胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術的製作方法

2023-05-29 08:23:21

專利名稱：胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術的製作方法
技術領域：
本發明胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術涉及一種胡楊組培快繁技術。
背景技術：
胡楊是生長在沙漠地區的大喬木，楊柳科植物。具有很好的耐鹽鹼、耐乾旱和耐寒冷的特性。但是由於種種原因胡楊的數量已經較少，被列為國家三級瀕危保護植物名單。中國政府重視改變西北地區的乾旱和沙漠環境，胡楊作為改善環境的優良植物具備以下幾個條件第一、適應性強，是當地的傳統樹種；第二，最有效，胡楊作為喬木類忍受逆境的能力最強；第三，經濟價值高，能提供木材和胡楊鹼等產品。缺點種苗數量太少。原有的胡楊林目前已進入成熟和衰退期，幼林缺乏。當地部門除保護現有資源外，也進行了一些育種和提高繁育的研究。但尚未解決胡楊種苗的快速繁育問題。為此，本發明提出一種新的技術方案。

發明內容
本發明目的在於提供一種胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，建立以瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖的技術途徑。從而解決種苗數量太少的問題。
本發明目的可通過下述技術方案一種胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，對胡楊進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，大量分化成再生植株，包括外植體取材及處理、接種分化培養、生根培養、練苗移栽，其中外植體取材挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。
在上述方案基礎上，所述的外植體取材是在4-5月份晴朗天氣，挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。
對外植體的無菌處理清水衝洗1小時，再用5-10％的過氧化氫消毒10-15分鐘，用無菌水衝洗乾淨，取出放無菌濾紙吸乾水分。
所述的接種分化培養在無菌操作臺取消毒好的嫩枝莖段，切成為0.3-0.5cm長度的小段，接種於培養基1或培養基2培養；10天左右，莖段的兩端切口出現愈傷組織，將愈傷組織轉至培養基3或培養基4進行分化培養觀察，結果在上述培養基上愈傷均出現分化芽團。
其中，所述的培養基分別為培養基1MS+BA(0.5-1.0)mg/L+NAA)(0.5-1.0)mg/L；培養基2MS+BA(1.0-2.0)mg/L+2，4-D(0.1-0.5)mg/L+；培養基3MS+BA(1.0-2.0)mg/L+NAA(0.5-1.0)mg/L+GA(0.1-0.5)mg/L+LH500mg/L和培養基4MS+BA1.0mg/L+NAA0.25mg/L+LH500mg/L。
所述的生根培養將生長到2-3cm長的小芽接種於1/2MS+NAA(0.5-1.0)mg/L+IBA(0.5-1.0)mg/L+蔗糖2％mg/L培養基，7-8天根原基形成，根系達到2-3cm後，進行練苗移栽。
本發明的優越性在於本發明方法可行，通過實驗胡楊可以進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，分化成再生植株，進行大量擴繁。利用本發明方法可解決每年上千萬苗的供應，解決百萬畝地的胡楊造林需求。


附圖1胡楊胚性愈傷圖片。
附圖2胡楊胚性芽增殖圖片。
具體實施方法本發明一種胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，對胡楊進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，大量分化成再生植株，包括外植體取材及處理、接種分化培養、生根培養、練苗移栽，其中外植體取材挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。取材料與方法1、取材與無菌處理4-5月份晴朗天氣，挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。清水衝洗1小時，再用5-10％的過氧化氫消毒10-15分鐘，用無菌水衝洗4-5次，取出放無菌濾紙吸乾水分。
2、分化培養在無菌操作臺取消毒好的嫩枝莖段，切成0.3-0.5cm長度的小段，接種於培養基1MS+BA(0.5-1.0)mg/L+NAA(0.5-1.0)mg/L或者培養基2MS+BA1.0-2.0mg/L+2，4-D(0.1-0.5)mg/L+培養。10天左右，莖段的兩端切口出現愈傷組織，如附圖1胡楊胚性愈傷圖片所示。將形成的愈傷組織轉培養基3MS+BA(1.0-2.0)mg/L+NAA(0.5-1.0)mg/L+GA(0.1-0.5)mg/L+LH500mg/L和培養基4MS+BA(1.0-2.0)mg/L+NAA(0.5-1.0)mg/L+LH500mg/L進行分化培養，附圖2胡楊胚性芽增殖圖片所示。經觀察，在以上培養基均出現分化，分化的頻率是85％和93％，每塊愈傷組織分化芽的個數在8-13個左右。
3、生根培養同樣，將生長到2-3cm長的小芽接種於1/2MS+NAA(0.5-1.0)mg/L+IBA(0.5-1.0)mg/L+蔗糖2％mg/L培養基，7-8天根原基形成，20天生根率達95％以上。根系達到2-3cm後，可進行練苗移栽。
實驗結果通過實驗胡楊也可以進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，分化成再生植株，進行大量擴繁。
權利要求
1.一種胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，對胡楊進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，分化成再生植株，包括外植體取材及處理、接種分化培養、生根培養、練苗移栽，其中外植體取材挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。
2.根據權利要求1所述的胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，其特徵在於外植體取材是在4-5月份晴朗天氣，挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。
3.根據權利要求1或2所述的胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，其特徵在於所述的無菌處理清水衝洗1小時，再用5-10％的過氧化氫消毒10-15分鐘，用無菌水衝洗乾淨，取出用無菌濾紙吸乾水分。
4.根據權利要求1所述的胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，其特徵在於所述的接種分化培養在無菌操作臺取消毒好的嫩枝莖段，切成為0.3-0.5cm長度的小段，接種在培養基1或培養基2上培養10天左右，莖段的兩端切口出現愈傷組織，將愈傷組織轉培養基3或培養基4培養，最後在培養基上出現分化。
5.根據權利要求4所述的胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，其特徵在於所述的培養基1MS+BA(1.0-2.0)mg/L+NAA(0.5-1.5)mg/L；培養基2MS+BA(1.0-2.0)mg/L+2，4-D(0.5-1.0)mg/L+；培養基3MS+BA1.5-2.0mg/L+NAA0.5-1.0mg/L+GA(0.1-0.5)mg/L+LH500mg/L；培養基4MS+BA1.0-2.0mg/L+NAA0.5-1.0mg/L+LH500mg/L。
6.根據權利要求1所述的胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，其特徵在於所述的生根培養將生長到2-3cm長的小芽接種於1/2MS+IAA(1.0-1.5)mg/L+IBA(1.0-2.0)mg/L+蔗糖2％mg/L培養基，7-8天根原基形成後轉1/2MS培養基，根系達到2-3cm後，進行練苗移栽。
全文摘要
本發明胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術涉及一種胡楊組培快繁技術。本發明一種胡楊瓶苗誘導胚性愈傷組織分化快速繁殖技術，對胡楊進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，分化成再生植株，包括外植體取材及處理、接種分化培養、生根培養、練苗移栽，其中外植體取材挑選胡楊優良母株，剪取當年生無病蟲嫩枝，作為外植體。本發明方法可行，通過實驗胡楊可以進行體細胞胚的誘導，產生具有胚性的愈傷組織，分化成再生植株，進行大量擴繁。利用本發明方法可解決每年上千萬苗的供應，解決百萬畝地的胡楊造林需求。
文檔編號A01G17/00GK1647617SQ20051002388
公開日2005年8月3日 申請日期2005年2月6日 優先權日2005年2月6日
發明者蘇敏, 宋學孟, 龐瑞華, 章振華, 王凌健, 董舉文, 何燕紅, 王濤, 陳權, 蘇峰 申請人:上海光兆植物速生技術有限公司