一種三棵針提取物的製備方法
2023-05-29 09:38:51 1
一種三棵針提取物的製備方法
【專利摘要】本發明屬於中藥提取【技術領域】，具體涉及一種三棵針提取物的製備方法。該方法包括以下步驟：a、三顆針破壁粉碎，於沸水中提取至少兩次，每次30-40分鐘，過濾；b、合併濾液，濾液濃縮為浸膏；c、浸膏乾燥得粗提物；d、粗提物用大孔樹脂層析柱進行純化，純化時先用鹼水洗滌除雜，然後用乙醇對層析柱洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮、乾燥得鹽酸小檗鹼含量≥80%的三棵針提取物。本發明的能夠實現三顆針中鹽酸小檗鹼的提取分離，並且工藝簡單，能耗小，時間短，實施容易，對設備配置要求低，同時提取效率高，並且純度好。
【專利說明】一種三棵針提取物的製備方法
[0001]【技術領域】
本發明屬於中藥提取【技術領域】，具體涉及一種三棵針提取物的製備方法。
[0002]【背景技術】
三棵針又名細葉小檗、針雀、銅針刺、刺黃連，是小檗科，小檗屬類植物的俗稱，落葉灌木。三棵針的提取物以其天然性、無抗藥性、多功能性及毒副作用較小等優點成為抗生素的替代品之一。
[0003]三棵針提取物的主要活性成分為小檗鹼，又稱黃連素，在臨床上常作為廣譜抗生素使用，近年來，研究發現黃連素還有許多新用途，特別是心內科、腫瘤科、器官移植方面的研究應用有新的發現(宋君，小檗鹼臨床應用及研究新進展，現代醫藥衛生2008年24卷第11 期，1652-1654)。
[0004]考慮到小檗鹼在三棵針中具有上述特殊功效，有必要進行提取分離。而國內對三棵針活性物質的提取分離研究較少，主要採用酸溶鹼沉鹽析的方法進行提取，如下:取三棵針根，切片，加8倍量水，加硫酸調節pH值至I-2，浸潰2次，每次24小時，濾過，濾液合併，用石灰乳調節PH值至12，靜置12小時，濾過，濾液加3倍量8%氯化鈉溶液，用鹽酸調節pH值至8-9，靜置12小時，濾過，取沉澱，乾燥，即得粗製品。將粗製品加15倍 量水，加熱至80°C攪拌使溶解，濾過，濾液加鹽酸調節pH值至I-2，靜置24小時，濾過，沉澱用水洗去多餘的鹽酸，在80°C以下乾燥，即得。有人用正交法對提取液的濃度，浸泡提取時間，鹽析時的PH值和鹽析液的含鹽量4個因素進行了優化(趙永生，胡大澤，三棵針提取工藝的優化選擇，中國民族民間醫藥雜誌2003年總第64期，299-300)，該工藝周期長，一般需要3_4天，收率低，且設備必須耐酸，要求高。
[0005]
【發明內容】
本發明涉及一種提取時間短的三棵針提取物的製備方法。
[0006]本發明採用以下技術方案:
一種三棵針提取物的製備方法，包括以下步驟:a、三顆針破壁粉碎，於沸水中提取至少兩次，每次30-40分鐘，過濾；b、合併濾液，濾液濃縮為浸膏；c、浸膏乾燥得粗提物；d、粗提物用大孔樹脂層析柱進行純化，純化時先用鹼水洗滌除雜，然後用乙醇對層析柱洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮、乾燥得鹽酸小檗鹼含量> 80%的三棵針提取物。
[0007]進一步精製，步驟d得到的三棵針提取物還可繼續採用C18反相矽膠填料色譜柱進一步純化，用85-95% (v/v)乙醇流動相洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮、乾燥得鹽酸小檗鹼含量> 95%的三棵針提取物。
[0008]步驟a中沸水用量為三顆針質量的8-15倍。
[0009]步驟d中鹼水為濃度0.5mol/L的氫氧化鈉溶液，鹼水的用量為層析柱填料體積的10-15倍，乙醇體積濃度為85-95%。
[0010]步驟d中大孔樹脂層析柱中的填料為HP600大孔樹脂。
[0011]步驟a中破壁粉碎時採用超微粉碎機。
[0012]本發明的能夠實現三顆針中鹽酸小檗鹼的提取分離，並且工藝簡單，能耗小，時間短，只需24h左右，實施容易，對設備配置要求低，同時提取效率高，並且純度好。
[0013]【具體實施方式】 實施例1:
a、稱取IOkg三棵針飲片，通過超微粉碎機進行破壁打碎；於8倍質量的純化水中蒸汽煮沸，動態攪拌，時間30分鐘，過100目篩網，提取2次；
b、將濾液合併，真空濃縮為浸膏；
C、浸膏噴霧乾燥得粗提物；
d、粗提物用HP600大孔樹脂層析柱進行純化，先用層析柱填料體積10倍的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液洗滌除雜，再用90% (v/v)乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液真空濃縮成浸膏，浸膏噴霧乾燥得提取物，其中鹽酸小檗鹼的含量達80.9% ；
e、精製純化，將上述提取物進行反相矽膠色譜分離，固定相為C18反相矽膠，洗脫流動相90% (v/v)乙醇，收集洗脫液，洗脫液濃縮、乾燥得純度達96.1%的三棵針提取物。
[0014]實施例2:
a、稱取IOkg三棵針飲片，通過超微粉碎機進行破壁打碎；於12倍質量的純化水中蒸汽煮沸，動態攪拌，時間30分鐘，過100目篩網，提取2次；
b、將濾液合併，真空濃縮為浸膏；
C、浸膏噴霧乾燥得粗提物；
d、粗提物用HP600大孔樹脂層析柱進行純化，先用層析柱填料體積12倍的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液洗滌除雜，再用95% (v/v)乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液真空濃縮成浸膏，浸膏噴霧乾燥得提取物，其中鹽酸小檗鹼的含量達81.6% ；
e、精製純化，將上述提取物進行反相矽膠色譜分離，固定相為C18反相矽膠，洗脫流動相95% (v/v)乙醇，收集洗脫液，洗脫液濃縮、乾燥得純度達97.3%的三棵針提取物。
[0015]實施例3:
a、稱取IOkg三棵針飲片，通過超微粉碎機進行破壁打碎；於15倍質量的純化水中蒸汽煮沸，動態攪拌，時間30分鐘，過100目篩網，提取2次；
b、將濾液合併，真空濃縮為浸膏；
C、浸膏噴霧乾燥得粗提物；
d、粗提物用HP600大孔樹脂層析柱進行純化，先用層析柱填料體積15倍的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液洗滌除雜，再用85% (v/v)乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液真空濃縮成浸膏，浸膏噴霧乾燥得提取物，其中鹽酸小檗鹼的含量達82.1% ；
e、精製純化，將上述提取物進行反相矽膠色譜分離，固定相為C18反相矽膠，洗脫流動相85% (v/v)乙醇，收集洗脫液，洗脫液濃縮、乾燥得純度達96.9%的三棵針提取物。
【權利要求】
1.一種三棵針提取物的製備方法，其特徵在於包括以下步驟:a、三顆針破壁粉碎，於沸水中提取至少兩次，每次30-40分鐘，過濾；b、合併濾液，濾液濃縮為浸膏；c、浸膏乾燥得粗提物；d、粗提物用大孔樹脂層析柱進行純化，純化時先用鹼水洗滌除雜，然後用乙醇對層析柱洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮、乾燥得鹽酸小檗鹼含量> 80%的三棵針提取物。
2.如權利要求1所述的三棵針提取物的製備方法，其特徵在於，步驟d得到的三棵針提取物採用C18反相矽膠填料色譜柱進一步純化，用85-95%乙醇流動相洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮、乾燥得鹽酸小檗鹼含量> 95%的三棵針提取物。
3.如權利要求1或2所述的三棵針提取物的製備方法，其特徵在於，步驟a中沸水用量為三顆針質量的8-15倍。
4.如權利要求1或2所述的三棵針提取物的製備方法，其特徵在於，步驟d中鹼水為濃度0.5mol/L的氫氧化鈉溶液，鹼水的用量為層析柱填料體積的10-15倍，乙醇體積濃度為85-95%。
5.如權利要求1或2所述的三棵針提取物的製備方法，其特徵在於，步驟d中大孔樹脂層析柱中的填料為HP600大孔樹脂。
6.如權利要 求1或2所述的三棵針提取物的製備方法，其特徵在於，步驟a中破壁粉碎時採用超微粉碎機。
【文檔編號】A61K36/29GK103446214SQ201310363150
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年8月20日 優先權日:2013年8月20日
【發明者】何勝利, 程永科, 李俊霞, 白豔鶴 申請人:天津藥業集團新鄭股份有限公司