至約80°C以利於成分的分散。可使用商購可得的液化器以形成液體混合物。然後將液體混合物(例如分兩個階段)均化。然後可將液體混合物熱處理以降低細菌載量，例如通過快速加熱液體混合物至約80°C至約150°C的溫度範圍約5秒至約5分鐘來進行。這可通過注蒸汽、高壓釜或通過熱交換器進行；例如板式熱交換器。然後，可將液體混合物冷卻至約60°C至約85°C；例如通過瞬時冷卻法進行。然後可將液體混合物再次均化，例如分兩個階段，第一階段約IOMPa至約30MPa，第二階段約2MPa至約lOMPa。然後可將均化的混合物進一步冷卻以加入任何熱敏感成分，如維生素和礦物質。此時適宜地調節均化混合物的pH和固體成分。將均化的混合物轉移至合適的乾燥裝置如噴霧乾燥器或冷凍乾燥器並轉化成粉末。該粉末的含水量應小於約5%重量。TGF-β如果未在之前加入則可在此時通過乾燥混合加入。如果優選是液體產品，則可將均化的混合物滅菌並無菌填裝於合適的容器中。實施例1下列給出本發明的成長配方組合物的實施例。該組合物僅為說明意圖而給出。tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage8權利要求營養組合物，其包含水解度15至25％的部分水解的奶蛋白和就每100ml即用組合物而言的50至1000毫微克的TGF-β。2.根據權利要求1的組合物，其為成長配方。3.根據權利要求1或2的組合物，其中所述部分水解的奶蛋白具有至少低於完整蛋白100倍的殘留抗原性。4.根據前述權利要求中任意一項的組合物，其中所述部分水解的奶蛋白是乳清蛋白。5.根據權利要求5的組合物，其中所述部分水解乳清蛋白的水解度是15至19%。6.根據權利要求4或5的組合物，其包含就每IOOml即用組合物而言的1.0至2.0克部分水解的乳清蛋白。7.根據權利要求4至6中任意一項的組合物，其包含就每IOOml即用組合物而言的1.2至1.9克部分水解的乳清蛋白。8.根據前述權利要求中任意一項的組合物，其包含就每IOOml即用組合物而言的200至300毫微克的TGF-β。9.根據前述權利要求中任意一項的組合物，其中所述TGF-β是TGF-β1和TGF-β2的混合物。10.根據權利要求9的組合物，其中TGF-β1與TGF-β2的比例是15至150。11.對在斷奶的幼小哺乳動物對新引入的食物蛋白的過敏反應的初級預防方法，包括在斷奶期以治療量的根據權利要求1至10中任意一項的組合物餵養幼小哺乳動物。12.對在斷奶的幼小哺乳動物中特應性疾病的初級預防方法，包括在斷奶期以治療量的根據權利要求1至10中任意一項的組合物餵養幼小哺乳動物。13.根據權利要求11或12的方法，其中幼小哺乳動物是人類嬰兒。14.根據權利要求13的方法，其中人類嬰兒的年齡在4個月以上。全文摘要本發明涉及營養組合物，其包含水解度15至25％的部分水解的奶蛋白和就每100ml即用組合物而言的50至1000毫微克的TGF-β，以及用於初級預防在斷奶的幼小哺乳動物對新引入的食物蛋白的過敏反應的方法和預防在斷奶的幼小哺乳動物發生特應性疾病的方法，其包括以治療量的所公開組合物餵養幼小哺乳動物。文檔編號A23L1/305GK101808532SQ200880108700公開日2010年8月18日申請日期2008年9月19日優先權日2007年9月26日發明者A·梅賽尼爾,A·齊歇爾,M·C·菲紹申請人:雀巢產品技術援助有限公司