釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法
2023-06-06 16:15:21 5
專利名稱::釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法
技術領域:
:本發明涉及一種釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,特別是涉及一種運用配有庫化陣列電化學檢測器的液相色譜和多元統計軟體鑑別釀造白酒巴與酒精勾兌白酒的方法。
背景技術:
:白酒行業作為中華民族的傳統產業,歷經上千年的發展歷程,是世界蒸餾酒苑中的一朵奇葩。儘管有關白酒起源的各種說法至今尚無定論,但它歷經千年積澱下來的豐厚文化底蘊卻是其它行業所無法相比的。伴隨科學技術進步和人們物質文化生活水平提升飲用白酒已從過去的純粹的生理嗜好逐步轉向對白酒文化、個性及其時尚的一種精神品味。白酒作為一種傳統飲品,深受廣大民眾的喜愛。傳統工藝白酒即釀造白酒是指以高粱、小麥、小米、大米、黃米、豌豆、糯米、薯類等糧谷為原料,經固態糖化、發酵、蒸餾、儲藏、勾兌而成的具有典型風格與香氣的蒸餾酒。酒精勾兌酒是指以酒精加香精加糖精等化學物質調香、勾兌而成的酒精飲料,俗稱三精酒。GB/T15109—1994《白酒工業術語》中規定,白酒"又稱燒酒,是中國獨有的一種蒸餾酒,經固態、半固態或液態發酵、蒸餾、貯存、勾兌而製得"。從這一標準的上述規定中可以看出,正規白酒釀造企業的生產過程有以下四大環節是必不可缺的B卩一是發酵——複雜的有機化合物在大曲、小曲、鼓曲等釀酒微生物的作用下,分解成比較簡單的物質的過程;二是蒸餾——把釀造白酒半成品液體的混合物加熱後,使之沸騰,使其中沸點較低的成分首先變成蒸汽,再冷凝成白酒液體的過程;三是忙存——新蒸餾發酵出的白酒口感辛辣,經過在貯存容器中貯存一定時間,使酒體諧調而柔和,是白酒生產中必要的工藝過程;四是勾兌——具有不同香氣和口味的同一類型的酒,按不同比例摻兌調配,起到補充、襯託、制約和緩衝的作用,使之符合同一標準,保持成品酒一定風格的專門技術。以上這四大環節是任何一家正規白酒釀造企業整個生產過程環環相扣的全部內容,缺一不可。勾兌只是其中極其重要的一個環節,而不是全部過程。由此可見,白酒的勾兌與酒精勾兌酒是完全不同的概念。按香型分白酒可以分為(1)濃香型白酒以糧谷為原料,經固態發酵、貯存、勾兌而成,具有以己酸乙酯為主體的複合香氣的蒸餾酒。典型代表有五糧液、劍南春、瀘州老窖、全興大曲等產品,該類型白酒佔市場份額約為80%,按酒精的含量又分為高度濃香型白酒和低度濃香型白酒。高度濃香型白酒酒精含量範圍為41.0%59.0%(V/V),低度濃香型白酒酒精含量範圍為35.0%39.0%(曹)。(2)清香型白酒以糧谷等為主要原料,經糖化、發酵、貯存、勾兌而釀製成,只有以乙酸乙酯為主體的複合香氣的蒸餾酒。典型代表有汾酒、二鍋頭酒等產品,該類型白酒佔市場份額約為15%,按酒精的含量又分為高度清香型白酒和低度清香型白酒。高度清香型白酒酒精含量範圍為41.0%59.0%(V/V),低度清香型白酒酒精含量範圍為35.0%39.0%(V/V)。(3)米香型白酒以大米為原料,經半固態發酵、蒸餾、貯存、勾兌而製成的,具有小曲米香特點的蒸餾酒。典型產品為桂林三花酒,按酒精的含量又分為高度米香型白酒和低度米香型白酒。高度米香型白酒酒精含量範圍為41.0%59.0%(V/V),低度米香型白酒酒精度含量範圍為35.0%39.0%(V/V)。(4)醬香型白酒以高梁、小麥為原料,經發酵、蒸餾、貯存、勾兌而製成的,具有醬香特點的蒸餾酒。典型產品為貴州茅臺酒,在市場上常見商標為飛天牌和貴州茅臺牌,酒精度常見的有53%、38%(V/V),也還能見到43%、33。/。(V/V)的產品。(5)兼香型白酒以穀物為主要原料,經發酵、貯存、勾兌而釀製成,具有濃香兼醬香獨特風格的蒸餾酒。典型代表有酒鬼酒、白雲邊、白沙液等產品。此外,還有以西鳳酒為代表的鳳香型白酒,以四特酒為代表的特香型白酒,以景芝白幹為代表的芝麻香型白酒,以廣東生產的玉冰燒酒為代表的豉香型白酒。按生產工藝分白酒可分為(1)固態法白酒以糧谷為原料,經酒醅固態發酵、貯存、勾兌而成,固態法白酒大都香氣濃鬱,口感柔和,綿甜爽淨,餘味悠長。(2)液態法白酒以穀物、薯類、糖蜜等為主要原料,經液態法發酵蒸餾而得的食用酒精為酒基,再經串香、勾兌而成的白酒。液態法白酒一般沒有固態法白酒那麼好的香氣和口感。白酒的風味特性與其化學成分密切相關。白酒含有數量眾多、含量(濃度)不同的酸、酯、醛、醇、酚類等呈香呈味物質。這些物質具有自身獨特的香與味。同時,白酒的色、香、味、格及其中的組成物質是由糧穀類原料,經微生物發酵、蒸餾、貯存而逐步生成的。各種化學物質之間因發酵用菌種不同,生產工藝的差異及貯存條件的改變而變化。各種物質由氧化還原反應形成醇、醛、酸、酯遞進的生成過程。各種物質之間具有固有的、穩定的生物相關性。同時,每一種物質在生成過程中,必定有其前驅體和分解代謝的副產物,即生命成長的"痕跡"。而這些痕跡一般都是含量極少、化學成分比較複雜的有機化合物,它們共存於一個體系中,彼此相互影響,形成了相對穩定的平衡體系。所以白酒中所有呈香呈味物質都有成長"痕跡"。酒中的有機酸種類很多,含量較大的是乙酸和乳酸;其次是己酸、丁酸、丙酸、戊酸、甲酸等;還發現有二元酸、三元酸、羥基酸和羰基酸等,含量較微。這些酸類一部分來源於原料,大部分由微生物發酵生成。其中的偶數飽和脂肪酸是在酵母菌線粒體複合酶的催化下從頭合成;奇數脂肪酸的反應前體物則是丙醯輔酶A。帶側鏈的脂肪酸一般是通過oc-酮酸脫羧生成,而這些帶側鏈的酮酸則是由胺基酸的生物合成途徑生成。酚類化合物一方面由原料中的成分在酵母和微生物中生成,另一方面是貯酒的木質容器中的某些成分,如香蘭素等溶於酒中經過氧化還原反應產生。羰化物也是白酒中較為重要的風味物質,大多數羰化物是由由微生物發酵生成的,途經如下。EMP途徑脫羧酶C6H1206--^CH3-CO-COOH--CHsCHO+CCb乙醛與醇類通過以下途徑的羥醛縮合反應生成乙縮醛,很多醇類如乙醇、異戊醇、仲醇等,都可以通過上述反應形成乙縮醛。formulaseeoriginaldocumentpage6清香型白酒香味組分的總量在釀造白酒中是屬較少的一類(除老白乾酒外)。這類白酒的香味組分仍是以酯類佔絕對優勢,其次是有機酸類、醇類、羰基類化合物。清香型白酒的總酯含量與總酸含量的比值超過了濃香型白酒相應的比值,它們的比值大約為5.5:1。在酯類化合物中,乙酸乙酯佔絕對優勢,是其特徵組分,但必須與適量的乳酸乙酯配合,才能保證其質量和風格的典型性。此外,丁二酸二乙酯也是清香型白酒酯類組分中較重要的成分,由於它的香氣閾值很低,雖然在酒中含量甚少,但它與P-苯乙醇組分相互影響,賦予清香型白酒香氣的特殊風格。酒中的有機酸以乙酸和乳酸為主(佔總酸的90%以上),是保證酒體醇甜、綿軟、協調的重要物質。此外,清香型白酒中乙縮醛具有爽口的特徵,它與正丙醇共同構成清香型白酒爽口帶苦的味覺特徵。我國在1989年公布的國家標準中就有明確的禁止性文字條款,規定釀造白酒(固態白酒)中不得加入非自身發酵的物質;之後的實行白酒生產許可證制度也是為了加強對生產企業的管理,提高產品質量。國家目前正在著手制定更加嚴格和科學合理的國家標準,(將白酒細分為固態白酒即釀造白酒、固液結合白酒、液態白酒三個標準)以充分保證消費者的身心健康。但到目前為止,標準中並沒有給出鑑別釀造白酒和酒精勾兌酒的分析方法。我國加入WTO之後,雖然有"限制外資對名優民族白酒產業的併購或控股"的尚方寶劍保護,白酒成了外資在中國惟一沒有涉足的最後一個產業,但是隨著國外大量洋酒、紅酒、啤酒及其他飲料的湧入,對白酒產業產生了很大程度的衝擊。而且,現在有人打著釀造酒的招牌,在市場上大量銷售酒精勾兌酒,不但擾亂了巿場正常的經濟秩序,損害了合法白酒生產廠家的利益;更重要的是,這種產品不僅欺騙了消費者,而且損害了消費者的身心健康。所以白酒產業只有朝著高品質的方向發展,才能有利於擴大白酒產品出口量、提高在國際上與洋酒、紅酒等競爭力、增加貿易額、提高經濟效益。在世界範圍內,人們對酒類的關心程度越來越高。目前世界上有70多個國家實行酒類專賣管理,法國等許多國家大力推行原產地保護制度。加入WTO後,我國必須參加《與貿易有關的智慧財產權協定》,該協定第二部分第三節專門規定了"地理標記"的保護,凡是加入國必須對"地理標記"進行保護。協定所稱的"地理標記"包含了"原產地"。在《保護原產地名稱及其國際註冊裡斯本協定》中,"原產地"被定義為"一個國家、地區或地方的地理名稱,用於指示一項產品來源於該地,其質量或特徵完全或主要取決於地理環境,包括自然和人為因素"。根據該定義,"原產地"是一個地理名稱,表明產品的產地,該產地具有獨特的地理環境、氣候條件和傳統的特殊製造工藝,決定了該地域產品的質量或特徵。目前,我國幾家著名的白酒企業,如茅臺、五糧液、太白酒等,均己獲得原產地域保護,而且現在有越來越多的白酒企業在申請原產地域保護,這就對白酒企業品質控制提出了更高的要求。隨著科學技術的不斷進步,特別是生物工程,食品科學和現代分析技術的發展,人們逐步認識到這樣一個事實,許多人類自己製造出來的東西,在為我們服務的同時,也對人類自身產生十分嚴重的損害。如化學香精、合成色素、防腐劑、殺蟲劑等等。在食品中使用這類對人身健康有嚴重危害或存在安全隱患的化學物質,必須加以嚴格限制或禁止使用,逐步推廣使用安全無毒的天然產品。同時,對所添加的化學物質,生產者也必需加以明示,讓消費者擁有充分的知情權和選擇權。白酒作為我國特有的蒸餾酒品種,具有廣泛而穩定的消費人群,因此白酒產品的質量與安全性就顯得尤為重要。對於白酒的質量控制,是比較複雜的。目前白酒的質量標準對白酒質量的表述主要包括三部分感官指標、理化指標及衛生指標。其中理化指標、衛生指標對白酒中常量或半微量的理化成分及對人體有害的成分進行了規定,並有相應的檢測方法。而感官指標雖然也有檢測方法,但要靠人的感覺器官,這樣,檢測的結果就會存在個體的差異;而且哪怕就是同一個人,在不同的時間、情緒和環境狀態下,由於客觀條件的影響,也會使檢測的結果產生很大的誤差。另外,我們也會看到,對於理化、衛生指標基本相同的兩個酒樣,其感官品質的結果也會大相逕庭。之所以會如此,除了兩個酒樣之間的產地差異、工藝差異、勾兌水平差異外,最根本的還是其內在組成中的微量、痕量成分的差異。比如說,兩個酒樣的總酯相等,並不代表這兩個酒樣中各種酯的比例相同,當然更不能表示其他組分的含量相同。隨著氣相色譜技術的普及和勾兌技術進步,酒精勾兌酒的水平也是不斷發展,已不能依靠簡單的眼看、嘴嘗及簡單分析手段來區分了,而且酒精勾兌酒為了儘量模仿、靠近釀造白酒的外觀、香氣、口感,人工進行脫色、脫臭處理,加入大量人工合成香精和化學物質,長期飲用,對人體健康會產生嚴重損害。目前,白酒檢驗方法主要有1、氣相色譜法(GC)及氣相-質譜聯用(GC-MS)依據國家標準,目前白酒分析最普遍的方法就是氣相色譜,氣相色譜分析的物質大多是揮發性組分,白酒中的大部分芳香物質通過累加、協同的作用,對白酒的品質起作用,如乙醛單獨存在時,呈辛辣味,但是在大多數高檔酒中都有這種物質,乙醛與其它物質同時存在時,對酒的感官起積極作用,所以通過氣相色譜測定揮發性組分的含量,不能完全、真實地反映白酒的性質;有些揮發性物質不穩定,重現性差,在氣相色譜中容易裂解;而且,氣相色譜分析的酯、醇等揮發性物質,大多數揮發性物質是可以通過勾兌實現的,從而生產出與釀造白酒相似的產品。2、液相色譜法(LC)高效液相色譜不受樣品揮發度和熱穩定性的限制,非常適合分析量較大、難氣化、不易揮發或對熱敏感的物質、離子型化合物及高聚物的分離分析,雖然氣相色譜技術在白酒成分的分析方面應用廣泛、成熟,但是如果深入對發酵過程進行研究,則很多不揮發及熱不穩定物質的分離就需要液相色譜技術的介入,如對發酵過程中糖類、有機酸、胺基酸、蛋白質的分離鑑定。另外,白酒雖為蒸餾酒,但在蒸餾過程中和貯存過程中也不排除帶入或生成一些難揮發或熱不穩定的物質,如乳酸等,這些無法使用氣相色譜分離的物質依靠液相色譜可以分離。白酒這個領域,作為一個傳統的生產行業,一直都是經驗的東西多,理論的東西少。雖然近十年來由於氣相色譜技術的發展和應用,對白酒的微量成分有了比較全面的了解,並對其中的大部分做了定性,但仍有一部分未能定性由於白酒產品之間風格各異,即使其中的微量成分都能定性、定量,規定上百種成分的含量來定義一種白酒也是不現實,不太可能實現的。因此,用現有的質量指標來表徵感官指標是很難的,也可以說感官指標用現有的質量指標來表徵具有很大的局限性。因此,發明一種可以量化白酒中的各項指標,用來分辨酒精勾兌白酒和釀造白酒的方法迫在眉睫。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種釀造白酒與酒精勾兌酒的鑑別方法,本發明的鑑別方法是使用配有庫侖陣列電化學檢測器液相色譜儀對白酒組分進行分離,區別於紫外及其他高效液相色譜檢測器,本發明鑑別方法對白酒樣品中的能夠發生氧化——還原反應的活性物質進行高靈敏度、多電勢、多通道掃描分析,得到白酒的三維指紋圖譜,並用Pirouette多元統計軟體對譜圖進行處理,建立酒精勾兌酒和釀造白酒的指紋圖譜模型。本發明提供的技術方案是一種釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,該方法包括如下步驟(一)使用配有庫侖陣列電化學檢測器的高效液相色譜建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜a、供試樣品的準備委託企業提供釀造白酒和酒精勾兌酒,其中酒精勾兌酒的理化指標達到目前釀造白酒國家標準;b、對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜分析色譜條件色譜柱反相色譜柱;流速0.61.2mL/min;進樣量l~100(aL:A相為水,B相為水、甲醇和/或乙腈的混合溶液,A、B兩相電解質為磷酸鹽或醋酸鹽,其濃度保持一致,磷酸鹽或醋酸鹽的濃度為10-40mmol;梯度洗脫B相在50min內,由20%線性升到80%,電勢分別從-10002000mV內選擇;c、對上述供試樣品所得的液相色譜圖進行分析處理,得到釀造白酒與酒精勾兌白酒的液相色譜數據;.(二)建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜統計模型1)對步驟c中所述液相色譜譜圖及數據導入多元統計軟體,對樣品進行歸類,並對釀造白酒和酒精勾兌酒進行標記;2)對所得數據進行聚類分析或主成分分析,分別建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜模型;(三)將待測白酒樣品以上述相同方法進行分析,獲得庫侖陣列高效液相色譜數據,通過所述指紋圖譜模型進行鑑別。所述庫侖陣列電化學檢測器對白酒樣品中的能夠發生氧化——還原反應的物質進行高靈敏度、多電勢、多通道掃描分析,得到白酒的三維指紋圖譜。上述步驟b中,所述磷酸鹽或醋酸鹽的濃度為20~30mmol,A相和B相為弱酸性,pH為5.5~6.5,優選為6.3。上述步驟b中,優選地,所述流速lmL/min;進樣量IOO^iL:A相30mmol的磷酸二氫鈉水溶液;B相水:甲醇:乙腈=20:40:40,該溶液中加入磷酸二氫鈉,濃度為30mmol;電勢分別為-150、300、400、500、600、700、800、900mV。所述多元統計軟體為Pirouette軟體。上述歩驟c中,所述數據分析的步驟是(1)對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜檢測,生成三維譜圖後,在出峰較多的通道中選5-6個有代表性的大峰進行標記,然後對應每個樣品,看這些有代表性的峰保留時間是否有錯位,如有錯位,重新調整讓其保留時間一致,保證樣品的重複性;(2)選擇導出數據參數,選5-47min時間段2-8通道的平均值;(3)輸出數據,建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的標準指紋圖譜數據。本發明的具有如下優點1、使用配有庫侖陣列電化學檢測器的高效液相色譜(HPLC-ECD)進行白酒品質分析,建立了-種全新的白酒品質控制方法。目前國內外對白酒的分析主要集中在運用氣相色譜分析方法對白酒的芳香物質進行分析,樣品中有意義的峰大約為幾十到上百個,對白酒的微量成分有了比較全面的了解,並對其中的大部分做了定性,但仍有一部分未能定性。由於白酒產品之間風格各異,即使其中的微量成分都能定性、定量,用上百種成分的含量來定義一種白酒也是不現實,不太可能實現的。本發明採用HPLC-ECD分析白酒品質,區別於紫外及其他高效液相色譜檢測器,本發明方法對白酒樣品中的能夠發生氧化——還原反應的活性物質進行高靈敏度、多電勢、多通道掃描分析,得到白酒的三維指紋圖譜。庫侖陣列電化學液相色譜可以達到幾百個峰,這對後續數據統計提供了足夠多的信息,突破了氣相色譜方法分析白酒的局限性。運用庫侖陣列電化學檢測器得到了釀造白酒和酒精勾兌酒的三維立體指紋譜圖,從而建立了一種全新的白酒品質控制方法。該種譜圖能夠提供幾百個樣品峰信息,使輸出結果更直觀、更豐富,該方法檢測靈敏度高,達到fg水平(10—15),比二極體陣列檢測器高6個數量級。2、運用多元統計軟體對釀造酒和酒精勾兌酒建立指紋圖譜模型釀造白酒和酒精勾兌酒經HPLC-ECD方法獲取的白酒三維立體指紋譜圖基礎上運用多元統計軟體(Pirouette)進行聚類和主成分等多元分析方法進行數據處理,藉助計算機統計歸納出釀造白酒及酒精勾兌酒的品質特徵,首次分別建立了兩者的特徵指紋圖譜模型,並成功地對不同來源的釀造白酒及酒精勾兌酒產品進行了準確的區分,在不需要定性和定量分析所有組分的情況下,能夠快速、直觀地分析白酒樣品。可以實現對釀造白酒大量的微量有效成分進行宏觀統計分析,建立統計模型,能真實的代表白酒的特徵;而且可以避免定性、定量分析中需要大量標準物質的難題,避免常規分析中定性定量繁瑣的計算過程。為以後質監部門和企業進行質量控制,提高白酒品質提供理論支持。國家目前正在著手制定更加嚴格和科學合理的國家標準,(將白酒細分為固態白酒即釀造白酒、固液結合白酒、液態白酒三個標準),該模型為即將發布的白酒新國家標準提供技術支持。3、通過本發明方法可建立各種不同類型白酒的指紋圖譜模型,形成系統的、全面的中國白酒指紋圖譜庫,將中國白酒的內質特徵進行歸納總結,從而有利於推動中國白酒國際貿易的發展,使中國白酒走向世界。4、本發明方法可針對不同濃度、不同品質原酒進行細化區分,為即將發布的白酒新國家標準提供技術支持;對質量監督部門的執法監督和白酒打假工作提供技術保障;生產企業也可應用該技術對產品的質量進行分析和跟蹤控制,指導生產。企業可以在幾十分鐘快速、準確地檢測。運用統計模型對大量數據分析原酒的真實品質,可以作為衡量白酒優劣的有利標尺。5、本發明方法有利於促進我國白酒原產地域保護工作的開展。有利於擴大白酒產品出口量、提高在國際上與洋酒、紅酒等競爭力、增加貿易額、提高經濟效益。6、為白酒感官分析的量化研究開闢新的途徑目前白酒呈香物質、呈味物質研究受到廣泛關注。應用氣相色譜技術分析白酒呈香物質、呈味物質已經取得階段性成果,但應用高效液相色譜關於這方面的研究還很薄弱,缺乏理論基礎。本發明方法為白酒感官分析的量化研究提供了一條全新的技術途徑。圖1為本發明實施例一酒精勾兌白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖2為本發明實施例一釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖3為本發明實施例一多元統計分析數據部分截取圖;圖4為本發明實施例一酒精勾兌白酒和釀造白酒的聚類分析結果圖;圖5為本發明實施例一酒精勾兌白酒和釀造白酒的主成分分析結果圖;圖6為本發明實施例一酒精勾兌白酒和釀造白酒中各個物質的方差貢獻率圖;圖7為本發明實施例一特徵時間點酒精勾兌白酒和釀造白酒的三維主成分分析圖;圖8為本發明實施例一A企業酒精勾兌白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖9為本發明實施例一A企業釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖10為本發明實施例一B企業酒精勾兌白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖11為本發明實施例一B企業釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖12為本發明實施例一C企業酒精勾兌白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖13為本發明實施例一C企業釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖14為本發明實施例一四家白酒企業的樣品數據部分截取圖;圖15為本發明實施例一四家白酒企業酒精勾兌白酒和釀造白酒聚類分析結果圖;圖16為本發明實施例一四家白酒企業酒精勾兌白酒和釀造白酒的主成分分析結果圖;圖17為本發明實施例二10%釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖18為本發明實施例二15%釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖19為本發明實施例二75%釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖20為本發明實施例二100%釀造白酒的HPLC-ECD色譜圖;圖21為本發明實施例二四個不同勾兌比例白酒的數據部分截取圖;圖22為本發明實施例二四個不同勾兌比例白酒樣品的聚類分析結果圖;圖23為本發明實施例二四個不同勾兌比例白酒樣品的主成分分析結果圖圖24為本發明實施例二四個不同勾兌比例白酒樣品的特徵時間點三維主成分分析結果圖;圖中,G-酒精勾兌白酒,Y-釀造白酒,H、J、L、N分別代表不同的企業。具體實施方式實施例一清香型釀造白酒與酒清勾兌白酒的鑑別(一)建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜a、供試樣品的準備。按照國家勾兌酒的標準,委託某一企業配製酒精勾兌白酒,並提供釀造白酒,其中,釀造白酒10個樣品,酒精勾兌白酒7個樣品。b、對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜檢測。儀器美國ESA公司生產的5600A型號、配有庫侖陣列電化學檢測器的高效液相色譜儀(HPLC-ECD)。甲醇、乙腈為色譜純,磷酸二氫鈉為分析純,水為蒸餾水。色譜條件流動相中A相為30mrno1的磷酸二氫鈉水溶液,B相為水:甲醇:乙腈=20:40:40,該溶液中加入磷酸二氫鈉,濃度為30mmol;梯度洗脫的程序為有機相在50min內,由20%線性升到80%;8個電勢分別為-150、300、400、500、600、700、800、900mV;色譜柱C18柱,4.6pmX250mm,柱溫保持30度恆溫;流速lmL/min:進樣量為100ul;為了改善分離效果,減少鬼峰的產生,水相和有機相的pH值調整為6.3。c、對上述供試樣品酒液的庫侖陣列高效液相色譜進行數據分析,建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜數據。釀造白酒與酒精勾兌酒的高效液相色譜數據請分別見表l、表2,色譜圖請分別見圖l、圖2。表1釀造白酒的高效液相色譜數據表tableseeoriginaldocumentpage12tableseeoriginaldocumentpage13tableseeoriginaldocumentpage14tableseeoriginaldocumentpage15tableseeoriginaldocumentpage16tableseeoriginaldocumentpage17tableseeoriginaldocumentpage18通過以上數據可以看出,釀造白酒和酒精勾兌白酒在液相色譜中檢測到的組分種類和含量都有較大的差距,在相同的數據處理條件下,釀造白酒能檢測到102種物質,是氣相色譜檢測到的數據的3倍,樣品信息豐富,有利於後續的多元統計分析。對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜檢測,生成三維譜圖後,在出峰較多的第3-4通道中選5個有代表性的大峰進行標記,然後對應每個樣品,看這些有代表性的峰保留時間是否有錯位,如有錯位,重新調整讓其保留時間一致,保證樣品的重複性。(2)選擇導出數據參數,按照每0.05min採集一個採樣點,選5-47min時間段,第2-8通道的平均值。(3)輸出數據,將採集的數據導入text文本後,改成後綴為dat的文件,建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的標準指紋圖譜數據。(二)建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜統計模型(1)打開多元統計軟體Pirouette(美國Infometric,Inc,MultivariateDataAnalysisVersion3.11,Pirouette③3.U),對標準指紋圖譜數據進行因子分析、預歸類,把每個樣品作為一個變量,並對釀造白酒和酒精勾兌酒進行標記,結果見圖3。(2)進行聚類分析或主成分分析,建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜模型。聚類分析結果見圖4,從該圖中可以看出,樣品明顯的分為兩個大區,分別為酒精勾兌酒和釀造白酒,分類效果明顯。主成分分析結果見圖5,在本實施例主成分分析結果中出現了一離散點,對該離散點作進一步處理,選點原則(請見圖6)是選擇對方差貢獻率比較大的任意三個時間點,進行三維空間分類分析,確定離散點的歸類,分析結果請見圖7。聚類分析設定的參數為預處理(preproccessing):中心化處理(mean-center);距離度量標準(distancemetric):歐式(歐幾裡得)(Euclideam);連接方法(linkagemethod):單鏈法(single),龍骨圖(dendrogramorientation):樣本(samples),變化(transforms):100%的標準化(normalizeto100%)。主成分分析設定的參數為預處理(preproccessing):自動調整(Autoscale);旋轉按照法線旋轉(Rotation:Normal(3));最大因子(maximumfactors):3;優化因子(Optimalfactors):2;有效性(validation):正交(cross(l));置信區間(Probthreshold):0.9500;轉化(Transforms):標準化處理(Normalize(100.000))。通過以上分析結果可以看出,聚類分析方法和主成分分析方法對於釀造白酒和酒精勾兌酒的分區結果一致。(三)模型驗證選取國內知名的三家白酒企業(分別稱為A、B、C企業)的釀造白酒和酒精勾兌白酒對以上建立的模型進行驗證。按照與建模過程完全相同的分析條件和處理條件對四家(其中一家是為建模提供樣品的企業)企業的共39個白酒樣品進行分析。A、B、C三家企業樣品的液相色譜圖見圖8至圖13,數據見圖14,聚類分析結果見圖15,主成分分析結果見圖16。從聚類分析結果(圖15)看出,四個企業的樣品聚類結果直觀,釀造白酒與酒精勾兌酒能很明顯的分成兩個大區,組內差距顯著。從主成分分析(圖16)看出,釀造白酒與酒精勾兌白酒在大的空間結構上分類很明顯。其中,不同企業的釀造白酒之間的差異較小,酒精勾兌酒組內之間存在差異。根據以上分析結果可以看出,釀造白酒和酒精勾兌白酒分區明顯,模型可靠。以上兩種統計方法均說明採用庫侖陣列電化學檢測器的高效液相色譜法分析釀造白酒和酒精勾兌白酒樣品,運用多元統計軟體方法處理數據,並建立模型,是一種可行、可靠的方法。實施例二對不同勾兌比例的白酒進行分類和鑑別選取四種不同比例的釀造白酒(100%、75%、15%和10%)進行高效液相色譜法分析,分析方法同實施例一。四種不同比例釀造白酒的液相色譜圖見圖17至圖20,從各圖中,可以很明顯的分辨出15%以下和75%以上濃度的白酒,而10%和15%,75%和100%之間的譜圖差距不大,而且由於峰比較多,難以直觀選取物質進行比較。對譜圖中的大量數據使用Pirouette數據處理軟體運用上述建立的指紋圖譜模型進一步進行了統計分析,數據圖請見圖21。對不同濃度的四個白酒樣品進行聚類分析,其中100%釀造白酒樣品重複進樣4次、75%釀造白酒樣品重複進樣5次、15%釀造白酒樣品重複進樣4次,10%釀造白酒樣品重複進樣5次,聚類分析結果見圖22。從圖22可以看出,10%和15%為一大類,75%和100%的為第二大類,分類明顯。如圖所示,直觀的顯示了聚類的過程,從圖可以清楚地看出各個樣品的歸屬。第一類是經過發酵而成的釀造原酒,第二類是原酒佔75%的釀造白酒,第三類是原酒佔15%的釀造白酒,第四類是原酒佔10%的釀造白酒。且從上圖還可以看出四個酒樣被明顯的分成兩個大區,100%和75%的是一個區,10%和15%的是另外一個區,而且相對於10%,15%和75%距離更近。分析聚類結果,結果跟理論相符,因此,運用聚類統計方法能夠實現釀造白酒和勾兌白酒的鑑定工作。運用主成分分析方法對不同勾兌比例的酒精勾兌酒進行分析,結果請見圖23。從圖23可以看出,樣品之間的的組間分類不明顯,這是因為系統壓力大的影響,所以主成分分析過程,需要根據各個物質方差貢獻率選取幾個主要時間段的任意三個時間點,進行三維空間分類分析。本實施例選取31.52min、36.02min和39.90min這三個時間點,分析結果見圖24所示。從圖24中發現,選取特徵時間點的分析結果,更準確,更明顯直觀,對一些分類結果不是特別理想的酒樣,可以採用這種方法進行驗證試驗,使分析結果更準確地反映酒樣間的區別。從本實施例中可以看出,本發明方法不僅適用於區分釀造白酒和酒精勾兌白酒,而且對不同勾兌比例的白酒也能進行準確的區分。本發明方法不限於清香型白酒的鑑別,同時也適用於其它類型的白酒的鑑別。權利要求1、一種釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,其特徵在於該方法包括如下步驟(一)使用配有庫侖陣列電化學檢測器的高效液相色譜建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜a、供試樣品的準備委託企業提供釀造白酒和酒精勾兌酒,其中酒精勾兌酒的理化指標達到目前釀造白酒國家標準;b、對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜分析色譜條件色譜柱反相色譜柱;流速0.6~1.2mL/min;進樣量1~100μL;A相為水,B相為水、甲醇和/或乙腈的混合溶液,A、B兩相電解質為磷酸鹽或醋酸鹽,其濃度保持一致,磷酸鹽或醋酸鹽的濃度為10~40mmol梯度洗脫B相在50min內,由20%線性升到80%,電勢分別從-1000~2000mV內選擇;c、對上述供試樣品所得的液相色譜圖進行分析處理,得到釀造白酒與酒精勾兌白酒的液相色譜數據;(二)建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜統計模型1)對步驟c中所述液相色譜譜圖及數據導入多元統計軟體,對樣品進行歸類,並對釀造白酒和酒精勾兌酒進行標記;2)對所得數據進行聚類分析或主成分分析,分別建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜模型;(三)將待測白酒樣品以上述相同方法進行分析,獲得庫侖陣列高效液相色譜數據,通過所述指紋圖譜模型進行鑑別。2、根據權利要求l所述的釀造白酒與酒精勾兌酒的鑑別方法,其特徵在於所述庫侖陣列電化學檢測器對白酒樣品中的能夠發生氧化一還原反應的物質進行高靈敏度、多電勢、多通道掃描分析,得到白酒的三維指紋圖譜。3、根據權利要求l所述的釀造白酒與酒精勾兌酒的鑑別方法,其特徵在於步驟b中,所述磷酸鹽或醋酸鹽的濃度為2030mmol,A相和B相為弱酸性,pH為5.5~6.5。4、根據權利要求1至3任一項所述的釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,其特徵在於-步驟b中,所述流速lmL/min:進樣量lOOpL;A相30mmol的磷酸二氫鈉水溶液;B相水:甲醇:乙腈=20:40:40,該溶液中加入磷酸二氫鈉,濃度為30mmol;電勢分別為-150、300、400、500、600、700、800、900mV。5、根據權利要求1所述的釀造白酒與酒精勾兌酒的鑑別方法,其特徵在於所述多元統計軟體為Pirouette軟體。6、根據權利要求5所述的釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,其特徵在於步驟C中,所述數據分析的步驟是(1)對供試樣品進行庫侖陣列高效液相色譜檢測,生成三維譜圖後,在出峰較多的通道中選5-6個有代表性的大峰進行標記,然後對應每個樣品,看這些有代表性的峰保留時間是否有錯位,如有錯位,重新調整讓其保留時間一致,保證樣品的重複性;(2)選擇導出數據參數,選5-47min時間段2-8通道的平均值;(3)輸出數據,建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的標準指紋圖譜數據。全文摘要一種釀造白酒與酒精勾兌白酒的鑑別方法,該方法包括如下步驟(一)運用庫侖陣列高效液相色譜分析並分別建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜,獲取釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜數據;(二)建立釀造白酒與酒精勾兌白酒的指紋圖譜統計模型;(三)將待測白酒樣品以上述相同方法分析、取得庫侖陣列高效液相色譜數據,通過指紋圖譜模型進行鑑別。本發明使用HPLC-ECD進行白酒品質分析,並運用多元統計軟體對釀造酒和酒精勾兌酒建立指紋圖譜模型,建立一種全新的白酒品質控制方法,並可針對不同濃度、不同品質原酒進行細化區分,檢測靈敏度高,結果直觀。通過本發明方法可進一步建立各種不同類型白酒的指紋圖譜模型,形成白酒指紋圖譜庫。文檔編號G01N30/88GK101149362SQ20071012252公開日2008年3月26日申請日期2007年9月27日優先權日2007年9月27日發明者靜劉,孫路偉,蕾朱,王宏鐳申請人:北京市產品質量監督檢驗所