杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法

2023-05-29 09:36:31

專利名稱：：杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法
技術領域：
：本發明涉及杞蓉片的質量控制方法，特別是涉及一種杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法。
背景技術：
：杞蓉片是由枸杞子、肉蓯蓉、鎖陽、蛇床子、女貞子、五味子、金櫻子、淫羊藿和菟絲子九種原料製備而成，其處方和製法如下處方枸杞子70g肉蓯蓉140g鎖陽210g蛇床子42g女貞子56g五味子42g金櫻子56g淫羊藿98g菟絲子84g製法以上九味，鎖陽粉碎成細粉，過篩；五味子、蛇床子第一次加10倍量60%乙醇加熱回流提取2小時，第二次加8倍量60%乙醇加熱回流提取1小時，合併提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.281.30的清膏，備用；其餘枸杞子等六味加水煎煮二次，第一次8倍量煎煮3小時，第二次6倍量煎煮2小時，合併煎液，靜置，取上清液濃縮至適量，加入上述五味子清膏充分攪勻，濃縮成稠膏，加入鎖陽細粉，混勻，製成顆粒，乾燥。壓製成1000片，包糖衣或薄膜衣，即得。快速，準確地測定杞蓉片中各種原料的含量是控制產品質量的重要指標之一。
發明內容本發明的目的在於提供一種有效控制杞蓉片產品質量的杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法。本發明的技術方案為—種杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法，其特徵在於採用高效液相色譜法進行測定，其包括如下步驟1)色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；30:70的乙腈_水為流動相；檢測波長為270nm;理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於5000;2)對照品溶液的製備精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每lml含0.lmg的溶液，即得；3)供試品溶液的製備取杞蓉片樣品，除去包衣，精密稱定，研細，再次精密稱定，置容器中，精密加入甲醇，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測定，即得。上述超聲處理功率250W，頻率50KHz，超聲處理2040分鐘。本發明以淫羊藿苷為對照品，用高效液相色譜法測定杞蓉片中淫羊藿苷的含量，作為控制杞蓉片的質量依據。按照本發明的方法，結果樣品中淫羊藿苷色譜峰與相鄰色譜峰分離良好，陰性對照(取淫羊藿)無幹擾，本發明的含量測定方法簡便、快捷，經方法學驗證，該法準確度、精密度、專屬性、耐用性、重現性均良好，達到國家藥品質量標準。下面為本發明的方法性驗證l準確度取同一批已知含量(批號(20070107，含量1.1644mg/g)的供試品6份，每份取樣量為供試品取量的50%(即0.25g)，以當前取樣含量的l:l，分別精密加入淫羊藿苷對照品溶液(0.1036mg/ml)3ml，按含量測定方法測定，計算淫羊藿苷的回收率。結果平均回收率為98.1%，RSD=0.9%(見表1)。表1準確度試驗結果試驗取樣量含量加入量測定結果回收率平均值RSD序號(g)(mg)(mg)(mg)(%)(%)(%)10.26100.30390.31080.608698.020.26130.30420.31080.604496.630.26400.30740.31080.614698.898.10.940.26420.30760.31080.613498.450.26570.30940.31080.617599.160.26320.30650.31080.616697.82精密度2.l重複性取同一批供試品(批號20070107)6份，按含量測定方法測定。結果重複性良好(見表2)。表2重複性試驗結果試驗號取樣量(g)含量(mg/片)平均值(mg/片)RSD%10.51800.45420.49550.44630.48340.4410.4471.140.50820.44350.49680.44860.50920.4522.2中間精密度取同一批供試品(批號20070107)6份，分別由A、B、C三人，在不同的時間，用同一臺設備，按含量測定方法測定。結果精密度良好(見表3)。表3中間精密度試驗結果4tableseeoriginaldocumentpage53專屬性試驗精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液各20iU，分別注入液相色譜儀，按含量測定的方法測定。結果未見陰性對照溶液有幹擾。4線性考察分別精密吸取淫羊藿苷對照品溶液(0.1036mg/g)3、5、10、15、20iil，注入液相色譜儀，按含量測定的方法測定，以對照品的濃度為橫坐標，測得的峰面積為縱坐標，繪製標準曲線，得回歸方程y=2182.5113X+5.81649，r=0.9999。結果表明，淫羊藿苷對照品溶液在0.31082.072iig之間與其峰面積呈良好的線性關係(見表4)。表4線性考察結果tableseeoriginaldocumentpage55測定範圍部頒標準規定的最低限度為每lg含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H4。015)計，不得少於1.10mg。故按限度的70%和300%(即0.773.30mg)考察測定範圍的準確度。範圍準確度取同一批已知含量(批號20070107，含量1.1644mg/g)的供試品12份，按範圍限度的50%取樣，其中低限取6份，每份0.34g，高限取6份，每份1.46g，按當前取樣含量約1:1分別精密加入淫羊藿苷對照品溶液(0.1036mg/ml)，低限2ml，高限8ml，按含量測定方法測定，計算淫羊藿苷的回收率。結果低限平均回收率為96.84%，RSD=0.8%;高限平均回收率為97.22%，RSD=0.8%(見表5)。表5範圍準確度試驗結果tableseeoriginaldocumentpage6—(含量測定取樣量*擬測定的高低限度濃度)x0.5已知樣品的含量濃度根據線性、精密度和準確度的試結果，本方法適合檢測含量在0.773.30mg/g的供試品。6耐用性6.!穩定性試驗取同一份供試品溶液，自製備後，按含量測定方法，分別在0、2、4、6、8小時進樣測定。結果供試品溶液自製備後8小時內測定基本穩定(見表6)。表6穩定性試驗結果tableseeoriginaldocumentpage66.2不同色譜柱的比較取同一批樣品(批號20070107)2份，按含量測定法，分另U用PhenomenexGeminiC18(250mmX4.6mm，5iim，柱號399977—11)、AgillentzorbaxeclipseC18(250mmX4.6mm，5um，柱號990967-902)、WaterssymmetryC18(250mmX4.6mm，5ym，柱號02103612413670)三種品牌的色譜柱測定，結果無明顯差別(見表7)。表7不同色譜柱的測定結果tableseeoriginaldocumentpage7具體實施例方式下面所例舉的具體實施例僅僅是對本發明的解釋說明，不構成對本發明的任何限制。照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈-水(30:70)為流動相；檢測波長為270nm。理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於5000。對照品溶液的製備精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含0.lmg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取0.5g，再次精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各101，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每片含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40015)計，不得少於0.33mg。權利要求一種杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法，其特徵在於採用高效液相色譜法進行測定，其包括如下步驟1)色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；30∶70的乙腈-水為流動相；檢測波長為270nm；理論板數按淫羊藿苷峰計算應不低於5000；2)對照品溶液的製備精密稱取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇製成每1ml含0.1mg的溶液，即得；3)供試品溶液的製備取杞蓉片樣品，除去包衣，精密稱定，研細，再次精密稱定，置容器中，精密加入甲醇，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得；4)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。2.按照權利要求所述的杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法，其特徵是上述超聲處理功率250W，頻率50KHz，超聲處理2040分鐘。全文摘要本發明涉及一種杞蓉片中淫羊藿苷的含量測定方法，該方法採用高效液相色譜法進行測定，以淫羊藿苷為對照品，以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑，30∶70的乙腈-水為流動相的高效液相色譜法。按照本發明的方法，結果樣品中淫羊藿苷色譜峰與相鄰色譜峰分離良好，陰性對照(取淫羊藿)無幹擾，本發明的含量測定方法簡便、快捷，經方法學驗證，該法準確度、精密度、專屬性、耐用性、重現性均良好，達到國家藥品質量標準。文檔編號A61K31/7048GK101791358SQ20101013980公開日2010年8月4日申請日期2010年4月7日優先權日2010年4月7日發明者丁建寶,亓偉,馮梅,孫志剛,田文榮申請人:寧夏啟元國藥有限公司