山茱萸多糖的微波提取與純化工藝的製作方法

2023-06-06 09:52:11 1

專利名稱：山茱萸多糖的微波提取與純化工藝的製作方法
技術領域：
本發明涉及中藥提取技術領域，具體涉及ー種山茱萸多糖的微波提取與純化工藝。
背景技術：
隨著科學技術的進步，對植物多糖的研究也不斷的深入，現在藥理研究表明，多糖具有多種藥理作用，其作用主要包括增強免疫、抗腫瘤、降血壓、降血脂、降血糖、抗衰老、增強骨髄造血機能、抗輻射、對肝腎等主要臟器的保護作用等。正是由於多糖具有如此之多的功效，人們越來越關注多糖的研究，目前，中藥多糖的化學研究範圍主要涉及提取、分離、純化、定量定性、結構分析、構效關係、分子量及單糖組成等方面。隨著檢測儀器和方法的不斷進步，人們對於多糖的認識進ー步增多，多糖的發展在進ー步加快，多糖對於人類疾病的預防與治療也將更加得到人們的重視。 山茱萸(Fructus Corni)為山茱萸科植物山茱萸的乾燥果肉，又名山萸肉、藥棗、肉棗等，臨床上以除去種子的成熟果實入藥，其味酸、澀、微溫，歸肝腎經，有補益肝腎、澀精固脫的功效，是我國傳統的中藥材。也是中醫常用的名貴藥材之一。中醫藥臨床研究證明，山茱萸是治療糖尿病、冠心病和高血壓病的主要藥材。現代研究表明，山茱萸具有增強免疫系統功能、抗炎抑菌、降血糖、抗休克、抗氧化、抗腫瘤等作用。山茱萸中含有豐富的多糖類成分，藥理研究顯示，山茱萸多糖是其中ー類主要活性成分。果肉中主要成分有糖類、有機酸類及其酯類、鞣質類等。多糖類物質是生命代謝不可缺少的重要物質，具有多種生物活性而成為當今生物醫藥研究和開發的一大熱點。傳統的加熱提取是以熱傳導、熱輻射等方式由外向裡進行，而微波提取是通過偶極子旋轉和離子傳導兩種方式裡外同時加熱。和傳統加熱提取相比，微波提取具有以下特點①質量高，可有效地保護食品、藥品以及其他化工物料中的功能成分；②產量大；③對提取物具有高選擇性；④省時，可節省50% 90%的時間；⑤溶劑用量少(可較常規方法少50% 90%);⑥低耗能。微波輻射技術在食品提取エ業和化學エ業上的應用研究雖然起步只有短短幾年的時間，但已有的研究成果和應用成果已足以顯示其以下優越性①反應或提取快；②產率高，產品質量好後處理方便安全無汙染，屬於綠色工程； 生產線組成簡單，節省投資；微波提取效率高、純度高、能耗小、產生廢物少、操作費用少、符合環境保護要求。可廣泛用於中草藥、香料、保健食品、化妝食品、化妝品、茶飲料、調味料、果膠、高粘度殼聚糖等行業，目前在我國微波提取已經用於多項中草藥的侵取生產線之中，如葛根、茶葉、銀杏等。微波提取已列為我國二十一世紀食品加工和中藥製藥現代化推廣技術之一。

發明內容
本發明所要解決的技術問題在於提高ー種提取效率高，純度高的山茱萸多糖的微波提取與純化工藝。
本發明所要解決的技術問題採用以下技術方案來實現山茱萸多糖的微波提取與純化工藝，其特徵在於包括以下方法步驟，一.山茱萸多糖的提取稱取山茱萸藥材適量，置於圓底燒瓶中，加水10-20倍量浸泡0. 5-2小時，超聲功率為600W，超聲提取3次，每次10-30分鐘，合併提取液，過濾，濃縮，得到濃縮液，加入濃縮液體積的0. 1-5倍的95%こ醇，靜置24小時，傾去上清液，減壓抽濾，濾餅再用水加熱至完全溶解，濃縮，再加入濃縮液體積的0. 1-5倍的95%こ醇，靜置24小吋，抽濾，50°C真空乾燥，烘乾即得山茱萸粗多糖；ニ.山茱萸粗多糖的純化①.精密稱取50mg山茱萸粗多糖,加蒸懼水溶解,並定容至100ml,配製成0. 5mg/ ml的粗多糖溶液，按照V樣品V試劑為5:1的比例加入Sevag試劑(Vgw : V正丁醇=4:1)萃取3次，取上層液，即可脫去蛋白；②.取步驟①中脫蛋白後的多糖溶液，濃縮(除盡氯仿、正丁醇)，加入2%的活性炭，於80°C下水浴30min，抽濾，濾液濃縮至原體積，即可脫色。所述的Sevag試劑由氯仿、正丁醇構成，其體積比為乂_ Vire =4:10本發明的有益效果是本發明提取時間短，能耗低，藥材原料處理量大，成倍或數倍提高，且雜質少，有效成分易於分離、浄化，成本低，綜合經濟效益顯著。


圖I為實施例中葡萄糖對照品掃描圖；圖2為實施例中山茱萸多糖樣品掃描圖；圖3為實施例中葡萄糖標準曲線圖。
具體實施例方式為了使本發明實現的技術手段、創作特徵、達成目的與功效易於明白了解，下面結合具體實施例，進ー步闡述本發明。I.準備儀器和試藥I. I 藥材山茱萸藥材。I. 2 試劑苯酚(上海中試化工總公司)；濃硫酸(上海中試化工總公司)；葡萄糖對照品(上海中試化工總公司)；95%こ醇(上海東懿化學試劑有限公司);碳酸氫鈉(上海蘇懿化學有限公司)。I. 3 儀器紫外可見分光光度計(上海精科，型號UV757);微電腦微波提取器(南京陵江科技開發有限責任公司，型號LWMC-201);真空乾燥箱(上海浦東躍欣科學儀器廠，型號DZF-200型)；電子天平(德國METTLER公司，型號AG285型)；恆溫水浴箱(常州國華電器有限公司)。2.多糖的含量測定
2. I對照品溶液的製備精密稱取105°C真空乾燥至恆重的無水葡萄糖對照品12. 60mg,置於IOOml量瓶中，加蒸餾水並稀釋至刻度，搖勻，即得對照品儲備液(濃度為0. 1260mg/ml)。精密移取2. 0ml, 3. 0ml, 4. 0ml, 5. 0ml, 6. 0ml, 7. 0ml, 8. Oml 對照品儲備液，置於 IOml 量瓶中加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，配成系列葡萄糖標準溶液。2.2山茱萸多糖的提取稱取適量山茱萸，置於圓底燒瓶中，加15倍量水浸泡2小時，置微波提取器(微波功率600W)中提取3次，每次15分鐘，合併提取液，過濾，濃縮，加入一定體積的95%こ醇，靜置24h，傾去上清液，減壓抽濾，濾餅再用水加熱至完全溶解，濃縮，加入一定體積的95%こ醇，靜置24h，抽濾，50°C真空乾燥，烘乾即得山茱萸粗多糖。2.3供試品溶液的製備
精確稱取50°C乾燥至恆重的山茱萸多糖5. Omg，置IOOml量瓶中，加蒸餾水至刻
度，搖勻。2. 4苯酚試液的配製稱取苯酚100 g，加鋁片0. I g，加碳酸氫鈉0. 05 g，油浴中常壓蒸餾，收集182°C的餾分，取餾出液5g，置IOOml量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻，備用。2. 5吸收波長的選擇分別精密吸取I. Oml 「2. 3」項下多糖溶液和葡萄糖對照品液於具塞試管中，加5%苯酹Iml,濃硫酸5ml,搖勻,放置5min後水浴加熱IOmin,流水放冷。同法用蒸懼水做空白，於紫外可見分光光度計上在370nnT600nm範圍內掃描,確定最大吸收波長為486nm,掃描圖見圖I、圖2。2. 6標準曲線的繪製精確吸取2. I項下各葡萄糖標準溶液I. 0 ml，按照「2. 5」項下同法操作，於486nm處測吸收度。以吸收度(A)對葡萄糖濃度(C)作回歸處理，得回歸方程Y=0.015X-0.0811，相關係數r=0. 9999，結果表明葡萄糖濃度為25. 2 y g/ml 100. 8 y g/ml時吸收度A與樣品濃度C有良好的線性關係，見表1，圖3。表I葡萄糖線性關係試驗數據
權利要求
1.山茱萸多糖的微波提取與純化工藝，其特徵在於包括以下方法步驟， A.山茱萸多糖的提取 稱取山茱萸藥材適量，置於圓底燒瓶中，加水10-20倍量浸泡0. 5-2小吋，超聲功率為600W，超聲提取3次，毎次10-30分鐘，合併提取液，過濾，濃縮，得到濃縮液，加入濃縮液體積的0. 1-5倍的95%こ醇，靜置24小時，傾去上清液，減壓抽濾，濾餅再用水加熱至完全溶解，濃縮，再加入濃縮液體積的0. 1-5倍的95%こ醇，靜置24小吋，抽濾，50°C真空乾燥，烘乾即得山茱萸粗多糖； B.山茱萸粗多糖的純化 a.精密稱取50mg白朮粗多糖,加蒸懼水溶解,並定容至100ml,配製成0.5mg/ml的粗多糖溶液，按照 Vww為5:1的比例加入Sevag試劑，萃取3次，取上層液，即可脫去蛋白； b.取步驟a中脫蛋白後的多糖溶液，濃縮，除盡氯仿、正丁醇，加入2%的活性炭，於80°C下水浴30min，抽濾，濾液濃縮至原體積，即可脫色。
2.根據權利要求I所述的白木多糖的超聲提取與純化工藝，其特徵在於所述的Sevag試劑由氯仿、正丁醇構成，其體積比為V歸V正丁醇=4: I。
全文摘要
山茱萸多糖的微波提取與純化工藝，涉及中藥提取技術領域，首先稱取山茱萸藥材適量，置於圓底燒瓶中，加水10-20倍量浸泡0.5-2小時，超聲功率為600W，超聲提取3次，每次10-30分鐘，合併提取液，過濾，濃縮，加入95%乙醇，靜置24小時，傾去上清液，減壓抽濾，濾餅再用水加熱至完全溶解，濃縮，加入95%乙醇，靜置24小時，抽濾，50℃真空乾燥，烘乾即得山茱萸粗多糖；用Savag脫蛋白以及活性炭脫色等進一步純化得山茱萸精多糖，用苯酚- 硫酸比色法測定山茱萸精多糖的含量，純度可以達到80%以上。本發明提取時間短，能耗低，藥材原料處理量大，成倍或數倍提高，且雜質少，有效成分易於分離、淨化，成本低，綜合經濟效益顯著。
文檔編號C08B37/00GK102757512SQ20121020368
公開日2012年10月31日 申請日期2012年6月20日 優先權日2012年6月20日
發明者史晨晨, 屈俊峰, 徐峰, 昝攀攀, 趙永賢 申請人:安徽凱盈藥業有限公司