一種含納米金抗菌敷料及其製備方法與流程
2023-06-06 14:12:40
本發明涉及一種抗菌敷料，具體涉及一種含納米金抗菌敷料，以及該含納米金抗菌敷料的製備方法和應用。
背景技術：
醫用敷料是醫院必需的消費品，消耗量很大。抗菌敷料具有殺菌、抗感染的作用，能保護患者防止感染、促進癒合，在醫院的外科、內科、燒傷科、耳鼻喉科已得到廣泛的應用。目前，市場上普遍使用的抗菌敷料是含納米銀的抗菌敷料。納米銀具有較強的廣譜抗菌作用，對細菌沒有耐藥性，是一種有效的抗菌劑。但是，納米銀不穩定，對人體有一定的毒性，納米銀敷料的安全性問題也越來越受到人們的重視。美國FDA已經明確禁止納米銀在醫療方面的使用，我國CFDA在醫用某些方面限制了納米銀的使用。
近年來，穩定性更好、對人體細胞毒性更小的納米金作為抗菌劑的研究逐漸被報導。Zhao yuyun等(Zhao Y,Tian Y,Cui Y,et al.Small molecule-capped gold nanoparticles as potent antibacterial agents that target gram-negative bacteria[J].Journal of the American Chemical Society,2010,132(35):12349-12356；Zhao Y,Chen Z,Chen Y,et al.Synergy of non-antibiotic drugs and pyrimidinethiol on gold nanoparticles against superbugs[J].Journal of the American Chemical Society,2013,135(35):12940-12943.和Zhao Y,Ye C,Liu W,et al.Tuning the composition of AuPt bimetallic nanoparticles for antibacterial application[J].Angewandte Chemie International Edition,2014,53(31):8127-8131.)報導的氨基嘧啶或氨基嘧啶/含氨基小分子的雙組分藥物修飾的納米金抗菌劑和納米金鉑雙金屬抗菌劑有很強的廣譜抗菌性，特別對多藥耐藥菌有很強的殺滅作用，其對人體細胞的毒性遠遠低於納米銀，並且不會產生細菌耐藥性，是一類非常有前途的抗菌劑。Anna Regiel-Futyra(Regiel-Futyra A,M,Sebastian V,et al.Development of Noncytotoxic Chitosan–Gold Nanocomposites as Efficient Antibacterial Materials[J].ACS applied materials&interfaces,2015,7(2):1087-1099.)報導的殼聚糖絡合的納米金也具有優異的抗菌性和對人體細胞低的毒性。
目前，國內外尚無公開文獻報導添加有廣譜抗菌性而細胞毒性小的納米金製作的抗菌敷料，將具有優異的廣譜抗菌性，無細菌耐藥性，對人體細胞毒性小的抗菌納米金添加到敷料中，使其成為一種具有高效廣譜抗菌性且安全性更高的抗菌敷料。
技術實現要素：
因此，本發明的目的在於克服上述現有技術中的缺陷，提供一種抗菌性能更佳且安全性更高的含納米金抗菌敷料，以及該抗菌敷料的製備方法和應用。
為實現上述目的，本發明提供了一種含納米金抗菌敷料，所述含納米金抗菌敷料包括基材和附著於所述基材上的具有抗菌作用的含金納米顆粒。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述基材為布料，其材料選自棉、毛、麻、絲、粘膠纖維、醋酸纖維、聚酯纖維、聚醯胺纖維、聚烯烴纖維、錦綸、尼龍、滌綸、腈綸和丙綸中的一種或多種。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述含納米金抗菌敷料中的含金納米顆粒的含量為0.01～3％重量百分比。例如可以為0.01～0.3％重量百分比，或0.02～0.25％重量百分比。優選地，所述含金納米顆粒的平均粒徑為1～20nm，優選為1～10nm。例如可以為1～15nm，5～15nm，或5～10nm。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述含金納米顆粒選自納米金顆粒、表面修飾有單組分或多組分的小分子或高分子的納米金顆粒、和含金的雙組分或多組分金屬納米顆粒中的一種或多種。添加的具有抗菌作用的含金納米顆粒可以具有優異的廣譜抗菌性，特別對多藥耐藥菌有很強的殺滅作用，並且與納米銀相比對人體細胞只有非常低的細胞毒性。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述表面修飾有單組分或多組分的小分子或高分子的納米金顆粒可為氨基嘧啶小分子與氨基類小分子雙組分修飾的納米金顆粒。優選地，所述氨基嘧啶小分子可以選自2-巰基-4,6-二氨基嘧啶、2-巰基-4-氨基嘧啶和2,4-二氨基-6-巰基嘧啶中的一種或多種，所述氨基類小分子可以選自胍、二甲雙胍、鹽酸二甲雙胍、1-(3-氯酚)雙胍、氯喹、鹽酸乙醯膽鹼和三聚氰胺中的一種或多種。例如，氨基嘧啶小分子與氨基類小分子雙組分修飾的納米金顆粒可以為文獻Zhao Y,Chen Z,Chen Y,et al.Synergy of non-antibiotic drugs and pyrimidinethiol on gold nanoparticles against superbugs[J].Journal of the American Chemical Society,2013,135(35):12940-12943中已報導的納米金顆粒。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述含金的雙組分或多組分金屬納米顆粒可為金-鉑雙組分納米顆粒。例如，該金-鉑雙組分納米顆粒可以為文獻Zhao Y,Ye C,Liu W,et al.Tuning the composition of AuPt bimetallic nanoparticles for antibacterial application[J].Angewandte Chemie International Edition,2014,53(31):8127-8131中已報導的納米顆粒。
根據本發明的含納米金抗菌敷料，其中，所述氨基嘧啶小分子與氨基類小分子雙組分修飾的納米金顆粒中，氨基嘧啶小分子與金元素的摩爾含量比為0.2:1～1.2:1，氨基類小分子與金元素的摩爾含量比為0.2:1～1.2:1。優選地，在所述金-鉑雙組分納米顆粒中，鉑的原子百分比為10～65％。
本發明還提供了上述含納米金抗菌敷料的製備方法，該方法包括以下步驟：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材在浸軋槽內浸軋，以使含金納米顆粒塗覆液均勻塗覆到基材上。優選地，該浸軋步驟可以重複操作3～4次，再進行烘乾步驟的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的基材在烘筒上烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
根據本發明的製備方法，其中，步驟(1)的含金納米顆粒塗覆液的濃度為200～800ppm。例如可以為300ppm。
優選地，步驟(2)的浸軋後的基材的帶液率為30～150％，軋車車速為40～100米/分鐘。
更優選地，步驟(2)的浸軋槽還可以連接有用於連續或定期補充含金納米顆粒塗覆液的補料桶。本領域技術人員容易理解，該補料桶的補料速度可根據浸軋條件進行相應調整。
更進一步優選地，步驟(3)的烘乾為在100～180℃，優選120～180℃，例如140～180℃，更優選140～160℃，例如150℃下烘2～20min。
根據本發明的製備方法，其中，所述含金納米顆粒塗覆液是通過以下步驟(a)、(b)和(c)中的任一種而製得的：
(a)用還原劑還原氯金酸溶液，得到含金納米顆粒塗覆液。
(b)將氯金酸、氨基嘧啶小分子和氨基類小分子溶解、混合以形成混合溶液，然後用還原劑還原所述混合溶液，得到含金納米顆粒塗覆液。
(c)用還原劑還原氯金酸和氯鉑酸鉀的混合溶液，得到含金納米顆粒塗覆液。
優選地，步驟(a)的氯金酸溶液、步驟(b)的混合溶液和/或步驟(c)的混合溶液中還添加有體積含量佔0.1％～10％的非離子表面活性劑。
根據本發明的製備方法，其中，所述還原劑為硼氫化鈉或抗壞血酸鈉。所述非離子表面活性劑為吐溫或聚乙二醇。
本發明還提供了上述含納米金抗菌敷料或按照本發明的方法而製備的含納米金抗菌敷料在製造醫療器械或醫用耗材中的應用。
本發明的含納米金抗菌敷料具有但不限於以下有益效果：
(1)基於抗菌性實驗可知，與納米銀敷料相比，本發明的含納米金抗菌敷料具有對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌更加高效、長久的抗菌性能。而且，通過細胞毒性試驗驗證，本發明的含納米金抗菌敷料的毒性遠低於使用納米銀的醫用納米銀敷料。
(2)與現有的僅修飾有氨基嘧啶類分子的納米金顆粒相比，本發明的修飾雙組分分子的納米金顆粒及敷料對革蘭氏陽性菌的抗菌性能更佳，從而在滿足安全性的基礎上進一步提升了納米金顆粒的廣譜抗菌能力，而且氨基類分子，如三聚氰胺、鹽酸乙醯膽鹼等，本身並沒有抗菌活性，與氨基嘧啶類分子一同修飾於納米金顆粒後產生協同作用，增強了對革蘭氏陽性菌的抗菌效果。
(3)製備過程中的浸軋處理解決了現有技術中含金納米顆粒在基材上分布不均勻，容易出現團聚，抗菌不均勻的現象。另外，如果用普通的大的浸漬缸，基材浸漬完後，缸中的塗覆液濃度會發生變化，需要重新調整濃度，操作比較麻煩，而本發明可採用連續化的浸軋處理，且浸軋槽可連接含金納米顆粒塗覆液的補料桶，以一定補料速度可實現連續不斷地補料，更易於工業化生產。而且，本發明採用棉、毛、麻等材質的布料，避免了在生產紗線時加入抗菌納米顆粒再進行織布的工序，從而也避免了納米顆粒在織布等工序中因脫落而導致的浪費，因此更加節省金資源，且工藝簡單，容易工業化。
(4)本發明的含納米金抗菌敷料的納米顆粒粒徑分布較均勻，製備方法簡單，易於大規模生產和保存，可應用於醫療衛生領域，有效提高醫療水平。
附圖說明
以下，結合附圖來詳細說明本發明的實施方案，其中：
圖1為實施例1製備的納米金塗覆液的照片。該照片示意性地示出該納米金塗覆液在玻璃容器中，為深紅色液體。
圖2示出了實施例1製備的含納米金抗菌敷料。
圖3示出了本發明可以使用的浸軋-烘乾一體機。該圖片僅用於示例而非限制本發明。本發明可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備，只要能實現本發明的製備步驟(1)～(3)即可。
圖4示出了實施例6抑菌圈試驗的部分結果照片。其中標號1～5分別表示實施例1～5，標號6表示對比敷料4(長沙海潤Ag紗布)。
圖5本發明採用的具有抗菌作用的含金納米顆粒2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/二甲雙胍雙組分修飾的納米金顆粒(AuNPs)、商品納米銀(AgNPs)、硝酸銀的細胞毒性比較圖。
具體實施方式
下面通過具體的實施例進一步說明本發明，但是，應當理解為，這些實施例僅僅是用於更詳細具體地說明之用，而不應理解為用於以任何形式限制本發明。
本部分對本發明試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性的描述。雖然為實現本發明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發明仍然在此作儘可能詳細描述。本領域技術人員清楚，在上下文中，如果未特別說明，本發明所用材料和操作方法是本領域公知的。
以下實施例中使用的試劑和儀器如下：
試劑：
氯金酸(三水合氯金酸)，購自國藥試劑；氯鉑酸鉀、2-巰基-4,6-二氨基嘧啶、1-(3-氯酚)雙胍、二甲雙胍均購自Sigma試劑公司。
儀器：
200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡，購自美國FEI公司、型號Tecnai G2S-TWIN。
實施例1
本實施例用於說明本發明的含納米金抗菌敷料及其製備方法。
本實施例的含納米金抗菌敷料的製備方法包括：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。該含金納米顆粒塗覆液為金-鉑雙組分Au80Pt20(即鉑的原子百分比為20％)納米顆粒塗覆液，濃度為300ppm。該塗覆液的製備方法可以為：配製氯金酸、氯鉑酸鉀和體積含量佔10％的吐溫80的混合溶液，然後在冰水浴中用還原劑硼氫化鈉還原該混合溶液，得到金-鉑雙組分Au80Pt20納米顆粒塗覆液。更詳細的製備方法見於Zhao Y,Ye C,Liu W,et al.Tuning the composition of AuPt bimetallic nanoparticles for antibacterial application[J].Angewandte Chemie International Edition,2014,53(31):8127-8131。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材滌綸布在浸軋槽內浸軋，以使塗覆液均勻塗覆到滌綸布上。浸軋後的基材的帶液率為60％，軋車速度為100米/分鐘。浸軋槽連接有連續補充塗覆液的補料桶。重複操作該浸軋步驟4次(即「四浸四軋」)後，再進行步驟(3)的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的滌綸布在烘筒上於180℃下烘2min至烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
本發明的含納米金抗菌敷料對生產設備沒有特殊要求，只要能實現上述步驟(1)～(3)即可。因此，本實施例可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備。也可以採用浸軋-烘乾一體機(如圖3所示)實現上述步驟(2)浸軋和步驟(3)烘乾。
在該含納米金抗菌敷料中，根據投料比確定的Au與Pt含量比。經200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡測定，含金納米顆粒(即Au80Pt20納米顆粒)的平均粒徑為5nm。
實施例2
本實施例用於說明本發明的含納米金抗菌敷料及其製備方法。
本實施例的含納米金抗菌敷料的製備方法包括：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。該含金納米顆粒塗覆液為2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/1-(3-氯酚)雙胍雙組分修飾的納米金顆粒塗覆液，濃度為400ppm。該塗覆液的製備方法可以為：將氯金酸、2-巰基-4,6-二氨基嘧啶和1-(3-氯酚)雙胍溶解、混合以形成混合溶液(可添加體積含量佔0.1％的吐溫80)，然後用還原劑抗壞血酸鈉還原所述混合溶液，得到2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/1-(3-氯酚)雙胍修飾的納米金顆粒塗覆液。更詳細的製備方法見於Zhao Y,Chen Z,Chen Y,et al.Synergy of non-antibiotic drugs and pyrimidinethiol on gold nanoparticles against superbugs[J].Journal of the American Chemical Society,2013,135(35):12940-12943。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材麻布在浸軋槽內浸軋，以使塗覆液均勻塗覆到麻布上。浸軋後的基材的帶液率為100％，軋車速度為60米/分鐘。浸軋槽連接有連續補充塗覆液的補料桶。重複操作該浸軋步驟3次(即「三浸三軋」)後，再進行步驟(3)的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的麻布在烘筒上於160℃下烘15min至烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
本發明的含納米金抗菌敷料對生產設備沒有特殊要求，只要能實現上述步驟(1)～(3)即可。因此，本實施例可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備。也可以採用浸軋-烘乾一體機(如圖3所示)實現上述步驟(2)浸軋和步驟(3)烘乾。
在該含納米金抗菌敷料中，根據投料比確定，2-巰基-4,6-二氨基嘧啶與金元素的摩爾含量比為0.2:1，1-(3-氯酚)雙胍與金元素的摩爾含量比為1.2:1。敷料中納米金顆粒的含量為0.029％重量百分比。經200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡測定，納米金顆粒的平均粒徑為15nm。
實施例3
本實施例用於說明本發明的含納米金抗菌敷料及其製備方法。
本實施例的含納米金抗菌敷料的製備方法包括：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。該含金納米顆粒塗覆液為2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/1-(3-氯酚)雙胍雙組分修飾的納米金顆粒塗覆液，濃度為400ppm。其製備方法與實施例2相同。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材錦綸布料在浸軋槽內浸軋，以使塗覆液均勻塗覆到錦綸布料上。浸軋後的基材的帶液率為30％，軋車速度為100米/分鐘。浸軋槽連接有連續補充塗覆液的補料桶。重複操作該浸軋步驟4次(即「四浸四軋」)後，再進行步驟(3)的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的錦綸布料在烘筒上於180℃下烘3min至烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
本發明的含納米金抗菌敷料對生產設備沒有特殊要求，只要能實現上述步驟(1)～(3)即可。因此，本實施例可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備。也可以採用浸軋-烘乾一體機(如圖3所示)實現上述步驟(2)浸軋和步驟(3)烘乾。
在該含納米金抗菌敷料中，根據投料比確定，2-巰基-4,6-二氨基嘧啶與金元素的摩爾含量比為1.2:1，1-(3-氯酚)雙胍與金元素的摩爾含量比為0.2:1。敷料中納米金顆粒的含量為0.0625％重量百分比。經200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡測定，納米金顆粒的平均粒徑為10nm。
實施例4
本實施例用於說明本發明的含納米金抗菌敷料及其製備方法。
本實施例的含納米金抗菌敷料的製備方法包括：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。該含金納米顆粒塗覆液為2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/二甲雙胍雙組分修飾的納米金顆粒塗覆液，濃度為800ppm。該塗覆液的製備方法可以為：將氯金酸、2-巰基-4,6-二氨基嘧啶和二甲雙胍溶解、混合以形成混合溶液(可添加體積含量佔1％的聚乙二醇)，然後用還原劑硼氫化鈉還原所述混合溶液，得到2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/二甲雙胍修飾的納米金顆粒塗覆液。更詳細的製備方法見於Zhao Y,Chen Z,Chen Y,et al.Synergy of non-antibiotic drugs and pyrimidinethiol on gold nanoparticles against superbugs[J].Journal of the American Chemical Society,2013,135(35):12940-12943。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材純棉紗布在浸軋槽內浸軋，以使塗覆液均勻塗覆到純棉紗布上。浸軋後的基材的帶液率為150％，軋車速度為85米/分鐘。浸軋槽連接有連續補充塗覆液的補料桶。重複操作該浸軋步驟3次(即「三浸三軋」)後，再進行步驟(3)的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的純棉紗布在烘筒上於170℃下烘10min至烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
本發明的含納米金抗菌敷料對生產設備沒有特殊要求，只要能實現上述步驟(1)～(3)即可。因此，本實施例可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備。也可以採用浸軋-烘乾一體機(如圖3所示)實現上述步驟(2)浸軋和步驟(3)烘乾。
在該含納米金抗菌敷料中，根據投料比確定，2-巰基-4,6-二氨基嘧啶與金元素的摩爾含量比為0.5:1，二甲雙胍與金元素的摩爾含量比為1:1。敷料中納米金顆粒的含量為0.125％重量百分比。經200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡測定，納米金顆粒的平均粒徑為5nm。
實施例5
本實施例用於說明本發明的含納米金抗菌敷料及其製備方法。
本實施例的含納米金抗菌敷料的製備方法包括：
(1)製備含金納米顆粒塗覆液。該含金納米顆粒塗覆液為2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/二甲雙胍雙組分修飾的納米金顆粒塗覆液，濃度為800ppm。該塗覆液的製備方法與實施例4相同。
(2)浸軋：將所述含金納米顆粒塗覆液加入浸軋槽內，然後將基材滌棉紗布在浸軋槽內浸軋，以使塗覆液均勻塗覆到滌棉紗布上。浸軋後的基材的帶液率為50％，軋車速度為40米/分鐘。浸軋槽連接有連續補充塗覆液的補料桶。重複操作該浸軋步驟3次(即「三浸三軋」)後，再進行步驟(3)的操作。
(3)烘乾：將浸軋後的純棉紗布在烘筒上於140℃下烘20min至烘乾，即得所述含納米金抗菌敷料。
本發明的含納米金抗菌敷料對生產設備沒有特殊要求，只要能實現上述步驟(1)～(3)即可。因此，本實施例可使用市面上常見的浸軋設備和烘乾設備。也可以採用浸軋-烘乾一體機(如圖3所示)實現上述步驟(2)浸軋和步驟(3)烘乾。
在該含納米金抗菌敷料中，根據投料比確定，2-巰基-4,6-二氨基嘧啶與金元素的摩爾含量比為1:1，二甲雙胍與金元素的摩爾含量比為1:1。敷料中納米金顆粒的含量為0.25％重量百分比。經200KV六硼化鑭透射電子顯微鏡測定，納米金顆粒的平均粒徑為3nm。
實施例6 抑菌圈試驗
本實施例為實施例1～5製備的含納米金抗菌敷料和對比敷料的抑菌圈試驗。
用於試驗的敷料包括：
實施例1～5製備的含納米金抗菌敷料。
對比敷料1：該敷料的製備方法與實施例5的製備方法基本相同，區別在於納米金顆粒上僅修飾有2-巰基-4,6-二氨基嘧啶，該敷料中的納米金顆粒的含量也為0.25％重量百分比。
對比敷料2：該敷料的製備方法與實施例4的製備方法基本相同，區別在於納米金顆粒上僅修飾有2-巰基-4,6-二氨基嘧啶，該敷料中的納米金顆粒的含量也為0.125％重量百分比。
對比敷料3：該敷料的製備方法與實施例3的製備方法基本相同，區別在於納米金顆粒上僅修飾有2-巰基-4,6-二氨基嘧啶，該敷料中的納米金顆粒的含量也為0.0625％重量百分比。
對比敷料4：長沙海潤Ag紗布(含納米銀0.3％-0.5％重量百分比)
按照《藥品微生物檢驗手冊》第18章第1節管碟法進行試驗，該抑菌圈試驗的結果見圖4和表1。
表1 抑菌圈試驗數據
從上表1中的試驗結果可看出，與僅修飾氨基嘧啶類分子的納米金敷料(對比敷料1～3)相比，本發明的雙分組修飾的含納米金抗菌敷料對革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌的抗菌性能有明顯提升(可分別用實施例5、4、3進行比較)，對革蘭氏陰性菌大腸桿菌和綠膿桿菌的抗菌效果也有提升。與納米銀敷料相比，本發明的含納米金抗菌敷料在納米金含量更低的情況下(如0.125％、0.25％重量百分比的納米金)，獲得了與納米銀敷料(0.3％～0.5％重量百分比的納米銀)相當或更好的抗菌效果。
實施例7 細胞毒性實驗
細胞毒性試驗操作過程：人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)在含有10％牛胎血清的Dulbecco改進的Eagle培養基(DMEM)中培養。在96微孔板的每個孔中加入104個HUVEC細胞，每個孔中加入不同濃度的納米金顆粒(2-巰基-4,6-二氨基嘧啶/二甲雙胍雙組分修飾的納米金顆粒)、商品化納米銀、硝酸銀溶液到200微升。微孔介質中在37℃下培養48小時，沒有加入抗菌劑的HUVEC細胞作為對照。培養完後，微孔中的溶液用磷酸緩衝溶液(PBS，0.01mol/L，pH 7.4)洗一次，加入10％(v/v)的CCK-8溶液在微孔介質中，在37℃下培養2小時。在酶聯免疫檢測儀450nm處測量各樣品孔以及對照孔的吸光值。計算各個樣品孔細胞相對活力。各樣品孔細胞相對活力定義為：各個孔吸光值/對照孔的吸光值×100％。試驗結果見圖5。
從圖5所示的試驗結果可知，本發明採用的含金納米顆粒在不同濃度下的細胞毒性均明顯低於納米銀和硝酸銀溶液。
儘管本發明已進行了一定程度的描述，明顯地，在不脫離本發明的精神和範圍的條件下，可進行各個條件的適當變化。可以理解，本發明不限於所述實施方案，而歸於權利要求的範圍，其包括所述每個因素的等同替換。